中药的指纹图谱技术
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中药的指纹图谱技术应用
中药的指纹图谱基本反映了该中药的化学成分及其含量分布状况。
具有特征明显、专属性强、重现性好的特点, 而且操作方便、快速,可以用来作为鉴别中药真伪优劣的依据, 是一种实现对中药多组分、多指标分析的理想方法。
中药的指纹图谱技术是指系指中药材或中成药经适当处理后, 采用一定的分析手段,将其化学成分进行分离而形成高低不同的峰组成一张色谱图,这些色谱峰的高度和峰面积分别代表了各种不同化学成分和其含量。
从而判断出中药的化学构成,评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。
其中的主要分析手段包括以下几种:
1. 红外光谱法(IR)
信息量较大, 纯化合物的红外光谱具有特征峰, 随着物质的种类的增加, 混合物红外光谱的特征性会逐步下降。
用统一的提取方法除去植物药中同性质类的成分, 如蛋白质、多肤、碳水化合物、树脂和无机盐等, 然后再将提取物按水溶性和脂溶性分成两部分, 所获得的红外光谱显示出较高的特征性和可重复性。
E.g. 田进国等用红外光谱法鉴别研究中药材, 提供了大量图谱与数据,并选用30种供药典方法用的对照药材进行了红外光谱测定.
2.紫外光谱法(UV)
采用紫外光谱法也是常用手段之一, 但紫外光谱是电子光谱, 反映的是分子结构特征, 光谱的峰位取决于电子能级差。
一般是一个或多个宽吸收带形状变化不大, 有时不同的化合物又会具有相似的吸收光谱, 往往会出现中成药中的多种成分的相互干扰和吸收峰的叠加现象, 特征信息量也很少。
3. 气相色谱法(GC)
气相色谱所得的轮廓色谱, 其重视性、分辨率相对来说较好, 由于是封闭系统色谱,外界影响因素较少, 稳定性较好, 检测设备可选性较大, 特别适合于挥发性药材和制剂的指纹图谱的研究与应用。
4. 高效液相色谱法(HPLC)
高效液相色谱具有分离效果好、紫外检测灵敏度高、定量精密度高、实际证明实用的检测器种类较多、需要时组分收集容易的优点。
就目前的普遍性来说,是所有的光谱、色谱分析中最基本、最适合绘制指纹图谱, 用途最广的一种方法。
5. 薄层色谱法
薄层色谱法也是可以提供大量信息量的方法之一, 但对其色谱的质量应进行精心的研究, 在双槽展开箱中以经过优化的溶剂系统, 用硅胶薄层板作两次展开, 对黄连所含原小聚碱进行薄层色谱分离, 所获商品黄连薄层色谱中可检出6 种生物碱, 使R f值较低的药根碱与非洲防已碱互相分离, 在黄连样品中可观察到包括微量生物碱在内的9~11个斑点, 不同品种黄连生物碱的种类及含量均有明显差别。
薄层色谱绝大多数为正相色谱, 操作简单、快速, 可同时比较鉴别多种样品, 独具特色。
经数据处理, 可得出各样品积分值, 较适合原料药材的图谱分析。
6. X光衍射法
单晶X 射线分析法为中药有效成分的结构测定及开发研究作出了较大贡献; 而粉末X 衍射分析法在中药分析领域中的运用是X 衍射技术应用范围的又一突破, 该法具快速、简单、图谱指纹专属性强, 信息量大, 所需样品小等诸多优点, 在蓬勃发展的中药分析领域中, 必将具有广阔的应用前景。
7. 毛细管电泳(CE)
具有柱效高、分析速度较快、毛细管清洗容易, 仪器维修简单, 可直接分析水溶液等特点, 在中药分析中越来越显示其优越性, 并成功地用于生物碱、黄酮、酚酸、香豆素、酉昆类、强心贰、皂贰等成分的分析及三黄泻心汤、金银花、银黄口服液、双黄连指纹图谱的绘制。
8. 分子生物技术
9.其它方法
其中光谱、色谱检测手段的科学性、准确性与灵敏度的提高以及先进的仪器设备普及, 使指纹图谱在中药研究中得到日益广泛的应用, 这将大大推动中药标准化、规范化的进程。
(Ref:蔡宝昌,潘扬,殷武,2000,指纹图谱在中药研究中的应用,世界科学技术)。