微生物学

微生物学1，列文虎克微生物学的开拓者首次发现微生物，最早纪录肌纤维、微血管中血流。

是微生物学的先驱者。

2，巴斯德否定微生物自然发生说，是微生物学的奠基人。

3，科赫，世界病原细菌学的奠基人和开拓者。

结构革兰阳性菌革兰阴性菌（肽聚糖组成聚糖骨架，四肽侧链，五肽桥聚糖骨架，四肽侧链肽聚糖层数可达50层仅1到2层）肽聚糖含量50%-80% 5%-10%脂质一般无含量少磷壁酸有无蛋白质0-含量较少含量较高（革兰氏阳性菌的细胞壁有丰富的肽聚糖和磷壁酸。

细胞壁较厚。

而革兰氏阳性菌这些东西含量少。

细胞壁较薄。

）5，细菌细胞的特殊结构。

1.荚膜：荚膜是某些细菌在细胞壁外包绕的一层界限分明，且不易被洗脱的粘稠性物质，其厚度≥0.2μm，为荚膜；厚度<0.2μm，为微荚膜。

荚膜对碱性染料的亲和性低，不易着色，普通染色只能看到菌体周围有一圈未着色的透明带；如用墨汁作负染色，则荚膜显现更为清楚。

其成分多为糖类，用荚膜染色法于光学显微镜下可见菌体外一层肥厚的透明圈。

其功能是：①对细菌具有保护作用；②致病作用；③抗原性；④鉴别细菌的依据之一。

2.鞭毛：鞭毛是由细胞质伸出的蛋白性丝状物，其长度通常超过菌体数倍。

弧菌、螺菌及部分杆菌具有鞭毛。

鞭毛纤细，长3～20μm，直径仅l0～20nm，不能直接在光学显微镜下观察到。

经特殊的鞭毛染色使鞭毛增粗并着色后，才能在光学显微镜下看到，也可直接用电子显微镜观察到。

按鞭毛数目和排列方式，可分为：①周鞭毛，菌体周身随意分布的许多鞭毛；②单鞭毛，位于菌体一侧顶端仅l根鞭毛；③双鞭毛，位于菌体两端各l根鞭毛；④丛鞭毛，位于菌体极端有数根成丛的鞭毛。

其功能是：①鉴定价值，鞭毛是细菌的运动器官，细菌能否运动可用于鉴定。

②致病作用：鞭毛运动能增强细菌对宿主的侵害，因运动往往有化学趋向性，可避开有害环境或向高浓度环境的方向移动。

③抗原性：鞭毛具有特殊H抗原，可用于血清学检查。

3.菌毛：许多革兰阴性菌和个别阳性菌，细菌表面有极其纤细的蛋白性丝状物，称为菌毛。

菌毛比鞭毛更细，且短而直，硬而多，须用电镜才能看到。

菌毛可分为普通菌毛和性菌毛两类。

（1）普通菌毛：该菌毛遍布整个菌体表面，形短而直，约数百根。

普通菌毛是细菌的粘附器官，细菌藉菌毛的粘附作用使细菌牢固粘附在细胞上，并在细胞表面定居，导致感染。

（2）性菌毛：性菌毛比普通菌毛长而粗，仅有l～10根，中空呈管状。

通常把有性菌毛的细菌称为雄性菌（F+菌）。

无性菌毛的细菌称为雌性菌（F-菌）。

带性菌毛的细菌具有致育性，细菌的毒力质粒和耐药质粒都能通过性菌毛的接合方式转移。

性菌毛能将F+菌的某些遗传物质转移给F-菌，使后者也获得F+菌的某些遗传特性。

细菌的抗药性与某些细菌的毒力因子均可通过此种方式转移。

4.芽胞：芽胞是某些细菌（主要是革兰阳性杆菌）在一定条件下，细胞质、核质脱水浓缩而形成的圆形或椭圆形的小体。

由于芽胞对热、干燥、辐射、化学消毒剂等理化因素具有强大抵抗力，故在医学实践中具有重要意义：①抵抗力强的芽胞可在自然界存活多年，成为某些疾病的潜在传染源；②特别注意能形成芽胞的细菌污染了病房、手术室等，必须封闭房间进行彻底灭菌；③因芽胞对理化因素的抵抗力强，故可以芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标；④细菌芽胞的形状、大小、位置等随菌种而异，具有重要鉴别价值。

其功能是：①芽胞的抵抗力很强；②芽胞在适宜条件可以发育成相应的细菌；③鉴定细菌的依据之一。

6，支原体，立克次氏体和衣原体比较（见p40）7，酵母菌的繁殖方式和生活史有人把只进行无性繁殖的酵母菌称作“假酵母”，而把具有有性繁殖的酵母称作“真酵母”。

（一）无性繁殖1．芽殖（budding）芽殖是酵母菌最常见的繁殖方式。

在良好的营养和生长条件下，酵母生长迅速，这时，可以看到所有细胞上都长有芽体，而且在芽体上还可形成新的芽体，所以经常可以见到呈簇状的细胞团。

芽体的形成过程是这样的：在母细胞形成芽体的部位，由于水解酶对细胞壁多糖的分解，使细胞壁变薄。

大量新细胞物质——核物质（染色体）和细胞质等在芽体起始部位上堆积，使芽体逐步长大。

当芽体达到最大体积时，它与母细胞相连部位形成了一块隔壁。

隔壁的成分是由葡聚糖、甘露聚糖和几丁质构成的复合物。

最后，母细胞与子细胞在隔壁处分离。

于是，在母细胞上就留下一个芽痕（budscar），而在子细胞上就相应地留下一个蒂痕（birthsear）。

在光学显微镜下无法直接看到酵母菌的芽痕，如果用钙荧光素（calcafluor）或樱草灵（primulin）等荧光染料染色，就可在荧光显微镜下看到它。

当然若在扫描电镜下摄影，就可清晰地观察到芽痕和蒂痕的细致结构。

根据酿酒酵母细胞表面留下芽痕的数目，就可确定某细胞曾产生过的芽体数，因而也可用于测定该细胞的年龄。

在任何酵母群体中，50％的细胞是由最近一代的细胞分裂所产生的，故在其表面仅有一个蒂痕而无芽痕；在其余50％细胞中，25％具有一个芽痕，12.5％具有两个芽痕，而12.5％则具有两个以上的芽痕。

2．裂殖（fission）酵母菌的裂殖与细菌的裂殖相似。

其过程是细胞伸长，核分裂为二，然后细胞中央出现隔膜，将细胞横分为两个相等大小的、各具有一个核的子细胞。

进行裂殖的酵母菌种类很少，例如裂殖酵母属的Schizosaccharomycesoctosporus（八孢裂殖酵母）等。

3．产生掷孢子等无性孢子掷孢子（ballistospore）是掷孢酵母属等少数酵母菌产生的无性孢子，外形呈肾状。

这种孢子是在卵圆形的营养细胞上生出的小梗上形成的。

孢子成熟后，通过一种特有的喷射机制将孢子射出。

因此，如果用倒置培养皿培养掷孢酵母并使其形成菌落，则常因其射出掷孢子而可在皿盖上见到由掷孢子组成的菌落模糊镜像。

此外，有的酵母如Candidaalbicans等还能在假菌丝的顶端产生厚垣孢子（chlamydospore）。

（二）有性繁殖酵母菌是以形成子囊（ascus）和子囊孢子（ascospore）的方式进行有性繁殖的。

它们一般通过邻近的两个性别不同的细胞各自伸出一根管状的原生质突起，随即相互接触、局部融合并形成一个通道，再通过质配、核配和减数分裂，形成4个或8个子核，每一子核与其附近的原生质一起，在其表面形成一层孢子壁后，就形成了一个子囊孢子，而原有营养细胞就成了子囊。

酵母菌的生活史。

上代个体经一系列生长、发育阶段而产生下一代个体的全部过程，称为该生物的生活史或生命周期。

各种酵母的生活史可分为三种类型：1. 单倍体型2. 双倍体型3. 单双倍体型单双倍体型以啤酒酵母为代表特点：单倍体营养细胞和双倍体营养细胞均可进行芽殖。

营养体既可以单倍体形式也可以双倍体形式存在；在特定条件下进行有性生殖。

单倍体和双倍体两个阶段同等重要,形成世代交替单倍体型以八孢裂殖酵母为代表特点:营养细胞是单倍体；无性繁殖以裂殖方式进行；双倍体细胞不能独立生活，因为双倍体阶段短，一经生成立即减数分裂。

双倍体型以路德类酵母为代表特点：营养体为双倍体，不断进行芽殖，双倍体营养阶段长，单倍体的子囊孢子在子囊内发生接合。

单倍体阶段仅以子囊孢子形式存在，故不能独立生活。

9，锁状联合锁状联合(clampconnection)：担子菌的次生菌丝每一个细胞都有二个核，其中一个核来自母本，一个来自父本，当双核细胞进行细胞分裂时，在二个核之间处生一个短小弯曲的分枝，核移动，一个核进入钩，一个留在菌丝。

两个核分裂后，钩中保留一个核，菌丝中二个核一往前一个往后移，钩状突起向下弯曲与细胞壁接触溶化，分枝基部生分隔膜（分隔中间有孔道），在原分支外形成一隔膜，产生一个新细胞双核体，在分隔处保留一个桥形结构称锁状联合。

定义：为两核细胞形成分裂产生双核菌丝体的一种特有形式。

常发生在菌丝顶端，开始时在细胞上产生突起，并向下弯曲，与下部细胞连接，形如锁状。

锁状联合的意义：保证每个菌丝细胞内都含有两个不同性别的核。

为进行有性生殖，通过核配形成担子打下基础。

10,病毒的对称体制:螺旋对称,二十面体对称,复合对称11.噬菌体的繁殖：吸附，侵入，增值，成熟，裂解自外裂解：大量噬菌体吸附在同一宿主细胞表面并释放众多溶菌酶，最终因外在的原因而导致细胞裂解。

12，一步生长曲线潜伏期指噬菌体的核酸侵入宿主细胞以后至第一个成熟噬菌体粒子装配前的一段时间。

它又可以分为两个阶段：1、隐晦期：指在潜伏期前期认为的（用氯仿等）裂解宿主细胞以后，此裂解液仍无侵染性的一段时间，这时细胞正处于复制噬菌体核酸和合成蛋白质衣壳的阶段；2、胞内累积期：即潜伏期的后期，指在隐晦期后，若认为的裂解细胞，其裂解液已呈现侵染性的一段时间，这意味着细胞内已经开始装配噬菌体粒子，此时电镜可以观察到。

裂解期紧接在潜伏期后的宿主细胞迅速裂解、溶液中噬菌体粒子急速增加的一个阶段。

噬菌体或者其它病毒粒因只有个体装配而不能存在个体生长，再加上若宿主细胞裂解的突发性，因此，从理论上来说，其裂解是瞬间出现的。

但是事实上因为宿主群体中各个细胞的裂解不可能是同步的，故出现较长的裂解期。

平稳期指感染后的宿主细胞已经全部裂解，溶液中噬菌体的数目达到最高峰，在这个时期，每一个宿主细胞释放的平均噬菌体粒子数即为裂解量。

13，温和噬菌体：凡能引起溶源性的噬菌体即称温和噬菌体。

溶源性（溶源现象）：温和噬菌体的侵入相应宿主细胞后，由于前者的基因组整合到后者的基金组上，并随后者的复制而进行同步复制，这种温和噬菌体的侵入并不引起宿主细胞的裂解，此即称为溶源性。

溶源菌,含有温和噬菌体的寄主细菌称为溶源菌.14，类亚病毒因子的比较（P82）15,4种运输营养物质方式的比较（ｐ９４）１６，培养基的４个原则和４种方法４个原则：目的明确，营养协调，理化适宜，经济节约４种发法；生态模拟，借鉴文献，精心设计，试验比较１７，生物固氮：生物固氮是指固氮微生物将大气中的氮气还原成氨的过程固氮生物都属于个体微小的原核生物，所以，固氮生物又叫做固氮微生物。

根据固氮微生物的固氮特点以及与植物的关系，可以将它们分为自生固氮微生物、共生固氮微生物和联合固氮微生物三类。

1、自生固氮微生物光合固氮微生物能进行光合作用，以二氧化碳为碳源、光合产物为能源进行固氮作用的微生物。

有蓝细菌（见蓝藻门）中的许多属种（如念珠藻属、鱼腥藻属等）和光合细菌中的红螺菌属以及绿硫菌属等。

化能自养固氮微生物有些化能自养微生物（如氧化亚铁硫杆菌等）能以二氧化碳、亚铁氧化物和分子态氮为碳、能、氮源。

异养固氮微生物进行异养生活，以适宜的有机碳化合物为碳源和能源，满足生活和固氮的需要。

这个生理、生态群包括许多种类，如固氮菌科的所有属、芽孢杆菌属、梭菌属的一些种、固氮螺菌属、肠杆菌科的一些属种、反硫化细菌、产甲烷细菌和其他一些异养细菌的种类。