蜂产品与生物检测

蜂产品与生物检测
湖南农业大学课程论文
学院：生物科学技术学院班级：生物工程二班姓名：熊严学号：1 课程论文题目：蜂产品与生物检测课程名称：养蜂与蜂产品利用评阅成绩：评阅意见：
成绩评定教师签名：日期：XX年 12 月 3 日
蜂产品与生物检测
学生：熊严
(生物科学技术学院生物工程二班，学号1)
摘要：简单介绍几种检测蜂产品中抗生素的技术关键词：蜂产品；抗生素；残留；检测
一、蜂产品价值
蜂产品主要包括蜂蜜、蜂王浆、蜂花粉、蜂胶、蜂蜡等几大类，是由蜜蜂采集并酿造的产物我国民间食用蜂产品的历史悠久，多年前的东汉药物学著作《神农本草经》中就有“久服蜂蜜，强志轻身，不老延年”的记载蜂产品的营养价值和药用价值都极高，如蜂花粉，被誉为“微型营养库”、“浓缩的维生素，其蛋白质含量高达30％，糖类含量25％～48％，其中粉多糖具有很强的免疫和防癌功能，蜂花粉中的多种活性物质，如黄酮类、激素、核酸、酶、绿酸等具有增强毛细血管强度、抗炎、强心、抗动脉硬化的功效作为一种营养丰富、保健功能突出的食品，蜂产品正走俏于国际市场，在欧洲的很多国家已被列为动物源天然保健食品
二、抗生素残留对人体的危害
蜂产品中抗生素残留的原因欧洲幼虫腐烂病是蜜蜂幼虫的一种恶性传染病，它可使蜂群的4日龄或5日龄幼虫大量死亡此病是由蜂房链球菌引起的，有多种抗菌素对欧洲幼虫病都有疗效，如链霉素、青霉素、土霉素等，但最好的是土霉素有些蜂农为了能有效地控制春季欧洲幼虫病的发生，即使蜂群没有发病，也将土霉素掺在越冬饲料中作为日粮饲喂蜂群，因此蜂产品中土霉素等抗生素的残留已成为一个日益突出的问题
蜂产品中抗生素的残留引发人类急性中毒的可能性很小，但长期低剂量摄人，可能会产生慢性和积蓄性的毒性，如“三致”(致癌、致畸、致突变)、免疫毒性等，其对健康和环境的危害具有隐蔽性，易造成实质性和难以逆转的危害
1．产生过敏反应
经常食用含低剂量抗生素的蜂产品，会使食用者由于反复受到抗生素的刺激而被致敏；已被致敏的人，当再次接触同种抗生素，将发生过敏反应，严重者可导致死亡 2．引起细菌耐药性
经常食用抗生素残留蜂产品，可使某些菌株由于长期反复接触而产生耐药性当人体发病时，由于耐药性菌株的存在而使抗生素的疗效降低或失败，而在更大范围危及人类公共卫生防疫体系和人类自身健康 3．造成环境平衡紊乱或菌群失调
正常情况下，人体肠道内的菌群由于长期共存，已与人体相互适应某些菌群能抑制其它菌群的过度繁殖，另一些菌群能合成维生素供人体利用但若长期摄人抗生素残留蜂产品，将使上述平衡紊乱，造成条件致病菌过度增殖而致病，并导致出现维生素缺乏和紫癜性损伤等病症 4．其它毒害作用
抗生素残留还会引起多种其它危害，例如，链霉素可引起肾损伤和听觉神经受损；四环素能引起肝损害，其与骨骼、牙齿中的钙质结合，产生骨骼及牙齿黄染；氯霉素的残留损害人体的造血机能，导致再生障碍性贫血
三、抗生素残留检测方法
抗生素残留的检测方法很多，大致可分为三大类：(1)生物测定法，包括微生物学测定法、放射受体测定法等；(2)仪器分析方法，包括波谱法、色谱法等及其联用技术；(3)免疫分析法，包括放射免疫测定法、酶联免疫测定法、荧光免疫测定法等
1．抗生素残留的微生物检测
微生物法是目前公认而又广泛应用的测定抗生素的方法，也是目前我国药典中引用的标准方法主要有纸片法法，即氯化三苯基四氮唑法等纸片法
纸片法，是依据抗生素能够抑制微生物的生长繁殖这一特性而设计的如果蜂产品存在抗生素残留，则其样品提取液可以抑制微生物的生长；反之则微生物的生长不会受到抑制，而蜂产品中抗生素残留的多少则可以根据对微生物的抑制
程度来判断用圆盘法对西宁市消毒鲜牛奶中抗生素残留的调查结果表明，检测5批25份市售消毒鲜牛奶中抗生素残留的质量分数在1．5×10 以上法
法是目前我国蜂产品卫生标准中规定的检查牛乳中抗生素残留的检测方法它是依据抗生素对微生物新陈代谢影响大而设计的该法以嗜热链球菌为指示菌，为指示剂(的氧化态无色，还原态为红色)，如果蜂产品中没有抗生素存在，则其样品提取液不影响指示菌的新陈代谢，从而能够使无色氧化态rI1c还原为红色还原态的，培养液从无色变为红色反之，其提取液抑制指示菌的新陈代谢，抑制的程度和抗生素残留量成正比，所以可依据培养液颜色有无变化及颜色变化的深浅来判断样品中抗生素的含量管碟法此法目前应用较广，其基本原理同PD法，即将一定量受检样品提取液以牛津杯点接在含有特定微生物的平板培养基上，然后在适当条件下进行培养，观察牛津杯周围是否出现抑菌圈，根据有无抑菌圈及抑菌圈的大小判定样品中是否含有抗生素及含量的高低微生物法虽然原理及操作简单，但是测定所花的时间太长且结果误差较大在测定时样品需在pH4．5的条件下培育3～4h，而有些抗生素，例如土霉素在pH2～6的环境里易发生差向异构化，抗菌活性减弱或完全消失，因此，不宜采用此法 2．抗生素残留的仪器分析
目前，常用的抗生素理化分析法，主要有薄层色谱法()和高效液相色谱法()在前人工作的基础上，利用C18小柱固相萃取出四环素族抗生素，用经麦氏)缓冲液处理的正相高效薄层色谱极()进行分离，喷雾显色后，用紫外灯和薄层扫描仪进行定性、定量检测他们用这种技术测定了蜂密中强力霉素、、四环素的最低检出限分别为7．09×103、5．49×103和6．11×103ug采用仪器分析方法对食品中痕量抗生素残留物分析，需经过烦琐的样品提取、分离、衍生等前处理过程分析速度慢、成本高前处理过程需要使用大量的有机溶剂，易造成环境污染，加上许多仪器分析技术本身的局限，难以适应大量复杂样品和现场快速检测的要求因此，仪器分析方法正在不断得到发展，其趋势主要表现为：(1)采用物理科学新的理论与成果，从而使灵敏度和选择性等大大提
高(2)与生物技术结合，开发利用新的样品前处理技术(3)实验室进行样品分析将可能为二级测试方法所代替即首先应用简便、快捷的分析方法(如免疫分析、生物传感器)进行现场快速初级监测，然后对初级监测中呈阳性反应的样品进行实验室确证从而可大大减少分析工作量，提高分析效率 3．抗生素残留的免疫测定
免疫分析方法是利用抗体与抗原的特异性结合特性来实现食品中污染物检测的方法，其具有高的特异性和灵敏度，可有效避免复杂样本中杂质的干扰，大大简化了前处理净化步骤等诸多优点，所以发展迅速免疫学方法的种类很多，目前用于食品安全检测的主要包括免疫凝聚沉淀法、放射免疫法、酶联免疫法等，其中，免疫凝集沉淀法由于灵敏度低而不适用于抗生素残留的检测，酶联免疫法由于其快速、准确、灵敏、可定量、操作简便、无需昂贵的仪器设备而且避免了使用放射性物质而可能对人体造成危害而被普遍采用酶联免疫法的基本原理是在合适的载体(常用的载体是聚苯乙烯微孔板)上，酶标记抗体或抗原与相应的抗原或抗体形成酶标记的抗原抗体复合物，在酶底物的参与下，复合物上的酶催化底物使其水解，氧化或还原成为另一种有色物质由于在一定条件下，酶降解底物和呈现色泽是成比例的，因此可以应用分光光度计进行测定，从而计算出参与反应的抗原和抗体的量酶联免疫法因检测体系、检测材料、载体和操作者的习惯不同可以分为许多种，大致上可以分为直接法、间接法、夹心法和竞争法等几种用于抗生素检测的主要是问接竞争目前，国外已有检测四环素、链霉素、青霉素等抗生素的商品试剂盒出售，用于检测牛奶、肉制品等中的抗生素残留，但是我国还没有自己生产的试剂盒，这方面的研究大多还在进行之中。