高中生物实验整理

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橙黄色(最窄,胡萝卜素)、黄色 (叶黄素)、蓝绿色(最宽,叶绿素 a)、黄绿色(叶绿素 b)。 胡萝卜素与叶黄素之间距离最大,叶绿素 a 与叶绿素 b 之间 距离最小。
5.3 归纳总结:高考中的高频考点
注意事项
目的原因
提 选材时要注意选取新鲜、颜色深的叶片 色素含量高
取 加入少许 SiO2 色 加入少许 CaCO3 素 加入无水乙醇
③ 涂: 将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中; ④ 烘: 将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。 2.水解 ① 解: 将烘干的载玻片放入装有 30ml 质量分数为 8%的盐酸的小烧杯中,进行材料 的水解; ② 保: 将小烧杯放入装有 30℃温水的大烧杯中保温 5 分钟。 3.冲洗涂片 ① 冲: 用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片 10 秒钟; ② 吸: 用吸水纸吸去载玻片上的水分。 4.染色 ① 染:用 2 滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色 5 分钟; ② 吸: 吸去多余染色剂; ③ 盖: 盖上盖玻片。 5.观察 ① 低: 在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清 晰; ② 高: 转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。 2.3 归纳总结:高考中的高频考点 (1)材料的选择 ① 选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察; ② 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞 【特别提示】为避免原有颜色的干扰,不可使用紫色表皮细胞等。 (2)取材要点 ① 取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质; ② 取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。 (3)冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗。 (4)安全要点 ① 用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动, 使载玻片均匀受热,以免破裂; ② 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却 1 分钟。
染色 3~5min。
使染色体着色
4.制片:用镊子将根尖放在 要弄碎根尖,再垂直向下均匀 目的:使细胞分散,避免细胞
载玻片上,加一滴清水,并用 用力压片,不可移动盖玻片, 重叠,便于观察。
镊子尖把洋葱根尖弄碎,盖上
盖玻片,在盖玻片上再加一片
载玻片。再用拇指轻轻地压载
玻片,使细胞分散开来。
三、观察
一定要找到分生区。 在一个视 分生区细胞特点是:细胞呈正
4 观察细胞的有丝分裂
4.1 实验原理:
原理
选材
高等植物的根尖、茎尖分生组织有丝分裂较旺盛
染色
细胞核内的染色体易被碱性染料(如龙胆紫溶液、醋酸洋红液)染成深色
时期确定 通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体(或染色质)的存在状态,就可判
断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期,进而认识有丝分裂的完整过程。
为了研磨得充分 为了防止研磨时叶绿体中色素受到破坏 作为叶绿体中色素的溶剂
研磨时要快,收集的滤液要用棉塞塞住 无水乙醇易挥发
分 在制备滤纸条时,要剪去两角
为了使色素带整齐
离 要在距离去两角的一端 1 ㎝处画一铅笔 起标记作用,以便使每次重复画的滤液细
色 细线
线在同一位置
素 画滤液细线要重复 2—3 次
5 叶绿体中色素的提取和分离
5.1 实验原理
试剂
原理
色素提取
无水乙醇 叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中
色素分离
层析液
叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同(溶解度高的随层
析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散
得慢)
5.2 实验步骤及结果
提取色素 漏斗过滤
滤液
(1)称取 5 克绿色叶片并剪碎
变成黄色的时间短 变成黄色的时间长
(2)橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与乙醇(酒精)发生化学反应,在酸性条件下, 变成灰绿色。
取 A 瓶中的培养液的滤液适量
取 B 瓶中的培养液的滤液适量
不会,因为紫色可以作为观察指标;若选用无色的洋葱内表皮细胞,则选用的溶液需有 一定的颜色; (4)发生质壁分离时,细胞壁与原生质层之间的是什么液体?
细胞壁是全透的,故细胞壁与原生质层之间充满的是外界溶液。 (5)本实验中用显微镜观察了几次?第一次有没有必要?
镜检了三次,第一次是未处理之前进行的观察,可以跟后面两次的观察的形成前后对照, 方便观察分析细胞的变化。 (6)不同的外界溶液进行实验的结果有何不同? ①0.3g/ml 的蔗糖溶液中会发生质壁分离,但不会自动复原,加入清水后可以复原; ②0.5g/ml 的蔗糖溶液中会发生质壁分离,但因外界溶液浓度过高,细胞过度失水死亡,再 加入清水也无法复原; ③1mol/l 的 KNO3 溶液中,由于 K+和 NO3-可被细胞吸收,使细胞液浓度增大,故细胞会发 生质壁分离后会自动分离复原; ④1mol/l 的醋酸溶液中,则不会发生质壁分离及复原现象,因为醋酸能杀死细胞,使原生质 层失去选择透过性。
6.1 实验原理:
6.2 实验装置
【特别提示】 (1)CO2 可使澄清石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰 水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短,可以检测酵母菌培养 CO2 的产生 情况。
条件 澄清石灰水的变化
加入溴麝香草酚蓝水溶液
甲组 乙组
变浑浊快 变浑浊慢


制作装片(滴 1~2 滴清水于材 观察颜色变化(紫色)
观察颜色变化(蓝色 料切片上→盖上盖玻片)
→棕色→砖红色) ↓
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜
观察→高倍镜观察染成橘黄色
的脂肪颗粒)
1.2 归纳总结:高考中的高频考点 (1)常见还原性糖与非还原性糖有哪些? 葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。
为了增加色素的含量,使实验结果明显
在制备滤纸条时,要剪去两角
为了使色素带整齐
层析时要加盖,减少有机溶剂的挥发 层析液都是易挥发且有一定毒性的有机
溶剂
不能让滤纸条上的滤液细线接触到层析 因为色素易溶解于层析液中,导致色素带

不清晰,影响实验效果。
【特别提示】色素的提取和分离中异常实验现象分析
6 探究酵母菌的呼吸方式
(5)换用高倍镜观察材料时,只能用细准焦螺旋进行调焦,切不可动粗准焦螺旋。
3 观察植物细胞的吸水和失水
3.1 实验原理:
内因:原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性 外因:细胞液与外界溶液的浓度差。 3.2 实验材料和方法: 紫色洋葱鳞片叶的外表皮。因为液泡呈紫色,易于观察。也可用水绵代替。0.3g/ml 的蔗糖 溶液。用蔗糖溶液做质壁分离对细胞无毒害作用。 3.3 实验步骤
4.2 实验过程 步骤 一、根尖的培养
二、装片的制作
注意问题
分析
置于温暖处,常换水。
细胞分裂和生长需要水分、适
宜的温度和氧气。
解离时间要保证,细胞才能分 目的:溶解细胞间质,使组织
1.解离:
散开来。
中的细胞相互分离开来。此时,
解离液:质量分数为 15%的盐 解离时间也不宜过长。否则, 细胞已被盐酸杀死。
或近于白色,如苹果, 生的子叶
梨,白萝卜
斐林试剂(甲液: 苏丹 III(苏丹 IV)染液
双缩脲试剂(A 液:
0.1g/mL 的 NaOH 溶
0.1g/mL 的 NaOH 溶
液,乙液:0.05g/mL
液,B 液:0.01g/mL 的
的 CuSO4 溶液),现
CuSO4 溶液)
配现用。
取样液 2mL 于试管中 制作切片(切片越薄越好)将最 试管中加样液 2mL
切片的厚薄不均匀。 (7)脂肪鉴定中 50%乙醇的作用? 洗去浮色。 (8)双缩脲试剂 A、B 两液是否混合后用?先加 A 液的目的?怎样通过对比看颜色变化?
不能混合;先加 A 液的目的是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比。
2 DNA 和 RNA 在细胞中的分布
2.1 原理与解析 (1)真核细胞的 DNA 主要分布在细胞核内,RNA 主要分布在细胞质中。 (2)甲基绿和吡罗红两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同,甲基绿对 DNA 亲和力

薄的花生切片放在载玻片中央 ↓
加入刚配的斐林试剂 ↓
加双缩脲试剂 A 液
1mL(斐林试剂甲液 染色(滴苏丹Ⅲ染液 2~3 滴于 1mL,摇匀
和乙液等量混合均匀 切片上→2~3min 后吸去染液→ ↓
后再加入)
滴体积分数 50%的酒精洗去浮 加双缩脲百度文库剂 B 液 4

色→吸去多余的酒精)
滴,摇匀
水浴加热 2min 左右 ↓
酸和体积分数为 95%的酒精的 根尖过于酥软,无法取出。
混合液(1:1)
2.漂洗:清水中漂洗约 10 min。 漂洗要充分,可换水 1~2 次。 目的:洗去解离液,便于染色。
3.染色:质量浓度为 0.01g/mL 染色时间不宜过长,否则显微 龙胆紫等为碱性染料,可使染
或 0.02g/mL 的龙胆紫溶液中 镜下一片紫色,无法观察。 色体着色。醋酸洋红溶液也能
末期的细胞。
4.3 归纳总结:高考中的高频考点
(1)选材需选择分裂期占整个细胞周期比例较大的材料;
(2)解离的目的是使细胞分散开,时间过短,达不到分离效果;时间过长,过于酥软,无
法制片;
(3)解离的结果细胞已经被杀死并固定在细胞周期的某个时期,故需观察多个细胞才可以
观察到完整的细胞周期;
(4)控制染色的时间,时间过短,染色体不能完全着色;时间过长,细胞内充满染色剂无 法分辨染色体。 (5)观察部位需注意,只有分生区才可以找到分裂图像,伸长区和成熟区不分裂。 (6)在显微镜下观察到间期细胞数目最多,原因是间期历时最长。
1.低倍镜观察:找到分生区细 野里,往往不容易找全有丝分 方形,排列紧密,有的细胞正
胞。
裂过程中各个时期的细胞。可 处于分裂期。
2.高倍镜观察:移走低倍镜, 以慢慢地移动装片,从邻近的
换上高倍镜,用细准焦螺旋和 分生区细胞中寻找。
反光镜把视野调整清晰,仔细
观察,找出处于细胞分裂期中
期的细胞,再找出前期、后期、
(2 )还原性糖植物组织取材条件? 含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
【特别提示】西瓜含糖量高,但不能作为实验材料,因为其颜色对结果观察有影响 (3)斐林试剂甲、乙两液的使用方法?混合的目的?为何要现配现用?
混合后使用;产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。 (4)还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化的顺序为? 浅蓝色 棕色 砖红色 (5)花生种子切片为何要薄? 只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察。 (6)转动细准焦螺旋时,若花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般 是什么?
充分研磨
制备滤纸条
(2)加入少许 SiO2、CaCO3 和无水乙醇 将干燥处理过的定性滤纸剪成长 6 ㎝、宽 1 ㎝的滤纸条,并在 一端剪去两角;
画滤液细线
用毛细吸管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地画一条细线。干
燥处理,重复画 2—3 次。
层析色素 观察结果
将 3mL 层析液倒入烧杯。 将滤纸条略微斜靠烧杯内壁(有滤液细线的一端朝下),轻轻插 入层析液中。用培养皿盖盖上烧杯。 滤纸条上从上到下出现四条色素带:
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1 检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
1.1 原理、试剂、步骤及结果
还原糖
脂肪
实验原理
还原糖 + 斐林试剂 脂肪 + 苏丹 III(苏丹 IV)
蛋白质 蛋白质 + 双缩脲试剂
选材 检测试剂
实验步骤及结果
砖红色沉淀
橘黄色 (红色)
紫色反应
还原糖含量高,白色 含脂肪量越高的组织越好,如花 蛋白质含量高
强,使 DNA 显现出绿色,而吡罗红对 RNA 的亲和力强,使 RNA 呈现出红色。用甲基绿、 吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布。
(3)盐酸的作用 ① 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞; ② 盐酸使染色体中的 DNA 与蛋白质分离,有利于 DNA 与染色剂的结合。 2.2 主要步骤(以观察口腔上皮细胞为例) 1.取材 ① 滴: 在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液; ② 刮: 用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下;
3.4 归纳总结:高考中的高频考点 (1)如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中,这些表皮细胞会出现什
么现象? 表皮细胞维持原状,因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。
(2)当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时,红细胞会不会发生质壁分离?为什么?
不会。因为红细胞不具细胞壁。 (3)为什么要选用紫色洋葱外表皮细胞,紫色会干扰实验现象吗?
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