cy3-叠氮标记原理
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cy3-叠氮标记原理
Cy3是一种常用的叠氮标记染料,它可以与亮氨酸残基上的1-甲基-4-氧代-1,2,4-三氮唑基(MeN3O2)发生专一性的环化反应,从而实现蛋白质的标记。
该反应的原理如下:
1. Cy3分子上的二硫代乙酸酯基团与蛋白质中的半胱氨酸残基
发生反应,形成一个新的硫醚键,将Cy3与蛋白质连接在一起。
2. 这个过程中,MeN3O2在光气(N2O)的作用下发生改变,生
成的亲电的五元环中的C-N键断裂,同时引发N2气的释放。
3. C-N键断裂后,五元环中的一个碳原子上的孤电子对攻击硫醚基团,形成一个环状咪唑环,同时再次释放出亲电的氮气(N2)。
4. 形成的咪唑环与周围的氨基酸残基的氨基发生酰基化反应,形成一个酰胺键,稳定Cy3与蛋白质的连接。
通过上述过程,Cy3可以专一地标记蛋白质中的亮氨酸残基,
实现蛋白质的荧光标记。