第三讲检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质

1．斐林试剂与双缩脲试剂比较
比较项目
斐林试剂
双缩脲试剂
甲液
乙液
A液
B液
成分 0.1 g/mL 0.05 g/mL 0.1 g/mL 0.01 g/mL
NaOH溶液 CuSO4溶液 NaOH溶液 CuSO4溶液
含醛基的可溶性还原糖 具有两个或两个以上肽键
反应原理 将Cu(OH)2还原为Cu2O 的化合物在碱性条件下与
质也是蛋白质；丁试管中人的红细胞置于蒸馏水中会吸水涨破
而释放血红蛋白。
答案：D
5．分析下表，可推测
()
根据乙溶液中的颜色变化可 根知据其溶含液有甲淀中粉的；颜色变化可知其含有蛋白质；
注：“＋”显色，“＋＋”显色更深；“－”不显色。
蛋甲白、质乙能混与合双后缩，脲两试溶剂液发中生的紫物色质反发应生反，淀应粉产生遇了碘还变原蓝糖色，，还
4．在下列四个试管中分别加入一些物质，甲试管：豆浆；乙试管：
氨基酸溶液；丙试管：牛奶和蛋白酶；丁试管：人的红细胞和
蒸馏水。上述四个试管中加入双缩脲试剂振荡后，有紫色反应
的是
()
A．甲、丁
B．甲、乙、丁
C．甲、乙、丙
D．甲、丙、丁
解析：双缩脲试剂用于鉴定蛋白质。甲试管豆浆中含有蛋白质；
乙试管中的氨基酸不与双缩脲试剂反应；丙试管中蛋白酶的本
4误认为脂肪的鉴定必须使用显微镜。 若要观察被染色的脂肪颗粒，则使用显微镜，但若要通过溶液 颜色变化，则不必使用显微镜。
化学物质的检测方法
考向一 考查实验原理和操作过程
1．(2012·上海高考改编)下列食物营养成分与鉴定试剂及显色反
应之间的对应关系中，错误的是
()
A．淀粉：碘液，蓝色
B．还原糖：斐林试剂，砖红色
[易误提醒]
1易忽略斐林试剂本身的颜色。 非还原糖如蔗糖＋斐林试剂水浴加热后的现象不是无色而是 浅蓝色[CuOH2 的颜色]。 2易混淆双缩脲试剂和斐林试剂的使用。 混合后加入——斐林试剂，且现配现用；分别加入——双缩脲 试剂先加 A 液，后加 B 液，且 B 液不能过量。 3易写错“斐”和“脲字”。 “斐林试剂”中的“斐”不可错写成“非”，双缩脲试剂中 “脲”不可错写成“尿”。
后再使用，而鉴定蛋白质时需先加A液，再加B液，且两
C．者Ⅲ 烤均鉴C，(匀苏定u用再S丹后O可双在Ⅳ4再溶缩溶白)染加液脲性纸液浓试入上还度，剂挤)原也通鉴压糖不过定，时同观 蛋看；白察，是质样要否时液出加，的现入不颜油斐需色迹林要变，加试化这热来剂些。鉴方(甲定法液，都和也不可乙需先要液将显混种微合子镜烘；
试管甲、乙、丙，分别加入等量的淀粉液，然后按下图所示加入等
量的提取液和蒸馏水20℃，和453℃0℃(适培宜养温条件度下)水相浴比保较温，350℃mi时n，淀粉立酶即的在活3性支
试管中加入等量斐林相相同对试条较剂件高并下，水产淀浴生粉加的酶热麦催芽化2 糖m淀更i粉n，多水。摇解匀成麦观芽察糖试的管速中率的更颜快，
②蛋白质―蛋―白―酶→氨基酸。 ③脂肪―脂―肪―酶→甘油＋脂肪酸。
1．下列关于“检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质”实验操
作步骤的叙述中，正确的是
()
A．用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白
质的鉴定
B．若要鉴定花生种子细胞中是否含有脂肪，一定需要用显微 用鉴镜于定观鉴花察定生还种原子糖是的否斐含林脂试肪剂，可甲将液花和生乙种液子，制必成须组混织合样均液匀，再加入苏丹
A．5、1、16～号3发 淀4、号试芽 粉5试管的 酶号管中小 能试中加麦 使加管入种小入内双子麦斐都缩林匀种呈脲 试浆子蓝剂试中中色后剂含的，后有淀因，淀粉1、因粉水3酶解号5 ，产号试试管管中是蒸馏水， B．加3入中的组的是蓝实生双蒸色麦验缩 馏，芽中水2脲号糖甲而试试等组无剂管还还和中中原原乙虽的糖糖含组A，。还的故液原实显和糖示验，B斐结但液林果未可试水相呈剂浴同本现加身蓝色；6 号试管中 C．含4淀热号粉，试酶故管等 仍内呈蛋呈蓝白色砖质，红，4色号故试，加管其入进余双行试缩水脲管浴试内加剂热都后后呈出出蓝现色紫色反应。 D．4现号砖试红管色内沉呈淀。砖红色，6 号试管内呈紫色
色。结果是
()
A．甲呈蓝色，乙呈砖红色，丙呈无色
B．麦甲芽呈糖无属色于还，原乙糖呈，砖与红斐色林试，剂丙反呈应蓝生色成砖红色沉淀， C．麦甲芽、糖乙越皆多显呈色蓝越色明，显丙，呈斐林砖试红剂色本身为蓝色，可得出
甲试管呈浅砖红色，乙试管呈砖红色，丙试管呈蓝色。
D．甲呈浅砖红色，乙呈砖红色，丙呈蓝色
7．下图 1 表示油菜种子成熟过程中各种有机物的变化情况(1 表示 可溶性糖，2 表示淀粉，3 表示含氮化合物，4 表示脂肪)。图 2 表示小麦种子成熟过程中蛋白质、葡萄糖、淀粉的含量和淀粉 磷酸化酶(催化淀粉的生物合成)活性的变化。回答下列问题：
麦芽糖 C．加入碘液，溶液呈蓝色，说明发芽的大麦中含有淀粉 D．加入双缩脲试剂，溶液呈蓝色，说明发芽的大麦中含有蛋白质 解析：脂肪会被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，被苏丹Ⅳ染液染成红色，向 组织样液中加入苏丹Ⅲ染液，溶液呈橘黄色，证明发芽的大麦中含有 脂肪。向组织样液中加入斐林试剂并水浴加热，溶液呈砖红色，说明 发芽的大麦中含有还原糖，但不能确定该还原糖为麦芽糖。双缩脲试 剂与蛋白质反应呈现紫色。 答案：C
A原．由糖甲此与溶可斐液知林含，试甲有剂溶淀在液粉水中浴含加有热淀条粉酶件B，下．乙生乙溶成溶液砖液中红含含色有有沉淀还淀粉。原。糖
C．混合溶液不含淀粉
D．混合溶液含有淀粉酶
6．(2015·襄阳五中质检)将小麦种子分别置于 20℃和 30℃培养箱中培养
4 天，依次取等量的萌发种子分别制成提取液Ⅰ和提取液Ⅱ。取 3 支
第一单元 细胞及其分子组成源自文库
第三讲
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一、还原糖的检测
二、脂肪的检测 1．实验原理 脂肪＋苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液―→橘黄色(或红色) 2．方法步骤 (1)方法一：花生种子匀浆＋3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色。 (2)方法二：
结论：花生种子的子叶 有脂肪存在。
三、蛋白质的检测
(1)油菜种子在成熟过程中，________含量不断提高，而可溶性糖 和淀粉含量不断下降，这说明___________________而来。
(2)图2中曲线③表示_____________。在小麦种子成熟过程中， 种子的干重将________。 (3)将小麦开花后第 10 d 和第 40 d 的种子分别制成组织样液，各 取等量样液分别加入 A、B 两试管中，再各加入等量的_____， 适温水浴加热后，A 试管出现_____，并且比 B 试管颜色更_____， 两试管中被检测的物质可以用图 2 中的曲线_____表示。
察花生临时切片，看到的是一片橘红色，而不是橘黄色的脂肪颗粒 ⑦
双缩脲试剂的使用方法是先加甲液后加乙液，加完之后立刻加热，出现
的颜色是紫色
A．①②⑥⑦
B．②③⑦
C．①⑤⑥
D．①④⑤
解析：制作花生临时切片时，用吸水纸吸去薄片周围染液，再用体积
分数为 50%的酒精洗去浮色，然后用吸水纸吸去切片周围的酒精。 答案：D
D．用双缩脲试剂鉴定蛋白质时，需水浴加热2 min才能看到
紫色
2．将刚刚萌发、带有小芽的大麦充分研磨后，过滤得到组织样液。在组织 样液中加入下列试剂后振荡均匀，有关实验现象及结论的叙述正确的是
() A．加入苏丹Ⅲ染液，溶液呈红色，证明发芽的大麦中含有脂肪 B．加入斐林试剂并水浴加热，溶液呈砖红色，说明发芽的大麦中含有
种子成熟与萌发时有机物的变化 (1)种子成熟时有机物的变化： 种子成熟时，小分子有机物合成大分子物质，以便于储 存，主要营养物质变化如下： ①可溶性糖类→不溶性糖类(如淀粉)。 ②非蛋白质氮→蛋白质。 ③糖类→脂肪。
(2)种子萌发时有机物的变化： 种子萌发时，储存的大分子有机物在酶的作用下水解为小 分子物质，作为幼胚生长的营养物质。 ①淀粉―淀―粉―酶→麦芽糖―麦―芽―糖―酶→葡萄糖。
沉淀
Cu2＋反应生成络合物
比较项目
斐林试剂
双缩脲试剂
甲、乙两液等量混匀 先加入A液2 mL摇匀，
添加顺序
后立即使用
再加3～4滴B液摇匀
反应条件 50～65℃水浴加热
不需加热
样液浅蓝色→棕色→ 反应现象
砖红色
样液变紫色
相同点
都含有NaOH、CuSO4两种成分，且所用 NaOH溶液浓度都是0.1 g/mL
2．注意事项 (1)三个实验中都不宜选取有颜色的材料，否则会干扰实验结 果的颜色变化。 (2)脂肪鉴定的过程中滴加 1～2 滴体积分数为 50%的酒精的 目的是洗去浮色，原因是苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精。 (3)蛋白质鉴定中，若用大豆作材料，必须提前浸泡；若用蛋 清作材料，必须稀释，防止其黏在试管上不易刷洗；且该实验应 预留部分组织样液作对比。 (4)物质鉴定实验一般不设立对照实验，若需设立对照实验， 对照组应加入成分已知的物质，如验证唾液淀粉酶是蛋白质，对 照组可加入稀释的鸡蛋清。
管内液体受热均匀；在组织样液中加入斐林试剂后试管内液体呈
蓝色；斐林试剂需现配现用。
答案：AB
考向二 借助物质检测，考查种子成熟和萌发中物质的变化
3．(2014·广东高考)油菜种子成熟过程中
部分有机物的变化如右图所示。将不
同成熟阶段的种子匀浆后检测，结果
正确的是
()
种子中第一30定d有种蛋子白中质有，脂加肪入，双与缩苏脲丹试Ⅲ剂染后液会发出生现反紫应色，反呈应； 现橘黄色；
第40 d种子中无淀粉，加入碘液后不会呈现蓝色。
第10 d有可溶性糖，不排除有还原糖的可能，故加入斐林 试剂，水浴加热后可能出现砖红色沉淀；
4．(2013·江苏高考)在 1、3、5 号试管中分别加入 2 mL 蒸馏水，2、 4、6 号试管中分别加入 2 mL 发芽的小麦种子匀浆样液，然后 在 1～4 号试管中适量滴加斐林试剂，5、6 号试管中合理滴加 双缩脲试剂，摇匀。预期观察到的实验现象是(多选) ( )
B．隔水加热时，试管中液体的液面应低于烧杯中水的液面
C．在组织样液中加入斐林试剂后试管内液体呈现无色，加热后变成
砖红色
D．实验结束时将剩余的斐林试剂装入棕色瓶，以便长期保存备用
解析：用 5 mL 量筒量取 2 mL 斐林试剂比用 10 mL 量筒更精确；
隔水加热时试管中液体的液面低于烧杯中水的液面，才能保证试
8．(不1)同下植表物表示种用子碘中液所、含苏营丹养Ⅲ成染分液有和差双异缩，脲如试豆剂类测作得物甲中、乙蛋、白丙质
含三种量植较物高的，干玉种米子种中子三中大淀类粉有含机量物较颜高色，反花应生，其种中子“中＋脂”肪的含数量
相量代对表较颜多色。反请应回深答浅下程列度问，题有：关说法不．正确的是
()
A．乙种子中含蛋白质最多 B．碘液、苏丹Ⅲ染液和双缩脲试剂与相应的物质发生的颜色反
C．脂肪：苏丹Ⅲ染液，橘黄色
D．蛋白质：双缩脲试剂，黄绿色
解析：淀粉遇碘液呈蓝色；还原糖遇斐林试剂呈砖红色；脂肪
可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色；蛋白质遇双缩脲试剂呈紫色。
答案：D
2．(2014·江苏高考)关于生物组织中还原糖的鉴定，下列叙述正确的是(多
选)
()
A．量取 2 mL 斐林试剂时应优先选用 5 mL 量筒而不用 10 mL 量筒
解析：(1)由图1中曲线可知，脂肪含量不断上升，而可溶性糖 和淀粉含量不断下降，说明脂肪由糖类(或可溶性糖和淀粉)转 化而来。(2)由图2可知，小麦种子成熟过程中，葡萄糖的含量 下降，淀粉含量上升，淀粉磷酸化酶活性先上升，后下降。此 过程中，自由水的含量逐渐下降，种子的干重逐渐增加。(3)葡 萄糖是还原糖，淀粉是非还原糖。第10 d与第40 d的种子相 比，葡萄糖的含量更高，因此与斐林试剂反应后，颜色更深。 答案：(1)脂肪 脂肪由糖类(或可溶性糖和淀粉)转化 (2)淀粉 磷酸化酶 增加 (3)斐林试剂 砖红色沉淀 深①
3．(2015·山东泰安一中期中)下列是有关检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白
质实验的叙述，其中正确的是
()
①斐林试剂的甲液和乙液与双缩脲试剂的成分是相同的 ②双缩脲试剂
的甲液与斐林试剂甲液的成分是相同的、乙液的成分不相同 ③斐林试
剂与双缩脲试剂的使用方法是一样的，都要现配现用 ④还原糖检验中
的颜色变化是：浅蓝色→棕色→砖红色，其中的砖红色是 Cu2O 造成的 ⑤制作花生临时切片时，洗去浮色用的是体积分数为 50%的酒精 ⑥观