分子生物学简答题教学教材

试述乳糖操纵子的阻遏作用、诱导作用及正调控。

阻遏作用：阻遏基因lacl转录产生阻遏物单体，结合形成同源四体，即阻遏物。它是一个抗解链蛋白，当阻遏物与操纵基因O结合时，阻止DNA形成开放结构，从而抑制RNA聚合酶的功能。lacmRNA的转录起始受到抑制。

诱导作用：按照lac操纵子本底水平的表达，每个细胞内有几个分子的β-半乳糖苷酶和β-半乳糖苷透过酶。当加入乳糖，在单个透过酶分子的作用下，少量乳糖分子进入细胞，又在单个β-半乳糖苷酶的作用下转变为诱导物异构乳糖，诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之因不能与操纵基因结合而失活，O区没有被阻遏物占据从而激发lacmRNA 的合成。

调控作用：葡糖糖对lac操纵子的表达的抑制是间接的，不是葡萄糖本身而是其降解产物抑制cAMP的合成。cAMP-CAP复合物与启动子区的结合是lacmRNA转录起始所必须的，因为该复合物结合于启动子上游，能使DNA双螺旋发生弯曲。有利于形成稳定开放型启动子-RNA聚合酶结构。如果将葡萄糖和乳糖同时加入培养基中，lac操纵子处于阻遏状态，不能被诱导

试述E.coli的RNA聚合酶的结构和功能。

2个α亚基、一个β亚基、一个β’亚基和一个亚基组成的核心酶，加上一个亚基后则成为聚合酶全酶

α亚基：核心酶组装、启动子识别

β和β’亚基：β和β’共同形成RNA合成的催化中心

因子：存在多种因子，用于识别不同的启动子

试述原核生物DNA复制的特点。

1.原核只有一个起始位点。

2.原核复制起始位点可以连续开始新的复制，特别是快速繁殖的细胞。

3.原核的DNA聚合酶III复制时形成二聚体复合物。

4.原核的DNA聚合酶I具有5'-3'外切酶活性

DNA解旋酶通过水解ATP 产生能量来解开双链DNA

单链结合蛋白保证被解链酶解开的单链在复制完成前保持单链结构

DNA拓扑异构酶消除解链造成的正超螺旋的堆积，消除阻碍解链继续进行的这种压力，使复制得以延伸

真核生物hnRNA必须经过哪些加工才能成为成熟的mRNA，以用作蛋白质合成的模板？

（1）、在5’端加帽，5’端的一个核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸（m7Gppp）。

（2）、3’端加尾，多聚腺苷酸尾巴。准确切割，加poly（A）（3）、RNA的剪接，参与RNA剪接的物质：snRNA、snRNP（4）、RNA的编辑，编辑（editing）是指转录后的RNA 在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。

（5.）、RNA的再编码，mRNA有时可以改变原来的编码信息，以不同的方式进行翻译

（6.）、RNA的化学修饰，人细胞内rRNA分子上就存在106种甲基化和95种假尿嘧啶产物。

真核生物的RNA聚合酶有哪几种？分布在细胞的什么位置？各有什么功能？

RNA聚合酶：核仁负责三种主要的rRNAs的转录：28S、18S、5.8S

RNA聚合酶：核质负责转录生成mRNAs及一些snRNAs

RNA聚合酶：核质负责转录转录生成tRNAs、5SrRNA、snRNAs

增强子的特点及对DNA 转录的作用。

增强或促进转录起始

影响模板附近的DNA双螺旋结构，导致DNA双螺旋弯折或在反式因子的参与下，以蛋白质之间的相互作用为媒介形成增强子与启动子之间的成环连接，活化基因转录

将模板固定在细胞核内特定位置，有利于DNA拓扑异构酶改变DNA双螺旋结构的张力，促进RNA聚合酶在DNA链上的结合和滑动

增强子区可以作为反式作用因子或RNA聚合酶进入染色质结构的入口

试述原核生物转录终止的两种机制。

转录的终止有两种机制。一是需要蛋白质因子ρ（Rho）的参与，ρ因子能与转录中的RNA结合，启动ρ因子ATP酶活性，并向RNA的3’端滑动，划至RNA附近时，RNA聚合酶暂停聚合活动，使RNA:DNA 解链分离转录的RNA释放种植转录。

另一是在立体系统中发现的，纯化的的RNA聚合酶不需要其他蛋白质因子的参与，可使转录终止，即不依赖ρ因子的转录终止机制，模板DAN在转录终止点附近有特殊核苷酸序列可以形成颈环结构影响RNA聚合酶的构象使转录暂停，DAN与RNA双链不稳定分离，转录终止。

指出摆动假说中密码子与反密码的变偶碱基对是什么？怎样进行变偶配对？

密码子与反密码子的配对中，第一对和第二对碱基严格遵守碱基互补配对原则，第三位碱基有一定自由度，可以“摆动”，因而使某些tRNA可以识别一个以上的密码子。一个tRNA究竟能识别多少个密码子是由反密码子的第一位碱基的性质决定的，反密码子第一位为A或C时只能识别1种密码子，为G或U时可以识别2种密码子，为I 时可识别三种密码子。如果有几个密码子同时编码一个氨基酸，凡是第一和第二位碱基不同的密码子都对应于各自独立的tRNA。

什么是RNA编辑，其生物学意义是什么？

RNA编辑是某些RNA,特别是mRNA的一种加工方式，它导致DNA所编码的遗传信息的改变，因为经过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA

生物学意义：校正作用、调控翻译、扩充遗传信息

试述tRNA分子的结构特点。

tRNA的二级结构是三叶草形，其主要结构特点和相关结合部位如下：

受体臂：其3’端最后3个碱基序列永远是CCA，此臂负责携带特异的氨基酸，称氨基酸接受位点

T C臂：是根据三个核苷酸命名的。此臂负责核糖体上的rRNA识别结合，即核糖体识别位点

反密码臂：常有5bp的径区和7Nt的环区组成，负责对密码子的识别与配对，即密码子识别位点

D臂：根据它含有尿氢二嘧啶命名的，负责和氨基酰tRNA聚合酶的结合，形成氨基酰-tRNA 合成酶识别位点

额外环：可变性大，从4Nt到2Nt不等其功能是在tRNA的L型三维结构中负责连接两个区域