AKTApurifier手动命令介绍
AKTAPurifier使用学习教程
每月清洗（Monthly cleaning） 必须每月按时清洗系统或在遇到问题时清洗系统（如色普峰出现重影）： 用1M NaOH ，执行SystemWash指令. 之后立即用水将NaOH冲洗干净.
第17页/共46页
系统移动（Moving the system）
移动系统时小心谨慎，拆下外围的部件和管 道，并防止剧烈震动，
10ml系统
100ml系统
第13页/共46页
维护－每六个月
Monitor UV-900
• 清洗UV流通池，如果样品很脏则须更频繁的清洗.
Monitor pH/C-900
•检查和校正pH计 （pH计在不使用时必须保存在下述溶液中： 1:1 mixture of pH 4 buffer and 2 M KNO3或pH4.0的饱和KCl溶液 中）
二、层析原理
第22页/共46页
第23页/共46页
第24页/共46页
第25页/共46页
第26页/共46页
第27页/共46页
第28页/共46页
第29页/共46页
第30页/共46页
第31页/共46页
第32页/共46页
第33页/共46页
第34页/共46页
第35页/共46页
第36页/共46页
20%乙醇流速减半。
第8页/共46页
仪器使用（5）
进样： 1、用注射器洗进样环，特别是入口处容易残留上次进样样品，需要特别注意。 2、进样时保证进样阀处于load位置。 3、注射器吸取样品时，尽量避免气泡，少量微小气泡关系不大。 4、进样体积大于定量环体积，否则容易进气泡。
第9页/共46页
仪器使用（6）
泵冲洗液（Pump rinsing solution）：
AKTA 操作
ÄKTA常见问题解决方案系统（System）Q：样品与缓冲液怎么脱气和过滤？A：溶液和样品必须过滤（0.2um或者0.45um的膜过滤）和脱气，可以使用负压抽滤瓶过滤（如右图），并且在负压条件下保持10min脱气。
脱气的方法还包括：超声15min以上或者使用注射用水配制缓冲液。
对于小体积样品的过滤，可以使用高速离心的方式，吸取上清。
Q：系统怎么保存？A：使用完毕，须用水将系统冲洗干净（关机前，电导检测数值<0.1ms/cm），之后用20%乙醇清洗系并保存所有的流路。
Q：系统的清洗？A：按时清洗系统或遇到问题时清洗系统。
用1M NaOH ，小流速清洗系统30min，之后立即用中性的缓冲液（例如PBS）和去离子水将NaOH冲洗干净并且系统pH保持在中性。
系统泵（Pump）Q：系统中进了气泡，怎么排除？A：排除气泡的方式有两种：system control→Manual→Pump→PumppurifierA/B，进行泵洗，高流速将气泡排出（流速和冲洗的时间系统默认）；或者将空注射器放置在泵头黑色接头处（如右图），拧开泵头，抽出气泡后，拧紧泵头即可。
Q：泵后润洗系统，如果进入气泡怎么处理？润洗液不循环，怎么处理？A：润洗系统只是起润滑作用，有小气泡不会影响缓冲液的系统或者进入柱子；如果有大段气泡影响润滑时，则将润洗瓶中有接头处接空注射器，将气泡抽出即可。
如果润洗液不循环，说明单向阀堵塞或损坏，可以使用超声清洗或更换。
紫外监测器(UV Monitor)Q：如果紫外检测曲线有噪音或者波动，怎么处理？A：可以使用注射器推甲醇或1M NaOH注入紫外流动池，停留20分钟，用水冲洗；或者用注射器推10%的表面活性剂（如Decon90，Deconex11，DBS25，SDS等）注入紫外流动池，停留20分钟，用水冲洗。
Q：怎么查看检测器的使用时间？A：三波长检测器灯的使用时间：面板菜单-Check-press OK-Check Lamp Run Time（如果>4000h，需要更换紫外灯）；光栅转动时间：面板菜单-Check-press OK-Check Flip Time （如果>2000h，需要维护）；紫外灯的能量：面板菜单-Check-press OK-Check Lamp Intensity （如果灯的能量<20%，需要更换内部光纤）固定波长检测器灯使用寿命：（AKTApurifier UPC/FPLC）：灯的使用时间：面板菜单-Check-pressOK-Check Lamp Run Time，如果达到以下使用时间，需要更换相应灯——汞灯在254 nm的寿命，室温一般为7000h（冷室2000h)；汞灯在280 nm的寿命，室温一般为3500h；锌灯的寿命，室温一般为2000h；面板菜单-Check-press OK-Check Lamp Intensity. 如果灯能量小于以下数值，需要更换相应灯——R <300 mV for 254 nm ；R <150 mV for 280 nm；R<150 mV for 214 nm。
AKTApurifier中文说明书
GE Healthcare实施您ÄKTApurifier的首次运行重要用户信息所有用户必须阅读整本手册以充分理解ÄKTApurifier的使用安全。
WARNING（警告）警告标识强调必须严格遵循指令以避免人身伤害。
在说明书完全弄懂和所有规定条件都具备后才能开始动手操作。
Caution（小心）小心标识用于引起注意以避免人身伤害，必须遵循指令和条件以避免毁坏产品和其它设备。
在说明书完全弄懂和所有规定条件都具备后才能开始动手操作。
Note（注意）注意标识用于指出对产品的无故障及最佳使用的重要信息。
CE证书产品符合适用于CE规定的所有要求。
相应合格证的复印件函索即寄。
CE标志和相应合格证对该仪器是有效的。
当仪器– 连接到其它标有CE标志的 GE Healthcare 仪器上，或，– 连接到本手册中推荐或所述的其它仪器上, 和，– 除了在本手册中提到的变更外，按 GE Healthcare 所提供的说明使用。
警告本产品为A类产品。
在局部环境下，本产品可能引起无线电干扰，在此情况下用户可能需要进行适当的测量。
销售条款和规定除非另有书面协议，在 GE Healthcare 集团供应范围内，所有售出货物和服务都服从公司的销售条款和规定。
这些销售条款和规定的复印件函索即寄。
如果您对本产品有任何意见，我们将乐意接受。
请寄往：GE HealthcareSE-751 84 UppsalaSweden商标水滴图样, ÄKTA, ÄKTApurifier, UNICORN and Superloop 均为 GE Healthcare 的商标。
Amersham 和 Amersham Biosciences 为 GE Healthcare 的商标。
.Windows为Microsoft Corporation 的注册商标。
办事处地址GE HealthcareSE-751 84 UppsalaSwedenGE Healthcare 香港办事处香港九龙望角亚皆老街8号朗豪坊办公大楼12楼电话：（852）2100 6314传真：（852）2100 6338GE Healthcare 北京办事处北京市经济开发区永昌北路1号电话：（010）5806 9689传真：（010）6787 1162邮编： 100176GE Healthcare 上海办事处上海市虹桥开发区兴义路8号万都中心2401室电话：（021）5257 4650－67337传真：（021）5208 1282邮编： 200336GE Healthcare 广州办事处广州市建设六马路33号宜安广场1212室电话：（020）8363 3828－67961，67956 传真：（021）8363 3291邮编： 510060800热线：800－810－9118© GE Healthcare Life Sciences 2003版权- 所有权利受保护目录1关于本指南 (5)1．1 必要条件 (5)1．2 印刷上的规定 (5)2系统和软件 (6)2．1 概论 (6)2．2 UNICORN综述 (9)2．3 帮助 (11)3 建立方法 (12)4准备运行系统 (15)4．1 系统连接 (15)4．2 系统的一般准备 (16)4．2．1充满入口管道 (17)4．2．2 充满样品环 (17)5开始运行 (18)6查看运行 (23)7查看和打印结果 (26)7．1 查看 (26)7．2 打印和生成报告 (29)8缓冲液制备 (32)9探索 (34)10进一步应用 (36)索引（略）简短说明 (38)注意：本手册所涉及内容以英文原版为准1关于本指南本指南是为不熟悉UNICORN™ 软件和ÄKTApurifier™的用户而写的。
AKTApurifier手动命令介绍
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Watch电导曲线功能，Delta_Peak为根据峰顶 的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base为 根据平均峰高来区分不同峰的参数。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Alarms&Mon
Watch浓度曲线功能，Delta_Peak为根据峰顶 的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base为 根据平均峰高来区分不同峰的参数。
Frac
进行峰收集的曲线来源，UV为紫外， AD900为检测糖类的一个信号转换。
进行紫外曲线峰收集的参数设定，可以根 据紫外水平或者斜率来设定。
24 / GE Title or job number /
2020/3/15
Frac
进行AD900曲线峰收集的参数设定，只可 以根据AD900水平来设定。
Pump
系统泵流速压力控制模式的调节参数。一 般情况不进行改变。
样品泵流速压力控制模式：在此模式下，当样 品泵压力达到设定的压力上限时系统会自动调 节流速，从而降低压力；若达到设定最低流速 时还超过设定压力，系统报警，停止。
Pump
AKTAexplorer系统泵清洗命令。其中A1进 口有八个通道，请确认A1入口的阀门位置 。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Watch PH曲线功能，Delta_Peak为根据峰顶 的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base为 根据平均峰高来区分不同峰的参数。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Alarms&Mon
Watch压力曲线功能，Delta_Peak为根据峰顶 Watch功能一般在自动编程方法中应用。 的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base为 根据平均峰高来区分不同峰的参数。
AKTA使用操作
AKTA使用操作1先打开AKTA开关后再开电脑2打开软件UNICORN，进入到SytemControl3冲洗系统：泵(Pump)—Pumpwahbic—PumpA-选择On单击执行(E某ecute)，立即执行指令，冲洗充满系统，之后会自动结束4设置报警：AlarmQmon—Alarmpreure---highalarm---在参数(Parameter)下面输入新的数值Mpa（根据柱子的信息设置5），单击执行(E某ecute)，立即执行指令5设置流速：泵(Pump)--流量(Flow)—在参数(Parameter)下面输入数值（流速FlowRate），设置一个较小的流速，一般0.5mL/min。
单击执行(E某ecute)，立即执行指令，单击关闭(Cloe)关闭对话框6接注：在冲洗状态运行中接柱子，先打开柱子上端，注满液体，先松松接入接头，去掉柱子下端堵头并接上接头，稍紧，待下接头有液体流出，充满接柱孔后旋紧，然后拧紧柱子上面接头。
7平衡：冲洗平衡柱子一个柱体积到基线稳定，期间可在接口2和6之间接上样品环，注射冲水洗干净，再用buffer冲洗并充满，注射器不拔，等待上样8上样：窗口进入到Flowpath—Injectionvalve—选择load，单击执行(E某ecute)。
取下注射器，用新的注射器吸取适量的样品（根据样品环的容量，注射器中不要带入气泡）从注射口缓慢的注入样品，注射器不可拔掉。
注射完成后，把load改为inject—inert，Alarm&Mon---AutozeroUV--inert，单击执行(E某ecute)开始上样，走4mL左右时，样品应已从样品环完全进入系统，把inject改为load，单击执行(E某ecute)，等待出峰收样，同时摆好收样器的位置，准备接收管。
9收样：出峰时设置Frac---fractionation900---在参数(Parameter)下面输入数值，一般0.5mL—1mL，单击执行(E某ecute)，结束收样时end结束，保存结果10：处理：洗脱样品结束后处理系统，先用水冲洗一个柱体积到基线稳定，暂停，换NaOH冲洗至少一个柱体积到基线稳定，再用水冲洗一个柱体积到基线稳定，测PH为7.0，暂停，换20%乙醇（Ethanol）冲洗至少一个柱体积到基线稳定，11：拆柱：先拆下面，取下后松接上堵头，旋松上面的接头，旋紧下面堵头，取下上面接头，柱子上端注满液体，接上端堵头。
AKTA purifier 全自动层析仪操作规程
ÄKTApurifier全自动层析仪操作规程1.开机打开主机和电脑电源，待仪器自检完毕（CU950上面的3个指示灯完全点亮不闪烁），双击桌面上UNICORN图标，进入操作界面。
2. 准备流动相和样品所有的工作溶液和样品必须经过0.45µm的滤膜过滤，样品也可高速离心后取上清备用。
当缓冲液中含有有机溶剂（如乙腈、甲醇），需在使用前用低频超声脱气10min。
3.清洗管道及装柱3.1 首先将A1管道放入平衡液或banding buffering中，将B1管道放入高盐溶液中或elutionbuffering中，在system control窗口点击manual→pump→pump wash basic，选中A1,B1管道为ON， execute。
泵清洗程序会自动运行结束。
3.2 选择manual→pump→flow rate，输入流速1ml/ml，insert；选择manual→Alarm&mon→alarm pressure，设置high alarm（输入填料的耐受压力，可在填料说明书中查到），insert，execute。
将进样阀的1号位管道接入柱子的柱头，稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉，直接拧入紫外流动池或连接管道。
4.手动运行4.1 平衡柱子平衡好了（观察电导COND，pH的数值正确曲线走稳了）。
此时将紫外调零，选择manual→Alarm&mon→autozero，exectue，就准备上样了。
4.2 上样4.2.1 用样品环上，将样品吸进注射器，推掉气泡，从进样阀的3号位推入（进样量不得低于样品环的体积的2倍），不要取下注射器。
选择manual→flowpath→injectionValve→inject，execute。
4.2.2 用样品泵上样（AKTAexplorer系统），将样品置于Sample Valve 1号位（可以选8个不同的位置），点击manual→pump→Direct Load_960输入进样流速和体积，execute。
AKTApurifier 层析操作规程
AKTApurifer层析仪操作规程
1、打开电脑和显示器，打开层析仪电源，等待仪器自检完成后，点击电脑桌
面上的UNICORN软件，输入用户名和密码进入软件控制系统。
2、系统清洗：依次用水和缓冲液。
A管放入A缓冲液中，B管放入B 缓冲
液中，进样阀4，5出口管和收集阀的废液出口接到废液瓶中，在System control窗口下，点击Manual打开pump菜单，选择PumpWashPurifier命令，指定冲洗液入口，执行。
样品环的清洗用注射器从进样阀3号位推入缓冲液，反复几次。
3、手动控制：在运行前设定Alarm & Mon 中的报警压力。
缓冲液平衡柱，
用注射器从进样阀3入口推入过滤好的样品，着路在样品环中。
待基线稳定后，在flowpath菜单中injectValve选择切换到inject状态上样，并在Alarm & Mon菜单中选autozeroUV 将紫外调零，上样后转换到load状态，进行样品的洗脱操作。
4、自动控制：先在Method Edit窗口中编辑好方法，然后用注射器从进样阀
3入口推入过滤好的样品着路在样品环中，在System control的窗口中直接按Run，调出编辑好的程序，按照提示将它运行。
5、纯化结束后，用水和20％乙醇依次清洗管路和保存。
如果用泵上样品，
运行PumpWashPurifier命令，将上样品的入口选中，并放置在1MNaOH 中，运行30min，然后用缓冲液，水和20％乙醇依次清洗和保存管路。
AKTAPurifier使用202011
平衡时不需要走整个柱体积，进样后也一样。合理安排时间，尽量不 要出现因为有事而长时间的空走。 4、用大柱子进行分析 注意：大柱子用于制备，小柱子进行分析。 5、开机使用pumpwash 注意：为避免对泵造成损伤，开机运行后不要立即使用pumpwash，应先 用低流速走几分钟。保证抽过泵头后，可省略pumpwash。 6、注意平衡时关闭紫外灯。 7、压力偏高时请不要降低流速继续使用，考虑更换滤器和通知管理员冲 洗柱子。 8、所有配件和说明书使用完后必须归位。
AKTA Purifier使用
一、仪器使用注意事项
AKTA purifier
流路图
Inlet
Pump
压力感应器
混合器 在线滤器
进样阀
色谱柱
紫外检测器
电导检测器PH计收集器使用环境对操作环境的要求： 室内温度：4－40度 相对湿度：10－90％ 输入电压：100－240VAC 功率：400AV－900AV 重量：40KG-70KG 注意事项： 1、主机要有良好的接地；计算机和主机不 要用同一电源 2、当把主机置于远端控制时，com线不要 长于15m
维护－每周
缓冲液筛网（Inlet filters）：
• 检查筛网是否很脏，如有必要须更换.
在线滤器（On-line filter）：
• 清洗滤器，如有必要须更换滤膜，否则会形成 很高的在线压力，损坏层析柱。
泵冲洗液（Pump rinsing solution）：
• 更换泵后冲洗液（20%乙醇）。如果冲洗液瓶中液体量增加，说明 泵头密封圈渗漏，须更换
快速蛋白质液相层析(FPLC)
快速蛋白质液相层析（FPLC）编制者：崔恒林ÄKTA purifier 100是快速分离肽、核酸和蛋白的全新液相色谱系统，全机流路采用PEEK惰性塑料，流速范围宽广，为0.01-100 ml/min。
除了操作简单，大量应用工艺和方法模板外，AKTApurifier还加进了很多尖端功能去缩短实验准备和运行所需时间，大大提高实验结果的可靠性和重复性。
仪器的主要技术参数：泵流速为0.01-100 ml/min；最大耐压为600psi ( 40bar )；紫外检测范围为0.01-5AU；波长选择有254 nm和280nm；温度范围为4-60℃；电导率范围为1 us/cm-999.9 ms/cm。
系统组成：本系统由控制系统（Monitor UPC-900）、泵（Pump-901）、混合仪（Mixer M-925）、进样阀（Valve INV-907），紫外检测仪和部分收集器（Frac-920）等部件组成。
系统特点1、高压：供液压力和进样压力都很高，一般可达0-5Mpa。
2、高速：载液在色谱柱内的流速比经典液相色谱高很多，可达0-100ml/min。
3、高效：由于采用了新型的固定相,提高了分辨率。
4、高灵敏度：采用了基于光学原理具有高灵敏度的检测器，之外吸收检测，灵敏度可达到10-9g/ml数量级。
5、梯度洗脱：洗脱液的组成可以是连续变化的，增加了洗脱强度，缩短了分析时间。
使用注意事项与维护保养虽然ÄKTA purifier 100的自动化程度极高，但该仪器极易受外界因素的影响甚至损坏，使用该仪器必须严格按使用规范和操作手册进行。
1、开机。
确认将ÄKTA purifier 100主机与电脑电源连接在稳压电源输出端。
先开ÄKTA，后开电脑。
2、关机。
确认退出所有程序后，关闭电脑后关闭ÄKTA purifier 100主机电源。
3、所有流动相和样品均应用 0.22微米孔径滤膜过滤，以防堵塞纯化柱。
AKTA系统手动命令指南
Alarms&Mon
电导报警设定，系统默认为关闭。 可以设定最高和最低报警，如果系统超出 设定值的话系统会自动停止。
PH报警设定，系统默认为关闭。 可以设定最高和最低报警，如果系统超出 设定值的话系统会自动停止。
Alarms&Mon
压力报警设定，系统默认为开启。可以设 定最高和最低报警，如果系统超出设定值 的话系统会自动停止。注意：每次运行一 个新程序一定要进行最高压力设定。
Other
设定系统自动暂停的参数。可以用累计时 间和累计体积来设定。
在开始运行新的程序前进行指定，可以将 程序自动保存在指定位置，而不存在 Manual run文件夹里。
Other
用自动配置缓冲液功能时，提供配方。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Watch PH曲线功能，Delta_Peak为根据峰 顶的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base 为根据平均峰高来区分不同峰的参数。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Alarms&Mon
Watch压力曲线功能，Delta_Peak为根据峰 顶的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base 为根据平均峰高来区分不同峰的参数。
Frac
进行峰收集的曲线来源，UV为紫外， AD900为检测糖类的一个信号转换。
进行紫外曲线峰收集的参数设定，可以根 据紫外水平或者斜率来设定。
Frac
进行AD900曲线峰收集的参数设定，只可 以根据AD900水平来设定。
收集体积设定。（不管是不是峰都会按照 设定值收集）
Frac
停止收集。
从当前收集的管子到下一个管子。
上样泵压力报警设定，系统默认为开启。可 以设定最高和最低报警，如果系统超出设定 值的话系&Mon
AK蛋白纯化系统操作
A K蛋白纯化系统操作 Modified by JACK on the afternoon of December 26, 2020AKTA蛋白纯化系统操作AKTA蛋白纯化系统是当前蛋白纯化工作经常用到的一组设备，自动化程度很高。
AKTA系统依据不同的配置，可以分为AKTA EXPLORER、AKTA PILOT、AKTA PURIFIER等多种型号的设备。
以下以AKTA EXPLORER为例简单介绍AKTA蛋白纯化系统的一般操作。
1、认识AKTA。
AKTA explorer 是为方法开拓及研究应用而设计的全自动液相色谱系统。
该色谱系统的分离装置有三个主要组件，在底部平台的左侧整齐堆起（Fig 1）。
它们是：FIG 1、AKTA EXPLORER主机Pump-900 为双通道高效梯度泵系列。
在AKTAexplorer 100，流速范围ml/min，压力高达10 Mpa（泵名为P-901）。
在AKTA explore10，流速范围ml/min，压力高达25 Mpa（泵名为P-903）。
Monitor UV-900，同时监控190－700 nm 范围内高达3 个波长的多波长紫外-可见（UV-Vis）监测器。
（针对部分AKTA PURIFIER机型，尚有UPC-900监测器可供选择，光源为汞灯光源，一次可以监控一个波长，安装滤光片后，可以在选择的波长范围内进行切换。
）Monitor pH/C-900，在线电导和pH 监测的组合监测器。
Fig 2、AKTA EXPLORER硬件模式图AKTA EXPLORER系统的主要组成部件可以用模式图表示（Fig 2）。
组成部件，如混合器、柱及不同的阀安装在右边部分。
打开装阀的门可全部看到。
柱被挂在装阀的门的外侧。
分离装置由UNICORN 软件控制。
软件安装于一独立的电脑主机之中，在电脑与色谱系统之间的通信由数据采集装置CU950进行控制。
2、一般操作开机按位于底部平台前左侧的ON/OFF 按钮，打开色谱系统，然后打开电脑电源。
AKTA蛋白纯化系统操作
AKTA蛋白纯化系统操作AKTA蛋白纯化系统是当前蛋白纯化工作经常用到的一组设备，自动化程度很高。
AKTA系统依据不同的配置，可以分为AKTA EXPLORER、AKTA PILOT、AKTA PURIFIER等多种型号的设备。
以下以AKTA EXPLORER为例简单介绍 AKTA蛋白纯化系统的一般操作。
1、认识AKTA。
AKTA explorer 是为方法开拓及研究应用而设计的全自动液相色谱系统。
该色谱系统的分离装置有三个主要组件，在底部平台的左侧整齐堆起（Fig 1）。
它们是：FIG 1、AKTA EXPLORER主机• Pump-900 为双通道高效梯度泵系列。
在AKTAexplorer 100，流速范围0.01-100 ml/min，压力高达10 Mpa（泵名为P-901）。
在AKTA explore10，流速范围0.001-10 ml/min，压力高达25 Mpa（泵名为P-903）。
• Monitor UV-900，同时监控190－700 nm 范围内高达3 个波长的多波长紫外-可见（UV-Vis）监测器。
（针对部分AKTA PURIFIER机型，尚有UPC-900监测器可供选择，光源为汞灯光源，一次可以监控一个波长，安装滤光片后，可以在选择的波长范围内进行切换。
）• Monitor pH/C-900，在线电导和pH 监测的组合监测器。
Fig 2、AKTA EXPLORER硬件模式图AKTA EXPLORER系统的主要组成部件可以用模式图表示（Fig 2）。
组成部件，如混合器、柱及不同的阀安装在右边部分。
打开装阀的门可全部看到。
柱被挂在装阀的门的外侧。
分离装置由UNICORN 软件控制。
软件安装于一独立的电脑主机之中，在电脑与色谱系统之间的通信由数据采集装置CU950进行控制。
2、一般操作2.1 开机按位于底部平台前左侧的ON/OFF 按钮，打开色谱系统，然后打开电脑电源。
待仪器自检完毕（CU950上面的3个指示灯完全点亮并不闪烁）。
蛋白质纯化系统AKTAPurifer10操作规程
仪器操作规程-蛋白质纯化系统 AKTA Purifer 10
一、标准操作规程
1.检查各部件连接是否正常（电源开关，仪器部件，流动相，色谱柱等）。
2.打开AKTA purifierTM10蛋白层析仪和计算机电源。
3.双击UNICON 5.11图标，进入实时方法编辑、实时运行、结果分析界面。
4.编辑新方法:
1)编辑方法：点击文件，点击新建方法，编辑方法（运行时间，流动相选择，流速，
检测波长等）。
2)保存方法：点击文件，点击另存方法为（输入文件名）。
3)运行方法：选择文件，点击右键，点击RUN，进行方法运行。
4)平衡色谱柱，一般约1—2个柱体积。
5)手动单针进样：在Load状态，将样品注入进样环，完毕后，点击Inject状态。
6)批处理进样：编辑方法，选择A—905自动进样器，进入scouting界面，利用向
导进行批处理编辑，保存批处理文件，点击批处理运行图标。
7)数据处理：点击第四个谱图分析图标，进入数据处理界面，打开要处理的文件，
点击积分向导图标进行数据处理（还可点击界面顶部的手动积分进行手动处理）。
保存数据处理方法。
5.运行已有方法：在实时分析界面点击文件，打开方法文件，点击RUN即可。
6.清洗色谱柱，在方法文件中调出自动清洗方法，点击RUN即可。
二、注意事项
1.流动相的溶剂须使用色谱纯，水为超纯水，缓冲盐需用0.45um的滤膜过滤。
2.清洗泵后的保护液为20%乙醇，一周更换一次。
3.如经常使用仪器，在线过滤器中的滤芯需每周超声清洗一次。
三、送样要求
初级纯化过滤后的样品。
AKTA_Purifier中文操作手册
GE Healthcare实施您ÄKTApurifier的首次运行重要用户信息所有用户必须阅读整本手册以充分理解ÄKTApurifier的使用安全。
WARNING（警告）警告标识强调必须严格遵循指令以避免人身伤害。
在说明书完全弄懂和所有规定条件都具备后才能开始动手操作。
Caution（小心）小心标识用于引起注意以避免人身伤害，必须遵循指令和条件以避免毁坏产品和其它设备。
在说明书完全弄懂和所有规定条件都具备后才能开始动手操作。
Note（注意）注意标识用于指出对产品的无故障及最佳使用的重要信息。
CE证书产品符合适用于CE规定的所有要求。
相应合格证的复印件函索即寄。
CE标志和相应合格证对该仪器是有效的。
当仪器– 连接到其它标有CE标志的 GE Healthcare 仪器上，或，– 连接到本手册中推荐或所述的其它仪器上, 和，– 除了在本手册中提到的变更外，按 GE Healthcare 所提供的说明使用。
警告本产品为A类产品。
在局部环境下，本产品可能引起无线电干扰，在此情况下用户可能需要进行适当的测量。
销售条款和规定除非另有书面协议，在 GE Healthcare 集团供应范围内，所有售出货物和服务都服从公司的销售条款和规定。
这些销售条款和规定的复印件函索即寄。
如果您对本产品有任何意见，我们将乐意接受。
请寄往：GE HealthcareSE-751 84 UppsalaSweden商标水滴图样, ÄKTA, ÄKTApurifier, UNICORN and Superloop 均为 GE Healthcare 的商标。
Amersham 和 Amersham Biosciences 为 GE Healthcare 的商标。
.Windows为Microsoft Corporation 的注册商标。
办事处地址GE HealthcareSE-751 84 UppsalaSwedenGE Healthcare 香港办事处香港九龙望角亚皆老街8号朗豪坊办公大楼12楼电话：（852）2100 6314传真：（852）2100 6338GE Healthcare 北京办事处北京市经济开发区永昌北路1号电话：（010）5806 9689传真：（010）6787 1162邮编： 100176GE Healthcare 上海办事处上海市虹桥开发区兴义路8号万都中心2401室电话：（021）5257 4650－67337传真：（021）5208 1282邮编： 200336GE Healthcare 广州办事处广州市建设六马路33号宜安广场1212室电话：（020）8363 3828－67961，67956 传真：（021）8363 3291邮编： 510060800热线：800－810－9118© GE Healthcare Life Sciences 2003版权- 所有权利受保护目录1关于本指南 (5)1．1 必要条件 (5)1．2 印刷上的规定 (5)2系统和软件 (6)2．1 概论 (6)2．2 UNICORN综述 (9)2．3 帮助 (11)3 建立方法 (12)4准备运行系统 (15)4．1 系统连接 (15)4．2 系统的一般准备 (16)4．2．1充满入口管道 (17)4．2．2 充满样品环 (17)5开始运行 (18)6查看运行 (23)7查看和打印结果 (26)7．1 查看 (26)7．2 打印和生成报告 (29)8缓冲液制备 (32)9探索 (34)10进一步应用 (36)索引（略）简短说明 (38)注意：本手册所涉及内容以英文原版为准1关于本指南本指南是为不熟悉UNICORN™ 软件和ÄKTApurifier™的用户而写的。
AKTAPurifier使用
仪器使用（4）
柱子连好后观察压力情况，刚接上一般压力比正常 压力稍低，属正常现象。
即使压力不超过报警压力，也不要将流速提高到正 常流速以上。 Superdex75 10/300GL 24ml 流速0.6ml/min Highload16/60 superdex75 120ml 流速1ml/min 20%乙醇流速减半。
如果系统仍将使用之前一天的相同缓冲液，则可以用10％的使用 流速，用缓冲液冲洗泵 如果将在第二天更换缓冲液，则需用水用PumpWash功能将泵冲 洗干净
几天停用仪器（Leaving for a few days）
先用水PumpWash冲洗之后，再用20%的乙醇将系统冲洗干净， 包括所有的进口管路和出口管路都用20％的乙醇保存好
AKTA Purifier使用
一、仪器使用注意事项
AKTA purifier
流路图
Inlet
Pump
压力感应器
混合器
在线滤器
进样阀
色谱柱
紫外检测器
电导检测器
PH计
收集器
使用环境
对操作环境的要求： 室内温度：4－40度 相对湿度：10－90％ 输入电压：100－240VAC 功率：400AV－900AV 重量：40KG-70KG 注意事项： 1、主机要有良好的接地；计算机和主机不 要用同一电源 2、当把主机置于远端控制时，com线不要 长于15m
仪器使用（3）
装柱：在有流速和设置保护压力的情况下装柱，约 0.3ml/min，从上到下，打开柱子上端后，使液体 充满上端，避免进入气泡，然后将上端拧成半紧 状态。然后打开下端，再将上端拧紧。120ml柱子 可直接观测接口管路一段时间，看是否有气泡 装好后检查紫外检测线，以及出口处出液情况。
AKTApurifier100操作规程(修改)
题目AKTApurifier100操作规程编码：共6页制定审核批准制定日期审核日期批准日期颁发部门颁发数量份生效日期分发单位一、范围：本标准规定了AKTApurifier100操作要求和维护方法；适用于本公司纯化岗位人员使用AKTApurifier100进行纯化工艺研究和小批量样品制备。
二、引用文献：《AKTAdesign Purification Method handbook》《AKTApurifier Installation Guide》《AKTApurifier System Manual》《Making your first runs Begin here with AKTApurifier》《Optional Configurations AKTApurifier User Manual》《Component User Manuals and Instructions》三、仪器的组成1、仪器的组成：AKTApurifier100，层析柱，电脑。
2、AKTApurifier100组成AKTApurifier100主要由Box-900，Monitor pH/C-900（pH，电导监控），Monitor UV-900（紫外监控），Pump P-901（泵）和ON/OFF button（总开关），injecton Valve INV-907（injecton阀），Outlet Valve PV-908（收集阀 PV-908），CU-950 Installation（CU-950监控），Online filter（在线滤器），Mixer M-925（混合仪），UV flow cell（紫外检测），pH electrode （pH电极），Conductance electrode（电导电极）组成。
四、主要技术参数流速范围：0.01-100ml/min压力范围：0-10MPa电导范围：1μS/cm-999.9mS/cmpH范围：2-12温度范围：4℃-40℃体积： 500mm×460mm×620mm重量：75kg部件参数P-901 泵流速范围：0.01-100ml/min增量：0.01ml/min压力范围：0-10MPa（100bar，1450psi）体积：<1800ul/pump module粘性：最大5cPUV-900紫外光/可见光检测器波长范围：190-700nm检测波长：同时检测3个波长波长可调范围：1nm带宽：4nm波长精度：± 2nm重现性：±0.01nm线性：<2%(在260nm，样品尿嘧啶，pH=2，紫外吸收上升到2AU时)噪音：<6×105AU(230nm)漂移：<2×104AU/h（254nm）最大压力：2MPa（20 bar 290psi）pH/C-900 pH/电导检测器电导单元电导范围：1μS/cm-999.9mS/cm噪音：；0.5%（满刻度校准范围内）pH单元pH范围：0-14（有效使用范围2-12）精度：±0.1pH单位，温度补偿稳定性：最大偏移0.1pH单位/10小时五、操作程序5.1 开机按位于底部平台前左侧的ON/OFF 按钮，打开色谱系统，然后打开电脑电源。
AKTA(FPLC) 纯化系统
AKTApurifierTM 系统可以确保每一根柱子都运行在最佳条件下，并且可以保护它们不受 某些破坏性事件 (比如超压) 的损害。只要从庞大的层析柱数据库中选择一根预装柱， AKTApurifierTM 就会自动地为它设定各种最佳的运行参数。新的层析柱可以不断地被加 入到这个数据库中去，而且可以在同样的安全模式下运行。
AKTApurifierTM UPC 10 和 100 核心系统都用 UPC-900 监控器方便地同时进行紫外波长， pH 以及电导的监控。相对于 UV-900，这种监控器具有更大的灵活性，是一种更为经 济的选择。
AKTApurifier 10 and 100 core system 4
AKTApurifier UPC 10 and 100 core system
GE Healthcare
A˙˙KTATM
设计自己的快速蛋白质 液相层析 (FPLC) 纯化系统
AKTApurifier 和自动 控制配套组件
多功能性和自动化
自动化的FPLCTM蛋白质纯化系统采用的层析系统能够确保获得更可靠的结果和更强大 的多功能性。自动化控制可以减少诸如样品溢出或是放错管子所导致的样品损失，从 而确保您能够获得更多的目的蛋白质。此外，自动化控制使得纯化条件的优化变得更 为便利。您可以在纯化蛋白质上节约大量的时间，从而可以集中精力去完成一些其它 重要的工作。
筛选层析柱配套组件配备了可以自动进行方法优化，多步骤纯化以及更为轻松地进行 层析柱筛选所需的一些电动阀 (motor valves)。一次可将多达八根层析柱接入系统。这 样，在一次运行中，不同层析柱的性能可以在运行时随着条件的改变易于进行比较。 而预设好的方案还可以在使用中防止系统超压以及层析柱损坏。
AK蛋白纯化系统操作精选文档
A K蛋白纯化系统操作精选文档TTMS system office room 【TTMS16H-TTMS2A-TTMS8Q8-AKTA蛋白纯化系统操作AKTA蛋白纯化系统是当前蛋白纯化工作经常用到的一组设备，自动化程度很高。
AKTA系统依据不同的配置，可以分为AKTA EXPLORER、AKTA PILOT、AKTA PURIFIER等多种型号的设备。
以下以AKTA EXPLORER为例简单介绍AKTA蛋白纯化系统的一般操作。
1、认识AKTA。
AKTA explorer 是为方法开拓及研究应用而设计的全自动液相色谱系统。
该色谱系统的分离装置有三个主要组件，在底部平台的左侧整齐堆起（Fig 1）。
它们是：FIG 1、AKTA EXPLORER主机Pump-900 为双通道高效梯度泵系列。
在AKTAexplorer 100，流速范围0.01-100 ml/min，压力高达10 Mpa（泵名为P-901）。
在AKTA explore10，流速范围0.001-10 ml/min，压力高达25 Mpa（泵名为P-903）。
Monitor UV-900，同时监控190－700 nm 范围内高达3 个波长的多波长紫外-可见（UV-Vis）监测器。
（针对部分AKTA PURIFIER机型，尚有UPC-900监测器可供选择，光源为汞灯光源，一次可以监控一个波长，安装滤光片后，可以在选择的波长范围内进行切换。
）Monitor pH/C-900，在线电导和pH 监测的组合监测器。
Fig 2、AKTA EXPLORER硬件模式图AKTA EXPLORER系统的主要组成部件可以用模式图表示（Fig 2）。
组成部件，如混合器、柱及不同的阀安装在右边部分。
打开装阀的门可全部看到。
柱被挂在装阀的门的外侧。
分离装置由UNICORN 软件控制。
软件安装于一独立的电脑主机之中，在电脑与色谱系统之间的通信由数据采集装置CU950进行控制。
完整word版蛋白纯化AKTA操作说明
AKTA pure操作说明分子筛层析操作步骤：1. 开机：打开AKTA pure开关，看指示灯，泵同步（泵内有注入液体的声音）。
2. 打开系统：打开电脑：双击Unicorn 7.0打开系统，进入log on 界面，用户名默认为Default，输入密码：default，点ok键，出现提示对话框，继续点确定，进入系统。
注意：进入系统时会弹出三个界面：System Control界面，Evaluation界面和Administration界面。
其中system Control界面为主操作窗口，所有的设置选项都是在该界面下完成：Manual---Execute Manual instructions---......；Evaluation界面为结果数据查看及处理窗口；Administration界面为Unicorn 7.0系统设置界面。
3. 洗泵：把A1泵头从20%乙醇中取出，用去离子水冲洗，放入分子筛缓冲液中，在SystemControl界面下，点击manual---Execute Manual instructions---Pumps---Pump A wash---点开inlet，选择A1---Excuse。
4. 设置系统参数：设柱压：Alams---alam systerm pressure---high alam---设置柱压---Execute；设流速：Pumps---System flow ---设置system flow（1mL/min）---Execute。
注意：流速和柱压设置参照“GE蛋白纯化柱表”，不要超出最高限制。
5. 装柱子(先上后下)：接柱子的上面：拧下连接进样阀和检测器之间的线，等进样阀出口有液体流出时，拧开柱上面线头的螺帽，将它连到进样阀出口；接柱子的下面：去掉柱下端连接的注射器，连上接头，连上一段线，待液体滴出滴出液体滴到检测器上的连接口的洞里，滴满，将接头连到检测器的连接口里。
AKTApurifier操作入门
欢迎阅读AKTApurifier层析系统操作入门为使用户在较短时间内尽快了解AKTA系列层析系统的功能和基本操作，特编写此操作入门。
若需进一步了解详细内容，可参阅相应的组件、系统和软件说明书。
一系统组件及系统功能介绍1系统组件(1)泵Pump(2)阀(3)(4)pH电导仪2(1)(a)梯度制备(Gradient)A、B泵分别放置A、B液，由A、B泵的流速变化产生梯度。
(b)自动缓冲液pH及梯度制备(BufferPrep)根据所用缓冲液配方，分别将A1、A2、B1、B2放入相应的溶液，由A泵及其三通阀调配缓冲pH，由B泵及其三通阀调配梯度。
(2)上样上样阀上样：将样品经进样阀3号口注入储存在样品环(Sampleloop)内，再由阀门切换将样品带入层析柱；系统泵上样：由三通阀选择进样管道，由系统泵将样品泵入层析柱。
(4)收集收集器收集：设置收集体积(Fracsize)，可自动按条件收集。
出口阀收集：按需要选择不同出口管收集。
二开机程序1开启电脑；2打开AKTApurifier电源；3启动UNICORN软件，输入用户名(Username)和密码(Password)，默认用户三；四系统控制(SystemContral)1手动操作(Manual)1.1手动操作命令简介(1)Pump泵Flow:设定系统泵流速Gradient:梯度设定BufferPrep_pH:使用缓冲液配制功能时，设定pH值SampleFlow:设定样品泵流速PumpWashpurfier:系统泵清洗(2)Flowpath流路PumpAInlet:A泵入口三通阀切换PumpBInlet:B泵入口三通阀切换InjectionValve:上样阀切换OutletValve:收集出口阀切换InjectionMark:插入记号(3)Alarm&Mon报警、检测WaveLength:选择监测波长（1-3个）(4)FracBufferPrepRecipe:选择缓冲液配方Set_Mark:插入提示语End_Timer:设定结束运行时间Recordon/off:手动运行时开始或结束数据记录1.2手动操作示例(1)梯度洗脱设定流速、梯度、柱位、收集方法后即可运行。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
Other
用自动配置缓冲液功能时，提供配方。
31 / GE Title or job number / 2016/6/28
27 / GE Title or job number / 2016/6/28
Frac
停止进行峰收集。
从出口阀进行收集。可以设定收集的数量 、收集体积、从哪一个出口开始等信息。
28 / GE Title or job number / 2016/6/28
Other
在运行曲线设定标记。
设定系统自动停止的参数。可以用累计时 间和累计体积来设定。
出口阀。系统默认溶液最后出口位置为1号 位置。其中F2，3…为2号、3号…出口； Feed为从当前出口转到下一个。
Flowpath
缓冲液阀的命令。A1入口的通路，系统默 认A11。
A泵的入口命泵的入口命令。系统默认B1通路。
Flowpath
溶液流经层析柱的方向： 从上向下流/从下向上流
Alarms&Mon
电导报警设定，系统默认为关闭。 可以设定最高和最低报警，如果系统超出 设定值的话系统会自动停止。
PH报警设定，系统默认为关闭。 可以设定最高和最低报警，如果系统超出 设定值的话系统会自动停止。
Alarms&Mon
压力报警设定，系统默认为开启。可以设 定最高和最低报警，如果系统超出设定值 的话系统会自动停止。注意：每次运行一 个新程序一定要进行最高压力设定。
29 / GE Title or job number / 2016/6/28
Other
设定系统自动暂停的参数。可以用累计时 间和累计体积来设定。
在开始运行新的程序前进行指定，可以将 程序自动保存在指定位置，而不存在 Manual run文件夹里。
30 / GE Title or job number / 2016/6/28
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Watch PH曲线功能，Delta_Peak为根据峰 顶的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base 为根据平均峰高来区分不同峰的参数。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Alarms&Mon
Watch压力曲线功能，Delta_Peak为根据峰 顶的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base 为根据平均峰高来区分不同峰的参数。
AKTA系统手动命令指南
1/ GE Title or job number / 2016/6/28
Pump
给定泵的流速（是A泵和B泵的总的流速）； 最大流速根据系统型号不同而不同（10ml和100ml）
溶液浓度梯度参数；Target为溶液B的最终浓度 百分比，Length为达到Target时需要的时间
在整个流路中标记上样位置。
Alarms&Mon
设定检测波长，从190-700nm，可以同时 设定3个不同波长，也可以根据不同要求 设定1个或者2个。
上样前对紫外进行调零。
Alarms&Mon
紫外平均采样时间，不同系统会有不同的 默认值。
紫外报警设定，系统默认为关闭。 可以设定最高和最低报警，如果系统超出 设定值的话系统会自动停止。
Pump
缓冲液制备时需要系统制备的缓冲液的PH值
样品泵流速
Pump
样品泵样品直接上样，此时样品泵管路 需要和上样阀2号位连接，3和6短接，样品 泵置于inject位置。
系统泵流速压力控制模式：在此模式下，当 系统压力达到设定的压力上限时系统会自动 调节流速，从而降低压力；若达到设定最低 流速时还超过设定压力，系统报警，停止。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Watch电导曲线功能，Delta_Peak为根据峰 顶的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base 为根据平均峰高来区分不同峰的参数。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Alarms&Mon
Watch浓度曲线功能，Delta_Peak为根据峰 顶的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base 为根据平均峰高来区分不同峰的参数。
上样泵压力报警设定，系统默认为开启。可 以设定最高和最低报警，如果系统超出设定 值的话系统会自动停止。如果需要用此泵上 样的话一定要设定报警压力。
Alarms&Mon
设定一定电导条件下的电导百分率为0%
设定一定电导条件下的电导百分率为 100%
Alarms&Mon
Watch紫外曲线功能，Delta_Peak为根据峰 顶的差额来区分不同峰的参数。 Delta_Base为根据平均峰高来区分不同峰 的参数。
AKTApurifier系统泵清洗命令。
Pump
AKTAbasic系统泵清洗命令。
AKTA系统清洗命令。
Pump
运行手动命令是以系统泵还是样品泵为 基准参考。
Flowpath
上样阀的命令。Load为样品上载，inject 为上样，waste为旁路。
Flowpath
柱位选择阀。系统默认1号位置（旁路）。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Watch流速曲线功能，Delta_Peak为根据峰 顶的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base 为根据平均峰高来区分不同峰的参数。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Alarms&Mon
Watch上样泵压力曲线功能，Delta_Peak为 根据峰顶的差额来区分不同峰的参数。 Delta_Base为根据平均峰高来区分不同峰的 参数。
Pump
系统泵流速压力控制模式的调节参数。一 般情况不进行改变。
样品泵流速压力控制模式：在此模式下，当样 品泵压力达到设定的压力上限时系统会自动调 节流速，从而降低压力；若达到设定最低流速 时还超过设定压力，系统报警，停止。
Pump
AKTAexplorer系统泵清洗命令。其中A1 进口有八个通道，请确认A1入口的阀门位 置。
Frac
进行峰收集的曲线来源，UV为紫外， AD900为检测糖类的一个信号转换。
进行紫外曲线峰收集的参数设定，可以根 据紫外水平或者斜率来设定。
24 / GE Title or job number / 2016/6/28
Frac
进行AD900曲线峰收集的参数设定，只可 以根据AD900水平来设定。
收集体积设定。（不管是不是峰都会按照 设定值收集）
25 / GE Title or job number / 2016/6/28
Frac
停止收集。
从当前收集的管子到下一个管子。
26 / GE Title or job number / 2016/6/28
Frac
重新将当前管子设定为1号管子。
设定峰收集的体积。（只收集峰的体积） 需要和Peak_FracParametersUV一起使用 。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Watch上样流速曲线功能，Delta_Peak为根 据峰顶的差额来区分不同峰的参数。 Delta_Base为根据平均峰高来区分不同峰的 参数。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Alarms&Mon
紫外灯的开关控制，每次开始新程序系统 都会默认处于开的状态。