第3章 分析样品的制备

NaCl + AgNO3
AgCl + NaNO3
AgNO3 + NH4SCN
AgSCN + NH4NO3
ⅱ）酸水解
例：醋氨苯砜的含量测定 • 取本品约0.5 g，精密称定，置于锥形瓶中，加 盐酸溶液（1→2）75 mL，瓶口放一小漏斗， 加热至沸后，保持微沸约50 min，放冷，将溶 液移至烧杯，锥形瓶用水25 mL 分次洗涤，洗 涤液并入烧杯，照永停滴定法，用亚硝酸钠滴 定液（0.1 mol/L）滴定，即得。
第三章
三、有机破坏法
• 药物分析中遇到一些含有卤族元素（F、Cl、 Br、I）、金属元素（Ca、Tb、Fe、Mg、 Zn、K、Pt、Sn、Bi等）及As、P、S等元 素的有机药物。在对它们进行鉴别、检查 及含量测定时，根据这些元素与有机药物 之间的相互关系及药物的性质等，确定药 品是否需要前处理、前处理的方法等。
结构与性质
第三章
• 1 含金属元素的有机药物 ①有机盐类：通常为有机酸盐、酚类或络合物如乳酸 钙、葡萄糖酸钙等。 该类药物的有机结构部分不干扰分析测定，可在溶液 中直接进行金属元素的鉴别或含量测定，如乳酸钙的分 析。 ②金属原子与有机物以共价键相连。 如葡萄糖酸锑钠、富马酸亚铁等。 该类药物的有机结构部分干扰分析测定，在溶液中一 般不能解离成离子态，应根据其共价稳固的程度，采用 适当的前处理方法，将金属原子转变为适于分析的状态 后，再进行鉴别及含量测定。
一、直接溶解法
• 多数药物的结构中具有可检测的官能团 （如羟基、胺或氨基、酚羟基、芳环及其 它共轭结构、金属盐类），可直接使用适 当溶剂（如水、乙醇、冰醋酸）溶解后采 用酸碱滴定法、分光光度法、高效液相色 谱法等测定。当某些药物难溶于水、乙醇 等常用溶剂时，可通过加热等简单方法处 理。如某金属有机酸盐与适当的矿酸共热 溶解释放出金属离子。
例： 富马酸亚铁的含量测定
第三章
• 例：富马酸亚铁的含量测定方法为：取供试 品约0.3 g，精密称定，加稀硫酸15 mL ，加 直 热使溶解，放冷，加新沸过冷水50 mL与邻 2 d，立即用硫酸铈滴定液 接 二氮菲指示液-1 L ）滴定，并将滴定结果用空白 滴 （0.15 mol· 1 mL硫酸铈滴定液（0.1 定 试验校正。每 mol· L-1）相当于16.99 mg的C4H2FeO4。 法 富马酸亚铁几乎不溶于水，可溶于热的稀酸， 同时分解，故供试品加稀硫酸 加热助溶，溶液放冷立即滴定。 Fe2+ + Ce4+ → Fe3+ + Ce3+
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第三章
ⅲ）碱性还原
还 原 水 解 后 测 定 法
• 例：泛影酸的含量测定方法为：取供试品 约0.4 g，精密称定，加NaOH 试液30 mL 与锌粉1.0 g ，加热回流30 min，放 冷，冷凝管用少量水洗涤，过滤，烧瓶与 滤器用水洗第三次，每次15 mL，洗液与 滤液合并，加冰醋酸5 mL与署红指示液5 d ，用硝酸银滴定液（0.1 mol· L-1）滴定。 每1 mL硝酸银滴定液（0.1 mol· L-1）相 当于20.46 mg的C11H9I3N2O4。
第三章
ⅲ）碱性还原
还 原 水 解 后 测 定 法 • 例：泛影酸的含量测定方法为：取供试品 约0.4 g，精密称定，加NaOH 试液30 mL 与锌粉1.0 g ，加热回流30 min，放冷， 冷凝管用少量水洗涤，过滤，烧瓶与滤器 用水洗第三次，每次15 mL，洗液与滤液 合并，加冰醋酸5 mL与署红指示液5 d ， 用硝酸银滴定液（0.1 mol· L-1）滴定。每1 mL硝酸银滴定液（0.1 mol· L-1）相当于 20.46 mg的C11H9I3N2O4。
ⅰ）碱水解法
例： 吡嗪酰胺的含量测定 原理：本品在氢氧化钠溶液中加热分解成氨，经水 蒸汽蒸馏、硼酸吸收后，用硫酸滴定液滴定。详见 “凯式定氮法”。 • 操作：取本样品约0.25 g，精密称定，置蒸馏瓶中， 加水200 mL，小心沿瓶壁加入40%氢氧化钠溶液50 mL使成一液层，连接蒸馏装置，另取4%硼酸溶液40 mL作为吸收液，加甲基红-溴甲酚绿混合指示溶液10 滴，轻轻转动蒸馏瓶使溶液混合均匀，加热蒸馏，待 蒸馏完全后，吸收液用盐酸滴定液（0.1 mol/mL）滴 定，即得。
例：阿司匹林含量的测定
• 取本品约0.4 g，精密称定，加中性乙醇（对酚 酞指示剂显中性）20 mL溶解后，加酚酞指示 剂3滴，用 NaOH滴定液(0.1 mol/L)滴定。
COOH OCOCH3
阿司匹林
例：乳酸钙的含量测定
乳酸钙的含量测定方法为：取供试品约 0.3 g，精密称定，加水100 mL，加热使溶 解，放冷，加氢氧化钠15 mL与钙紫红素指 示剂约0.1 g，用EDTA滴定液（0.15 mol· L-1）滴定至溶液由紫红色转变为纯蓝 色。每1 mL EDTA滴定液（0.15 mol· L-1） 相当于15.42 mg的C6H10CaO6· 5H2O。
扑米酮原料药—扑米酮的测定—氮测定法
• 精密称取供试品约0.2 g，连同滤纸置干燥的500 mL凯氏烧瓶中， 依次加入硫酸钾10 g和硫酸铜粉末0.5 g，再沿瓶壁缓缓加硫酸 20 mL，在凯氏烧瓶口放一小漏斗并使凯氏烧瓶成45°斜置，用 直火缓缓加热，使溶液的温度保持在沸点以下，等泡沸停止，强 热至沸腾，待溶液成澄明的绿色后，继续加热30分钟，放冷。沿 瓶壁缓缓加水250 mL，振摇使混合，放冷后，加40%氢氧化钠 溶液75 mL，注意使沿瓶壁流至瓶底，自成一液层，加锌粒数粒， 用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接，另取2%硼酸溶液50 mL， 置500 mL锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴，将冷 凝管的下端插入硼酸溶液的液面下，轻轻摆动凯氏烧瓶，使溶液 混合均匀，加热蒸馏，至接收液的总体积约为250 mL时，将冷 凝管尖端提出液面，使蒸气冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后停止 蒸馏，馏出液用硫酸滴定液（0.05 mol/L）滴定至溶液由蓝绿色 变为灰紫色，并将滴定结果用空白试验校正。每1 mL硫酸滴定 液（0.05 mol/L）相当于10.91 mg的C12H14N2O2。
第三章
ⅰ）碱水解
• 讨论：供试品中氯原子与烃链相连，于NaOH 溶液中加热回流即可分解为氯化钠，过量的 碱 硝酸银用硫氰酸铵液回滴定（Volhard法）。 水 反应式：
解 后 测 定 法
CH3 Cl 3C C CH3 OH + 4NaOH 回流 (CH3)2CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2O
第三章
结构与性质
• 2 含卤素的有机药物 有机药物中经常含有卤族元素（F、Cl、Br、 I），如三氯叔丁醇、水合氯醛、泛影酸、 盐酸胺碘酮、氧氟沙星、氯烯雌醚等。在 含卤素的有机药物中，卤素原子一般以共 价键与有机碳链或芳环相连，因此在分析 之前，一般需经有机破坏或适当条件下水 解后，将有机卤素转变为卤素离子，利用 卤素离子的鉴别反应进行鉴别，或采用银 量法、碘量法或碘酸钾等适当的方法进行 含量测定。
第3章 分析样品的制备
第一节 第二节 第三节 第四节 化学原料药分析样品的制备 化学药剂分析样品的制备 中药及其制剂分析样品的制备 生物分析样品的制备
• 分析样品制备方法的选择主要依据待测药物的结 构特征或杂质在药物中存在状态和选用的分析方 法的灵敏度及其它特定要求，同时要考虑药物的 组成和介质特性。是采用一定的方法，使待测药 物或待测元素转化为适当的测定方式后，再进行 分析测定。 • 通常，分析样品在转化的同时，也一定程度的增 加了测定的专属性和检测灵敏度，因而样品的前 处理是药物分析工作的重要组成部分。
第三章
三、有机破坏法
湿 法 破 坏 法
• 注意事项： 1 所用仪器为凯氏烧瓶 2 空白试验 3 取样量：含金属元素在10～100 g范围 内时，取样量为10 g；血样10 ～15 mL； 尿样50 mL 4 在通风橱中进行
第三章
三、有机破坏法
干 法 破 坏 法
• 将有机物灼烧灰化以达到分解的目的。 • 适于湿法不易破坏完全的有机药物（如 含氮杂环类）以及某些不能用硫酸进行 破坏的有机药物，不适于含有易挥发金 属（如汞、砷）的有机药物的破坏。 • 常加无水碳酸钠或轻质氧化镁以助灰化。
第三章
第一节 化学原料药分析样品的制备
• 在化学原料药的鉴别、检查和含量测定中， 由于某些药物的结构特征或杂质在药物中存 在的状态或受药物结构的影响无法直接分析， 需要根据待测药物或杂质的理化性质、存在 特点及选用的分析方法的特点，进行分析样 品的制备。通常分为三类： 一、直接溶解法 二、化学分解法 三、有机破坏法
凯氏定氮法
• 定义：
测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即 在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机 氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐 转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收， 再以标准碱滴定，就可计算出样品中的氮量。由 于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白 质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。
第三章
例：葡萄糖酸锑钠的含量测定
葡萄糖酸锑钠的含量测定方法的原理：
间 接 滴 定 法
Sb + 2KI
5+
H+
Sb + I2 + 2K
3+
+
I2 + Na2S2O3
2NaI + Na2S4O6
二、化学分解法
ⅰ）碱水解法：某些含酰胺基团的药物，用强碱性 溶液使其水解生成氨或小分子的脂肪胺，加热使 其逸出，再用酸碱滴定法测定。 ⅱ）酸水解法：含芳香胺结构的药物在酸性溶液中 回流水解，生成游离芳伯胺基，可用以硝酸钠滴 定法测定含量。 ⅲ）碱性还原法：可用于苯环上碳原子直接连结有 碘原子的药物测定的前处理。
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第三章
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
ⅲ）碱性还原
还 原 水 解 后 测 定 法 • 讨论：供试品中碘原子与苯环相连， 在金属锌存在下，加NaOH溶液中加 热回流使泛影酸中的碘水解为碘化钠， 然后采用银量法（Fajans法）测定。
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反应式：
COOH I I + 11NaONa + 3Zn CH3COCN I COONa NHCOCH 3 回流
ⅰ）碱水解法
当测定某些含卤素有机物时，当卤素原子 直接结合在脂肪碳原子上时，结合不够牢 固，可在适当溶液中加热回流，使其水解 并生成卤化物后用银量法测定。
第三章
ⅰ）碱水解法
• 例：三氯叔丁醇的含量测定方法为：取供试 品约0.1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加 碱 乙醇5 mL，溶解后，加20% NaOH 5 mL， 水 加热回流15 min，放冷至室温，加水20 mL 解 与硝酸5 mL，精密加硝酸银滴定液（0.1 后 mol· L-1） 30 mL，再加邻苯二甲酸二丁酯， 测 密塞，强力振摇后，加硫酸铁铵指示液2 mL， 定 用硫氰酸铵滴定液（0.1 mol· L-1）滴定，并 法 将滴定结果用空白试验校正。每1 mL硝酸银 滴定液（0.1 mol· L-1）相当于6.216 mg的 C4H7Cl3O· 1/2H2O。
第三章
例：葡萄糖酸锑钠的含量测定
间 接 滴 定 法
葡萄糖酸锑钠的含量测定方法为：取供 试品约0.1 g，精密称定，置具塞锥形瓶 中，加水100 mL，盐酸15 mL，碘化钾 试液10 mL，密塞，振摇后，在暗处放置 10 min，用硫代硫酸钠滴定液（0.1 mol· L-1）滴定，至近终点时，加淀粉指 示剂，继续滴定至蓝色消失，并将滴定 结果用用空白试验校正。每1 mL硫代硫 酸钠滴定液（0.1 mol· L-1）相当于6.088 mg的Sb。
第三章
+ 3NaI+ 2CH3COONa + 3Na2ZnO2 + 3H2O
H2N
NH2
NaI + AgNO3
AgI + NaNO3
三、有机破坏法
• 有些有机药物结构中的卤族元素、 金属元素及As、P、S等元素与碳 原子结合牢固，用上述方法难以成 为无机化合物，此时必须采用有机 破坏的方法，方可进行测定。
第三章
三、有机破坏法
1.湿法破坏法 2.干法破坏法 3.氧瓶燃烧法
第三章
三、有机破坏法
湿 法 破 坏 法
• ①硝酸-硫酸法： --适于大多数有机物的破坏 • ②硝酸-高氯酸法： --破坏力强，不适于含氮杂环 • ③硫酸-硫酸盐法 --常用于含砷、锑有机药物
凯氏定氮法
A- 蒸馏瓶 B-缓冲瓶 C-蒸馏瓶 D-漏斗 E-冷凝管 F-接收瓶 G-活塞