积雪草酸通过激活Nrf2抗氧化通路抑制自发性高血压大鼠心肌纤维化

１
（ ， ）、 、 ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ １ ＰＡＩ１ Ｎｒｆ２ ＨＯ
、 、 、磷酸化糖原合酶 （ １ ＮＱＯ１ ｐＡｋｔ
３β ｇｌｙｃｏｇｅｎ ｓｙｎ
， ）、 、 抗体（美国 ｔｈａｓｅ ｋｉｎａｓｅ ３β ＧＳＫ３β Ｆｙｎ βａｃｔｉｎ
Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ 公司）；天狼星红染色液试剂盒（北京华
态下，激活的Ｎｒｆ２ 从细胞质转运至细胞核内，与抗
ＡＯＣ）试剂盒，购自南京建成生物工程有限公司；兔
抗大鼠胶原蛋白Ｉ（ｃｏｌｌａｇｅｎ ，Ｉ Ｃｏｌ Ｉ）、纤维黏连蛋白
（ ， ｆｅｂｒｏｎｅｃｔｉｎ ＦＮ）、结缔组织生长因子（ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅ
， ）、血小板活化抑制因子 ｔｉｓｓｕｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ＣＴＧＦ
中国药理学通报 ； （）： Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ２０１８ Ａｕｇ ３４ ８ １０７３ ～ ８
· · １０７３
网络出版时间： ： 网络出版地址： ： ２０１８ － ７ － ２ １３ ５３
ｈｔｔｐ ／ ／ ｋｎｓ． ｃｎｋｉ． ｎｅｔ ／ ｋｃｍｓ ／ ｄｅｔａｉｌ ／ ３４． １０８６． Ｒ． ２０１８０７０２． ０９５５． ０１８． ｈｔｍｌ
和冠心病的发病机制， ： ； Ｅｍａｉｌ ｍｅｎｇｚｈｅｎｉｈａｏ＠ １６３． ｃｏｍ 李海禹（１９８３ － ），男，博士，副主任医师，研究方向：冠心 病和高血压的药物治疗，通讯作者，Ｅｍａｉｌ：ｌｉｈａｉｙｕ１５６２３９
积雪草酸通过激活 Ｎｒｆ２ 抗氧化通路抑制自发性 高血压大鼠心肌纤维化
孟 哲，腾 帅，王 琛，白雪洋，李海禹
（郑州大学第一附属医院心血管内科，河南郑州 ４５００５２）
： ｄｏｉ １０． ３９６９ ／ ｊ． ｉｓｓｎ． １００１ － １９７８． ２０１８． ０８． ００９
氧化反应元件（ ， ）结 ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｅｌｅｍｅｎｔ ＡＲＥ
： （ ） 文献标志码 文章编号： Ａ
１００１ － １９７８ ２０１８ ０８ － １０７３ － ０６
合后，上调下游多个抗氧化靶基因表达，包括血红素
中国图书分类号： ； ； ； ； ； Ｒ３３２ Ｒ２８４ １ Ｒ３２２ １１ Ｒ３２９ ２５ Ｒ５４４ １
； Ｒ５４２ ２３ Ｒ９７７ ６
摘要：目的 对自发性高血
Ｗｋｙ ＋ ＡＡ ２０ ｍｇ － １ ｋｇ － １ ｄ － １
１０
只。天狼星红染色法观察胶原蛋白沉积水平；比色法测定各
组氧化应激水平；Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 法测定相关蛋白表达。结果
ＡＡ 能有效减少心肌胶原蛋白沉积，以及ＰＡＩ１、ＣＴＧＦ、
氧合酶１（ｈｅｍｅ ｏｘｙｇｅｎａｓｅ １，ＨＯ１）、超氧化物歧化
越洋生物科技有限公司）。
１． ２ 实验动物 ８ 周龄健康♂ＳＨＲ 和Ｗｋｙ 大鼠，
ＳＰＦ 级，体质量２００ ～ ２３０ ｇ，购自中科院上海实验动
收稿日期：２０１８ － ０４ － １９，修回日期：２０１８ － ０５ － ２０
物中心，动物生产许可证：ＳＣＸＫ（沪）２０１７ － 。 ０００５
基金项目：河南省卫生厅科技攻关项目（Ｎｏ ） ２０１４０３０５１ 作者简介：孟 哲（１９８３ － ），男，博士，主治医师，研究方向：高血压
Ｎｒｆ２ 诱导的抗氧化通路，上调心肌组织抗氧化活性，进而减 少氧化应激产物形成。
关系。 １ 材料与方法
关键词：积雪草酸；心肌纤维化；氧化应激；核因子Ｅ２ 相关因 子２；自发性高血压大鼠；Ａｋｔ／ ＧＳＫ３β／ Ｆｙｎ 信号通路
１． １
药物与试剂
（纯度 ＡＡ
＞ ９８％
，成都普瑞法生
物有限公司）；丙二醛（ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ ）、
的五环三萜烯类组分，广泛分布于多种蔬菜和水果
中。ＡＡ 具有抗增殖、抗凋亡、抗炎、抗氧化应激等
多种药理学活性［４－ 。５］ ＡＡ 已被证实能通过上调
Ｎｒｆ２ 活性，减少氧化产物生成，抑制阿霉素诱导的心
Ｃｏｌｌａｇｅｎ 、Ｉ ＦＮ 的表达，提高血清中ＳＯＤ、ＴＡＯＣ 活性，并降低 脏损害［６］。本研究以自发性高血压大鼠（ｓｐｏｎｔａｎｅ
压大鼠（ ， ）心肌纤维化的拮 ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ ｒａｔｓ ＳＨＲｓ
抗作用及其可能的分子机制。方法 动物分为４ 组：对照组
（ ）、 组、 组（ · Ｗｋｙ ＳＨＲｓ ＳＨＲｓ ＋ ＡＡ ＳＨＲｓ ＋ ＡＡ ２０ ｍｇ －１ ｋｇ －１
· ）、 组（ · · ），每组 ｄ －１ ＡＡ
， ）作为压力诱导心肌纤维 ＭＤＡ 含量，增强心肌组织Ａｋｔ、ＧＳＫ３β 磷酸化，抑制Ｆｙｎ 核 ｏｕｓ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ ｒａｔｓ ＳＨＲｓ
转位；提高Ｎｒｆ２ 活性，并增加ＮＱＯ１、ＨＯ１ 蛋白表达。结论 化模型，观察ＡＡ 的抗纤维化作用，并试图解释ＡＡ
ＡＡ 能有效抑制ＳＨＲｓ 心肌纤维化，其机制可能通过激活 心血管保护作用与其抗氧化应激药理学活性之间的
酶（ ， ）、依赖还原型辅酶 ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ ＳＯＤ
／Ⅱ
醌氧化还原酶［ （ ） Ⅰ ＮＡＤ Ｐ Ｈ ｑｕｉｎｏｎｅ ｏｘｉｄｏｒｅｄｕｃ
， ］等。积雪草酸（ ， ）是 ｔａｓｅ １ ＮＱＯ１ ［３］
ａｓｉａｔｉｃ ａｃｉｄ ＡＡ
从多年生草本植物积雪草（Ｃｅｎｔｅｌｌａ ）中提取 ａｓｉａｔｉｃａ
性，延迟细胞内信号传导，诱导心肌细胞凋亡和心肌
成纤维细胞增殖等途径，促进心肌纤维化的发
展。转录因子 相关因子（ ［２］
ＮＦＥ２
２ ｎｕｃｌｅａｒ ｆａｃｔｏｒ
， ）属于帽和领（ ’ ｅｒｙｔｈｒｏｉｄ ２ｒｅｌａｔｅｄ ｆａｃｔｏｒ ２ Ｎｒｆ２
Ｃａｐ
ｎ’Ｃｏｌｌａｒ，ＣＮＣ）转录因子家族成员。在氧化应激状
、总抗氧化能力（ ， ＳＯＤ
ｔｏｔａｌ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｃａｐａｃｉｔｙ Ｔ
心肌细胞肥厚、心肌成纤维细胞增殖和细胞外
基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ，ＥＣＭ）过度沉积是心肌纤
维化的典型组织学表现，并具有不可逆性［１］。氧化
应激能够通过促进脂质、蛋白氧化，破坏细胞膜完整