实验三 细菌芽孢和鞭毛染色法
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孢杆菌，变形杆菌 染色剂 5％孔雀绿水溶液，0.5％番红水溶 液，硝酸银鞭毛染色液（ A液，B液） 其他 显微镜，酒精灯，双层瓶，载玻片， 木夹子，生理盐水，等。
四、实验步骤
1、鞭毛染色 载玻片 —— 一端加一滴水 —— 挑菌 —— 在水滴中 轻沾几下 ——将玻片稍倾斜 ——自然干燥——A 液覆盖（ 5-6min ） ——充分水洗 ——B液冲去残 水 ，B液覆盖(可稍加热)——涂面出现明显褐色 时——水洗——自然干燥——镜检 2、芽孢染色 涂片 —— 干燥 —— 固定 —— 染色（孔雀绿，加 热，微冒蒸汽且不干，10min）——水洗（玻片 冷却后） —— 复染（番红， 5min ） —— 水洗 — —干燥——镜检
细菌鞭毛显微镜照片
五、实验结果
绘图（油镜下）： 芽孢、芽孢囊、营养细胞 鞭毛
六、思考题
1.
用简单染色法能否观察到细菌的芽孢？ 2. 鞭毛染色要注意那些环节？
下次实验：酵母菌形态观察
实 验 三
细菌的芽孢染色及鞭毛染色
一、实验目的
学习并掌握芽孢染色法、鞭毛染色法。 初步了解芽孢杆菌、细菌鞭毛的形态特 征。 巩固无菌操作技术
二、基本原理
1. 芽孢染色法： 芽孢是细菌的休眠体。细菌能否形成芽孢以及芽孢的形状、芽 孢在芽孢囊内的位置、芽孢囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依 据之一。 芽孢壁厚、透性低、不易着色，用着色力强的染色剂孔雀绿或 石炭酸复红，在加热条件下染色，使染料不仅进入菌体也可进 入芽孢内，进入菌体的染料经水洗后被脱色，而芽孢一经着色 难以被水洗脱，当用对比度大的复染剂染色后，芽孢仍保留初 染剂的颜色，而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色，使芽孢和 菌体更易于区分。 2. 鞭毛染色法： 鞭毛是细菌的运动“器官”，细菌是否具有鞭毛，以及鞭毛着 生的位置和数目是细菌的一项重要形态特征。细菌的鞭毛很纤 细，其直径通常为0.01~0.02μm，一般细菌的鞭毛均不能用光学 显微镜直接观察到 。在染色前先用媒染剂处理，使它沉积在鞭 毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色。
四、实验步骤
1、鞭毛染色 载玻片 —— 一端加一滴水 —— 挑菌 —— 在水滴中 轻沾几下 ——将玻片稍倾斜 ——自然干燥——A 液覆盖（ 5-6min ） ——充分水洗 ——B液冲去残 水 ，B液覆盖(可稍加热)——涂面出现明显褐色 时——水洗——自然干燥——镜检 2、芽孢染色 涂片 —— 干燥 —— 固定 —— 染色（孔雀绿，加 热，微冒蒸汽且不干，10min）——水洗（玻片 冷却后） —— 复染（番红， 5min ） —— 水洗 — —干燥——镜检
细菌鞭毛显微镜照片
五、实验结果
绘图（油镜下）： 芽孢、芽孢囊、营养细胞 鞭毛
六、思考题
1.
用简单染色法能否观察到细菌的芽孢？ 2. 鞭毛染色要注意那些环节？
下次实验：酵母菌形态观察
实 验 三
细菌的芽孢染色及鞭毛染色
一、实验目的
学习并掌握芽孢染色法、鞭毛染色法。 初步了解芽孢杆菌、细菌鞭毛的形态特 征。 巩固无菌操作技术
二、基本原理
1. 芽孢染色法： 芽孢是细菌的休眠体。细菌能否形成芽孢以及芽孢的形状、芽 孢在芽孢囊内的位置、芽孢囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依 据之一。 芽孢壁厚、透性低、不易着色，用着色力强的染色剂孔雀绿或 石炭酸复红，在加热条件下染色，使染料不仅进入菌体也可进 入芽孢内，进入菌体的染料经水洗后被脱色，而芽孢一经着色 难以被水洗脱，当用对比度大的复染剂染色后，芽孢仍保留初 染剂的颜色，而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色，使芽孢和 菌体更易于区分。 2. 鞭毛染色法： 鞭毛是细菌的运动“器官”，细菌是否具有鞭毛，以及鞭毛着 生的位置和数目是细菌的一项重要形态特征。细菌的鞭毛很纤 细，其直径通常为0.01~0.02μm，一般细菌的鞭毛均不能用光学 显微镜直接观察到 。在染色前先用媒染剂处理，使它沉积在鞭 毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色。