鲁抗实习报告 (3)

鲁抗舍里乐公司605车间发酵工段实习报告鲁抗舍里乐公司605车间发酵工段实习报告摘要：为了提高我们的工程知识，了解药厂厂区布局，车间布局，熟悉相关原则；熟悉相关生产工艺流程(从原料到成品)，学习各车间物料流程，加强专业知识和安全知识的学习，把理论与实践相结合；了解各部门日常工作，亲自体验，并自我总结；提高沟通及人际关系处理能力；感受现实工作生活。

丰富专业知识，积累工程实践经验，为以后走上工作岗位打基础；找到自身不足之处，早日弥补，增强自己适应社会能力。

为此今年8月末到9月末，去山东鲁抗药业股份有限公司为期20多天的实习。

下面我将为大家介绍我们实习过程中的经历和所学到的东西。

关键词:鲁抗；实习；发酵2014年8月30号我们来到了山东鲁抗，接下来的20多天里，我们在这里完成我们的实习任务。

开始四天里，我们进行了简短的培训，主要是让我们了解公司，同时进行安全教育，我们被分成好几个组，分别进了不同的车间，我被分到了605车间，我们605车间分进去的有10个人，我们被分别分到了三个岗位：菌种、发酵、包装。

我被分到了发酵工段，和我一起的还有其他三个。

开始我们都体验了其他两个岗位，在菌种和包装岗位分别实习了一天的时间之后就固定了岗位。

在发酵工段，我们的主要任务是了解T605生产的工艺流程，学习工人们如何操作，学习实验室到放大后的不同，同时去感受鲁抗的企业文化，更重要的是丰富自己工程化知识，提高自己的社会经验。

1 鲁抗介绍和605车间及其产品介绍1.1鲁抗介绍山东鲁抗医药股份有限公司是国家大型生物制药企业，国家重要的抗生素研发、生产基地，国家重点高新技术企业，拥有国家级企业技术中心。

鲁抗医药A股（600789）股票于1997年2月在上海证券交易所挂牌上市，现有资产38亿元，占地近4000亩，拥有5家全资子公司、7家控股子公司、1家参股公司，员工6500余人，其中各类专业技术人员3100余人。

鲁抗以发展生态医药、服务人类健康为使命，以专业领先，行业领跑、基业长青为愿景，坚持诚信、创新、共赢的核心价值观，大力创建资源节约型和环境友好型企业，制造安全高效的药品，保障病患者健康，造福自然，造福人类。

鲁抗医药拥有年产各类微生物发酵及半合成原料药15000吨、粉针30亿支、片剂100亿片、胶囊50亿粒、水针2亿支、大容量注射剂1.5亿瓶的生产能力，主要产品有人用药、动植物药等500余个品种，已通过ISO9001质量体系认证、ISO14000环境体系认证和OSHMS 职业健康安全体系认证，青霉素钠原料药及粉针获得国家质量金奖，酒石酸泰乐霉素、大观霉素原料药获得欧盟CEP证书，大观霉素通过德国cGMP认证，AIV、盐酸大观霉素均通过美国FDA认证。

鲁抗产品畅销全国，远销亚洲、欧洲、非洲、美洲40多个国家和地区，年出口创汇过亿美元。

鲁抗以科技为先导，走科技兴企之路，运用现代生物技术，生产经营抗生素类、氨基酸类、心脑血管类、半合成抗生素类原料药，生物药品以及相关制剂、输液、中成药、医药中间体、动物保健用抗生素、淀粉、葡萄糖等。

“鲁抗”牌商标被评为“商务部重点培育和发展的出口名牌”，先后获得了“全国质量效益型先进企业”、“全国用户满意企业”、“全国医药优秀企业”等荣誉称号，2009年被认定为国家级高新技术企业；2011年鲁抗研发中心被认定为国家级企业技术中心，2012年被确定为山东省科技兴贸出口创新基地。

“十二五”期间，鲁抗围绕发展战略，以市场为导向，以体制机制和管理创新为保障，以科技创新和技术进步为动力，优化资源配置，提升管理能力，打造生物制药、生物制品、生物基因制药三条产业链，大力发展鲁抗（人用）医药、鲁抗动保、环境科技、鲁抗生物四大板块，建设鲁抗医药、科技、生物制造、合成四大产业园区，努力培育和提升企业核心竞争力，使鲁抗跻身于国内一流制药企业行列。

1.2 605车间及其产品介绍1.2.1 605车间的主要设备车间的主要设备有：发酵罐、一级种子罐、二级种子罐、储罐、油罐、空气过滤器、质检设备和灌装设备等。

1.2.2 产品及菌种介绍605车间是以Bt（苏云金芽孢杆菌）发酵为主，生产具有杀死一些幼虫，如：直翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目，特别是鳞翅目的多种害虫的制剂—T605。

605车间的生产产品就是BT发酵液，发酵液的有效成分是芽孢单体和单胞晶体。

发酵液不需要经过其它处理就直接灌装，可以直接使用，而且产品对人体无害，无毒，主要销售于非洲等地用于改善水质，进化水源。

苏云金杆菌简称是目前产量最大、使用最广的生物杀虫剂。

它的主要活性成分是一种或数种杀虫晶体蛋白，又称δ-内毒素，对鳞翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目、同翅目等昆虫，以及动植物线虫、蜱螨等节肢动物都有特异性的毒杀活性，而对非目标生物安全因此，Bt 杀虫剂具有专一、高效和对人畜安全等优点目前苏云金杆菌商品制剂已达100多种，是世界上应用最为广泛、用量最大、效果最好的微生物杀虫剂，因而倍受人们关注。

但是，商品Bt制剂在生产防治中也显示出某些局限性，如速效性差、对高龄幼虫不敏感、田间持效期短以及重组工程菌株遗传性状不稳定等都已成为影响Bt进一步成功推广使用的制约因素。

因此，为了提高Bt制剂的杀虫效果，对其增效途径的研究已成为世界性的研究热点，主要包括：筛选增效菌株；利用化学添加剂、植物它感素、几丁质酶作为增效物质；昆虫病原微生物间的互作增效等。

2 T605生产工艺T605制剂生产工艺流程相对比较简单，冷冻的菌种通过两次斜面和一次摇瓶培养，接种到种子罐，30℃、pH8.0左右，进行24个小时的菌种扩大培养，之后移种到18t发酵罐中，在同样的条件下，发酵约48个小时，当芽孢囊体裂解，释放出芽孢和单胞晶体，添加防腐剂，质检，无杂菌后进行灌装。

下图是T605发酵的工艺流程图。

图一 T605发酵工艺流程图培养基的成分主要是酵母粉和玉米淀粉，加完水后用，用碱水调节pH在8.5到9.0；发酵条件：温度30℃，pH为8.0；种子培养时间：24h；发酵时间：48h；通气速度：300m³/h；接种量：5%-7%。

T605产品的特殊性，对产品的要求严格，发酵过程不能染菌，发酵液不能带任何杂菌，产品发酵完成后要加防腐剂，之后又要进行质检，检查有无染杂菌，无杂菌后才能灌装。

3 发酵罐和种子罐的灭菌由于605车间发酵的特殊性，对菌种的要求非常严格，发酵过程中不能出现任何的染菌的现象，所以对灭菌这块要求非常之高。

为此，605车间对发酵罐进行了空消和实消两次灭菌，空消就是不装培养液，只对罐和管道进行灭菌；实消就是把培养液装进发酵罐或种子罐后，在进行灭菌。

605车间对发酵罐的灭菌采用高压蒸汽湿热灭菌。

3.1 灭菌前的准备工作在通入蒸汽前，要进行清洗、检修、试漏。

清洗液：碱水；检修：对阀门，管道，压力表、视镜、罐体等进行检查；检漏：用肥皂水对各个焊接口、阀门及阀门连接处、管道连接处等进行检漏；确保生产工艺路线的严密性，无漏洞；空消前排空降温夹层，或蛇管中的水，关闭进水阀和回水阀，打开上下排空阀；确保罐内无杂物，蒸汽压力可达到0.3MP以上；实罐灭菌时调节pH8.0-9.0，然后紧罐盖。

3.1 发酵罐的灭菌在完成了灭菌前的操作后，往发酵罐通入蒸汽，就可以进行空罐灭菌了。

根据发酵罐结构（图二），发酵罐灭菌通入蒸汽的系统有出料管系统、取样管系统、空气管系统、移种管系统和补料管系统。

在进行保压的时候补料管进汽一般会关闭，有时会进行气封。

开始通入蒸汽后，等到温度达到110℃以上，压力超过0.1MPa后，通过调节排气阀进行保压，维持一个小时的保压灭菌。

图二机械搅拌式发酵罐3.2 种子罐灭菌种子罐灭菌与发酵罐灭菌基本相同，空消与实消前都要做同样的工作，唯一不同的就是一级种子罐的进蒸汽系统分别是出料管系统、取样管系统、空气管系统和补料管系统，没有移种管系统。

灭菌时要注意：1、保压前一定要将罐内的空气排净，防止造成假压，灭菌不彻底；2、蒸汽流量要适中，过大，造成浪费，不安全；过小，灭菌不完全；3、保证蒸汽流通，不留死角。

4 染菌对发酵的影响及其治理发酵染菌：指在发酵过程中生产菌以外的其他微生物侵入了发酵系统，从而使发酵过程失去真正意义上的纯种培养。

4.1 染菌对发酵的影响4.1.1 染菌对不同发酵过程的影响青霉素发酵过程：由于许多杂菌都能产生青霉素酶，因此不管染菌是发生在发酵前期、中期或后期，都会使青霉素迅速分解破坏，使目的产物得率降低，危害十分严重。

核苷或核苷酸发酵过程：由于所用的生产菌种是多种营养缺陷型微生物，其生长能力差，所需的培养基营养丰富，因此容易受到杂菌的污染，且染菌后，培养基中的营养成分迅速被消耗，严重抑制了生产菌的生长和代谢产物的生成。

柠檬酸等有机酸发酵过程：一般在产酸后发酵液的pH值比较低，杂菌生长十分困难，在发酵中、后期不太会发生染菌，主要是要预防发酵前期染菌。

谷氨酸发酵：周期短，生产菌繁殖快，培养基不太丰富，一般较少污染杂菌，但噬菌体污染对谷氨酸发酵的影响较大。

4.1.2 染菌发生的不同时间对发酵的影响4.1.2.1 种子培养期染菌种子培养主要是使微生物细胞生长与繁殖，此时，微生物菌体浓度低，培养基地营养十分丰富，比较容易染菌。

若将污染的种子带入发酵罐，则危害极大，因此应严格控制种子染菌的发生。

一旦发现种子受到杂菌的污染，应经灭菌后弃去，并对种子罐、管道等进行仔细检查和彻底灭菌。

4.1.2.2 发酵前期染菌在发酵前期，微生物菌体主要是处于生长、繁殖阶段，此时期代谢的产物很少，相对而言这个时期也容易染菌。

染菌后的杂菌将迅速繁殖，与生产菌种争夺培养基中的营养物质，严重干扰生产菌的正常生长、繁殖及产物的生成。

4.1.2.3 发酵中期染菌发酵中期染菌将会导致培养基中的营养物质大量消耗，并严重干扰生产菌的代谢，影响产物的生成。

有的染菌后杂菌大量繁殖，产生酸性物质，使pH值下降，糖、氮等的消耗加速；菌体自溶，致使发酵液发粘，产生大量的泡沫，代谢产物的积累减少或停止；有的染菌后会使已生成的产物被利用或破坏。

从目前的情况来看，发酵中期染菌一般较难挽救，危害性较大，在生产过程中应尽力做到早发现、快处理。

4.1.2.4 发酵后期染菌由于发酵后期培养基中的糖等营养物质已接近耗尽，且发酵的产物也已积累较多，如果染菌量不太多，对发酵影响相对来说就要小一些，可继续进行发酵。

对发酵产物来说，发酵后期染菌对不同的产物的影响也是不同的，如抗生素、柠檬酸的发酵，染菌对产物的影响不大；肌苷酸、谷氨酸等地发酵，后期染菌也会影响产物的产量、提取和产品的质量。

4.2 发酵异常现象及原因分析发酵过程中的种子培养和发酵的异常现象是指发酵过程中某些物理参数、化学参数或生物参数发生与原有规律不同的改变，这些改变必然影响发酵水平，使生产蒙受损失。