大豆糖蛋白的分离纯化及结构分析
糖蛋白中聚糖成分的分离纯化方法
糖蛋白中聚糖成分的分离纯化方法糖蛋白是一类对生物体具有重要生理功能的复杂分子结构，由糖基和蛋白质基团组成。
糖蛋白的糖基部分通常由聚糖构成，其中的聚糖成分在糖蛋白的功能中起着重要的作用。
分离纯化糖蛋白中的聚糖成分是对糖蛋白功能的研究必不可少的步骤。
本文将介绍一种常用的糖蛋白中聚糖成分的分离纯化方法。
糖蛋白是一类具有多糖结构的蛋白质，其糖基部分通常由聚糖构成。
糖蛋白在许多生物体的生理过程中发挥重要作用，如细胞信号传递、细胞黏附和免疫调节等。
聚糖成分是糖蛋白中重要的结构基础，研究聚糖成分的物理化学性质和生物学功能对于揭示糖蛋白的结构和功能具有重要意义。
分离纯化糖蛋白中的聚糖成分是研究糖蛋白功能的关键步骤。
常用的糖蛋白中聚糖成分的分离纯化方法包括离子交换色谱法、凝胶过滤法和亲和层析法。
离子交换色谱法是一种常用的分离纯化聚糖的方法。
离子交换色谱法是利用不同离子强度的树脂对样品中的成分进行分离。
首先将糖蛋白样品溶解于合适的缓冲液中，通过调整pH值和离子强度来控制样品的结构和电荷状态。
然后将样品加载到离子交换柱中，利用离子交换树脂与样品中的组分之间的静电相互作用进行分离。
通过逐步调整洗脱缓冲液中的离子强度和pH值，使得各种成分依次从柱上洗脱下来。
最后，通过对洗脱液进行分析和检测，可以得到纯化的聚糖成分。
凝胶过滤法是一种基于分子大小的分离纯化方法。
凝胶过滤法利用介孔材料的孔隙大小来分离不同分子大小的成分。
样品溶液被加入到凝胶柱中，大分子成分会受到凝胶孔隙的限制，无法进入凝胶内部，从而被过滤掉；而小分子成分则能够通过凝胶孔隙，在柱底部收集。
通过调整凝胶柱的孔隙大小，可以选择性地分离纯化糖蛋白中的聚糖成分。
亲和层析法是一种利用亲和剂与目标物质的特异性相互作用进行分离纯化的方法。
亲和层析法可以通过两种方式进行：一种是基于亲和柱的固相亲和层析法，另一种是液相亲和层析法。
在固相亲和层析法中，亲和剂通常被固定在硅胶或琼脂糖等固体支持介质上，然后将样品溶液加载到柱中，目标物质会与亲和剂发生特异性相互作用，从而分离纯化出目标物质。
大豆蛋白提取方法和工艺流程
大豆蛋白提取方法和工艺流程
大豆蛋白是一种重要的植物蛋白质来源，其提取方法和工艺流程对于高效获得纯度较高的蛋白质产品至关重要。
下面将介绍一种常用的大豆蛋白提取方法和工艺流程。
首先，在大豆蛋白提取过程中，将大豆加工成豆浆是关键步骤之一。
大豆经过清洗后，浸泡在水中，然后经过破碎和热处理，使得大豆中的蛋白质溶解在水中形成豆浆。
接下来，对豆浆进行固液分离，最常用的方式是通过高速离心将固体与液体分离。
离心过程中，大豆渣被分离出来，而含有蛋白质的液体则被留下来。
然后，对蛋白质溶液进行沉淀和过滤。
通过调整pH值和添加适量的盐酸（或盐）等化学物质，使蛋白质在酸性条件下发生沉淀。
接着，通过过滤将沉淀蛋白质分离出来。
这些步骤有助于去除杂质和提高蛋白质的纯度。
最后，对分离出的蛋白质进行干燥和粉碎。
通常使用喷雾干燥或冷冻干燥等方法将蛋白质溶液中的水分去除，得到干燥的蛋白质粉末。
为了得到更细的粒径，粉碎设备常常用于将蛋白质粉碎成所需的颗粒大小。
总结而言，大豆蛋白提取的工艺流程主要包括大豆加工成豆浆、固液分离、沉淀和过滤、干燥和粉碎等步骤。
这些步骤共同作用，可有效提取大豆中的蛋白质，并最大程度地提高蛋白质的纯度，从而满足不同需求的应用场景。
大豆糖蛋白的分离纯化及结构分析
０．０５ｍｏｌ／Ｌ ｐＨ６．８ ＰＢＳ（磷酸缓冲液）中，４℃下浸提过夜， 离心后取上清液，在冰浴条件下用（ＮＨ４） ２ＳＯ４ 沉淀，静置 后离心。沉淀物为糖蛋白粗品，粗品用 ０．０５ｍｏｌ／Ｌ ｐＨ７．２ Ｐ Ｂ Ｓ 透析，备用。
收稿日期：２００６－０７－１５ ＊通讯作者 基金项目：湖北省新世纪高层次人才工程入选人员科研择优资助项目（鄂人［２００３］３１号） 作者简介：詹玲（ １ ９ ８ １ － ） ，女，硕士研究生，研究方向为农产品加工。
※分析检测
食品科学
2006, Vol. 27, No. 12 595
Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ， Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ｆｒｏｍ Ｓｏｙｂｅａｎ
ＺＨＡＮ Ｌｉｎｇ，ＰＡＮ Ｓｉ－ｙｉ＊ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｗｕｈａｎ ４３００７０， Ｃｈｉｎａ）
３ 结 论
研究表明通过对脱脂大豆粉的浸提，硫酸铵沉淀以 及离子交换层析和凝胶过滤层析，得到一种纯化的大豆 糖蛋白。其蛋白质含量为 ３０．５５％，分子质量约为 ６１０００， β－ 消除反应证明它是 Ｏ－ 糖蛋白，红外光谱分析其含有 α型糖苷键。
参考文献：
［１］ 王凤翼， 钱方， 等． 大豆蛋白质生产与应用［Ｍ］． 中国轻工业出版社， ２００４． ８６－１２２．
１ 材料与方法
１．１ 材料和试剂
１．１．１ 材料 大豆粉：干大豆粉碎过 ２ ０ ０ 目筛。
１．１．２ 主要试剂 ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ ５２（Ｐｈａｒｍａｃｉａ），Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２００
糖蛋白的提取分离纯化与表征终稿课稿
糖蛋白的提取分离纯化与表征摘要：糖蛋白是由寡糖链与多肽链共价连接而成的一类结合蛋白质，是一类重要的生物大分子，在生物体内占有重要地位。
本文综述了糖蛋白的分类、分离纯化及纯度鉴定方法研究，并介绍了某些糖蛋白的生理活性，对糖蛋白的开发利用具有借鉴作用。
关键词：糖蛋白，提取，分离纯化，纯度鉴定，生物活性1 糖蛋白的简介1.1糖蛋白的定义糖蛋白是由小于15个单糖单位的寡糖链与蛋白质以共价键连构成的复合分子，在组成上以蛋白质为主。
与其他大分子相比，糖蛋白的定义一直比较模糊，直至1908年美国生物化学家协会首次将糖蛋白定义为：由蛋白质分子和除核酸外的含有碳水化合物基团的物质共同组成的复合物(compounds of the protein molecules with a substance or substances containing acarbohydrate group,other than nucleic acid)(Montreuil et a1.,1995)。
糖含量在不同糖蛋白中差别较为明显，通常情况下，总糖含量占蛋白重量的1％-60％不等，举几个例子：胶原蛋白含糖量一般不到1％，免疫球蛋白G低于4％，人红细胞膜的血型糖蛋白含糖量在54％左右。
随着糖和蛋白复合物领域研究的逐步深入，研究者将蛋白聚糖和糖蛋白区别开来，糖蛋白专指由比较短(通常不会超过15个单糖单位)、通常情况下具有多个分支的寡糖链与多肤链以共价键相连接的，含量上以蛋白为主的复合物；而蛋白聚糖在组成上以糖为主，且其糖链类型和连接方式均与糖蛋白有区别。
近年来，糖蛋白的研究成为多门学科的研究前沿领域。
相关研究者在医药学、生物化学、细胞生物学、免疫学以及食品科学领域都渗透进了糖蛋白的相关研究。
1.2糖蛋白的分类及分布糖蛋白的主要由糖链和肽链两大部分构成。
构成糖蛋白的单糖主要有(陈惠黎主编，1997)：葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖、N-乙酞葡萄糖胺、以及糖醛酸等。
三种常见大豆蛋白质分离纯化提取方法是什么
三种常见大豆蛋白质分离纯化提取方法是什么大豆蛋白质分离纯化提取方法介绍
1、起泡法
起泡特种浓缩分离处理工艺是一项新的提纯技术，主要依据表面活性的差异，来分离和纯化物质的技术，大豆蛋白质的分离在一连续操作的泡沫精馏塔中完成，氮气由塔底通入池液，原料液由泡沫界面入进入塔内，泡沫由塔顶导出并被破碎成泡沫液，泡沫液即为分离出的大豆蛋白质。
该技术也被广泛应用于环境保护、生物工程、冶金工业及医药工业等许多途径，该技术也是分离和浓缩蛋白质及酶的一条有效途径。
2、双极膜电解法
这种方法是在电渗析的基础上发展而来，阴离子交换膜和阳离子交换膜以及阴阳离子交换膜中间的亲水层，达到大豆蛋白质的等电点而使蛋白质沉淀。
特种浓缩分离设备过程过程中不需要加入酸或碱调整蛋白质溶
液的pH值，避免分离得到的大豆蛋白质中混入盐离子，并且可保护大豆蛋白质的功能性。
3、膜分离技术
蛋白质分离纯化设备选用膜分离提取技术可大大提高蛋白质的提取率，一般都可高达90%以上。
将浸提液进行循环超滤分离，截留液的浓度可达15%左右。
与传统蛋白质提取工艺比较，具有能源消耗小、产品品质好、提取物的产量高、废水回收利用率可高达90%以上，而且处理后的废水可达到国家排放标准，不仅解决了环境污染等问题还提高了水资源的利用率。
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大豆抗氧化肽的制备、分离纯化及结构鉴定
研究生物活性肽的构效关系，有助于深入了解肽链的结构与功能之间的关系， 为开发新的生物活性肽药物提供理论依据。例如，某些研究表明，某些具有抗 肿瘤活性的生物活性肽通过与肿瘤细胞表面的受体结合，抑制肿瘤细胞的增殖 和转移。而另一些研究发现，某些具有抗菌活性的生物活性肽通过与细菌细胞 膜结合，破坏细菌细胞膜的完整性，从而抑制细菌的生长和繁殖。
泥鳅是一种富含营养的水生生物，其蛋白质含量高，且具有多种生物活性成分。 近年来，研究发现泥鳅蛋白中富含抗氧化肽，对于抗疲劳、抗癌等方面具有显 著的功效。本次演示旨在对泥鳅蛋白抗氧化肽的分离纯化及抗疲劳、抗癌功效 进行深入探讨。
在国内外研究中，泥鳅被认为是一种具有广泛应用前景的生物活性成分。泥鳅 蛋白具有较高的营养价值，包含多种必需氨基酸，且其脂肪酸组成对人体健康 也有益。此外，泥鳅还富含多种生物活性物质，如抗氧化肽、胶原蛋白等，具 有抗氧化、抗疲劳、抗癌等多种功效。
结构鉴定大米蛋白抗氧化肽：使用质谱仪对纯品进行结构鉴定。通过数据库搜 索，比对鉴定结果。同时，采用核磁共振技术对鉴定结果进行验证。
结果与讨论
通过上述实验步骤，成功制备了大米蛋白抗氧化肽的粗品和纯品。在分离纯化 过程中，采用SephadexG-75凝胶柱进行分离，得到洗脱峰整齐、纯度较高的 抗氧化肽。经过冷冻干燥后，得到米白色粉末状纯品。
4、联合作用研究：考虑多种因素对大豆抗氧化肽抗氧化效果的影响，如与其 他营养物质的相互作用等，综合研究其抗氧化作用及机制。
参考内容
引言
随着人们对营养和健康的度不断提高，食品营养和功能性成为研究的热点。大 米作为世界上最重要的粮食之一，不仅含有丰富的淀粉和蛋白质，还具有许多 生物活性物质，如抗氧化肽。这些肽段具有清除体内自由基、延缓衰老、预防 慢性病等多种生物功能。因此，本次演示旨在探讨大米蛋白抗氧化肽的制备、 分离纯化和结构鉴定，以期为食品营养和功能性研究提供理论依据。
大豆蛋白质分离纯化注意事项
大豆蛋白质分离纯化注意事项
大豆蛋白质分离纯化注意事项大豆不仅可以加工成传统的豆制品，还可以通过对大豆蛋白质的分离纯化制成营养价值更高的食品，所以大豆分离蛋白、浓缩蛋白、组织蛋白的生产越来越引起人们的关注。
大豆蛋白质分离纯化生产工艺比较
1、分离蛋白的生产流程:
低温脱脂豆片—→碱液浸出—→豆渣分离—→酸沉—→凝乳和
乳清分离—→凝乳水洗—→次级凝乳和乳清分离—→老化—→中和
杀菌—→喷雾干燥。
2、大豆浓缩蛋白提纯设备生产流程:
脱脂豆粉—→酸浸—→一次凝乳和乳清分离—→乳清的二次分离—→老化—→中和杀菌—→喷雾干燥。
大豆蛋白质分离纯化比较
大豆分离蛋白是低温脱脂白豆片经过碱液萃取、喷雾干燥等工序将白豆片中可溶性蛋白质提取出来，使蛋白质含量达90% 以上。
大豆分离蛋白是大豆蛋白中的尖端产品，具有最好的功能特性。
浓缩蛋白是将脱脂白豆粉用酸法浸提经喷雾干燥，除去可溶性糖而制得。
大豆分离蛋白质含量最高，并且营养价值仅次于分离蛋白，但要高于组织蛋白等其它大豆蛋白产品。
由于大豆浓缩蛋白成本较低，功能性又与分离蛋白相似，在一般食物制品中可替代分离蛋白，所以它同分离蛋白一样有着广泛的发展前景。
大豆浓缩蛋白提纯设备用生产分离蛋白的离心机生产浓缩蛋白，在调小差数比、增大分离时间的情况下效果是不错的。
所具有的功能性，同分离蛋白一样可广泛用于肉类加工、保健食品、调味料及饮料等方面。
目前国内大豆蛋白质分离纯化产量还很少，属于新兴行业，大豆蛋白质分离纯化工业正在发展中。
大豆分离蛋白中非淀粉多糖
大豆分离蛋白中非淀粉多糖
大豆分离蛋白中含有非淀粉多糖，这些多糖可能影响其功能性质。
大豆分离蛋白（SPI）是一种高蛋白质含量的产品，通常含有90%以上的蛋白质。
在制备过程中，除了蛋白质，还可能含有一定量的非淀粉多糖。
这些多糖包括纤维素、半纤维素和果胶等，它们存在于大豆原料中，即使在分离蛋白的生产过程中也难以完全去除。
非淀粉多糖对大豆分离蛋白的功能性质有着重要影响。
例如，它们可以与蛋白质形成共价复合物，进而影响蛋白质的乳化性、凝胶形成能力和冻融稳定性。
研究表明，不同的糖种类，如葡萄糖、麦芽糖和葡聚糖，与大豆分离蛋白形成的共价复合物的冻融特性有所不同。
非淀粉多糖是大豆分离蛋白中的一个组成部分，它们的存在和种类可能会影响蛋白的功能性质，这对于食品加工和应用具有重要意义。
豆渣内大豆多糖蛋白的制取方法
豆渣内大豆多糖蛋白的制取方法
第一步：大豆渣的提取。
用水解法将大豆渣混合物用24倍量的水按1:8（渣溶于水比例）称重比例拌和混合搅拌均匀，把磨成粉末的大豆渣加入水中。
把混合物加入紫外光可
降解滤膜包，放入90℃的高温水浴中进行滤液，把滤液收集下来。
第二步：大豆多糖蛋白的分离。
将滤液用乙醇蒸发，乙醇蒸发滤液放入锥形离心管，
使用15000r/min的低速离心分离，得到蛋白沉淀液，将获得的沉淀液加入乙醇中，把蛋
白从乙醇中重新沉淀出来，从而分离提取出大豆多糖蛋白。
第三步：批次液相色谱分析。
将分离提取出来的大豆多糖蛋白溶于1 mM波尔多胺缓
冲液（pH=7.0）中，溶解大豆多糖蛋白溶液的最终浓度为A，将A作为提取流动相加入相
对应的靶蛋白峰混合物，将混合物至十毫升容量的HPLC色谱柱（组成0.1 M NaHC03/ AcCN/10 % TFA，pH=7.0），将流动相由A梯度改变乙腈的浓度至70%，检测谱图的前景峰，拟合浓度曲线确定大豆多糖蛋白的浓度。
第四步：反相HPLC纯化。
将溶液以70%乙腈为流动相成功运用反相HPLC柱纯化大豆
多糖蛋白，以反相柱清洗后加入比较完整的大豆多糖蛋白溶液，随后在反相柱上精馏大豆
多糖蛋白，并采用凝胶过滤膜筛查，最终获得大豆多糖蛋白纯化溶液。
第五步：大豆多糖蛋白的终产品制备。
将反相HPLC纯化的大豆多糖蛋白经过超滤拆
除乙腈和TFA，并回溶溶液中，离心分离凝析出大豆多糖蛋白，采用乙醇蒸发将蛋白浓度
进一步减少，最后采用冻干术或旋转蒸发术将大豆多糖蛋白制成终产品，以得到高纯度的
大豆多糖蛋白。
大豆蛋白提取研究报告
大豆蛋白提取研究报告一、引言大豆蛋白是一种重要的植物蛋白质资源，具有丰富的氨基酸组成和营养价值。
大豆蛋白的提取对于满足人民日益增长的蛋白质需求、开发植物蛋白质的应用价值具有重要意义。
本研究旨在探索大豆蛋白的最佳提取方法，以提高蛋白质得率和纯度。
二、材料与方法1. 材料：- 大豆粉：采用优质大豆粉作为原料。
- 溶剂：选择适宜的溶剂，如乙醇、水、酸性溶液等。
2. 提取方法：- 常温提取：将大豆粉与溶剂按一定比例混合，搅拌均匀后静置，待沉淀形成后收集上清液。
- 热水提取：将大豆粉与热水混合，加热至一定温度并保温一段时间，然后离心收集上清液。
- 酸溶液提取：用酸性溶液处理大豆粉，利用溶解和沉淀过程获得蛋白质。
3. 蛋白质测定：- 采用比色法、光谱法或生化分析仪器测定蛋白质得率和纯度。
三、结果与讨论1. 提取方法对蛋白质得率的影响：- 常温提取法能够较好地保留大豆蛋白质的活性结构，但对于部分蛋白质不易高效提取。
- 热水提取法相对来说蛋白质得率较高，但可能导致一些蛋白质的变性损失。
- 酸溶液提取法对于蛋白质得率较高，但容易造成部分蛋白质的酸性降解和损失。
2. 提取方法对蛋白质纯度的影响：- 常温提取法由于较少的蛋白质损失，可获得较高的蛋白质纯度。
- 热水提取法可降低一些非蛋白质杂质的存在，提高纯度。
- 酸溶液提取法可能引起酸性降解产物的混入，降低纯度。
四、结论本研究通过对不同提取方法的比较研究，发现常温提取法可以获得较高的蛋白质得率和纯度。
然而，对于特定蛋白质的高效提取还需要进一步优化方法和工艺。
未来的研究可以进一步探索酶解等方法对大豆蛋白的提取和改性，以提高蛋白质的应用价值和功能性。
大豆分离蛋白的结构及其性质研究
大豆分离蛋白结构及其性质的研究摘要：对大豆分离蛋白的结构、提取、改性、功能特性以及在食品工业上的应用做出详细论述，以期对今后有关大豆蛋白的研究和应用有所帮助。
关键词：大豆分离蛋白；结构；应用；研究Abstract: This article mainly summarized that structure, extraction, modification of soybean protein isolates and its application in food industry respectively, with the purpose to contribute to the exploration and widely using.Keywords: Soybean protein isolates; Structure; Application; Study1. 引言蛋白质(包括植物蛋白和动物蛋白)是生命体中不可缺少的基本成分。
包括人类在内的各种陆上动物，均直接或间接地消耗着大量的植物蛋白，这些植物蛋白为合成各类动物蛋白提供了丰富的氨基酸来源。
多年来，由于在营养上的重要性，植物蛋白已成为各国专家广泛研究的课题。
大豆是世界上栽培最为广泛的作物之一，在世界各地都可以看到大面积的种植，我国北方种植甚为广泛。
大豆中含大豆蛋白40%，由大豆生产的大豆蛋白质并不是单一的某一种蛋白质，而是指大豆种子中诸多蛋白质的总称。
大豆蛋白质无论从营养组成、资源丰富还是加工技术方面来看，都是人类最为熟悉、安全和经济的植物蛋白质资源。
从氨基酸组成以及必需氨基酸的含量来看，大豆蛋白富含人体所需的8种必需氨基酸，且氨基酸分数接近于动物蛋白，是人类取代动物蛋白最好的植物蛋白质之一。
大豆蛋白是为数不多的可取代动物蛋白的营养佳品之一，不仅可以补充人体内所需要的蛋白质，而且由于不含胆固醇，对血管病患者尤为有益。
大豆蛋白[1]主要分为三种：脱脂豆粉、浓缩大豆蛋白（SPC）和大豆分离蛋白（SPI）。
大豆分离蛋白(SPI)分离提取工艺及其优化条件的探究
燕山大学课程设计说明书大豆分离蛋白（SPI）分离提取工艺及其优化条件的探究学院（系）：环境与化学工程学院年级专业：08级生物化工学号：燕山大学课程设计（论文）任务书院（系）：环境与化学工程学院基层教学单位：生物工程系说明：学生、指导教师、基层教学单位各一份。
2011年 6月 27 日2010-2011 春季学期生物工程专业课程设计结题论文大豆分离蛋白（SPI）分离提取工艺及其优化条件的探究摘要本设计拟定以低温脱脂豆粕为原料，以改良的碱提酸沉新工艺对大豆分离蛋白（SPI）进行分离提取，并对其工艺的优化条件进行探究。
设计实验主要分为三个部分来探究SPI 分离提取工艺及其优化条件：单因素实验确定SPI 提取工艺参数范围的设计；正交实验确定SPI 提取工艺优化条件的设计；最佳SPI 提取工艺优化参数下应用碱提新工艺的设计。
第一部分设计单因素实验分别探究SPI 提取工艺参数（料液比、提取温度、提取时间、酸碱度）范围，为进一步工艺最优条件探究奠定基础；第二部分设计在确定SPI 提取工艺参数基础上，借助正交实验进一步确定其优化条件；第三部分在前两部分基础上，将其最优工艺参数条件应用于改良的SPI 提取新工艺中，以最大化提高蛋白质提取率。
通过本次课程设计，拟确定改良的碱提酸沉新工艺进行SPI 提取的优化条件，以获得较高蛋白质提取率及各项指标的数据范围,进一步扩宽SPI 的应用范围,为蛋白质提取在本专科实验教学中的应用提供参考依据，并为今后某些物质的分离提取工艺研究奠定技术基础。
关键词：大豆分离蛋白；碱提酸沉法；分离提取；工艺条件优化目录第一部分：文献综述1.大豆分离蛋白概况背景 (1)1.1 大豆产物简介 (1)1.2 大豆分离蛋白（SPI）概述 (1)1.3大豆分离蛋白功能特性 (2)1.3.1乳化性 (2)1.3.2水合性 (2)1.3.2.1吸水性 (2)1.3.2.2保水性 (3)1.3.2.3膨胀性 (3)1.3.3吸油性 (3)1.3.4胶凝性（又称凝胶性） (4)1.3.5溶解性 (4)1.3.6起泡性 (4)1.3.7粘性 (5)1.3.8结团性 (5)1.3.9组织性 (5)2. 大豆分离蛋白应用前景 (5)2.1 在乳制品中的应用 (6)2.2 在面制品中的应用 (6)2.2.1面条和挂面 (7)2.2.2培烤食品 (7)2.2.3方便面 (7)2.3 在肉制品中的应用 (7)2.4 在其他食品中的应用 (8)2.4.1饮料生产 (8)2.4.2作为发泡剂 (8)2.4.3罐头食品 (8)3.大豆分离蛋白提取工艺方法 (8)3.1 酸沉碱提法 (9)3.2 超过滤法 (9)3.3反胶束萃取分离法 (9)3.4离子交换法 (10)I燕山大学课程设计说明书3.5起泡法 (10)3.6反相高效液相色谱法 (10)4.我国分离提取大豆分离蛋白（SPI）发展现状 (11)4.1大豆分离蛋白的发展现状 (11)4.2我国大豆分离蛋白生产水平与国外先进水平的差距 (13)4.2.1对大豆原料加工处理不重视 (13)4.2.2产品的功能差 (14)4.2.3综合效益差 (14)5. 总结——本设计的研究宗旨以及意义 (14)第二部分：课程设计部分1. 材料 (16)1.1 实验原料 (16)1.2 实验器材 (17)1.3 实验试剂 (17)2.方法 (17)2.1传统碱提酸沉法 (17)2.1.1原料处理 (17)2.1.2溶解萃取 (18)2.1.3 酸沉淀 (18)2.1.4干燥测定分析 (18)2.2优化改良的碱提酸沉新工艺 (19)2.2.1豆粕浸取处理 (19)2.2.2三次碱提萃取 (19)2.2.3酸沉淀 (19)2.2.4干燥测定分析 (20)3.设计 (20)3.1单因素实验确定SPI提取工艺参数范围的设计 (20)3.1.1提取时间对SPI 二次碱提效果的影响 (20)3.1.2提取pH对SPI二次碱提效果的影响 (20)3.1.3提取温度对SPI 二次碱提效果的影响 (21)3.2正交实验确定SPI提取工艺优化条件的设计 (21)3.3最佳SPI提取工艺优化参数下应用碱提新工艺的设计 (20)4.分析与总结 (22)4.1 分析展望 (22)4.2 总结体会 (24)参考文献 (26)Ⅱ燕山大学课程设计说明书第一部分文献综述1.大豆分离蛋白概况背景大豆的蛋白含量较高而且营养丰富，一般含蛋白30～50 %。
大豆分离蛋白结构与性能_田琨
收稿:2007年4月,收修改稿:2007年8月 ＊国家自然科学基金项目(No .20674011)、教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET -06-0354)和教育部长江学者和创新团队发展计划项目资助＊＊通讯联系人 e -mail :chenx @fudan .edu .cn大豆分离蛋白结构与性能＊田 琨 管 娟 邵正中 陈 新＊＊(复旦大学高分子科学系聚合物分子工程教育部重点实验室 上海200433)摘 要 大豆分离蛋白是大豆的重要组成部分,含有大量活性基团,具有可再生、可生物降解性等优点,可以成为制备环境友好材料的主要原料。
由于大豆分离蛋白的组成和构象会对其功能特性产生明显的影响,因此对其结构和性能之间的关系进行系统的研究无疑会对材料学家在今后开发出新型的具有优异性能的大豆蛋白材料具有相当的帮助。
本文首先介绍了大豆分离蛋白的组成、亚基的结构以及对其两种主要成分———β-大豆伴球蛋白(7S 球蛋白)和大豆球蛋白(11S 球蛋白)的分离方法;然后对大豆分离蛋白在不同条件下的构象研究和其主要物理化学性质,如溶解性和凝胶性的研究进展作了介绍;最后对大豆分离蛋白在薄膜、纤维和塑料等材料领域的应用进行了简要的综述。
关键词 大豆球蛋白 β-大豆伴球蛋白 植物蛋白质 纤维 薄膜中图分类号:O636,O629.73,O631.1 文献标识码:A 文章编号:1005-281X (2008)04-0565-09Structural and Functional Study of Soybean Protein IsolationTian Kun G uan Juan Shao Zhengzhong Che n Xin＊＊(Key Laborator y of Molecular Engineering of Polymers of Ministr y of E ducation ,Department ofMacromolecular Science ,Fudan University ,Shanghai 200433,China )A bstract Soybean protein isolation (SPI ),the main component in soybean ,may become an important chemicalresource for the preparation of environmentally friendly materials because it contains many reactive groups and has the merits of being rene wable and biodegradable .As the composition and conformation of SPI ma y significantly influence its appr opriate functional properties ,the systematic elucidation of the relationship between the structures and properties of SPI could help scientists to develop the novel soybean protein materials with excellent properties in the future .Thus in the beginning of this article ,the composition ,the subunit structures of SPI and the separation of its major components ,β-conglycinin (7S protein )and glycinin (11S protein )ar e intr oduced .Then ,the conformation studies under different conditions and the main physico -chemical properties of SPI ,such as solubility and gelation property are summarized .At last ,the applications of SPI as films ,fibers and plastics in the material field are briefly reviewed .Key words glycinin ;β-conglycinin ;botanic pr otein ;fibers ;films1 引言 蛋白质(包括植物蛋白和动物蛋白)是生命体中不可缺少的基本成分。
糖蛋白的制备、结构分析及生理功能研究现状
糖蛋白的制备、结构分析及生理功能研究现状王倩;刘淑集;吴成业【摘要】糖蛋白广泛分布于生物体内，其糖链部分影响蛋白质的折叠和整体构象，蛋白质与糖链连接的特殊结构使其具备了各种生物活性，参与了人类许多生理功能及疾病的发生和预防。
糖基或糖链与蛋白质肽链的链接方式主要有0一连接和N一连接2种。
本文综述了糖蛋白的分类、分离纯化方法及其化学结构组成的分析方法，并介绍了某些糖蛋白的生理活性，对糖蛋白的开发利用具有借鉴作用。
%Glycoproteins are widely distributed in organisms, and they have a variety of biological activities for its special protein - sugar linkage structure. This paper reviewsed the preparation and structure analysis methods of glycoprotein. Physiological effects of glycoprotein were also summarized aiming to provide some the- oretical reference for developing health food and medicines【期刊名称】《福建水产》【年(卷),期】2012(034)006【总页数】6页(P498-503)【关键词】糖蛋白;提取;分离纯化;牛物活性【作者】王倩;刘淑集;吴成业【作者单位】福建农林大学食品科学学院福建福州350002 福建省水产研究所福建厦门361013;福建农林大学食品科学学院福建福州350002 福建省水产研究所福建厦门361013;福建省水产研究所福建厦门361013【正文语种】中文【中图分类】S986.1糖类是自然界中分布广泛的一类重要的有机化合物，但由于多糖和糖类衍生物的结构复杂多样性，长期以来糖化学的发展因科技的落后而较为缓慢。
11 凝胶过滤法分离纯化大豆蛋白肽
表 2 正交实验方案及实验结果分析
B
C
2
3
1
1
2
2
3
3
1
2
2
3
3
1
1
3
2
1
3
2
51.50
54.30
55.52
55.45
58.71
56.24
17.17
18.01
HZS-H 水浴振荡器；PHS-25 型酸度计；80-2 型离心沉淀机；BS110S 型电子天平；超滤装置；BSI-100 自动部分收集器；722-光栅分光光度计；1000µL 微量进样器 1.3 测定方法
水解度计算（DH）：（pH-Stat 法）[4]；蛋白含量测定采用 folin-酚法 1.4 酶水解实验 1.4.1 正交实验因素的选择
如图 1 所示，由分子量标准谱图的出峰位置可知第 20 管以后是分子量为 1200 以下的，以此可以进行 判断大豆肽的分子量肽段。
从图 2 可以看出，根据分子量的大小，大豆肽被分成了几个组分，分离效果较好。20 管以后是实验要 收集的肽段，即分子量 1200 以下的大豆肽。
OD（280nm） OD（280nm）
将 6000 以下的肽通过 SepHadex G15 进行分离收集分子量 1200 以下的肽段。
2 结果与讨论
2.1 AS1.398 中性蛋白酶参数的确定
表 1 正交实验因素水平表（Lg33）
水平
底物浓度（W/V，%） A
加酶量（%） B
1
3
4
2
4
大豆蛋白分离系统工艺流程及技术
大豆蛋白分离系统工艺流程及技术(总3页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--大豆蛋白分离系统工艺流程及技术大豆分离蛋白具有蛋白含量高，几乎不含胆固醇等特点，具有良好的乳化性、凝胶性、溶解性、起泡性、吸油性和持水性等性能，是其它动物蛋白所不能替代的。
大豆分离蛋白是一种与人体的必需氨基酸组成比例最接近、更易被人体吸收的天然植物蛋白源，属于全价优质蛋白。
在生产大豆分离蛋白工艺方面，酸沉法工艺应用是最完善的，其主要工艺是粉碎、萃取、分离渣乳、酸沉、凝乳分离、中和老化、杀菌干燥，检验包装等工序。
整个进料、分离、出料均是自动、连续、封闭的状态下完成。
一、大豆蛋白质分离纯化工艺用于生产食用蛋白食品的大豆经过预处理后，浸出油料，提取脱脂豆粕和豆粉，然后在碱性溶液中将大豆蛋白质从豆粉中溶解出来，最后加酸使蛋白质凝集沉淀分离出来。
其中渣液分离是最关键的生产工序，目前普遍采用高转速卧螺离心机，来提高蛋白回收率，萃取后的溶液经卧螺离心机后可直接分离出豆渣和豆浆，根据工序条件又分为一次分离和二次分离。
凝乳分离的目的是将凝乳混合料液中的乳清、碳水化合物、盐类等可溶性部分分离去除，来提纯蛋白的质量，最后再进入水洗工序。
二、其他大豆蛋白生产工艺：1、传统湿热浸提工艺是由于回收不了可溶于水的大豆蛋白，使得蛋白质得率极低，目前已基本被淘汰。
2、乙醇浸提工艺是醇法制备的大豆浓缩蛋白是一种高蛋白的大豆制品，其氨基酸组成合理，产品的风味清淡、色泽较浅，蛋白损失较小。
然而由于醇溶液的变性、沉淀作用，使得产品中的蛋白质发生变性，功能差，使用范围受到限制。
由于生产中采用的回液比大，需蒸馏回收乙醇的量较大，因此生产中能源消耗也较高。
3、稀盐酸浸提工艺是产出量虽比前1、2种工艺较大，但工艺复杂，投资较大，工时较多，同时在生产过程中需耗用大量的酸和碱溶液，排出的废水较难处理三、蛋白质分离纯化工艺优点：1、产品得率高，百分百回收。
大豆蛋白的分离提纯及药用前景
大豆蛋白的别离提纯及药用前景目录第一章绪论 (1)第二章大豆别离蛋白的提取方法 (2)2.1碱提酸沉法 (2)2.2膜别离方法 (3)2.3起泡法 (3)第三章别离蛋白产品在医药领域的作用及前景 (5)3.1大豆肽 (5)3.2大豆卵磷脂 (6)第四章结论 (8)参考文献 (9)大豆蛋白的别离提纯及药用前景摘要大豆的蛋白含量较高而且营养丰富，一般含蛋白30%—50%。
大豆蛋白含有8种人体必需氨基酸，且比例比较合理，只是赖氨酸相对稍高，而蛋氨酸和半胱氨酸含量较低。
目前大豆蛋白已成为一种重要的蛋白资源，特别是大豆别离蛋白含蛋白质90%以上，是一种优良的食品原料。
大豆别离蛋白主要由11S球蛋白〔Glycinin〕和7S球蛋白〔β-con-glycinin〕组成，大约占整个大豆籽粒贮存蛋白的70%。
这两种球蛋白的组成、结构和构象不同，大豆别离蛋白的功能特性也不同。
大豆别离蛋白在提取、加工和贮运过程中会发生物理和化学变化，这些适当的改变可以提高大豆蛋白在食品、药品中应用的功能特性。
本文综述了大豆别离蛋白的提取和改性方法，以及大豆别离蛋白在食品生物特别是医药领域的应用前景。
关键词：大豆蛋白，别离方法，应用前景第一章绪论大豆营养价值高,资源丰富,原料成本低。
食品工业的飞速发展迫切需要具有功能特性和营养特性的蛋白质,作为食品的原料成分或添加基料。
除了提供人体所必需的氨基酸外，还具有一定的加工特性和生理活性。
为此，加强或改善大豆的功能特性和生物活性,开发新的功能食品,成为食品及医疗保健业亟待解决的问题。
在食品、医疗等领域,大豆的研究与应用备受国内外的关注。
大豆经清洗、破碎、脱皮、压片和正已烷浸出后，可得到脱脂大豆片，即白豆片。
由于白豆片的NSI〔水溶性氮指数〕值高，为提取别离蛋白提供了可靠的保证。
所谓别离蛋白，就是从白豆片里除去非蛋白质成分得到含蛋白90％以上的蛋白粉。
大豆别离蛋白是理想的植物蛋白，其中含有人体必需的8种氨基酸〔亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、苯丙氨酸和缬氨酸〕。
大豆球蛋白的组成多肽分离及氨基酸组分分析
大豆球蛋白的组成多肽分离及氨基酸组分分析 3
郑志雄 ,杨晓泉
(华南理工大学轻工与食品学院食物蛋白工程研究中心 ,广东 广州 , 510640)
摘 要 通过 Nagano方法制备得纯度达 95%以上的大豆球蛋白 ,以其为原料 ,通过制备型液相色谱 ,对大豆球 蛋白的组成多肽进行了分离 。结果显示 :以 DEAE2Sepharose Fast Flow为分离介质 ,以含有 6 mol/L 碳酰二胺和 0102 mol/L巯基乙醇 、pH值为 6145的 0105 mol/L 磷酸缓冲液为平衡液 ,通过对穿透液及梯度洗脱液的分部收 集 ,大豆球蛋白的组成多肽能得到较好的分离 ,回收率达到 75% ,聚丙烯酰胺凝胶电泳显示各组分的纯度达 90%。此外 ,对各组成多肽的氨基酸组分及种类进行了分析 。 关键词 大豆球蛋白 ,多肽 ,分离 ,制备型液相色谱 ,氨基酸组分分析
样品按 1∶100 ( g∶mL )溶于 6mol/L HCl,密封后 110℃水解 24 h。使用装 P ICO1TAG柱的 HPLC系统 (W aters 510,美国 )于 38℃、检测波长 254 nm、流速 110 mL /m in状态下对氨基酸组成进行测定 ,结果表 示为 g /100 g蛋白质 。
agano方法提取制得大豆球蛋白sd2page电泳图谱212大豆球蛋白肽分离纯化按照11312中的层析条件以211中大豆球蛋白为原料经离子交换色谱分离得到包含各洗脱组分的洗脱图谱见图研究结果比较本试验的洗脱峰数量多1个即最后那个nknown此外第ori等人的这可能是因为本试验上样量远远大于他们的实验2sepharosefastflow洗脱图谱分别对不同收集管的收集样品进行sd2page分析结果见图4
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食品科学※分析检测收稿日期：2006-07-15 *通讯作者基金项目：湖北省新世纪高层次人才工程入选人员科研择优资助项目(鄂人[2003]31号)作者简介：詹玲(1981-)，女，硕士研究生，研究方向为农产品加工。
大豆糖蛋白的分离纯化及结构分析詹 玲，潘思轶*(华中农业大学食品科技学院，湖北 武汉 430070)摘 要：通过DEAE-Cellulose 52离子交换层析和Sephadex G-200凝胶层析从大豆中提取纯化一种糖蛋白，并对其结构进行了初步分析。
用S D S -P A G E 检测纯度，并测定其分子质量的大小，测定结果为61000，蛋白质含量为30.55%；β-消除反应说明其为O-连接型糖蛋白，红外光谱法推断其含有α型糖苷键。
关键词：大豆糖蛋白；分离纯化；结构分析Isolation, Purification and Analysis of Glycoprotein from SoybeanZHAN Ling ，PAN Si-yi*(College of Food Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China)Abstract ：A soybean glycoprotein was isolated and purificated from soybean by using DEAE-Cellulose 52 IEC(Ion-exchange Chromatography) and Sephadex G-200 SEC(Size-exchange Chromatography). The soybean glycoprotein was analysed by SDS-PAGE for its purity and molecular mass.The content of the soybean glycoprotein is 30.55% and the molecular mass is 61000.β-elimination reaction indicated the linkage type of the soybean glycoprotein is O-glycosidic linkage and IR Spectra is α-glycoside l inkage.Key words ：soybean glycoprotein ；isolation ；purification ；structure analysis中图分类号：Q513.2 文献标识码：A 文章编号： 1002-6630(2006)12-0594-03糖蛋白是指糖和蛋白质之间，以蛋白质为主，其一定部位以共价键与若干糖分子链相连而构成的分子[1]。
根据糖基异头碳原子上的羟基与肽链氨基酸残基上的酰胺基或羟基脱水所形成的糖苷键的不同，可分为N -糖苷键和O-糖苷键两大类[2]。
糖蛋白在自然界广泛存在于动物、植物和某些微生物中，在生物体内它们以各种形式存在[3]。
近年来随着对糖蛋白研究的深入，发现糖蛋白在生物体内起着重要的作用，而这些作用与糖链的结构密切相关。
本文研究了大豆糖蛋白的提取、纯化方法，对糖蛋白的结构进行了初步分析，为后续的研究打下基础。
1材料与方法1.1材料和试剂1.1.1材料大豆粉：干大豆粉碎过200目筛。
1.1.2主要试剂DEAE-Cellulose 52(Pharmacia)，Sephadex G-200(Pharmacia)，标准分子质量蛋白质(Amersham)。
1.2仪器与设备电泳仪 北京六一；紫外可见分光光度计 日本；红外光谱仪 美国；冷冻干燥机 瑞典；HD －93－1核酸蛋白检测仪。
1.3方法1.3.1大豆糖蛋白的分离提取将干燥脱脂后的大豆粉按一定的料液比加入到0.05mol/L pH6.8 PBS(磷酸缓冲液)中，4℃下浸提过夜，离心后取上清液，在冰浴条件下用(NH 4)2SO 4沉淀，静置后离心。
沉淀物为糖蛋白粗品，粗品用0.05mol/L pH7.2P B S 透析，备用。
1.3.2大豆糖蛋白粗品纯化取大豆糖蛋白粗品若干，用0.05mol/L pH7.2 PBS 溶解。
将活化后的DEAE-Cellulose 52填料装柱(1.6×60cm)，用0.05mol/L pH7.2 PBS 平衡，上样后分别用0.05mol/L pH7.2 PBS ，0.05mol/L pH7.2 PBS-0.1mol/L NaCl 洗脱和0.05mol/L pH7.2 PBS-0.2mol/L NaCl 洗脱，洗脱液595※分析检测食品科学用核酸蛋白质检测仪检测蛋白含量以及用苯酚-硫酸反应检测糖含量，收集重合峰，将收集液透析浓缩后上Sephadex G-200(1.6×50cm)凝胶层析柱，用0.05mol/L pH7.2 PBS-0.05mol/L NaCl 洗脱，用同样的检测方法检测蛋白质和糖含量，收集对称重合峰，收集液用蒸馏水透析后，冷冻干燥，得到一种纯化的大豆糖蛋白。
1.3.3大豆糖蛋白的蛋白质和糖含量的测定蛋白质含量的测定用考马斯亮蓝法，以牛血清白蛋白(BSA)为标准蛋白[5]。
糖含量测定采用苯酚-硫酸法，以葡萄糖为标准糖[10]。
1.3.4大豆糖蛋白的纯度和分子量测定采用SDS-PAGE 凝胶电泳法来鉴定提取的大豆糖蛋白的纯度。
同时用SDS -PAG E 凝胶电泳法测定大豆糖蛋白的分子量，以胰蛋白酶抑制剂、牛碳酸酐酶、兔肌动蛋白、牛血清白蛋白和兔磷酸化酶B 作相对分子质量标准，用各个蛋白的相对迁移率对分子质量的对数作图，得到其相对分子质量[4,5]。
1.3.5大豆糖蛋白的糖肽键特征分析糖蛋白或糖肽的β-消除反应，能够把与肽链上丝氨酸或苏氨酸的羟基相连的单糖或糖链水解下来，而与天冬氨酰相连的N -型糖链则不能被稀碱水解。
因此通过测定碱处理前后紫外吸收光谱的变化，可确定糖肽键的类型[6]。
1.3.6大豆糖蛋白的红外光谱分析用KBr 压片，机型为Nicoler-SX-170型红外光谱仪。
2结果与分析2.1大豆糖蛋白的纯化2.1.1DEAE-Cellulose 52离子交换层析[7]PBS 缓冲液提取的大豆糖蛋白粗品经过DEAE-Cellu-lose 52离子交换柱分离，洗脱结果如下，收集第三组峰进行后续的样品纯化。
图1 DEAE-Cellulose 52 IEC 离子交换层析洗脱曲线图Fig.1 Elution curves of the soybean glycoprotein onDEAE-Cellulose 52 IEC1614121086420010203040吸光值管数糖含量蛋白质含量2.1.2Sephadex G-200凝胶层析将上述第三组峰级分透析浓缩后经Sephadex G-200凝胶层析柱进一步分离纯化，洗脱曲线如下，收集糖和蛋白质含量重合的组分，透析后冷冻干燥，即为大豆糖蛋白纯品。
图2 Sephadex G-200 SEC 凝胶层析洗脱曲线图Fig.2 Elution curves of the soybean glycoprotein onSephadex G-200 SEC302520151050010203040吸光值管数糖含量蛋白质含量2.2大豆糖蛋白纯度和分子量的测定大豆糖蛋白纯品的SDS-PAGE 电泳图谱如下，分别经过蛋白质染色[8]和糖染色[9]，在相同位置出现一条染色带，表明这种蛋白质是纯化的糖蛋白。
通过大豆糖蛋白的相对迁移率可知其分子量为61000。
兔磷酸化酶B 97400牛血清白蛋白66200胰蛋白酶抑制剂 20100牛碳酸酐 31000兔肌动蛋白 43000大豆糖蛋白图3 SDS-PAGE 电泳图谱Fig.3 The SDS-PAGE photography of the soybean glycoprotein图4 质量标准曲线图Fig.4 Calibration curve4.24.44.64.855.5相对迁移率标准蛋白质分子质量的对数2.3大豆糖蛋白糖肽键特征分析取纯品大豆糖蛋白10mg 溶于5ml 0.1mol/L NaOH 溶液中，30℃反应20h ，测定碱处理前后240nm 处氨基酸食品科学※分析检测含量的变化。
由图可看出大豆糖蛋白纯品经β-消除反应后，在240n m 处有明显的吸收峰，因此可说明其为O -糖蛋白。
2.4大豆糖蛋白红外光谱分析在3500～3200cm －1之间的宽峰是O-H 和N-H 的伸缩振动，说明存在分子间和分子内的氢键。
3000～2800cm －1的峰是糖类C-H 伸缩振动，1400～1200cm －1的一组峰是C-H 的变角振动。
根据这两组峰可判断该物质是糖类化合物。
1650c m －1的峰是乙酰氨基中的C =O 伸缩振动。
1250～950cm －1之间的一组强峰是吡喃糖环的醚键和羟基的吸收峰。
840c m －1的吸收峰为吡喃糖α型的C -H 平伏键[10,11]，表明大豆糖蛋白中含有α型糖苷键。
3结 论研究表明通过对脱脂大豆粉的浸提，硫酸铵沉淀以及离子交换层析和凝胶过滤层析，得到一种纯化的大豆糖蛋白。
其蛋白质含量为30.55%，分子质量约为61000，β-消除反应证明它是O-糖蛋白，红外光谱分析其含有α型糖苷键。
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