(免疫学课件)免疫学实验二
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医学免疫学实验：噬细胞吞噬功能检测
第二次实验2：吞噬细胞吞噬功能检测一、实验目的学习并掌握吞噬细胞吞噬功能检测。
二、实验原理吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能，在机体固有免疫中发挥重要作用。
小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠，可刺激巨噬细胞的聚集。
四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液，一小时后解剖收集腹腔吞噬细胞，染色、镜检可观察对羊红细胞的吞噬现象。
通过计算吞噬百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞噬功能。
一、实验材料1. ICR 品系小鼠（北京大学医学部实验动物中心提供）2. PBS 缓冲液3. 3％硫代乙醇酸钠4.羊红细胞（1％悬液，北京大学医学部实验动物中心提供）5. 解剖器材、注射器、尖吸管、橡皮吸头、小试管及载玻片6. 瑞氏染液、甲醇四、实验步骤1. 实验准备：用无菌注射器吸取3％硫代乙醇酸钠3ml，注射于小鼠腹腔内。
2. 四日后，注射羊红细胞（1％悬液）1ml 于小鼠腹腔内。
3. 注射1 小时后，将小鼠用颈椎脱臼法处死，解剖暴露腹腔，于腹腔靠上部位，用镊子轻轻夹起腹膜，将腹膜剪一小口，用尖吸管注入5ml 预温的PBS，同时用手反复揉搓腹腔约1—2 分钟，以便尽可能多地冲洗出小鼠腹腔的吞噬细胞。
4. 用尖吸管吸取腹腔液，置一洁净试管内。
5. 用尖吸管将腹腔液吹打均匀(尽量避免产生气泡)，吸取一滴滴于载玻片上，加盖玻片镜检。
6. 观察结果，也可以将腹腔液涂片，平放于湿盘内，37℃，孵育30 分钟。
取出涂片，用预温的PBS 冲洗3 次，然后用甲醇固定1 分钟，以瑞氏染液1 份加pH6.4 的PBS 2 份混匀后，滴于涂片上染色5-10 分钟，以蒸馏水冲洗（切勿先将染液倾去）后，待干，镜检。
五、实验结果观察小鼠腹腔巨噬细胞和中性粒细胞对羊红细胞的吞噬现象，计算吞噬百分比，即每100 个吞噬细胞中吞噬有羊红细胞的细胞数。
也可用吞噬指数表示，即将100 个吞噬细胞中所吞噬羊红细胞的总数除以100。
吞噬百分比和吞噬指数一般是平行的。
医学免疫学实验PPT课件
间接凝集抑制试验
可溶性抗原与相应抗体结合后并不能产生凝集反应，怎样才能用肉眼就能观察到可溶性抗原与相应抗体的结合呢？
实验原理
间接凝集示意图:
间接凝集抑制示意图:
妊娠免疫诊断试验
孕妇尿中，绒毛膜促性腺激素（HCG）含量明显增高。（HCG是可溶 性抗原 ） 反之，非孕妇尿中HCG含量甚微，不足以消耗掉抗HCG抗体。
医学免疫学实验
医学免疫学实验
免疫学教研室
间接凝集抑制试验 沉淀反应
实验目的
掌握间接凝集抑制试验、沉淀反应的操作及结果的正确观察、判断. 熟悉间接凝集抑制试验、沉淀反应的原理. 了解间接凝集抑制试验、沉淀反应的用途.
间接凝集抑制实验
分类及概念
血清学反应: 在血清中进行的抗原抗体反应.
凝集反应: 在一定浓度的电解质环境中，颗粒性抗原和相应抗体反应能够产生肉眼可见的凝块。 注意以下几个方面: 第一: 参与反应的抗原必须是体积较大的颗粒性抗原，比如说细菌、红细胞等，都属于颗粒性抗原的范畴。 第二: 必须是相应的抗原抗体才能发生凝集反应 第三: 必须有电解质的参与 第四: 凝集块是一种肉眼能够见到的细小均匀块状物质。
试验材料
1、标本：非孕妇、待检尿 ２、试剂：兔抗人HCG血清、HCG致敏的乳胶颗粒 ３、器材：载玻片、滴管、玻棒
实验方法
加尿液标本 加兔抗人HCG免疫血清 加HCG致敏的乳胶颗粒 观察结果
待检尿
非孕妇尿
混匀静置2分钟
混匀静置2分钟
实验结果
火箭免疫电泳
单向扩散+电泳：将单向扩散与电泳技术相结合的一种方法。 沉淀峰的高度与抗原的浓度成正比。
对流免疫电泳的原理
蛋白质抗原在碱性环境中，其羧基发生电离而带负电荷，在电泳时从负极向正极移动。 抗体分子在电场中从正极向负极移动。
可溶性抗原与相应抗体结合后并不能产生凝集反应，怎样才能用肉眼就能观察到可溶性抗原与相应抗体的结合呢？
实验原理
间接凝集示意图:
间接凝集抑制示意图:
妊娠免疫诊断试验
孕妇尿中，绒毛膜促性腺激素（HCG）含量明显增高。（HCG是可溶 性抗原 ） 反之，非孕妇尿中HCG含量甚微，不足以消耗掉抗HCG抗体。
医学免疫学实验
医学免疫学实验
免疫学教研室
间接凝集抑制试验 沉淀反应
实验目的
掌握间接凝集抑制试验、沉淀反应的操作及结果的正确观察、判断. 熟悉间接凝集抑制试验、沉淀反应的原理. 了解间接凝集抑制试验、沉淀反应的用途.
间接凝集抑制实验
分类及概念
血清学反应: 在血清中进行的抗原抗体反应.
凝集反应: 在一定浓度的电解质环境中，颗粒性抗原和相应抗体反应能够产生肉眼可见的凝块。 注意以下几个方面: 第一: 参与反应的抗原必须是体积较大的颗粒性抗原，比如说细菌、红细胞等，都属于颗粒性抗原的范畴。 第二: 必须是相应的抗原抗体才能发生凝集反应 第三: 必须有电解质的参与 第四: 凝集块是一种肉眼能够见到的细小均匀块状物质。
试验材料
1、标本：非孕妇、待检尿 ２、试剂：兔抗人HCG血清、HCG致敏的乳胶颗粒 ３、器材：载玻片、滴管、玻棒
实验方法
加尿液标本 加兔抗人HCG免疫血清 加HCG致敏的乳胶颗粒 观察结果
待检尿
非孕妇尿
混匀静置2分钟
混匀静置2分钟
实验结果
火箭免疫电泳
单向扩散+电泳：将单向扩散与电泳技术相结合的一种方法。 沉淀峰的高度与抗原的浓度成正比。
对流免疫电泳的原理
蛋白质抗原在碱性环境中，其羧基发生电离而带负电荷，在电泳时从负极向正极移动。 抗体分子在电场中从正极向负极移动。
免疫学实验设计PPT课件
饲料与饮水
提供适宜的饲料和清洁饮水，保证动物获得足够的营养和水分。
动物观察
定期观察动物的生命体征和精神状态，及时发现和处理异常情况。
03
免疫学实验方法与技术
抗原制备与纯化
抗原制备
抗原的制备是免疫学实验的重要步骤，包括提取、纯化和修 饰等过程。
抗原纯化
通过物理、化学或生物学方法去除抗原中的杂质，提高抗原 的纯度和免疫原性。
免疫接种与免疫途径
免疫接种方式
包括注射、口服、鼻内等不同接种方式，选择合适的接种方式可以提高免疫效 果。
免疫接种剂量
免疫接种剂量对免疫效果有重要影响，剂量不足可能无法产生足够的免疫反应， 而剂量过大则可能引起免疫病理反应。
免疫检测方法与试剂
01
02
03
抗体检测
通过酶联免疫吸附试验 （ELISA）、免疫荧光等 技术检测抗体。
实验动物分组方法
随机分组
将实验动物随机分配到不同的实验组和对照组，保证 各组间动物数量和特征相似。
根据体重分组
根据实验动物的体重进行分组，确保各组间动物体重 相似。
根据性别分组
根据实验动物的性别进行分组，以排除性别对实验结 果的影响。
实验动物饲养管理
饲养环境
提供适宜的饲养环境，包括温度、湿度、光照和通风等。
建立与人类自身免疫性 疾病相似的动物模型， 用于研究疾病的发生和 发展过程。
通过检测免疫细胞、细 胞因子和抗体等指标， 了解免疫反应的特点和 变化规律。
对动物模型进行治疗试 验，评估不同药物对疾 病的治疗效果和安全性 。
探究自身免疫性疾病的 发病机制，为开发新的 治疗策略提供理论依据 。
案例四：移植免疫的实验设计
抗原检测
提供适宜的饲料和清洁饮水，保证动物获得足够的营养和水分。
动物观察
定期观察动物的生命体征和精神状态，及时发现和处理异常情况。
03
免疫学实验方法与技术
抗原制备与纯化
抗原制备
抗原的制备是免疫学实验的重要步骤，包括提取、纯化和修 饰等过程。
抗原纯化
通过物理、化学或生物学方法去除抗原中的杂质，提高抗原 的纯度和免疫原性。
免疫接种与免疫途径
免疫接种方式
包括注射、口服、鼻内等不同接种方式，选择合适的接种方式可以提高免疫效 果。
免疫接种剂量
免疫接种剂量对免疫效果有重要影响，剂量不足可能无法产生足够的免疫反应， 而剂量过大则可能引起免疫病理反应。
免疫检测方法与试剂
01
02
03
抗体检测
通过酶联免疫吸附试验 （ELISA）、免疫荧光等 技术检测抗体。
实验动物分组方法
随机分组
将实验动物随机分配到不同的实验组和对照组，保证 各组间动物数量和特征相似。
根据体重分组
根据实验动物的体重进行分组，确保各组间动物体重 相似。
根据性别分组
根据实验动物的性别进行分组，以排除性别对实验结 果的影响。
实验动物饲养管理
饲养环境
提供适宜的饲养环境，包括温度、湿度、光照和通风等。
建立与人类自身免疫性 疾病相似的动物模型， 用于研究疾病的发生和 发展过程。
通过检测免疫细胞、细 胞因子和抗体等指标， 了解免疫反应的特点和 变化规律。
对动物模型进行治疗试 验，评估不同药物对疾 病的治疗效果和安全性 。
探究自身免疫性疾病的 发病机制，为开发新的 治疗策略提供理论依据 。
案例四：移植免疫的实验设计
抗原检测
免疫学课件
造血干细胞
髓样祖细胞
朗格汉斯细胞
间质性树 突状细胞
髓样树突状 细胞
淋巴样祖细胞
淋巴样树 突状细胞
Properties
express high levels of both class II MHC molecules
more potent (有效的) antigen-presenting cells than macrophages and B cells
[ˈæ lərdʒis]
Monocytes (单核细胞)
Monocytes
Monocytes
Properties
circulate in the bloodstream for about 8h
then migrate into the tissues and differentiate into macrophages or
need to be activated before they can function as antigen-presenting cells
Mast cells (肥大细胞)
are formed in the bone marrow by hematopoiesis (造血作用)
are released into the blood be found in various tissues, including
结晶状的颗粒
Eosinophils
Properties
bilobed nucleus（双叶核,眼镜核） granulated cytoplasm that stains with the
acid dye eosin red（曙红） can migrate from the blood into the tissue
髓样祖细胞
朗格汉斯细胞
间质性树 突状细胞
髓样树突状 细胞
淋巴样祖细胞
淋巴样树 突状细胞
Properties
express high levels of both class II MHC molecules
more potent (有效的) antigen-presenting cells than macrophages and B cells
[ˈæ lərdʒis]
Monocytes (单核细胞)
Monocytes
Monocytes
Properties
circulate in the bloodstream for about 8h
then migrate into the tissues and differentiate into macrophages or
need to be activated before they can function as antigen-presenting cells
Mast cells (肥大细胞)
are formed in the bone marrow by hematopoiesis (造血作用)
are released into the blood be found in various tissues, including
结晶状的颗粒
Eosinophils
Properties
bilobed nucleus（双叶核,眼镜核） granulated cytoplasm that stains with the
acid dye eosin red（曙红） can migrate from the blood into the tissue
医学免疫学实验二 对流免疫电泳
➢ 火箭免疫电泳（roket immunoelectrophoresis， RIE）：即单扩+电泳。比较快，但影响因素多。
➢ 免疫电泳（immunoelectrophoresis，IEP）：即电 泳后进行双相琼脂扩散实验
➢ 免疫固定电泳（immunofixation electrophoresis） ：即区带电泳+沉淀反应
实验二
对流免疫电泳
实验目的
➢ 掌握对流免疫电泳技术的原理和方法 ➢ 巩固电泳槽、电泳仪的使用方法 ➢ 提高对抗原、抗体免疫反应的理解
实验原理
抗原（antigen，Ag）: 能诱导（活化或抑制）免疫系统产生免疫
应答，并与相应的抗体或致敏淋巴细胞进行特 异性结合（体内或体外）的物质。 抗体（antibody,Ab)：
➢ 主要用于检测标本中各种免疫球蛋白和血清中各种 补体成分的含量，敏感性很高。
双向琼脂扩散试验:
➢ 将抗原和抗体分别加入琼脂对应的孔中 ，二者会向四周扩散，在二者比例合适处 形成白色沉淀线。
免疫电泳技术 Immunoelectrophoresistechnique
➢ 对流免疫电泳（counter immunoelectrophoresis ，CIEP）：即双扩+电泳，具有快、高敏感等优点， 但分辨力低。
琼脂凝胶
pH 8.6
0.05M 巴比妥缓冲液:
巴比妥
1.84g
巴比妥钠 10.3g
加蒸馏水至1000ml
调pH至8.6
蛋白质在酸性溶液中易变性，在偏碱溶液中比较 稳定，所以蛋白质电泳大多用pH8.2～8.8的巴比 妥或硼酸缓冲液，在这种pH中，血清蛋白由于等 电点的原因一般都带负电荷。
在凝胶电泳中，首先应用的是琼脂电泳，具有下列优点： ➢ 琼脂含98-99%液体，近似自由电泳，但是样品的扩散度
➢ 免疫电泳（immunoelectrophoresis，IEP）：即电 泳后进行双相琼脂扩散实验
➢ 免疫固定电泳（immunofixation electrophoresis） ：即区带电泳+沉淀反应
实验二
对流免疫电泳
实验目的
➢ 掌握对流免疫电泳技术的原理和方法 ➢ 巩固电泳槽、电泳仪的使用方法 ➢ 提高对抗原、抗体免疫反应的理解
实验原理
抗原（antigen，Ag）: 能诱导（活化或抑制）免疫系统产生免疫
应答，并与相应的抗体或致敏淋巴细胞进行特 异性结合（体内或体外）的物质。 抗体（antibody,Ab)：
➢ 主要用于检测标本中各种免疫球蛋白和血清中各种 补体成分的含量，敏感性很高。
双向琼脂扩散试验:
➢ 将抗原和抗体分别加入琼脂对应的孔中 ，二者会向四周扩散，在二者比例合适处 形成白色沉淀线。
免疫电泳技术 Immunoelectrophoresistechnique
➢ 对流免疫电泳（counter immunoelectrophoresis ，CIEP）：即双扩+电泳，具有快、高敏感等优点， 但分辨力低。
琼脂凝胶
pH 8.6
0.05M 巴比妥缓冲液:
巴比妥
1.84g
巴比妥钠 10.3g
加蒸馏水至1000ml
调pH至8.6
蛋白质在酸性溶液中易变性，在偏碱溶液中比较 稳定，所以蛋白质电泳大多用pH8.2～8.8的巴比 妥或硼酸缓冲液，在这种pH中，血清蛋白由于等 电点的原因一般都带负电荷。
在凝胶电泳中，首先应用的是琼脂电泳，具有下列优点： ➢ 琼脂含98-99%液体，近似自由电泳，但是样品的扩散度
《医学免疫学实验》课件
《医学免疫学实验》PPT课 件
contents
目录
• 引言 • 实验材料与方法 • 实验结果与分析 • 结论与展望 • 参考文献
01
引言
实验目的
掌握医学免疫学实验 的基本原理和技术。
培养学生对医学免疫 学的兴趣和探究精神 。
了解免疫学在医学中 的应用和价值。
实验背景
医学免疫学是研究人体免疫系统 的结构和功能的科学，是医学领
实验结果一
通过ELISA方法检测了血清中IgG 的浓度，发现实验组与对照组之
间存在显著差异。
实验结果二
利用流式细胞术检测了T细胞亚 群的比例，发现实验组中CD4+ 和CD8+T细胞的比例与对照组有
所不同。
实验结果三
通过斑点试验检测了细胞因子IL2的产生，发现实验组细胞培养 上清中的IL-2浓度明显高于对照
文献
作者4，文章标题4，发表年份4，刊物名称4。
感谢您的观看
THANKS
流式细胞术
利用荧光标记的抗体检测细胞表面 或内部的抗原。
实验步骤
样本准备
采集实验动物或组织样 本，进行适当的处理和
固定。
免疫染色
按照实验方法要求，进 行抗体标记和抗原抗体
反应。
结果观察
通过显微镜或相关仪器 观察实验结果，记录数
据。
结果分析
对实验数据进行整理和 分析，得出结论。
03
实验结果与分析
实验结果
培养具备国际视野和创新能力的免疫 学人才，提升我国免疫学研究的国际 地位。
关注免疫学在疾病预防、诊断和治疗 中的应用，为人类健康事业做出贡献 。
05
参考文献
文献
作者1，文章标题1，发表年份1，刊物名称1。
contents
目录
• 引言 • 实验材料与方法 • 实验结果与分析 • 结论与展望 • 参考文献
01
引言
实验目的
掌握医学免疫学实验 的基本原理和技术。
培养学生对医学免疫 学的兴趣和探究精神 。
了解免疫学在医学中 的应用和价值。
实验背景
医学免疫学是研究人体免疫系统 的结构和功能的科学，是医学领
实验结果一
通过ELISA方法检测了血清中IgG 的浓度，发现实验组与对照组之
间存在显著差异。
实验结果二
利用流式细胞术检测了T细胞亚 群的比例，发现实验组中CD4+ 和CD8+T细胞的比例与对照组有
所不同。
实验结果三
通过斑点试验检测了细胞因子IL2的产生，发现实验组细胞培养 上清中的IL-2浓度明显高于对照
文献
作者4，文章标题4，发表年份4，刊物名称4。
感谢您的观看
THANKS
流式细胞术
利用荧光标记的抗体检测细胞表面 或内部的抗原。
实验步骤
样本准备
采集实验动物或组织样 本，进行适当的处理和
固定。
免疫染色
按照实验方法要求，进 行抗体标记和抗原抗体
反应。
结果观察
通过显微镜或相关仪器 观察实验结果，记录数
据。
结果分析
对实验数据进行整理和 分析，得出结论。
03
实验结果与分析
实验结果
培养具备国际视野和创新能力的免疫 学人才，提升我国免疫学研究的国际 地位。
关注免疫学在疾病预防、诊断和治疗 中的应用，为人类健康事业做出贡献 。
05
参考文献
文献
作者1，文章标题1，发表年份1，刊物名称1。
(免疫学教学课件)2抗原Ag
（三）丝裂原（mitogen）
1、概念：可致细胞发生有丝分裂的物质； 2、特点： （1）与淋巴细胞表面受体结合； （2）刺激静止淋巴细胞转化为淋巴母细胞，并
发生有丝分裂； （3）激活某一类淋巴细胞的全部克隆。
T有丝分裂原：PHA(植物血凝素), ConA(刀豆蛋白A) ；
B有丝分裂原：SPA(葡萄球菌蛋白A);
抗体
（五）共同抗原表位和交叉反应
（common epitope and cross-reaction）
1、共同抗原表位：不同抗原之间的相同或相似的抗原表位。
2、交叉反应：抗体或致敏淋巴细胞对具有相同或相似表位的 不同的抗原的反应。
四、影响抗原免疫应答的因素
（一）抗原方面
1、化学性质：蛋白质、多糖 2、分子量：>10kD，大＞小。 3、结构：复杂＞简单；苯环＞直链。 4、分子构象;空间构象影响抗原性 5、易接近性：被抗原受体接近的程度。 6、物理状态：聚合＞单体；颗粒性＞可溶性。
2、胸腺非依赖抗原--TI Ag
(thymus-independent antigen TI Antigen ）
不依赖Th细胞辅助即诱导体液 免疫应答。
TI-1 和 TI-2 抗 原
TI－1：含有B细胞丝裂原和重复B细胞表位，成熟或未成熟B 细胞均可发生应答，如LPS
TI－2：仅有高度重复的B细胞表位,造成BCR交联，仅能活 化成熟的B细胞；如荚膜多糖聚合缏毛素。
七、非特异性免疫刺激剂
（一）超抗原； （二）佐剂； （三）丝裂原
（一）超抗原（Superantigen, SAg ）
1、概念：
某些抗原性物质。其抗原作用不受MHC限制，无抗 原特异性，只要及低浓度，即可激活多克隆淋巴细胞 （2-20%），产生强烈的免疫应答。
免疫学全套PPT课件
Day 3
Day 5
Day 7
三.免疫学科逐渐形成(20世纪中叶至今)：
㈠ 对免疫系统结构与功能的认识逐步完善 免疫系统分为：
天然免疫系统(natural immune system), 又称固有免疫系统(innate immune system)或 非特异性免疫系统(non-specific immune System)
一．根据抗原性质：完全抗原、半抗原 二．根据抗原刺激B细胞产生抗体是否需要Th细
胞辅助： 胸腺依赖性抗原(thymus-dependent antigen, TD-Ag)：如：多数蛋白质抗原 胸腺非依赖性抗原(thymus-independent antigen, TI- Ag)：如：细菌脂多糖，聚合鞭 毛素
抗原的两种基本特性：
（1）免疫原性(immunogenecity)： 指抗原分子能够刺激机体产生免疫应答
(产生特异性抗体及免疫效应细胞)的性质。
（2）抗原性(antigenicity，又称免疫反应性)： 指抗原分子与免疫应答产物(抗体或免
疫效应细胞)发生特异性结合的性质。
完全抗原（complete antigen)： 具有免疫原性和抗原性的物质，如：蛋
寡糖重复单位。
G＋ 菌细胞壁结构
磷壁酸 肽聚糖 磷脂(细胞膜)
G- 菌细胞壁结构
脂多糖（LPS）
磷脂(外膜) 脂蛋白 肽聚糖
磷脂(内膜，细 胞膜)
脂 多 糖 的 结 构
脂类A
特异性多糖 （O抗原）
核心多糖 聚二糖
脂肪酸
细胞膜：位于细胞壁内侧，细胞浆外侧 构成成分：脂类、蛋白质和多糖
细胞浆（细胞质）： 内含有质粒、核糖 体、胞浆颗粒。
四．异嗜性抗原（heterophil antigen，又称 Forssman抗原）
医学免疫学全套PPT课件
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1
第一章 免疫学概论
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2
免疫学是一门古老又年轻的学科。
免疫学（Immunology）: 是研究机体免疫系统识别和清除有害生物
及其成分的应答过程及机制的科学；
是研究免疫系统对自身抗原耐受，防止自 身免疫病发生的科学；
是研究免疫功能异常与相应疾病发病机制 及其防治措施的科学。
特异性的物质基础是抗原表位或抗原决 定簇。
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37
一、表位或抗原决定簇
1.概念
表 位 （ epitope ） 或 抗 原 决 定 簇 （ antigenic determinant）是指存在于抗 原分子中决定抗原特异性的特殊化学基 团。其性质、数量和空间构象决定了抗 原的特异性。
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16
3. 免疫病理概念的形成
海葵触角的甘油提取液 狗 死亡 存活（少数）
（3~4周后注射1/20量）
立即死亡 （反常现象） 这种反常现象被称为“过敏反应”。
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17
三、 近代免疫学时期
抗体生成的克隆选择学说：
免疫细胞在分化成熟过程中，能随机地形 成多样性的细胞克隆（clone，即细胞系）。
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7
（二）适应性免疫（获得性免疫）
1. 特征 （1）个体出生后，由于接触抗原而获得。 （2）针对性强（特异性强），也称特异
性免疫。
（3）有多样性、记忆性、耐受性和自 限性。
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8
2. 组成 （1） 体液免疫 B细胞介导 （2） 细胞免疫 T细胞介导
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40
（2）顺序表位（决定簇） ①一段顺序相连的氨基酸序列，又称线性
1
第一章 免疫学概论
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2
免疫学是一门古老又年轻的学科。
免疫学（Immunology）: 是研究机体免疫系统识别和清除有害生物
及其成分的应答过程及机制的科学；
是研究免疫系统对自身抗原耐受，防止自 身免疫病发生的科学；
是研究免疫功能异常与相应疾病发病机制 及其防治措施的科学。
特异性的物质基础是抗原表位或抗原决 定簇。
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37
一、表位或抗原决定簇
1.概念
表 位 （ epitope ） 或 抗 原 决 定 簇 （ antigenic determinant）是指存在于抗 原分子中决定抗原特异性的特殊化学基 团。其性质、数量和空间构象决定了抗 原的特异性。
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3. 免疫病理概念的形成
海葵触角的甘油提取液 狗 死亡 存活（少数）
（3~4周后注射1/20量）
立即死亡 （反常现象） 这种反常现象被称为“过敏反应”。
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三、 近代免疫学时期
抗体生成的克隆选择学说：
免疫细胞在分化成熟过程中，能随机地形 成多样性的细胞克隆（clone，即细胞系）。
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7
（二）适应性免疫（获得性免疫）
1. 特征 （1）个体出生后，由于接触抗原而获得。 （2）针对性强（特异性强），也称特异
性免疫。
（3）有多样性、记忆性、耐受性和自 限性。
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2. 组成 （1） 体液免疫 B细胞介导 （2） 细胞免疫 T细胞介导
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40
（2）顺序表位（决定簇） ①一段顺序相连的氨基酸序列，又称线性
免疫学实验二 ELISA(双抗夹心法)ppt课件
9
1.已知抗原包被酶标板
2.2拍干
2.1弃去板内包被抗原
2.3加满洗涤液（重复三次）
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10
3.加样
（1）阳性对照：第1、2孔加 HBsAb阳性对照血清50μl； （2）阴性对照：第3、4孔加 HBsAb阴性对照血清50μl； （3）空白对照：第5孔加生理盐 水100μl； （4）余下各孔加待检血清50μl 。
该技术的特点是敏感性高，特异性强，操作简易，结果容易观察。
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2
实验原理：
• 免疫酶技术是利用酶标记抗体或抗原，以检测 相应抗原或抗体的一种免疫学标记技术。其原 理是酶与抗体或抗原结合后既不改变抗体或抗 原的特异性及免疫反应性，也不影响酶的催化 效能。当存在相应酶底物时，酶能催化产生有 颜色的产物，颜色的有无及深浅能反映相应的 抗原或抗体是否存在及其量的多少。
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11
4. 加酶标记的抗HBsAb抗体：除空白对照外各孔50μl，充分 混匀。将即时帖覆盖于反应板上，37℃孵育30min。
5. 弃去反应孔内液体，拍干，用洗涤液注满各孔、静置30秒、 再拍干，重复洗涤5 次。(操作同2)
6. 显色：各孔（包括空白对照）加底物A液50μl（1滴），底 物B液50μl（1滴），置37℃避光温育15min。
实验二、酶联免疫吸附试验
Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA
实验内容： 间接法
－－－测乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）
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实验原理：
酶联免疫吸附试验（ELISA）是将抗原、抗体的特异性反应与酶对底 物的高效催化作用相结合的一种敏感性很高的实验技术，可用于检测体 液中微量的特异性抗体或抗原。首先，抗原、抗体的特异性反应在一种 固相载体表面－聚苯乙烯微量反应板孔中进行，通过洗涤去除多余的游 离反应物；然后加入酶标记的抗体或酶标记的抗抗体，从而形成抗体－ 抗原－酶标抗体复合物（双抗体夹心法）或抗原－抗体－抗抗体复合物 （间接法）；此时加入酶底物和显色剂，在酶催化底物后，液体呈现显 色反应。液体显色的强弱与复合物中待测抗原或抗体的量呈正比，借此 可检测待测抗原或抗体的有无及含量。
医学免疫学ppt课件
超敏反应和自身免疫病等。
免疫学（immunology） 研究机体免疫系统结构和功能，以及有关疾病的免
疫学发病机制、诊断和防治的一门学科。
.
3
二、免疫学基本内容
（一）免疫系统的组成与结构 （二）免疫系统的功能 （三）免疫应答的类型 （四）特异性免疫应答及其特点
.
4
（一） 免疫系统（immune system, IS）的组成
3.耐受性
免疫细胞接受抗原（决定基）刺激
→对特定抗原（决定基）产生特异性不应答
→免疫耐受
.
13
三、免疫学发展简史
1．经验免疫学时期（16世纪~17世纪）
* 中国医学家用人痘苗预防天花
在明代隆庆年间（1567 ～ 1572），人痘苗已在我国广 泛应用；至 17 世纪，人痘苗接种预防天花的方法引起邻国 的注意，先后传入俄国、朝鲜、日本、土耳其、英国等地， 进而使人痘苗预防天花的方法得以推广和验证。此即经验 免疫学时期。它是人类认识机体免疫性的开端，为以后英 国医生 Jenner （琴纳）发明牛痘苗奠定了基础。
.
14
天花病人局部痂皮 鼻 儿童
中国古代“种人痘”
.
15
2.经典免疫学时期 （ 18－20世纪中叶）
这一时期，人们对免疫功能的认识由人体现象的观察进入 了科学实验时期。
*牛痘苗的发明（Jenner,1798)
Edward Jenner (1749-1823)
.
Jenner种牛痘图
16
*减毒疫苗的发明
1879 Louis Pasteur
19 世纪末，随着微生物学的发 展，法国免疫学家巴斯德 （Pasteur）和德国细菌学家郭 霍（Koch）在创立了细菌分离 培养技术的基础上，通过系统 地科学研究，利用物理、化学， 以及生物学方法获得了减毒菌 苗，并用于疾病的预防和治疗。 Pasteur 以高温培养法制备了炭 疽疫苗，用狂犬病毒在兔体内 经连续传代制备了狂犬病疫苗。 这些减毒疫苗的发明不但为实 验免疫学打下了基础，也为疫 苗的发展开辟了新局面。
免疫学（immunology） 研究机体免疫系统结构和功能，以及有关疾病的免
疫学发病机制、诊断和防治的一门学科。
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3
二、免疫学基本内容
（一）免疫系统的组成与结构 （二）免疫系统的功能 （三）免疫应答的类型 （四）特异性免疫应答及其特点
.
4
（一） 免疫系统（immune system, IS）的组成
3.耐受性
免疫细胞接受抗原（决定基）刺激
→对特定抗原（决定基）产生特异性不应答
→免疫耐受
.
13
三、免疫学发展简史
1．经验免疫学时期（16世纪~17世纪）
* 中国医学家用人痘苗预防天花
在明代隆庆年间（1567 ～ 1572），人痘苗已在我国广 泛应用；至 17 世纪，人痘苗接种预防天花的方法引起邻国 的注意，先后传入俄国、朝鲜、日本、土耳其、英国等地， 进而使人痘苗预防天花的方法得以推广和验证。此即经验 免疫学时期。它是人类认识机体免疫性的开端，为以后英 国医生 Jenner （琴纳）发明牛痘苗奠定了基础。
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14
天花病人局部痂皮 鼻 儿童
中国古代“种人痘”
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15
2.经典免疫学时期 （ 18－20世纪中叶）
这一时期，人们对免疫功能的认识由人体现象的观察进入 了科学实验时期。
*牛痘苗的发明（Jenner,1798)
Edward Jenner (1749-1823)
.
Jenner种牛痘图
16
*减毒疫苗的发明
1879 Louis Pasteur
19 世纪末，随着微生物学的发 展，法国免疫学家巴斯德 （Pasteur）和德国细菌学家郭 霍（Koch）在创立了细菌分离 培养技术的基础上，通过系统 地科学研究，利用物理、化学， 以及生物学方法获得了减毒菌 苗，并用于疾病的预防和治疗。 Pasteur 以高温培养法制备了炭 疽疫苗，用狂犬病毒在兔体内 经连续传代制备了狂犬病疫苗。 这些减毒疫苗的发明不但为实 验免疫学打下了基础，也为疫 苗的发展开辟了新局面。
免疫学实验课件：实验二直接凝集试验
实验二 凝集试验
一、目的要求
理解凝集反应的基本原理； 掌握玻片凝集反应的操作技术与结果
判定； 掌握试管凝集反应的操作技术与结果
判定。
二、凝集反应的原理
通常，细菌和红细胞等颗粒性抗原在悬液中带弱负电荷, 在悬 液中相互排斥而呈均匀的分散状态。 凝集试验的发生分两阶段,当特异抗体与相应抗原颗粒相遇时， 发生特异性的结合形成抗原抗体复合物，降低了抗原分子间的 静电排斥力。第二步在电解质的参与下进一步中和复合物外层 的电荷，从而聚集成较大的凝集块。
凝集反应的类型
两大类
玻片法：定性 直接凝集试验
试管法：定量
间接凝集试验
乳胶凝集试验 碳素凝集试验 间接血凝试验
三、实验材料
1. 玻板凝集试验
（1）玻片、移液枪、牙签等； （2）布氏杆菌平板凝集抗原、布氏杆菌标准阳性血清和阴性血清 （3）待被检血清
2. 试管凝集试验
（1）试管（1 ㎝×8 ㎝ ）、试管架、恒温箱、各规格移液枪等； （2）布氏杆菌试管凝集抗原及布氏杆菌阳性血清、阴性血清； （3）待被检血清； （4）灭菌0.5%石碳酸生理盐水。
四、操作方法
1. 玻板凝集试验
（1）在洁净玻片上，各加15-20ul布氏杆菌阳性血清、阴性 血清、待检血清与生理盐水。
（2）加入布氏杆菌平板抗原15-20ul，滴在血清附近，不 与血清接触。用牙签将血清与抗原混匀，轻轻摇动玻板使 液滴呈旋状运动。
阴性血清（ຫໍສະໝຸດ ）结果判定：待检 阳性 血清 血清
• 出现颗粒状或块状凝集者为阳性反应；
• 未出现凝集者为阴性反应。
生理盐水
2. 试管凝集试验
（1）取试管八支，按下表加入生理盐水； （2）取布氏杆菌血清进行梯度稀释； （3）加入布氏杆菌检测抗原； （4）充分20.35混匀，置37℃ 温箱24小时。
一、目的要求
理解凝集反应的基本原理； 掌握玻片凝集反应的操作技术与结果
判定； 掌握试管凝集反应的操作技术与结果
判定。
二、凝集反应的原理
通常，细菌和红细胞等颗粒性抗原在悬液中带弱负电荷, 在悬 液中相互排斥而呈均匀的分散状态。 凝集试验的发生分两阶段,当特异抗体与相应抗原颗粒相遇时， 发生特异性的结合形成抗原抗体复合物，降低了抗原分子间的 静电排斥力。第二步在电解质的参与下进一步中和复合物外层 的电荷，从而聚集成较大的凝集块。
凝集反应的类型
两大类
玻片法：定性 直接凝集试验
试管法：定量
间接凝集试验
乳胶凝集试验 碳素凝集试验 间接血凝试验
三、实验材料
1. 玻板凝集试验
（1）玻片、移液枪、牙签等； （2）布氏杆菌平板凝集抗原、布氏杆菌标准阳性血清和阴性血清 （3）待被检血清
2. 试管凝集试验
（1）试管（1 ㎝×8 ㎝ ）、试管架、恒温箱、各规格移液枪等； （2）布氏杆菌试管凝集抗原及布氏杆菌阳性血清、阴性血清； （3）待被检血清； （4）灭菌0.5%石碳酸生理盐水。
四、操作方法
1. 玻板凝集试验
（1）在洁净玻片上，各加15-20ul布氏杆菌阳性血清、阴性 血清、待检血清与生理盐水。
（2）加入布氏杆菌平板抗原15-20ul，滴在血清附近，不 与血清接触。用牙签将血清与抗原混匀，轻轻摇动玻板使 液滴呈旋状运动。
阴性血清（ຫໍສະໝຸດ ）结果判定：待检 阳性 血清 血清
• 出现颗粒状或块状凝集者为阳性反应；
• 未出现凝集者为阴性反应。
生理盐水
2. 试管凝集试验
（1）取试管八支，按下表加入生理盐水； （2）取布氏杆菌血清进行梯度稀释； （3）加入布氏杆菌检测抗原； （4）充分20.35混匀，置37℃ 温箱24小时。
微生物免疫学实验二：细菌生长测定
目的：測量細菌在液體批次培養(batch culture)中的生長，繪製生長曲線圖並計算生長速率。
原理：測量細菌在液體培養基中的生長速度，必須先測出細菌族群在培養期間不同時間點的密度或數量，再繪圖或以電腦軟體求出族群增長的速率。
而測量族群密度常用的方法有三：(1)直接計數法在顯微鏡下算出固定體積培養液內的細胞數目，由於細菌細胞太小，容易與溶液中的灰塵混淆，此方法大多用於酵母菌、單細胞藻類等較大型的真核微生物；(2)混濁度利用分光光度計以波長590 - 600 nm的可見光測量細菌培養液的混濁度，通常以OD590表示，其數值在0.9以下時與細菌細胞密度呈直線關係，讀取數值超過0.9時則先做10倍稀釋再測量混濁度，獲得的細菌密度乘以10即得到原本的密度；(3)平盤測定法將細菌培養液作連續10倍稀釋後取一定體積塗在平盤培養基上，培養後計算培養基上的菌落數目以推算出原本的細胞密度。
第三個方法將在下一次實驗中操作，本次實驗使用第二個方法，為最便利快速而常用的細菌生長測量法。
材料：(每組)i.含5 ml LB (tryptone 1%, yeast extract 0.5%, NaCl 0.5%)培養基的白色旋蓋試管× 6ii.含5 ml 以NH4+為氮源的葡萄糖低限培養基(glucose minimal medium) (glucose 2%, Na2HPO4 1.3%, KH2PO4 0.3%, NaCl 0.05%,NH4Cl 0.1%)的白色旋蓋試管× 3iii.含5 ml 以NO3- 為氮源的葡萄糖低限培養基(glucose minimal medium) (glucose 2%, Na2HPO4 1.3%, KH2PO4 0.3%, NaCl 0.05%,KNO3 0.19%)的白色旋蓋試管× 3iv.過夜大腸桿菌培養液(培養在以NH4Cl為氮源的葡萄糖低限培養基中) × 1v.無菌水100 ml × 1vi.空懸蓋試管4支vii.P1000微量吸管一支、1000 ml微量吸管尖ㄧ盒、標籤紙8個、透明膠帶、小燒杯一個全班：分光光度計步驟：1.在裝有LB培養液的四支試管蓋上貼上標籤，註明組別，並分別標示為A、B、C與D。
医学免疫学：实验2 凝集反应(ABO血型测定)
ELISA(酶联免疫吸附试验) 凝集反应(ABO血型测定)
凝集反应
原理:
颗粒性抗原与相应抗体发生特异性结合，并 在一定条件下形成肉眼可见的凝集物。
应用：检测未知Ag或Ab
分类：
1.直接凝集反应： 玻片法---ABO血型鉴定、菌种鉴定
试管法---肥达反应
2.间接凝集反应
ABO血型测定
实验目的: 检测待测者ABO血型
Hale Waihona Puke 步骤：1、加入待检标本50ul； 同时设阴性对照和阳性对照 (分别各加1滴)
go 2、加入酶结合物1滴/每孔，混匀，封板，
37℃30min 3、弃去每孔液体, 用洗涤液洗涤每孔，5秒×5
次， 拍干板
4、每孔加显色液A、B各1滴, 混匀, 37 ℃1015min
5、肉眼观察颜色深浅 （+：蓝色； —：无色）
加酶标二抗
+
-
抗原抗体 复合物
游离
洗涤
+
-
加底物
每孔加底物 A and B 各一滴 混匀， 37 ℃ 10 min
实验结果
颜色变化或OD（吸光度）值 酶标板
思考
ELSA实验中，待测标本是否含有乙 肝表面抗体？为什么？
ABO血型鉴定实验中，待测者的血型 属哪一型？为什么？
血型鉴定在临床中有什么应用？
实验目的:
检测血清标本中有无HBsAb
材料:
48孔ELISA板
阳性对照血清（HBsAb） 阴性对照血清 酶标二抗
乙肝病毒表面抗体 诊断试剂盒
洗涤液
底物A和B
微量加样器，待测血清标本等
实验方法
微孔板已包被HBsAg
HBsAg
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
凝集反应
原理:
颗粒性抗原与相应抗体发生特异性结合，并 在一定条件下形成肉眼可见的凝集物。
应用：检测未知Ag或Ab
分类：
1.直接凝集反应： 玻片法---ABO血型鉴定、菌种鉴定
试管法---肥达反应
2.间接凝集反应
ABO血型测定
实验目的: 检测待测者ABO血型
Hale Waihona Puke 步骤：1、加入待检标本50ul； 同时设阴性对照和阳性对照 (分别各加1滴)
go 2、加入酶结合物1滴/每孔，混匀，封板，
37℃30min 3、弃去每孔液体, 用洗涤液洗涤每孔，5秒×5
次， 拍干板
4、每孔加显色液A、B各1滴, 混匀, 37 ℃1015min
5、肉眼观察颜色深浅 （+：蓝色； —：无色）
加酶标二抗
+
-
抗原抗体 复合物
游离
洗涤
+
-
加底物
每孔加底物 A and B 各一滴 混匀， 37 ℃ 10 min
实验结果
颜色变化或OD（吸光度）值 酶标板
思考
ELSA实验中，待测标本是否含有乙 肝表面抗体？为什么？
ABO血型鉴定实验中，待测者的血型 属哪一型？为什么？
血型鉴定在临床中有什么应用？
实验目的:
检测血清标本中有无HBsAb
材料:
48孔ELISA板
阳性对照血清（HBsAb） 阴性对照血清 酶标二抗
乙肝病毒表面抗体 诊断试剂盒
洗涤液
底物A和B
微量加样器，待测血清标本等
实验方法
微孔板已包被HBsAg
HBsAg
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
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影响抗原抗体反应的因素
抗原抗体结合过程可分为两个阶段：一 是特异性结合阶段，二是可见反应阶段。
1、抗原、抗体的浓度、比例
2、反应时间
3、电解质酸碱度 中性或弱碱性
4、温度 5、酸碱度
37℃ pH 6-8
正常人体内环境
第二节 抗原抗体反应类型
* 抗原抗体的检测 （一）检测原理
抗原与相应抗体可发生特异性结合，并在外界条件 影响下出现肉眼可见或借助仪器可检测的各种现象，如 凝集或沉淀。借此可用已知抗体（或抗原）检测未知抗 原（或抗体），因所采用的抗体常存在于血清中，故称 为血清学反应。
1、凝集反应
细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结 合后形成凝集团块，此类反应称为凝集反应。
（1）直接凝集
红细胞
+ 抗红细胞抗 体（IgM）
用于：ABO血型测定 细菌鉴定
凝集
（2）间接凝集
常 用用于载：体钩：端绵螺羊旋+ 红 体细 病胞 、、 血聚 吸苯 虫乙 病烯、乳类胶风等湿。关节
激素炎抗的体辅助诊激断素。分子
原，利用标记技术的高度敏感性进行抗原抗体
检测。
可见
胶体金
Ag Ag Ag AgAg
Ag Ag
Ag
Ag
Ag Ag
优点:灵敏度高、快速、可定性、定量、定位。
分类：根据标记物的不同，免疫标记技 术可分为免疫荧光技术、免疫酶技术、放射 免疫技术、胶体金和化学发光技术。
（1）免疫荧光技术
常用荧光素：异硫氰酸荧光素（FITC） 和藻红蛋白（PE）。
敏感性（每升） ＜1～2mg ＜1mg ＜0.5mg ＜0.1mg ＜5～10mg 1μg 1μg 0.1μg 0.1μg ＜1pg ＜1ng ＜1pg
实验操作1：双抗夹心法检测特定抗原
• 检测抗原最常用ELISA， • 适用于检测具有至少两个抗原决定簇的多价抗原。
• 原理：
1、利用连接于固相载体上的抗体和酶标抗体分别与样 品中被检测抗原分子上两个抗原决定簇结合，形成固 相抗体-抗原-酶标抗体免疫复合物。 2、复合物的形成量与待测抗原的含量成正比。 3、测定复合物中的酶作用于加入的底物后生成的有色 物的量(OD值)，即可确定待测抗原含量。
不凝集
激素包被的 乳胶颗粒
+ 激素抗体
凝集
（3）间接凝集抑制试验
+ +
激素分子
用于：早孕的检测
不凝集
2、沉淀反应
可溶性抗原与相应抗体在有适量电解质存在下，出 现肉眼可见的沉淀现象，称为沉淀反应。
该反应多用半固体琼脂凝胶作为介质进行琼脂扩散 或免疫扩散，即可溶性抗原 与抗体在凝胶中扩散，在比 例合适处相遇形成可见的白 色沉淀现象。
第一节 抗原抗体反应概述
抗原抗体反应概念
抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗原 抗体反应(antigen-antibody reaction)。
抗原抗体反应原理
抗原抗体结合反应是抗原决定簇和抗体分 子超变区之间的相互作用，是一种分子表面 的特异的可逆的弱结合力。这些弱结合力只 能在极短距离内才能发生效应。
（1）单向免疫扩散
（2）双向免疫扩散
（3）免疫电泳
（4）免疫比浊
（1）单向免疫扩散
不同浓度的标准血清 待测血清（Ag）
Ab
（对数）浓 度
c’
d’
d’ 直径
火箭电泳
（2）双向免疫扩散
Ag
Ab
将抗原与抗体分别
加入琼脂凝胶的小孔中， 抗原抗体会自由地向四 周扩散，在它们相遇的 位置形成一条沉淀线。 是一种定性检测法。
直接法
间接法
冲洗
冲洗1
冲洗2
Ag Ag Ag AgAg
Ag Ag
Ag
Ag
Ag Ag
Ag Ag Ag AgAg
Ag Ag
Ag
Ag
Ag Ag
可通过荧光显微镜或流式细胞仪观察荧光。
（2）免疫酶技术
将抗原抗体反应的特异性与酶催化底物的高效 性相结合,通过酶作用于底物后的显色反应判定结果。 常用方法:酶标免疫组化法及酶联免疫吸附法等
双抗夹心法 （sandwich ELISA）
实验材料：
1、固相载体在ELISA测定过程中作为吸附剂和容器。 • ELISA板的特点是可以同时进行大量标本的检测，
并可在特制的比色计上迅速读出结果。
2、酶结合物：酶与抗体或抗原联结的产物
具有酶促反应，显示出生物放大作用。
常用的酶为辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)和碱性磷酸 酶(alkaline phosohatase, AP)。
Ag1
Ag1
Ab1
Ag1
Ag2
Ab1、2
Ag1
Ag1、2
Ab1、2
（3）免疫电泳
待测Ag
+
Ag1
Ag2 Ag3
-
Ab槽
（4）免疫比浊
Ag’
已知Ag
根据不同量抗原抗体 反应所形成的浊度不同判 断样品中未知抗原的含量。
3 、免疫标记技术
免疫标记技术是用荧光素、酶、放射性
核素、胶体金或化学发光物质等标记抗体或抗
常用标记酶:辣根过氧化物酶(HRP)
邻苯二胺
HRP 催化
显黄色EAg NhomakorabeaOPD
E
HRP
Ab
酶联免疫吸附试验(ELISA)
将抗原抗体反应在固相上进行,通过洗涤除去 游离成分.目前是应用最广的免疫酶技术。
双抗体夹心法
间接法
E
E
冲洗
待测为抗原
待测为抗体
（3）放射免疫技术(RIA)
定义：用放射性核素标记抗原或抗体进行 免疫检测的方法。
Ag Ag
Ag Ag
Ag
Ag Ag
Ag
（二）抗原或抗体的检测实际意义
• 评价机体免疫功能状况 • 相关疾病诊断 • 了解相关疾病发病机制 • 相关药物及激素浓度监测
（三）抗原抗体反应的基本检测方法
根据抗原的性质、出现结果的现象、参与反应的成 分的不同，抗原抗体反应可分为凝集反应、沉淀反应、 免疫标记技术等。
常用标记物：125I和131I
特点：灵敏度高（pg），故用于测量微量 物质，如胰岛素、生长激素、甲状腺素、孕酮 等激素、吗啡、地高辛、IgE等。
但放射性核素有一定危害性，使得放射 性免疫激素的应用受到一定限制。
免疫学测定方法敏感性比较
测定方法 单向免疫扩散试验 双向免疫扩散试验
火箭电泳 对流电泳 免疫电泳 凝集试验 被动血凝试验 血凝抑制试验 补体结合试验 放射免疫分析法 酶联免疫吸附试验 定量免疫荧光分析
医学免疫学 实验二
抗原抗体反应及免疫学标记技术
生物病原及免疫学系 2015年9月
主要内容
讨论：
第一节 抗原抗体反应概述 概念、原理、特点及影响因素
第二节 抗原抗体反应类型 示教： 单向琼脂扩散干板、双向琼脂扩散干板、 火箭电泳干板、对流免疫电泳干板
操作：
夹心ELISA检测特定抗原 胶体金试纸检测HCG 细菌的凝集实验