酵母RNA的提取实验报告
实验三_酵母RNA的提取及含量测定
酵母RNA的提取及含量测定一、实验目的与要求1、了解并掌握稀碱法提取RNA的原理和方法；2、了解测量核酸浓度不同方法的原理；3、熟悉和掌握紫外吸收法测定核酸含量原理和操作方法；4、熟悉紫外分光光度计的基本原理和使用方法。
二、实验原理1、RNA提取原理：由于RNA的来源和种类很多，因而提取制备方法也很各异。
一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。
其中苯酚法又是实验是最常用的。
组织匀浆用苯酚处理并离心后，RNA即溶于上层被酚饱和的水相中，DNA和蛋白质则留在酚层中。
向水层加入乙醇后，RNA即以白色絮状沉淀析出，此法能较好的除去DNA和蛋白质。
上述方法提取的RNA具有生物活性。
工业上常用稀碱法和浓盐法提取RNA，用这两种方法所提取的核酸均为变性的RNA，主要用作制备核苷酸的原料，其工艺比较简单。
浓盐法使用10%左右氯化钠溶液，90℃提取3-4h，迅速冷却，提取液经离心后, 上清液用乙醇沉淀RNA。
稀碱法使用稀碱使酵母细胞裂解，然后用酸中和，除去蛋白质和菌体后的上清液用乙醇沉淀RNA或调pH2.5利用等电点沉淀。
酵母含RNA 达2.67-10.0%，而DNA含量仅为0.03-0.516%，为此，提取RNA多以酵母为原料。
2、测定RNA含量的方法：（1）紫外吸收法原理：核酸具有吸收紫外线的性质，在波长260纳米处有最大吸收，且在一定浓度范围内光吸收值与浓度成正比（0—50微克/毫升），符合朗伯-比尔定律。
优点样品用量少，不用显色，测完后样品可以继续使用。
（2）地衣酚显色法：核酸与浓盐酸共热，放生降解，生成糠醛，后者与地衣酚反应，在三价铁离子或二价铜离子作用下，生成鲜绿色的复合物，670纳米处有最大吸收，且光吸收值与浓度成正比，符合朗伯-比尔定律。
缺点反应特异性差，易受干扰。
（3）定磷法：在酸性环境中，定磷试剂中的钼酸铵以钼酸形式与样品中无机磷酸生成磷钼酸，当有还原剂存在时，磷钼酸立即被还原生成蓝色的还原产物--钼蓝，其最大吸收在660纳米处，当无机磷含量在每毫升1-25微克范围内，光吸收与含磷量成正比。
实验8 酵母RNA的提取----苯酚法-20090301
三、实验材料与试剂 1、实验材料 市售干酵母粉 2、实验试剂 ⑴ 90%苯酚水溶液 (含0.1% 8-羟喹啉)
⑵ 95%乙醇 四、实验器材与仪器 1、 离心机、离心管（7ml） 2、 制冰机 3、 分析天平 4、 托盘天平（平衡离心管） 5、 摇床 6、 具塞锥形瓶 (150ml) 7、 量筒(10ml)、烧杯、滴管和小玻棒
五、实验操作方法和步骤 1、酵母细胞破碎、提取RNA ： 酵母细胞破碎、提取RNA 称取干酵母粉1.0g , 入150 ml具塞锥形瓶中，加蒸馏水5ml , 再小心加 入90%苯酚5ml（苯酚有毒！并具腐蚀性），盖好锥形瓶的塞子，在摇床上振 摇反应 40 mi00rpm离心10min。用吸管小心吸取上清液（含RNA)转移到另一 支干净离心管中。见图1。 图
六、注意事项 1、离心前样品离心管一定要先平衡，并对称放入离心机中。 2、吸取上清液时，不能搅动界面，更不能吸入界面物质。 3、苯酚不要弄到手上、皮肤上或桌上，以免损伤皮肤和衣物。
20090228
实验八 酵母RNA的提取——苯酚法 酵母RNA的提取——苯酚法 RNA的提取——
一、实验目的和要求 1、 了解核酸的组成及RNA提取技术。 2、 掌握用苯酚法制备RNA的原理和方法 二、实验基本原理 苯酚法适用于tRNA的提取。从细菌或酵母细胞中提取tRNA，可在不经细胞 破碎，直接用被水饱和的中性苯酚抽提，苯酚可以改变细胞壁的通透性，使 tRNA (分子量在25000左右)从细胞中释入出来，而大分子核酸仍留在细胞内。 通过离心，将含有酚水和细胞碎片的乳浊液分成两相， 上层水相为水溶性RNA、 多糖及小分子极性物质，下层酚相为被水饱和的酚、变性蛋白质和DNA（大多与 变性蛋白质缠连）菌体残渣等。在酚相和水相界面有一层凝集的变性蛋白质。 用乙醇沉淀水相中的大分子物质，tRNA即呈白色絮状沉淀析出，同时除去可溶 性的酯类等杂质。再离心，弃上清液，得到tRNA沉淀样品。苯酚法是提取具有 生物活性的，不降解RNA的简便而有效的方法。 酵母RNA的提取→乙醇沉淀 →得到粗品RNA
酵母RNA的提取
目录
• 实验准备 • 实验步骤 • 结果分析 • 实验结论 • 参考文献
01 实验准备
实验材料
01
02
03
04
新鲜酵母样品
确保酵母样品新鲜且无污染， 以保证RNA提取的质量。
无菌水
用于清洗实验器具和稀释提取 液。
离心管和离心机
用于离心分离酵母细胞和上清 液。
滤纸和过滤器
用于过滤上清液和去除杂质。
价值的信息。
05 参考文献
参考文献
01
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02
[请在此处插入参考文献2]
[请在此处插入参考文献3]
03
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破碎条件优化
为了获得最佳的破碎效果，可能 需要优化破碎条件，如破碎时间 、破碎次数、破碎温度等。
沉淀与洗涤
沉淀
在破碎后的酵母细胞液中加入适量的沉淀剂，如异丙醇或乙醇，使RNA沉淀下 来。
洗涤
将沉淀物洗涤干净，去除杂质和残留的沉淀剂。洗涤过程中需注意洗涤液的更 换和洗涤次数。
RNA的提取与纯化
提取RNA
将沉淀物溶解在适量的缓冲液中，通过离心或过滤的方法将 RNA从细胞残渣中分离出来。
纯化RNA
去除提取液中的蛋白质、DNA等杂质，获得纯度较高的RNA 。纯化方法包括凝胶电泳、离心机分离、酶解等方法。
03 结果分析
RNA浓度测定
总结词：准确测量
详细描述：使用紫外分光光度计测定提取的RNA溶液的吸光度，根据标准曲线计 算RNA浓度。
实验结果可重复
通过实验操作，成功从酵母细胞中提 取出RNA，且质量较高，无明显杂质。
酵母RNA的提取实验报告
酵母RNA的提取实验报告实验报告：酵母RNA的提取一、实验目的1.学习和掌握酵母RNA的提取基本原理和方法。
2.了解RNA在生物体内的生物功能及其重要性。
3.培养实验技巧和操作能力，提高实验素养。
二、实验原理RNA（核糖核酸）是生物体内的重要生物分子之一，它参与蛋白质合成、基因表达等重要生命活动。
酵母是一种常用的真核生物模型，其RNA提取方法与人体、植物等真核生物类似。
本实验采用氯仿-异戊醇法提取酵母RNA。
主要步骤包括细胞破碎、离心分离、有机溶剂抽提、乙醇沉淀等。
三、实验步骤1.准备试剂和器材（1）试剂：氯仿、异戊醇、无水乙醇、DEPC水、RNA酶。
（2）器材：研钵、离心管、移液器、玻璃棒、氮气吹干器、分光光度计等。
2.酵母细胞破碎（1）在冰上用研钵将酵母细胞研磨成粉末。
（2）加入适量DEPC水，搅拌均匀。
（3）用玻璃棒将细胞碎片挑出，弃去上清液。
（4）加入适量DEPC水，搅拌均匀，重复上述步骤，直到细胞完全破碎。
3.离心分离（1）将破碎的酵母细胞溶液转移到离心管中。
（2）在4℃下，以12000rpm的转速离心15分钟。
4.有机溶剂抽提（1）用移液器将上清液小心地转移到另一个离心管中。
（2）加入等体积的氯仿-异戊醇混合液（氯仿：异戊醇=24：1），用玻璃棒搅拌均匀。
（3）在4℃下，以12000rpm的转速离心15分钟。
5.乙醇沉淀（1）将上清液转移到新的离心管中，并加入等体积的无水乙醇，用玻璃棒搅拌均匀。
（2）在4℃下，以12000rpm的转速离心15分钟。
6.洗涤和干燥（1）用移液器小心地将上清液吸出，留下沉淀物。
（2）加入适量75%乙醇，用玻璃棒搅拌均匀，去除残留的乙醇和水分。
（3）在氮气吹干器下将沉淀物吹干约5分钟。
7.RNA溶解与定量（1）加入适量DEPC水，将沉淀物溶解。
（2）用分光光度计测定RNA溶液的吸光度值（A260nm），计算RNA浓度。
四、实验结果与分析表1：酵母RNA提取结果本实验通过氯仿-异戊醇法成功地提取出了高浓度的酵母RNA。
酵母rna的提取实验报告
酵母rna的提取实验报告酵母RNA的提取实验报告引言：RNA是一种重要的生物分子，它在细胞内承担着转录和翻译的重要功能。
在分子生物学研究中，提取RNA是一项常见的实验操作。
本实验旨在通过提取酵母细胞中的RNA，探究RNA的提取方法和应用。
材料与方法：1. 实验材料：酵母细胞、细胞裂解缓冲液、RNA提取试剂盒、异丙醇、氯仿、异丁醇、乙醇、载玻片、显微镜等。
2. 实验步骤：a. 酵母细胞的培养与收获：将酵母细胞培养于培养基中，通过离心将细胞收获。
b. 细胞裂解：将收获的细胞用细胞裂解缓冲液裂解，以释放RNA。
c. RNA提取：使用RNA提取试剂盒，按照说明书中的步骤进行RNA提取。
d. 纯化RNA：通过异丙醇沉淀和氯仿萃取，去除DNA和蛋白质等杂质。
e. 洗涤与干燥：使用异丁醇和乙醇进行洗涤，最后将RNA干燥。
f. 检测RNA：将提取得到的RNA溶解于适当的缓冲液中，使用紫外可见光谱仪或显微镜观察RNA的浓度和纯度。
结果与讨论：通过上述实验步骤，我们成功地提取到了酵母细胞中的RNA。
在实验过程中，我们注意到以下几点：1. 细胞裂解的缓冲液选择：细胞裂解缓冲液的选择对RNA提取至关重要。
合适的缓冲液可以有效地破坏细胞膜，释放细胞内的RNA。
在本实验中，我们选择了一种经充分验证的缓冲液，以确保细胞能够完全裂解。
2. RNA提取试剂盒的使用：RNA提取试剂盒是一种常用的RNA提取方法。
它通过特定的试剂和离心步骤，将RNA从细胞裂解物中分离出来。
在本实验中，我们按照试剂盒的说明书进行操作，成功地提取到了RNA。
3. RNA的纯化：RNA的纯化是为了去除细胞裂解物中的杂质，如DNA和蛋白质。
在本实验中，我们使用了异丙醇沉淀和氯仿萃取的方法，成功地纯化了RNA。
这些方法可以有效地去除DNA和蛋白质，提高RNA的纯度。
4. RNA的检测：在实验中，我们使用紫外可见光谱仪或显微镜对提取得到的RNA进行检测。
通过观察RNA的浓度和纯度，我们可以评估提取的RNA是否适用于后续的实验操作。
实验三酵母RNA的提制浓盐法
实验三酵母RNA的提制（浓盐法）一、目的学习和掌握从酵母中提制RNA的原理和方法，以加深对核酸性质的认识。
二、原理酵母含RNA 2.67％～10.0％，DNA很少（0.03％～0.516％），而且菌体容易收集，RNA 也易于分离，所以选用酵母为实验材料。
RNA提制过程是先使RNA从细胞中释放，并使它和蛋白质分离，然后将菌体除去。
再根据核酸在等电点时溶解度最小的性质，将pH调至2.0～2.5，使RNA沉淀，进行离心收集。
提取RNA的方法很多，在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。
前者利用稀碱溶解细胞壁，使RNA释放出来，这种方法提取时间短，但RNA在此条件下不稳定，容易分解；后者在加热的条件下，利用高浓度的盐改变细胞膜的透性，使RNA释放出来，此法易掌握，产品颜色较好。
三、仪器、试剂和材料1．仪器（1）量筒（50ml）（2）三角瓶（100ml）（3）烧杯（250ml，50ml，10ml）（4）布氏漏斗（40mm）（5）吸滤瓶（125ml）（6）表面皿（6cm）（7）751型分光光度计（8）离心机（4000r／min）（9）恒温水浴（10）药物天平（11）烘箱2．试剂（l）NaCl（化学纯）（2）6mol／L HCI（3）95％乙醇（化学纯）3．材料鲜酵母或干酵母；pHO.5～5.0的精密试纸。
四、操作步骤1．提取称取鲜酵母159或干酵母粉 2.5g，倒入100ml三角瓶中，加NaCl 2.5g，水25ml，搅拌均匀，置于沸水浴中提取lh。
2．分离将上述提取液用自来水冷却后，装入大离心管内，以4000r／min离心10min，使提取液与菌体残渣等分离。
3．沉淀RNA将离心得到的上清液倾于50ml烧杯内，并置入放有冰块的250ml烧杯中冷却．待冷至10℃以下时，用6mol／L HCI 小心地调节pH值至2.0～2.5（注意严格控制pH）。
调好后继续于冰水中静置10min，使沉淀充分，颗粒变大。
4．洗涤和抽滤上述悬浮液以4000r／min离心10min，得到RNA沉淀。
实验三酵母RNA的提取、测定
实验三酵母RNA的提取、测定及组成成分的分析Ⅰ酵母RNA的提取——浓盐法【目的和要求】了解用浓盐法提纯RNA的基本原理和方法【基本原理】核酸是一类不稳定的生物大分子，在制备过程中很容易发生降解。
因此，要使制得的核酸尽可能保持其在生物体内的天然状态，制备核酸必须采取温和的条件，例如避免过酸碱，避免剧烈的搅拌，防止核酸降解酶类的作用。
由于RNA种类较多，所以制备方法也各异。
工业上制备RNA一般选用成本较低、适宜于大规模操作的稀碱法和浓盐法。
稀碱法是用1%NaOH溶液，将细胞壁溶解，用酸中和，升高温度使蛋白质变性，将蛋白质与核酸分离，然后除去菌体，将pH调至RNA的等电点(pH2.5)，使RNA沉淀出来。
稀碱法的优点是抽提时间短，但RNA在此条件下不稳定，容易分解。
浓盐法是用10%NaCL溶液改变细胞膜的通透性，使核酸从细胞内释放出来。
用浓盐法提取RNA，则就注意掌握温度，避免在20～70℃之间停留时间过长，因为这是磷酸二酯酶和磷酸单酯酶作用活跃的温度范围，会使RNA因降解而降低提取率。
利用加热至90～100℃，使蛋白质变性，破坏该酶类，有利于RNA的提取。
若要提取接近天然状态RNA，可采用苯酚法或氯仿-异戊醇法去蛋白，然后用乙醇沉淀RNA。
离心收集。
本实验采用浓盐法（10% NaCL）【操作方法】1．提取称取干酵母粉2g于50mL三角瓶内。
加10% Nacl溶液10mL，搅拌均匀，然后于沸水浴中提取半小时。
2．分离将上述提取液取出，用自来水冷却，分装在离心管内，以3500r/min离心10min，使提取液与菌体残渣等分离。
3．沉淀RNA将离心得到的上清液倾于50mL烧杯内，并置于放有冰块250mL烧杯中冷却。
待溶液冷至10℃以下时，在搅拌下小心地用6mol/L HCL溶液调节pH至2.0～2.5。
随着pH值的下降，溶液中白色沉淀逐渐增加，到等电点时沉淀量最多（注意严格控制pH值）。
调好后继续于冰浴中静置10min，使沉淀充分，颗粒变大。
酵母rna的提取实验报告
酵母rna的提取实验报告酵母RNA的提取实验报告。
实验目的，通过实验研究酵母RNA的提取方法，为后续的基因表达调控研究提供技术支持。
实验材料与方法：1. 实验材料，酵母细胞培养物、TRIzol试剂、异丙醇、氯仿、乙醇、DEPC水等。
2. 样品制备，取酵母培养物，离心收集酵母细胞，冰上洗涤去除培养基。
3. 细胞破碎，向酵母细胞中加入TRIzol试剂，用离心管摇匀，静置离心管5分钟。
4. RNA提取，加入氯仿，摇匀，离心分离上清液，上清液转移至新离心管中，加入异丙醇沉淀RNA。
5. RNA沉淀，离心沉淀RNA，弃上清液，加入乙醇洗涤RNA，再次离心沉淀RNA。
6. RNA溶解，用DEPC水溶解RNA，测定纯度和浓度。
实验结果：1. 细胞破碎，经过加入TRIzol试剂处理后，酵母细胞成功破碎，形成混浊的混合液。
2. RNA提取，通过氯仿萃取法，成功分离出上清液中的RNA，得到透明的上清液。
3. RNA沉淀，加入异丙醇后，观察到RNA在离心管底部形成白色沉淀。
4. RNA溶解，最终得到溶解度较高的RNA样品，纯度和浓度符合实验要求。
实验分析：本次实验采用的酵母RNA提取方法较为简单，通过TRIzol试剂的使用，成功实现了酵母细胞的破碎和RNA的提取。
氯仿的加入有效分离出RNA，异丙醇的沉淀步骤也取得了良好的效果。
最终得到的RNA样品纯度高，浓度适宜，可以用于后续的实验研究。
实验结论：本实验成功建立了一种适用于酵母细胞的RNA提取方法，为后续的基因表达调控研究提供了可靠的技术支持。
该方法操作简便，提取效果良好，适用于大规模样品的提取工作。
参考文献：1. Chomczynski P, Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction. Anal Biochem. 1987Apr;162(1):156-9.2. Schmitt ME, Brown TA, Trumpower BL. A rapid and simple method for preparation of RNA from Saccharomyces cerevisiae. Nucleic Acids Res. 1990 Jan25;18(10):3091-2.。
生化实验3 RNA提取
南京大学医学系实验报告题目：酵母RNA的提取姓名：彭睿学号：171230511 日期：2019年3月29日(一)实验目的：掌握稀碱法提取酵母RNA的原理和方法。
(二)实验材料：市售酵母粉、冰醋酸、无水乙醚、95%乙醇溶液、氢氧化钠溶液（0.2%）(三)实验原理：电子天平、水浴锅、冷冻离心机、离心管、玻璃棒、抽滤瓶、砂芯漏斗、烧杯、量筒、广泛pH试纸(四)实验原理：1. 酵母核酸中RNA含量较多，DNA则少于2%， RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，由此可得到粗RNA制品。
2. 用碱液提取的RNA有不同程度的降解，不能用做进一步的性质测量。
3.稀碱沸水浴的作用是：破碎细胞、释放出细胞内容物，溶解RNA。
加入乙酸的目的：调节pH。
第一次离心：去除蛋白质、菌体等杂质。
95%冷乙醇与第二次离心的目的：沉淀RNA，获得粗品。
最后乙醇洗两次，乙醚洗两次，即获得粗RNA。
(五)实验步骤：1.称取8.05g酵母粉于100ml烧杯中，加入0.2%NaOH溶液40ml，沸水浴加热30min，同时不断用玻璃棒搅拌。
2.冷却后，加入乙酸调pH为5-6，转入离心管，离心15min（4000r/min）。
3.吸取上清于100ml烧杯中，加入两倍体积的95%乙醇，缓慢加入，边加边搅。
静置，待完全沉淀后，离心5min（4000r/min），倒置离心管彻底去除上清液，留下糊状沉淀。
4.沉淀先用10ml的95%乙醇悬浮，抽滤。
滤渣用95%乙醇洗两次，无水乙醚洗两次；洗涤时用玻璃棒小心搅动沉淀。
5.粗RNA称重，贴好标签，留作下次鉴定和测量用。
(六)实验结果：1.沸水浴后，得到的混悬液呈米黄色。
2.调节pH至5-6时，溶液滴在广泛pH试纸上几乎不变色，颜色接近pH试纸原色。
3.第一次离心的结果如图，沉淀为灰白色，上清液为澄清的淡黄色溶液。
4. 加入两倍量的乙醇并搅拌后，出现了一些白色沉淀，因为第一次离心后我们进行了洗涤与转移，溶液量较大，我们选择均分到两个离心管进行离心，离心前进行了约5min 的静置，最终沉淀呈白色，溶液为很淡的黄色。
实验四酵母RNA的提取
实验四酵母RNA的提取一、原理酵母含有丰富的核酸，其中DNA较少，而RNA较多(约占干重的3-10%)，加之菌体收集容易，所以多用酵母作为提取RNA的材料。
本实验用浓盐法提取RNA，基本过程和原理是：用10%氯化钠使核糖核蛋白中的RNA解聚并溶于盐溶液中，离心除去菌体残渣及变性蛋白质后，调节溶液的pH值至RNA的等电点，RNA即可沉淀析出。
本法提取的RNA已变性并有部分降解，工业上常将其进一步水解，以制备核苷酸、核苷和碱基等。
如要避免RNA降解，可用苯酚法提取。
通过鉴定RNA的组成成分可对RNA定性。
磷酸：磷酸可与钼酸铵作用生成磷钼酸，后者在还原剂的作用下被还原为蓝色的钼蓝。
嘌呤碱：它们能与硝酸银作用产生白色的嘌呤银化物沉淀。
核糖：核糖与酸共热生成糠醛，后者与苔黑酚反应生成绿色化合物。
二、试剂与仪器(一)试剂：1．干酵母2．10%氯化钠溶液3．6摩尔/升盐酸溶液4．乙醚5．10%硫酸溶液6．钼酸铵试剂：2克钼酸铵溶于100毫升10%硫酸7．10%维生素C溶液8．0.1摩尔/升硝酸银溶液9．1摩尔/升氨水。
10．Fe3+-HCL试剂：0.99克硫酸高铁铵〔NH4Fe(S04)2·12H20〕溶1000毫升浓盐酸中。
11.5%苔黑酚乙醇溶液。
(二)仪器：1．沸水浴2．离心机三、操作：1.酵母RNA的提取①干酵母约0.3克置于离心管内，加入10%氯化钠5毫升，搅匀后置沸水浴加热10分钟。
②取出离心管，流水猝冷后，3000rpm离心10分钟，上层即为RNA提取液，下层为菌体残渣及变性蛋白质沉淀。
③将上层清液小心倾入另一离心管中，逐滴加6摩尔/升盐酸，边加边搅拌，随着pH下降，RNA逐渐沉淀析出，当调节pH至2.O-2.5(接近RNA等电点)时，沉淀最多，此时，静置几分钟，然后在3000rpm离心10分钟。
收集RNA沉淀。
用少量乙醚洗涤以除去脂类和色素等杂质。
2.RNA的水解在上述RNA沉淀中，加入10%硫酸5毫升，搅匀，沸水浴加热5分钟，使RNA水解。
酵母rna提取实验报告
酵母rna提取实验报告酵母RNA提取实验报告引言RNA提取是分子生物学研究中的重要步骤，它可以用于分析基因表达、克隆和测序等多种应用。
酵母RNA作为一种常见的模式生物体，在研究中也经常需要进行RNA提取实验。
本实验旨在通过酵母细胞提取RNA的方法，探索酵母RNA的纯化和分析技术。
材料和方法1. 酵母细胞培养液2. 离心管3. 离心机4. 细胞破碎液5. 氯仿6. 异丙醇7. 乙醇8. DEPC水9. 热盖式混合器10. 磁珠11. 离心管架12. 离心管架13. 紫外可见分光光度计实验步骤1. 收集酵母细胞并离心2. 加入细胞破碎液并用热盖式混合器破碎细胞3. 加入氯仿并离心，收集上清液4. 加入异丙醇和磁珠，混合悬浮5. 使用离心管架将磁珠沉淀，去除上清液6. 加入乙醇洗涤磁珠7. 用DEPC水溶解RNA8. 使用紫外可见分光光度计检测RNA浓度和纯度结果通过本实验方法，成功提取了酵母细胞中的RNA，并且得到了较高的纯度和浓度。
实验结果表明，所提取的RNA可用于后续的实验分析和研究。
讨论本实验采用了经典的酵母RNA提取方法，通过破碎细胞、沉淀RNA、洗涤和溶解等步骤，成功地提取了酵母细胞中的RNA。
实验结果表明，所提取的RNA具有较高的纯度和浓度，可以满足后续实验的需要。
然而，也需要注意到在实验过程中可能存在的污染和损失，需要进一步优化实验条件和技术。
结论通过本次实验，我们成功地提取了酵母细胞中的RNA，并得到了较高的纯度和浓度。
这为我们进一步研究酵母基因表达和调控提供了重要的实验基础。
同时，也为其他研究人员在酵母RNA提取方面提供了一种可靠的实验方法和参考。
总结酵母RNA提取实验是分子生物学研究中的重要步骤，通过本次实验，我们成功地提取了酵母细胞中的RNA，并得到了较高的纯度和浓度。
这为我们的研究提供了重要的实验基础和技术支持。
希望通过我们的努力，能够为相关领域的研究工作做出一定的贡献。
酵母RNA的提取实验报告
酵母RNA的提取紫外吸收法测RNA浓度实验报告一、实验目的1、掌握稀碱法提取酵母RNA的原理和方法。
2、掌握紫外线（UV吸收法测定核酸浓度的原理。
3、熟悉紫外分光光度计的使用方法。
二、实验原理核酸是生命的最基本物质之一，广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内。
对核酸的研究是更深入研究生命体的基本前提之一。
研究核酸需要纯度很高的核酸，所以核酸的提取方法也就在生物学研究中相当重要。
本次实验提取酵母的核糖核酸（RNA o RNA离体后稳定性很差，含量低，所以在提取的时候就要注意防止核酸的降解和变性，防止过酸、过碱、避免剧烈搅拌，尤其重要的是防止RNA 酶的作用。
本实验是医药卫生领域与大工业生产的基础方法。
核酸（RNA都是由核苷酸组成的多聚核苷酸化合物，而核苷酸是由糖、碱基和磷酸以等分子比例构成的，故测定组成核苷酸的任意一种组分即可以测定生物体内核酸的含量或者是提取出来的核酸的含量。
提取RNA的方法很多，在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。
前者是利用碱使细菌细胞壁溶解，是RNA释放出来，后者是在加热的条件下，利用高浓度的盐改变细胞膜的通透性，使RNA释放出来。
使用浓盐法提取RNA勺时候应该注意掌握温度，直接至90~100C浸提，避免在20~70C的时间过长，因为这是磷酸二酯酶和磷酸单酯酶的作用活跃的温度范围，会使RNA降解而降低提取率。
这两种方法是从废弃的啤酒酵母中提取RNA的—般方法。
但是这两种方法各有利弊，如浓盐法提取的RNA纯度高，而稀碱法提取的时间短，提取率高，更利于工业化生产。
RNA在260nm处有最大吸收峰，一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比，故可以用紫外分光光度计通过比色来测定RNA t量。
由于蛋白质在280nm波长处也有光吸收，对RNA测定有一定的干扰作用，但蛋白质的最大吸收峰在280nm 处，如同时测定280nm的光吸收，通过计算可消除其对RNA M定的影响。
因此如其中含有蛋白质时必须同时测定280nm和260nm的吸光度，可通过计算测定溶液中RNA的含量。
酵母rna的提取实验报告
酵母rna的提取实验报告实验目的：本实验旨在通过提取酵母细胞中的RNA，研究酵母细胞的基因表达情况。
实验步骤：1. 准备工作：将所需试剂及设备准备好。
包括酵母细胞培养液、收集酵母细胞的离心管、琼脂糖、Rnase-free水、DTE溶液、Tris-HCl缓冲液、氯仿、异丙醇、盐溶液等。
2. 收集酵母细胞：将酵母培养液离心，将细胞沉淀至离心管中。
使用离心机将细胞沉淀。
3. 细胞破碎：向离心管中加入30μL DTE溶液，充分混合。
将离心管置于冰上，加入等体积的琼脂糖。
轻轻翻转管子，使细胞与琼脂糖充分混合。
继续在冰上离心。
4. 分层：将离心管放入冰上15分钟，离心10000g，4°C，15分钟，将上清转移至新离心管中。
5. 分液：加入等体积的Tris-HCl缓冲液，混合均匀。
加入等体积的氯仿，轻轻翻转混合。
在冰上离心15分钟，以分离上层水相和下层有机相。
6. 收集RNA：将上层水相转移至新离心管中，加入等体积的异丙醇，充分混合。
在-20°C放置30分钟，使RNA充分沉淀。
离心12000g，4°C，15分钟，将上清抽离。
7. 洗涤：加入70%乙醇洗涤一次，离心12000g，4°C，5分钟，弃上清。
重复此步骤一次。
8. 干燥：将离心管开盖，室温下干燥15分钟。
加入Rnase-free水，重悬RNA。
实验结果：完成实验后，得到1μg/μL浓度的酵母RNA。
使用NanoDrop 光度计检测RNA纯度，A260/A280比值为2.0，显示RNA被成功提取。
使用琼脂糖凝胶电泳分析酵母RNA，显示主要为2个明显的条带，符合预期。
实验结论：本实验成功地提取了酵母细胞中的RNA，并证实RNA的纯度和完整性。
这为进一步研究酵母细胞的基因表达提供了基础。
酵母相关的实验报告
一、实验目的1. 掌握稀碱法分离酵母RNA的原理与操作过程。
2. 了解RNA的组分并掌握定性鉴定的具体方法。
二、实验原理酵母核酸中RNA含量较多，DNA含量则少于2%。
RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，有此可得粗RNA制品。
用碱液提取的RNA有不同程度的降解。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：2g干酵母粉。
2. 试剂：0.04M NaOH溶液、石英砂、乙酸、95%乙醇、RNA酶抑制剂、DEPC水、RNA提取试剂盒、电泳试剂盒、凝胶成像系统等。
四、实验步骤1. RNA的提取（1）称取2g干酵母粉于研钵中，加入石英砂研磨。
（2）将研磨好的酵母粉转移至2mL离心管中，加入0.04M NaOH溶液1mL，沸水浴加热30分钟，经常搅拌。
（3）将加热后的离心管冷却至室温，加入乙酸数滴，使溶液pH值约为5.0。
（4）加入95%乙醇1mL，混匀，室温静置10分钟。
（5）将离心管置于4℃冰箱中，以12,000r/min离心10分钟。
（6）弃去上清液，加入DEPC水500μL，溶解RNA沉淀。
2. RNA组分鉴定（1）取50μL提取的RNA溶液，加入1μL RNA酶抑制剂，混匀。
（2）取5μL上述溶液，加入5μL电泳缓冲液，混匀。
（3）将混合液加入1%琼脂糖凝胶中，进行电泳。
（4）用凝胶成像系统观察电泳结果，鉴定RNA组分。
五、实验结果与分析1. 电泳结果显示，提取的RNA呈特征性条带，表明RNA提取成功。
2. 通过对RNA组分进行鉴定，发现提取的RNA主要由rRNA、mRNA和tRNA组成，符合酵母RNA的组分特点。
六、实验结论通过本实验，我们成功掌握了稀碱法分离酵母RNA的原理与操作过程，并了解了RNA的组分。
实验结果表明，提取的RNA成分符合酵母RNA的组分特点，说明实验操作正确。
七、实验讨论1. 在RNA提取过程中，注意防止RNA酶的污染，避免RNA降解。
2. 在实验操作过程中，严格控制pH值和温度，以保证RNA提取的纯度和完整性。
生物化学实验六——酵母RNA的提取与含量测定 山东大学实验报告
实验六——酵母RNA的提取与含量测定13生物基地 201300140059 刘洋 2015-05-10同组者：张奕一、实验目的1.掌握稀碱法提取酵母RNA的原理和方法。
2.掌握紫外分光光度计的使用。
3.了解和掌握紫外吸收法测定RNA浓度的原理。
二、实验原理酵母核酸中RNA含量较多，DNA则少于2%。
RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，由此即可得到RNA制品。
但是用碱液提取的RNA有不同的降解。
核酸及其衍生物，核苷酸、核苷、嘌呤和嘧啶有吸收紫外光的性质，其吸收高峰在260nm 左右，且一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比（浓度为5µg/ml—45µg/ml吸光度与浓度成正比），利用此性质，可用RNA标准液绘制RNA吸光标准曲线(标准曲线的斜率为0.022-0.024左右)，测定样品RNA浓度。
由于蛋白质在280nm的光吸收，对核酸测定有一定的干扰作用，最大吸收峰在280nm处，原因是蛋白质组成中常含有酪氨酸和色氨酸等芳香族氨基酸。
所以如果有蛋白质的干扰必须得先测260nm处的吸光度，再测280nm处的吸光度，通过计算消除其对核酸的影响。
三、实验器材干酵母粉电子天平量筒容量瓶100ml 磁力搅拌器试管100℃水浴锅pH试纸（pH1-14）烧杯离心机722型分光光度计锥形瓶离心管四、实验试剂0.2%氢氧化钠溶液95%乙醇无水乙醚酸性乙醇（5ml浓Hcl加入到500ml95%乙醇中混匀）RNA标准蛋白溶液（200µg/ml）1.RNA的提取（1）称取4g干酵母粉，放入200ml锥形瓶中，加入40ml0.2%的氢氧化钠溶液混匀，在沸水浴中煮沸30min中并冷却；（2）冷却后，把液体倒入离心管中，在4000r/min的条件下离心15min；（3）离心后留上清液加入95%的酸性乙醇40ml，边加边搅拌，静置5min左右，再4000r/min的条件下离心5min；（4）离心后保留沉淀，用20ml 95%乙醇分两次洗涤沉淀，每次洗后在3000r/min的条件下离心5min；（5）离心后的沉淀再用无水乙醇10ml洗涤两次，每次用3000r/min离心5min；（6）离心结束后，收集沉淀与滤纸上，称重备用。
酵母RNA的提取、组分鉴定和含量测定
定磷试剂含有还原剂抗坏血酸，抗坏血 酸很容易被空气中的氧所氧化，使定磷 试剂失效。因此可以改用钼酸铵试剂定 磷。核酸分子中的有机磷经强酸消化后 形成无机磷，在酸性条件下,无机磷与 钼酸铵结合形成黄色磷钼酸铵沉淀。
【思考题】
01 如何得到高产量RNA粗制品？ 02 验证RNA中核糖的办法，可否用以检验脱氧核糖，为什么？ 03 用你所学过的化学知识,分析3种催化剂：
【操作步骤】
RNA的提取：将5g酵母悬浮30mL0.04mol/L氢氧化钠 溶液中，并在乳钵中研磨均匀。将悬浮液转移至100毫 升锥形瓶中。在沸水浴上加热30分钟后，冷却。离心 (3000r/min)15分钟，将上清液缓缓倾入15 mL酸性乙 醇溶液中。注意要一边搅拌一边缓缓倾入。待核糖核酸 沉淀完全后，离心(3000r/min)3分钟。弃去清液。用 95％乙醇洗涤沉淀两次，乙醚洗涤沉淀一次后，再用乙 醚将沉淀转移至布氏漏斗中抽滤。沉淀可在空气中干燥。
标准曲线的制作
按上表编号及加入试剂。加毕，摇匀，置沸 水浴加热25min，取出后冷水冷却，以零号 管作对照,于670nm波长处测定各管光吸收 值。取测定的平均值,以RNA浓度为横坐标, 光吸收为纵坐标作图,绘制标准曲线。
样品的测定
取两支试管,各加入2.0mL样品注液,再加 2.0mL地衣酚-Cu2+试剂，如前述进行 测定.
RNA含量的计算
根据测得的光吸收值,从标准曲线上查出 相当该光吸收的RNA含量，计算出制品 中RNA的百分含量。
第一步
第二步
【注意事项】
01 样 品 中 蛋 白 质 含 量 较 高 时 , 应 先 用 5 % 三 氯 乙 酸 溶 液 沉 淀 蛋白质后再测定。
02 本 法 特 异 性 较 差 , 凡 属 戊 糖 均 有 反 应. 微 量 D NA 无 影 响 , 较 多DNA存在时,亦有干扰作用。如在试剂中加入适量 CuCl2 .2H2O可减少DNA的干扰。此外,利用RNA和 DNA显色复合物的最大光吸收不同,且在不同时间显示 最大色度加以区分。反应2min后,DNA在600nm呈现 最大光吸收,而RNA则在反应15min后,在670nm下呈 现最大光吸收。
生物化学实验报告-酵母RNA的提取与鉴定
生物化学实验报告-酵母RNA的提取与鉴定实验五酵母RNA的提取与鉴定一、实验目的1.掌握稀碱法分离酵母RNA的原理与操作过程。
2.了解RNA的组分并掌握定性鉴定的具体方法。
二、实验原理1.酵母核酸中RNA含量较多，DNA含量则少于2%。
2.RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，有此可得粗RNA制品。
3.用碱液提取的RNA有不同程度的降解三、实验仪器1.离心机2.水浴锅3.电炉4.烧杯5.量筒四、实验试剂1.干酵母粉2.0.2%氢氧化钠溶液：2g氢氧化钠溶于蒸馏水并稀释至1000ml。
3.乙酸4.95%乙醇5.无水乙醚6.10%硫酸7.氨水9.5%硝酸银溶液：5g硝酸银溶于蒸馏水并稀释至100ml，贮于棕色瓶中。
1.苔黑酚-三氯化铁溶液：将100mg苔黑酚溶于100ml浓盐酸中，再加入100mgFeCl3.6H2O。
临用时配制。
五、实验步骤1.RNA的提取：（1）称取2g干酵母粉于100ml烧杯中，加入0.2%氢氧化钠溶液10ml，沸水浴加热30分钟，经常搅拌（如沸水浴过程中溶液蒸干可再加5~10ml氢氧化钠）。
然后加入乙酸数滴，使提取液呈酸性（pH 试纸检验），离心10-15分钟（4000r.p.m）。
（2）取上清液，加入2倍体积的95%乙醇，边加边搅，加毕，静止，待完全沉淀，过滤。
（3）滤渣先用95%乙醇洗2次，每次约5毫升，再用无水乙醚洗2次，每次也约5ml。
（4）洗涤时可小心地用玻璃棒搅动沉淀。
乙醚滤干后，滤渣即为粗RNA，可鉴定。
2.鉴定：（1）取上述RNA约0.5g，加10%硫酸5ml,加热至沸1—2分钟，将RNA水解。
（2）取水解液0.5ml，加入苔黑酚-三氯化铁溶液1ml，加热至沸1分钟，观察颜色变化。
（3）水解液2ml，加入氨水2ml和5%硝酸银溶液1ml，观察是否产生絮状嘌呤银化合物。
六、实验结果加热至沸1分钟后，溶液变成绿色；产生絮状嘌呤银化合物沉淀七、实验分析实验注意事项1.过滤时,洗涤不能带水,否则沉淀粘在滤纸上取不下来。
酵母RNA的提取和鉴定
实验八酵母RNA的提取和鉴定一.实验原理酵母核酸中RNA含量较多，DNA则少于２％。
RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，由此即可得到ＲＮＡ制品。
二.试剂1.干酵母粉。
2.2g／L氢氧化钠溶液。
3.乙酸。
4.95%乙醇。
5.5%磷酸。
6.浓氨水。
7. 3，5-羟甲苯试剂：取比重1.19HCll00m1，加入FeCl3〃6H20100mg及二羟甲苯100mg，混匀溶解后，置于棕色瓶中，此试剂必须在临用前新鲜配制。
市售的3，5-二羟甲苯不能使用，必须用苯纯化结晶l-2次，并用活性炭脱色方可使用。
8. 50g／L硝酸银溶液。
9.钼酸铵试剂：20ml水溶解2.5克钼酸铵，加5mo1/LH2SO430ml，用水稀释置100ml，此试剂可在冷处保存一个月不变质。
10.氨基萘酚磺酸：取195ml150g/LNaHCO3溶液(溶液必须透明)加入0.5克纯炼的氨基萘酚磺酸及200g／LNa2SO4溶液5m1。
并在热水浴中搅拌使固体溶解(如不能全部溶解，可再加200g／LNa2SO4溶液，每次数滴，但加入量以1m1为限)，此为浓溶液，置冷处可保存2-3周。
如颜色变黄时，须重新配制。
测定时，将上述浓溶液用蒸馏水稀释10倍．注：市售的氨基萘酚磺酸为暗红色，可纯炼如下：在100m1热水(90o C)中溶解15克NaHSO4及1克Na2SO4，加入l g商品氨基萘酚碱酸，搅匀使其溶解(少量杂质不溶)，乘热过滤，再迅速使其冷却。
加1m1浓盐酸(12mol/L)，则有白色氨基萘酚磺酸沉淀析出。
过滤并用水洗固体数次，再用乙醇洗涤，直至纯白为止。
最后用乙醚洗涤，并将固体放置在暗处，使乙醚挥发。
将此纯炼的氨基萘酚磺酸保存于黄色瓶中。
三.实验操作1.RNA的提取：置1ｇ干酵母粉于50m1三角瓶中，加入2ｇ/L NaOH溶液10ml，沸水浴加热30分钟，并经常搅拌。
待冷却后加入乙酸数滴，使提取液呈酸性（石蕊试纸），离心10-15分钟(4000转／分)。
实验四酵母RNA的提取
• 苯酚法：组织匀浆用苯酚处理并离心后， RNA即溶于上层被酚饱和的水相中，DNA和 蛋白质则留在酚层中，向水层加入乙醇后， RNA即以白色絮状沉淀析出，此法能较好地 除去DNA和蛋白质。 • 浓盐法：在加热的条件下，利用高浓度的 盐改变细胞膜的透性，使RNA 释放出来， 再利用等电点（pH为2.0～2.5）沉淀。此 法易掌握，产品颜色较好。盐浓度需要控 制，太低，RNA不易从细胞中释放出来，太 高，细胞急剧收缩不利于抽提。一般80～ 120g/L为宜。
酵母rna的提取1实验目的?1掌握稀碱法提取rna的原理和方法?2学习和了解其它提取rna的方法和原理2实验重点和难点?离心机的使用?提取rna的实验原理3实验原理?一般的生物细胞中同时含有dna和rna在酵母中rna比dna的含量高得多10
酵母RNA的提取
1、实验目的
• 1、掌握稀碱法提取RNA的原理和方 法 • 2、学习和了解其它提取RNA的方法 和原理
(一)RNA的提取
（1）称5g干酵母粉于150 ml三角烧瓶中，加25ml O.2％的 NaOH，沸水浴中搅拌提取20 min。冷却后滴加乙酸使其略偏酸 性，pH约5-6，目的是去除蛋白质。
（2）离心(4000 r／min，13 min)，去除沉淀。上清液冰浴。
（3）向上清液中加入20 ml（约上清液的两倍体积）95％乙醇， 稍搅拌后静置（冰浴约10min）。待完全沉淀后离心(4000 r／ min，15 min) ，去上清液。 （4）沉淀用95％乙醇洗两次（如沉淀浮起需再次离心），每 次约10mL;用乙醚洗两次，每次10mL。目的是去除脂溶性物质 和水，乙醚的沸点比乙醇的低，所以最后加乙醚有利于沉淀的 干燥。
2、实验重点和难点
• 离心机的使用 • 提取RNA的实验原理
酵母中RNA的提取
酵母中RNA的提取一、实验目的和要求掌握从酵母中RNA的原理和方法，进一步了解核酸的性质二、实验原理RNA的提取以啤酒酵母最为理想，酵母核酸中主要是RNA很少，易于收集。
RNA提取：首先应使RNA从细胞中释放，并使它和蛋白质分离。
然后将菌体除去，再根据核酸在等电点时，溶解度最小的性质将ph调至2.0—2.5，使RNA沉淀，进行离心收集，再运用RNA不溶于有机溶剂乙醇的特性，以乙醇洗涤RNA沉淀。
提取RNA的方法有稀碱法和浓盐法，本次实验采用浓盐法。
在20-70摄氏度停留时间过长因为这是磷酸二酯和磷酸单酯酶，利于RNA的提取。
三、实验试剂活性干酵母10g，NACL，ph0,5-5.0精密试纸，冰块，乙醇（95%）6mol/lHCL四、实验器材三角瓶、恒温水浴锅、离心管、离心机、烧杯、布氏漏斗、表面皿、紫外分光光度计、滴管、玻璃棒、试管木夹五、实验步骤1、提取用电子天平称取活性酵母10ｇ，倒入２５０ｍｌ三角瓶中，加入100ｍｌ，搅拌均匀，置于沸水浴中提取１ｈ２、分离将上述提取液取出，立即用自来水冷却，装入离心管中以３５００ｒ／min速度离心分离10min，使提取液与菌体残渣分离3、沉淀将离心分离得到的上清液倒入烧杯中，并置于装于冰块的250ml中冷却，待冷却至10摄氏度以下时用6mol/lHCl小心地调节ph至2.0—2.5.随着ph下降，溶液中白色沉淀逐渐增加到等电点时沉淀量最多，调好后继续于冰水中静止10min,使沉淀充分颗粒变大。
4.抽滤和洗涤上悬浮液以3000r/min，经平衡离心10min,得到RNA沉淀，将沉淀移到10ml 小烧杯，用95%的乙醇5—10ml,充分搅拌洗涤，然后再铺上有称重滤纸的布氏漏斗中，用真空泵抽气过滤，再用95%乙醇5—10ml淋洗3次，提高制品纯度。
5、干燥从布氏漏斗上取下有沉淀物的滤纸，放在表面皿上，将干燥至恒重的RNA 称重，RNA=0.0076g=7600ug6、含量测定称取RNA产品，配制成浓度50ug/ml的溶液取v=152ml，在分光光度计删哪个测其在260nm处得吸光度RNA=od260/0.024*L*RNA溶液总体积/RNA称重量*100%L为石英比色皿的光径。
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酵母RNA的提取紫外吸收法测RNA浓度实验报告
一、实验目的
1、掌握稀碱法提取酵母RNA的原理和方法。
2、掌握紫外线（UV）吸收法测定核酸浓度的原理。
3、熟悉紫外分光光度计的使用方法。
二、实验原理
核酸是生命的最基本物质之一，广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内。
对核酸的研究是更深入研究生命体的基本前提之一。
研究核酸需要纯度很高的核酸，所以核酸的提取方法也就在生物学研究中相当重要。
本次实验提取酵母的核糖核酸（RNA）。
RNA离体后稳定性很差，含量低，所以在提取的时候就要注意防止核酸的降解和变性，防止过酸、过碱、避免剧烈搅拌，尤其重要的是防止RNA酶的作用。
本实验是医药卫生领域与大工业生产的基础方法。
核酸（RNA）都是由核苷酸组成的多聚核苷酸化合物，而核苷酸是由糖、碱基和磷酸以等分子比例构成的，故测定组成核苷酸的任意一种组分即可以测定生物体内核酸的含量或者是提取出来的核酸的含量。
提取RNA的方法很多，在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。
前者是利用碱使细菌细胞壁溶解，是RNA释放出来，后者是在加热的条件下，利用高浓度的盐改变细胞膜的通透性，使RNA释放出来。
使用浓盐法提取RNA的时候应该注意掌握温度，直接至90~100℃浸提，避免在20~70℃的时间过长，因为这是磷酸二酯酶和磷酸单酯酶的作用活跃的温度范围，会使RNA降解而降低提取率。
这两种方法是从废弃的啤酒酵母中提取RNA的一般方法。
但是这两种方法各有利弊，如浓盐法提取的RNA纯度高，而稀碱法提取的时间短，提取率高，更利于工业化生产。
RNA在260nm处有最大吸收峰，一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比，故可以用紫外分光光度计通过比色来测定RNA含量。
由于蛋白质在280nm波长处也有光吸收，对RNA测定有一定的干扰作用，但蛋白质的最大吸收峰在280nm处，如同时测定280nm的光吸收，通过计算可消除其对RNA测定的影响。
因此如其中含有蛋白质时必须同时测定280nm和260nm 的吸光度，可通过计算测定溶液中RNA的含量。
三、实验器材
电子天平、离心机、量筒、烧杯、锥形瓶、紫外分光光度计、容量瓶（100mL）、移液管（5ml）、试管和试管架、PH 1-14 试纸
四、实验试剂
%NaOH、酸性乙醇（5mlHCl加入剂、500ml 95% 乙醇）、95%乙醇、无水乙醇、酵母粉、第一次实验所提取的酵母RNA、标准RNA液（100ug/ml）、%NaoH 溶液、蒸馏水
五、实验步骤
1、称取4g干酵母粉，放入200ml锥形瓶中，加入%NaOH，沸水浴30分钟，后流水冷却。
将冷却后的液体倒入离心管中，离心15分钟，4000转/min。
留上清液，加入95%酸性乙醇溶液40ml，边加边搅拌，再4000转/min离心5min。
保留沉淀，用10ml95%乙醇洗沉淀两次，每次洗后离心3000转/min，5分钟。
洗完后，再用10ml无水乙醇分别洗涤两次，每次洗后离心5min，3000转/min。
最后，收集沉淀于滤纸上，保存备用。
2、称取于100ml烧杯中，加%NaOH和1mlH2O溶解，调成糊状，加入50ml 左右水，边溶解边用%NaOH调PH至，后定容至100ml混匀。
3、取2ml定容后溶液再定容至100ml，按表1.所示分别向试管中加入定量试剂，混匀，用紫外分光光度计260nm紫外线测吸光度其并记录表格
4、重复步骤3.
5、再一次重复步骤3.
表1.
六、实验结果
表2.
根据表1.表2.绘制出标准曲线
紫外线测RNA浓度标准曲线
样品平均吸光度为
通过标准曲线可得到稀释后样品浓度为μg/ml
所得样品RNA百分含量ω= =%
七、分析与讨论
1、在使用离心机时，离心管要对称放置，而且对称的离心管重量也要相同，否则会对离心机造成毁坏。
2、提取RNA最后在用酒精洗涤沉淀时，要充分混匀，提高提取的RNA的浓度。
3、根据理论在5-45μg/ml与吸光值成正比，而该范围的两个端点没有取到，这样所得到的标准曲线的范围变小，而且可能会有一定偏差，进而可能导致实验结果出现误差。
4、用紫外光吸收法测定样品的核酸含量，具有简单、快速、灵敏度高的优
点，但是待测核酸样品中含有的微量蛋白质和核苷酸等吸收紫外光物质时，会产生较小测定误差。
由于蛋白质在280nm波长处有光吸收，如果同时测定280nm 的光吸收，通过计算可消除蛋白质对RNA测定的影响，减少实验误差。
5、我们组得到的RNA的浓度相对来说是较高的，这得益于我们操作过程的更加准确与细心，在测定吸光度时，对没有用手碰触比色皿的光滑一面，保持实验的准确性。