鸡腺胃型传支病毒_QX株_与呼吸型及肾型毒株理化特性的比较

鸡腺胃型传支病毒(Q X株)与呼吸型及肾型毒株理化特性的比较王永玲　王玉东　张子春　范根成　吴延功　蒋贻海　刘相娥　丁　江
(农业部动物检疫所,山东青岛266032)
Q X I BV是本研究室从青岛地区免疫过呼吸型和肾型I BV的发病鸡群中分离并命名,本病毒主要侵害20～80日龄的小鸡,引起鸡腺胃肿大如球状,腺胃壁增厚,腺胃粘膜乳头出血溃疡,病鸡极度消瘦、呈负增长趋势,最终拉稀死亡。

该病发病率高,死亡率在3%～95%之间不等[2]。

给本地区养鸡户带来很大经济损失。

为了弄清它与传统的呼吸型及肾型I BV的区别,以期更好地预防和控制本病的发生,在电镜观察、动物回归及攻毒实验的基础上,进行了理化特性的鉴定及比较。

1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　病毒　Q X株和H株由本研究室从青岛地区患病鸡群中分离鉴定并提供;H120疫苗株,由南京农业大学提供。

1.1.2　血清　鸡抗Q X株和鸡抗H株血清,分别从发病鸡心脏采血分离制备,该鸡群在发病前未做I BV免疫。

SPF鸡血清,购自中国兽药监察所,作为标准阴性对照血清。

1.1.3　鸡胚　用于I BV繁殖的SPF鸡胚,购自山东家禽所。

用于气管环制备的健康鸡胚,购自上马镇兽医站。

1.2　方法
1.2.1　气管环组织培养及中和试验　气管环组织的制备、I BV对TOC的半数致死量(LD50)测定和气管环中和试验均按吴延功等的方法进行[3]。

1.2.2　Q X株、H株及H120株理化特性　主要参照吴志达的方法[4]。

1.2.2.1　耐热性试验和二价阳离子保护试验:每株病毒分4份装入灭菌青霉素瓶中,置56℃恒温水浴中处理,分别在15、30、45和60m in时取出;另取一组加入等量1M M gC l2,置56℃恒温水浴中处理1h;设不作任何处理的病毒做对照。

将处理好的病毒做TOC LD50测定,37℃温箱培养5～6天观察结果。

1.2.2.2　pH值对各株毒力的影响:分别用1M HC l和1M N aOH将各株病毒液调pH 至3和11左右,设不作任何处理的病毒对照,分别做TOC LD50测定。

1.2.2.3　脂溶剂敏感性试验:用20%乙醚(终含量)与病毒液混匀后放4℃作用24h; 5%氯仿(终浓度)振荡均匀后4℃作用1h,取出后分别以2000r m in,离心20m in,取出病毒液测定各株病毒的TOC LD50,设不作任何处理的病毒作对照。

1.2.2.4　对胰蛋白酶的稳定性试验:将各株病毒液分别加入等量的0.5%胰蛋白酶, 37℃处理1h,取出加等量的犊牛血清终止作用,按病毒最终浓度分别稀释各病毒,做TOC LD50测定。

设不作任何处理的病毒作对照。

1.2.2.5　中和试验:采用恒量病毒变量血清的方法,用Q X株病毒与其它几株病毒的阳性血清做中和,测定其中和效价,设SPF阴性血清作对照。

2　结　果
2.1　各株病毒半数感染量测定见表1。

结果表明Q X株与其它两株半数感染量接近。

表1　各毒株的半数感染量平均值(10× m l)
毒株Q X H120H TOCLD505.915.66.06 2.2　耐热性试验和二价阳离子保护试验见表2。

结果表明,3株病毒对热均敏感;二价镁离子对3株病毒均有稳定作用,Q X株病毒耐热性比H株和H120株好,在有二价镁离子作用下,56℃水浴感作60m in,Q X株毒力几乎不受影响,而H株和H120株分别下降1～2log10。

表2　耐热试验和二价阳离子保护
试验(10× m l)
组别
56℃水浴感作时间(m in)
15304560
对照QX株不加镁离子
QX株加镁离子
6.065.04.03.7
6.0
6.36 H120株不加镁离子
H120株加镁离子
6.03.413.53
6.6
6.6
H株不加镁离子
H株加镁离子
6.24.231.7
5.25
6.31 2.3　pH值稳定性试验见表3。

结果表明,室温下,3株病毒对pH3和pH11均有不同程度的耐受力,Q X株病毒对pH3的耐受力比
pH11时好。

表3　ph值稳定性试验
各毒株毒力(10× m l)
pH值Q X H120H
34.52.04.45
113.292.54.54
7.26.364.56.23 2.4　脂溶剂敏感性试验见表4。

结果表明,3株病毒对乙醚和氯仿均敏感,处理后的各病毒毒力比对照组低2～4log10。

表4　脂溶剂敏感性试验(10× m l)
毒株乙醚氯仿对照
Q X3.054.06.36
H120224
H3.192.756.23 2.5　胰蛋白酶处理稳定性试验见表5。

结果表明,3株病毒经胰蛋白酶处理后毒力略有下降。

表5　5%胰蛋白酶处理稳定性试验(10× m l)组别Q X H120H
处理4.04.273.0
未处理5.915.384.5
2.6　中和试验结果见表6。

结果表明,Q X2
I BV和H株、HOL T E株血清中和效价比H120株、H52株明显高,与H120株中和效价仅为4,而与H株中和效价高达305。

表6　QX株病毒与几株I BV毒株血清中和效价
血清号QX H HOL T H120H52SPF血清
中和效价平均
值(QX病毒)
395.53052564185.40
3　讨论与结论
3.1　由以上试验结果可以看出,Q X株病毒理化特性与H120株和H株基本相同,符合
I BV理化特性的特征。

3.2　据报道,多数I BV经56℃15m in便被灭活[5]而本试验中3株病毒经56℃水浴感作60m in后仍有感染力;而且Q X株病毒在有二价镁离子作用下,56℃水浴感作60m in 后毒力几乎不受影响;二价镁离子能明显提高该3株病毒的耐热性,这与Co ria的研究结果一致[6]。

3株病毒对乙醚和氯仿均敏感,这符合了传支病毒具有囊膜对脂溶剂敏感这一特性。

3.3　3株病毒对热、酸、碱和胰酶都表现出了不同程度的耐受力,而且Q X株病毒耐热性比其它两株都好,这对于开发耐热性疫苗有意义。

3.4　由中和试验结果可以看出,Q X株与肾型H株、HOL T E株阳性血清中和效价比呼吸型的H120株、H52株明显高,这说明Q X株与肾型I BV毒株相关性比呼吸型大,与H120几乎不相关。

这就解释了为什么养鸡户在用了呼吸型的H120株和H52株及肾型多价疫苗预防后,仍然暴发腺胃型传支。

因此,提醒广大养鸡户,应注意腺胃型传支的预防。

3.5　从自然发病鸡和动物回归试验鸡的剖检结果看出,Q X I BV除引起病鸡腺胃明显肿大外,有部分鸡还伴有不同程度的肾脏肿胀,个别还出现明显的“花斑肾”。

从中和试验结果也可以看出,Q X I BV与肾型的H株和HOL T E株交叉反应效价较高。

这进一步说明新分离的Q X I BV与肾型I BV之间有较大的相关性。

参考文献
1　吴延功,王永玲,蒋贻海等.中国兽医杂志,1996,22(4): 16～18
2　王玉东,张子春,王永玲等.中国动物检疫,1997,14(2): 14,(3):6～8
3　吴延功,郑明球,蔡宝祥等.中国畜禽传染病,1994,80
(1):8～12
4　吴志达.中国兽医杂志,1984,10(3):2～4
5　O tsuk i,K.Yam amo to,H.T subokura,M.A rch.V iro l., 1979,60:25～32
6　Co ria,M.F.A pp l.M icrobi o l.,1972,23:281～284黄牛剖腹产时不切断大血管初探
朱义兴　付希萍　张启明　薛宗武
(山东省胶州市张应镇兽医工作站,266323)
笔者曾对20多例难产黄牛做过剖腹产手术,但由于手术中失血较多,患牛
术后较难恢复正常,成功率仅在50%左
右。

近年笔者采用了不切断大血管的剖
腹产法,对2例难产黄牛进行了试验,效
果满意,现报告如下。

本镇东安家沟村村民赵××和西安家沟村村民安××各养黄母牛1头,因
胎位不正难产求诊。

两例经外部助产均
毫无效果。

采用不切断大血管的剖腹产
的方法,见到血管不用刀切,而用钝性物
将血管挑起,分离在一边,使血管不受任
何伤害,腹膜也不用刀切,用手撕开即
可。

子宫只切一小口,部位选在靠近小牛
的子宫壁。

将切口慢慢用手撕开,取出小
牛。

术后注意补液、强心、抗菌、消炎。