两种猪蓝耳病抗体检测试剂盒的比较与临床应用
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引 起 的危 害 养猪 业 的主 要疾 病 之 一 ，主 要表 现 为 母猪 繁 殖 障碍 及不 同 日龄猪 份 仔猪 血清样 本 ， 日龄２ ０ ～５ ０ 天 。２ 个猪 场 使用Ｐ ＲＲＳ ＲＨ９ ８ 株 疫 苗免疫 ，２ 个猪 场使 用 Ｊ ＸＡ１ 一Ｒ株 疫 苗免 疫 ，２ 个 猪场 使 用ＣＨ一１ Ｒ株
将－２ ０ ℃保 存 的 血清 样 本解 冻 ，混 匀 。然
后 ，将 两 个试 剂 盒 放 置 室温 ３ ０ ｍｉ ｎ以上 恢复 室 温 。２ ０ ０ 份样 本 用 两个试 剂 盒 平行 检测 ，２ 天 内
完成 。选择 弱 阳性和 中等 强度 阳性样本 各 １ 份， 用 于精 密 性评 价 ，每 天 上午 和 下 午 各 做４ 个 重 复 ，连 续３ 天１ ２ 个重 复 ，计 算平 均值和 标准 差 ，
变异系 数Ｃ Ｖ＝标准差／ 平 均值 。
８ ４
Ｐ Ｉ ＧＳ Ｔ ｏ ＤＡＹ Ｍａ ｒ ｃ ｈ ２ ０ １ ５
１ ． ４ Ｉ Ｄ Ｅ Ｘ Ｘ Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｘ ３ 抗体检测试剂盒操作方法
在相 应 的 孔 中 加 入 １ Ｏ Ｏ Ｌ阴 阳对 照 和 ４ ０
疫 苗免 疫 ，所 有样 本 均 为免 疫 两次 之后 采 集静
脉血分 离血清 ，血清状 态 良好 。
蓝耳 病 病 毒在 猪 群 中持 续感 染 ，可破 坏 各个 日
龄 猪 的免 疫系 统 功 能 ，使猪 群 对 其他 病原 体 易
材 料 ：４ 个 血 清转 化 盘 样本 ，每 个 盘包 含
１ ． １材 料
样 本 ：河 南 省 漯 河 市 动 物 疫 病 预 防控 制 中 ￣ ， ２ ０ １ ４ 年３ 了６ 月在６ 个猪 场 采 集 的 １ ６ ８ 份 血 清 样本 ，其 中包 括 ５ ６ 份 母 猪血 清 样 本 ， 日龄均 大 于２ ０ ０ 天 ；４ ７ 份 育肥 猪 血清 样本 ， 日龄 ５ Ｏ ～１ ０ ０
Ｐ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｃ ｅ 实践 试验园 地
两种猪 蓝耳病抗体检测试 剂盒的比较与临床应 用
本研究 采用两种不 同的猪蓝耳病抗体检 测试 剂盒对 比检测 了１ ６ ８ 份 不 同疫苗免疫 的３ 个猪群样 本、４ 个血 清转化盘样本 ，评价两试剂盒 的灵敏 度和特异性 ，结果 显示两试剂盒对 １ ６ ８ 份样本 的总符合率为
一
６ ５ ０ ｎ ｍ处测定 样本 以及 对 照的吸 光度值 。样 本／ 阳 性对 照 比率 的计算 （ Ｓ ／ Ｐ ）大 于 或等于 Ｏ ． ４ ，
对于 规 模化 猪场 来说 ，猪 群 的 日常 抗体 水
平监测是选 择疫苗 、评 估免疫程 序合理性 、掌握 猪群健康状 态的重要 手段 ，同时也从侧面反 映猪
场 管理是 否合 理 ，因此是 养 殖 企业 疫 病 监测 工
１ ． ２检 测试 剂 盒
美 国Ｉ ＤＥ ＸＸ Ｐ ＲＲＳ Ｘ３ 抗体 检 测试 剂盒 １
５ 份 样 本 ，分 别 在 仔猪 抗 体 检 测 为 阴 性 时注 射 ＲＨ９ ８ 株 和Ｊ ＸＡ１ －Ｒ株疫 苗 ，间隔３ ～７ 天抽 取静 脉血 分 离血 清 ，用 于 比较 两试 剂 盒 的检 测 灵敏 度。
感 ，严 重 影 响其 他疫 苗 的免 疫 效 果 ，极 大 降低 猪群 的生产 性能 ，被ＯＩ Ｅ（ 世界 动物 卫生组 织 ） 列为必 须报告 的动物 传染 病 。
９ ５ ． ２ ％，不一致的样本主要集 中在仔猪群体 ，两试剂 盒对 不同疫 苗 免疫的检测结果没有显著差异。
文ｌ 安利 民 潘燕燕
杜娟
乔飞
崔建 凯
李彩霞
河南省漯河市动物疫病预 防控制 中心
猪 繁 殖 与呼 吸 综 合 征 （ Ｐ ＲＲ Ｓ ）又称 蓝 耳
病 ，是 由猪繁 殖 与呼 吸综合 征病 毒 （ Ｐ ＲＲＳ Ｖ）
间接免 疫荧光 实验 （ Ｉ Ｆ Ａ）、抗体 中和实验和 酶
联免疫 吸附实验 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） ，与 其他 方法相 比 ，
Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ检测操作 简便 ，易于标准 化 ，快速敏 感 ， 非常适合大规模 流行 病调查和免疫监测 。
１ 。 ３ 实验 方法
１材 料 与 方 法
倍稀释好的样本 ，１ ８ ～２ ５ ℃孵 育 ３ Ｏ士２ ａｉ ｒ ｎ， 洗板后加入 １ ０ ０ Ｌ酶 标 抗 体 ， １ ８ ～２ ５ ℃孵 育 ３ Ｏ土２ ｍｉ ｎ，洗 板 后 加 入 １ ０ ０ Ｌ底 物 溶 液 ， １ ８ ～２ ５ ℃ 孵育 １ ５ ±ｌ ｍｉ ｎ，加 终止 液 １ ０ ０ Ｌ，在
２结 果 分 析
２ ． １ １ ６ ８ 份样本两试剂盒检测结果 比较分析
６ 个猪场采集 的１ ６ ８ 份 血 清 样 本 ，用 两 个 试 剂 盒 平 行 检 测 ，共有 ８ 份样 本 检 测 结 果 不 一 致 ，总符 合 率为 ９ ５． ２ ％。其 中母 猪样 本 ５ ６ 份， 两 试 剂 盒 检 测 均 为 阳性 ，符 合 率 为 １ ０ Ｏ ％。育 肥 猪 样 本４ ７ 份 ，Ｉ ＤＥＸＸ检 测 阳性 ４ ４ 份 ，赛 孚 检 测 阳 性４ ５ 份 ，１ 份 样 本 检 测不 一 致 ，符 合 率 为９ ７． ９ ％。仔 猪 样 本 ６ ５ 份 ，Ｉ ＤＥＸＸ检 测 阳 性 ４ ２ 份 ，赛 孚检 测 阳 性 ４ ４ 份 ，７ 份 样 本 检 测 不
盒 ，５ ． ９ ６ Ｔ ／ 盒 ，包 被 基 因 重 组 Ｐ ＲＲＳ Ｖ美 洲 株 和
作 的重点 。 目前用 于Ｐ ＲＲＳ Ｖ抗体检 测 的方法 有
欧洲株 Ｎ Ｐ结构蛋 白，间接 两步法反 应模式 。 郑州赛孚 生物 工程有限公 司Ｐ ＲＲＳ Ｖ Ｉ ｇ Ｇ抗 体检 测试 剂 盒 ２ 盒 ，２ ９ ６ Ｔ／ 盒 ，包被 基 因重 组 ＰＲＲＳ Ｖ美 洲 株 和 欧洲 株ＮＰ 结 构 蛋 白 ，间接 两 步法反 应模式 ，批号２ ０ １ ４ ０ ５ ０ ６ 。
将－２ ０ ℃保 存 的 血清 样 本解 冻 ，混 匀 。然
后 ，将 两 个试 剂 盒 放 置 室温 ３ ０ ｍｉ ｎ以上 恢复 室 温 。２ ０ ０ 份样 本 用 两个试 剂 盒 平行 检测 ，２ 天 内
完成 。选择 弱 阳性和 中等 强度 阳性样本 各 １ 份， 用 于精 密 性评 价 ，每 天 上午 和 下 午 各 做４ 个 重 复 ，连 续３ 天１ ２ 个重 复 ，计 算平 均值和 标准 差 ，
变异系 数Ｃ Ｖ＝标准差／ 平 均值 。
８ ４
Ｐ Ｉ ＧＳ Ｔ ｏ ＤＡＹ Ｍａ ｒ ｃ ｈ ２ ０ １ ５
１ ． ４ Ｉ Ｄ Ｅ Ｘ Ｘ Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｘ ３ 抗体检测试剂盒操作方法
在相 应 的 孔 中 加 入 １ Ｏ Ｏ Ｌ阴 阳对 照 和 ４ ０
疫 苗免 疫 ，所 有样 本 均 为免 疫 两次 之后 采 集静
脉血分 离血清 ，血清状 态 良好 。
蓝耳 病 病 毒在 猪 群 中持 续感 染 ，可破 坏 各个 日
龄 猪 的免 疫系 统 功 能 ，使猪 群 对 其他 病原 体 易
材 料 ：４ 个 血 清转 化 盘 样本 ，每 个 盘包 含
１ ． １材 料
样 本 ：河 南 省 漯 河 市 动 物 疫 病 预 防控 制 中 ￣ ， ２ ０ １ ４ 年３ 了６ 月在６ 个猪 场 采 集 的 １ ６ ８ 份 血 清 样本 ，其 中包 括 ５ ６ 份 母 猪血 清 样 本 ， 日龄均 大 于２ ０ ０ 天 ；４ ７ 份 育肥 猪 血清 样本 ， 日龄 ５ Ｏ ～１ ０ ０
Ｐ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｃ ｅ 实践 试验园 地
两种猪 蓝耳病抗体检测试 剂盒的比较与临床应 用
本研究 采用两种不 同的猪蓝耳病抗体检 测试 剂盒对 比检测 了１ ６ ８ 份 不 同疫苗免疫 的３ 个猪群样 本、４ 个血 清转化盘样本 ，评价两试剂盒 的灵敏 度和特异性 ，结果 显示两试剂盒对 １ ６ ８ 份样本 的总符合率为
一
６ ５ ０ ｎ ｍ处测定 样本 以及 对 照的吸 光度值 。样 本／ 阳 性对 照 比率 的计算 （ Ｓ ／ Ｐ ）大 于 或等于 Ｏ ． ４ ，
对于 规 模化 猪场 来说 ，猪 群 的 日常 抗体 水
平监测是选 择疫苗 、评 估免疫程 序合理性 、掌握 猪群健康状 态的重要 手段 ，同时也从侧面反 映猪
场 管理是 否合 理 ，因此是 养 殖 企业 疫 病 监测 工
１ ． ２检 测试 剂 盒
美 国Ｉ ＤＥ ＸＸ Ｐ ＲＲＳ Ｘ３ 抗体 检 测试 剂盒 １
５ 份 样 本 ，分 别 在 仔猪 抗 体 检 测 为 阴 性 时注 射 ＲＨ９ ８ 株 和Ｊ ＸＡ１ －Ｒ株疫 苗 ，间隔３ ～７ 天抽 取静 脉血 分 离血 清 ，用 于 比较 两试 剂 盒 的检 测 灵敏 度。
感 ，严 重 影 响其 他疫 苗 的免 疫 效 果 ，极 大 降低 猪群 的生产 性能 ，被ＯＩ Ｅ（ 世界 动物 卫生组 织 ） 列为必 须报告 的动物 传染 病 。
９ ５ ． ２ ％，不一致的样本主要集 中在仔猪群体 ，两试剂 盒对 不同疫 苗 免疫的检测结果没有显著差异。
文ｌ 安利 民 潘燕燕
杜娟
乔飞
崔建 凯
李彩霞
河南省漯河市动物疫病预 防控制 中心
猪 繁 殖 与呼 吸 综 合 征 （ Ｐ ＲＲ Ｓ ）又称 蓝 耳
病 ，是 由猪繁 殖 与呼 吸综合 征病 毒 （ Ｐ ＲＲＳ Ｖ）
间接免 疫荧光 实验 （ Ｉ Ｆ Ａ）、抗体 中和实验和 酶
联免疫 吸附实验 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） ，与 其他 方法相 比 ，
Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ检测操作 简便 ，易于标准 化 ，快速敏 感 ， 非常适合大规模 流行 病调查和免疫监测 。
１ 。 ３ 实验 方法
１材 料 与 方 法
倍稀释好的样本 ，１ ８ ～２ ５ ℃孵 育 ３ Ｏ士２ ａｉ ｒ ｎ， 洗板后加入 １ ０ ０ Ｌ酶 标 抗 体 ， １ ８ ～２ ５ ℃孵 育 ３ Ｏ土２ ｍｉ ｎ，洗 板 后 加 入 １ ０ ０ Ｌ底 物 溶 液 ， １ ８ ～２ ５ ℃ 孵育 １ ５ ±ｌ ｍｉ ｎ，加 终止 液 １ ０ ０ Ｌ，在
２结 果 分 析
２ ． １ １ ６ ８ 份样本两试剂盒检测结果 比较分析
６ 个猪场采集 的１ ６ ８ 份 血 清 样 本 ，用 两 个 试 剂 盒 平 行 检 测 ，共有 ８ 份样 本 检 测 结 果 不 一 致 ，总符 合 率为 ９ ５． ２ ％。其 中母 猪样 本 ５ ６ 份， 两 试 剂 盒 检 测 均 为 阳性 ，符 合 率 为 １ ０ Ｏ ％。育 肥 猪 样 本４ ７ 份 ，Ｉ ＤＥＸＸ检 测 阳性 ４ ４ 份 ，赛 孚 检 测 阳 性４ ５ 份 ，１ 份 样 本 检 测不 一 致 ，符 合 率 为９ ７． ９ ％。仔 猪 样 本 ６ ５ 份 ，Ｉ ＤＥＸＸ检 测 阳 性 ４ ２ 份 ，赛 孚检 测 阳 性 ４ ４ 份 ，７ 份 样 本 检 测 不
盒 ，５ ． ９ ６ Ｔ ／ 盒 ，包 被 基 因 重 组 Ｐ ＲＲＳ Ｖ美 洲 株 和
作 的重点 。 目前用 于Ｐ ＲＲＳ Ｖ抗体检 测 的方法 有
欧洲株 Ｎ Ｐ结构蛋 白，间接 两步法反 应模式 。 郑州赛孚 生物 工程有限公 司Ｐ ＲＲＳ Ｖ Ｉ ｇ Ｇ抗 体检 测试 剂 盒 ２ 盒 ，２ ９ ６ Ｔ／ 盒 ，包被 基 因重 组 ＰＲＲＳ Ｖ美 洲 株 和 欧洲 株ＮＰ 结 构 蛋 白 ，间接 两 步法反 应模式 ，批号２ ０ １ ４ ０ ５ ０ ６ 。