中药呆聪液对痴呆大鼠模型脑内β-淀粉样前体蛋白基因表达的影响

中药呆 聪 液 对 痴呆 大 鼠 Ｂ — Ａ Ｐ Ｐ基 因转 录 的 影 响 （ 见表 １ ） 。从 实 验 结 果 看 出 ， 痴呆模型组 Ｂ — Ａ Ｐ Ｐ ｍＲ —
Ｎ Ａ 的表达量 较 空 白对 照组 明显升 高 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ， 各 给
药组 Ｂ — Ａ Ｐ Ｐ ｍＲ Ｎ Ａ 的 表 达 量 与 痴 呆 模 型组 相 比明 显
２ 结 果
数 据 以 ｘ± ｓ 表示 ， 使用 Ｓ Ｐ Ｓ Ｓ １ ０ ．
后显 示水 迷宫 逃生 的记 忆 能 力 降低 ， 使 在水 中 的游 动 持续 时 间明显 延长 ， 将 造模后 的大 鼠随机 分 为 ４组 ， 每
组１ ０只 ， 即 痴呆 模 型 组 、 中药一 组 （ ５ ｇ・ ｋ ｇ ｄ ） 、 中
１ ． ４ ． ５ Байду номын сангаасＲ Ｔ — Ｐ Ｃ Ｒ 用 Ｔ ａ ｋ ａ Ｒ ａ Ｒ Ｎ Ａ Ｐ Ｃ Ｒ Ｋ ｉ ｔ （ Ａ ＭＶ）
研 究 发现 ， 环境和基 因突变导致淀粉样前体蛋 白（ Ｂ — ａ ｍ ｙ ｌ ｏ ｉ ｄ ｐ ｒ ｅ ｃ ｕ ｓ ｏ ｒ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ， Ａ Ｐ Ｐ ） 代谢异 常， 在 神 经 元 细
物（ ５ 一 Ａ Ａ Ｔ Ｃ Ｃ Ｔ Ｇ Ｃ Ａ Ｇ Ｔ Ａ Ｃ Ｔ Ｇ Ｃ Ｃ Ａ Ａ Ｇ 一 ３ ， ） ， 下游引物 （ ５
一
与痴呆模型组 比较 ， Ｐ＜０ ． ０ ５
３ 讨论
Ｔ Ｇ Ｇ Ｃ Ａ Ａ Ｃ Ａ Ｇ Ｔ Ａ Ｃ Ｔ Ｇ Ｃ Ｃ Ａ Ａ Ｇ － ３ ， ） 。Ｂ — ａ ｃ ｔ ｉ ｎ上 游 弓 Ｉ 物
１ ． ４ ． ２ 痴 呆动 物 的分组 及给 药方 法 Ｓ Ｄ大 鼠经造 模
图谱用 Ｓ Ｔ Ｏ Ｒ Ｍ ８ ６ ０ 荧光扫描分析仪（ 美国 Ｄ Ｙ Ｎ Ａ ＭＩ Ｃ
公司） 分析， 相 对 表 达 量 根 据 各 电泳 区 带 与 内 对 照 Ｂ — ａ ｃ ｔ ｉ ｎ的面 积 之 比来 计 算 。 以 ［ ５ － ａ ｃ ｔ ｉ ｎ为 内参 照 ， 按 公 式 ｐ—Ａ Ｐ Ｐ ／ ｐ — ａ ｃ ｔ ｉ ｎ计 算 Ｂ～Ａ Ｐ Ｐ ｍＲ Ｎ Ａ水平 。 １ ． ４ ． ６ 统 计学 处理 ０统 计 软件处 理 。
ｒ ｅ ｏ ｔ ａ ｘ ｉ ｃ Ａ ｔ ｌ ａ ｓ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ Ｒ ａ ｔ Ｂ ｒ ａ ｉ ｎ 鼠脑 图 谱 于 前 颅 前 ２ ｍｍ， 中线 旁开 ２ ． ５ ｍ ｍ处 用 自制 打孔 钻 打 开颅 骨一 小 孔， 固定 移 动 装 置 ， 垂 直 进 入 微 型 注 射 针 头 ７—８ ｍｍ （ 即相 当于基 底 核 区 ） ， 轻轻注入 １ ｇ海 人 酸 （ １ ｇ ／ Ｌ ） ， 静 留针 １— ２ ｍ ｉ ｎ后 ， 缓慢 移动 装置 退针 ， 先 用石 蜡粉 溶 化后 封 住颅 骨开 口， 再 在 封 口上 撒 适 量 青 霉 素 和链 霉 素粉 剂后 缝合 皮肤 。
老 年痴 呆是 一种 以记 忆 能力 减退 、 认 知功能 障碍 、
行 为异 常 为特 征 的脑退 行性疾 病 。由于没 有理 想 的治 疗方法， 给患 者 、 家庭 和 社会 带来 沉重 的负 担 。近年 来
（ ５ 一 Ｃ Ａ Ａ Ｃ Ｔ 丌Ａ Ｃ Ｃ Ｔ Ｔ Ｇ Ｇ Ｃ Ｃ Ａ Ｃ Ｔ Ａ Ｃ Ｃ 一 ３ ，， 下游 弓 Ｉ 物（ ５ Ｔ Ａ Ｃ Ｇ Ａ Ｃ Ｔ Ｇ Ｃ Ａ Ａ Ａ Ｃ Ａ Ｃ Ｔ Ｃ Ｔ Ａ Ｃ Ａ Ｃ Ｃ一３ ’， 产物 （ １ ５ ０ ｂ ｐ ） 。
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ｑ Ａｃ ｔ ａ Ａｃ ａ ｄ Ｍｅ ｄ Ｗｅ ｉ ｆ ａ ｎｇ Ｖ ｏ １ ． ２ ９ Ｎｏ ５ ２０ ０７
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妥 钠腹 腔 内麻 醉 ， 然后 固定 于江 湾 Ⅱ型立 体定 位仪 上 ，
降低 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５） 。Ｒ Ｔ — Ｐ Ｃ Ｒ扩 增 产 物 琼 脂 糖 电泳 结 果 显示 （ 见图 １ ） ， 呆 聪液 中剂 量组 效果 最 佳 。
表１ 呆聪 液 对痴 呆大 鼠 ［ ５ － Ａ Ｐ Ｐ基 因转 录 的影 响
１ ． ４ ． ３ 大 鼠脑 组织 Ｒ Ｎ Ａ 的提 取
药二组（ １ ０ ｇ・ ｋ ｇ ｄ ） 、 中药三组（ ２ ０ ｇ・ ｋ ｇ ｄ ） 和
正 常对 照组 。根据 每 日的 中药 量 灌 胃 给药 ， 痴 呆 模 型 组 和正 常对 照组 用 生理 盐 水 １ ０ ｍ ｌ ／ （ ｋ ｇ・ ｄ ） 灌 胃， １个
月后 取脑 标本 。
经消 毒 后正 中尸状 切 Ｋ Ｉ ， 按照 Ｌ ｏ ｕ ｉ ｓ Ｊ ． Ｐ ｅ ｌ ｌ ｅ ｇ ｒ ｉ ｎ ｏ Ａ Ｓ ｔ ｅ —
的琼 脂 糖 凝 胶 上 电泳 ， ５ Ｖ ／ ｃ ｍ， ４ ５ ｍ ｉ ｎ ， 用 自动 成 像 仪
（ 美国 Ｆ Ｏ Ｔ Ｏ Ｄ Ｙ Ｎ Ｅ公 司 ） 观 察拍 照 。重 复实 验 的 电泳
参照 Ｔ ｉ ｒ ｚ ｏ ｌ 试 剂 说
明 书方法 提取 脑 细胞 总 Ｒ Ｎ Ａ， 紫 外分 光 光 度法 测 定 总 Ｒ Ｎ Ａ浓 度 ， Ａ ２ ６ ０ ｎ ｍ ／ Ａ ２ ８ ０ ｎ ｍ为 １ ． ８—２ ． ０ ， 提 取 总
Ｒ Ｎ Ａ于 一７ ０ ℃保存 。 １ ． ４ ． ４ 引物 的设 计 与合 成 Ｂ—Ａ Ｐ Ｐ ｍＲ Ｎ Ａ， ｐ — ａ ｃ ｔ ｉ ｎ 通过 Ｈ ｔ ｔ ｐ ： ／ ／ ｗ ｗ ｗ ． ｎ ｃ ｂ ｉ ． ｎ ｌ ｍ． ｎ ｉ ｈ ． ｇ ｏ ｖ获得 ｃ Ｄ Ｎ Ａ序 列 ， 采用 Ｐ ｉ ｒ ｍ ｅ ｒ ５引物 设 计 软 件 ， 获得最 佳 Ｐ Ｃ Ｒ引 物 ， 引 物 由上 海生 工生 物工程 有 限公 司合 成 。Ｂ — Ａ Ｐ Ｐ上 游 引