分子生物学实验室常用仪器及使用方法

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分子生物学实验室仪器使用说明书

分子生物学实验室仪器使用说明书

分子生物学实验室仪器使用说明书

一、引言

分子生物学实验室仪器的使用是进行基因研究和分析的重要环节,正确的仪器操作和维护对于保证实验结果的准确性具有至关重要的作用。本说明书旨在提供对分子生物学实验室仪器的正确使用方法和维护技巧的指导,以确保实验室工作的顺利进行。

二、常用仪器

1. 基因扩增仪

基因扩增仪是分子生物学实验室常用的仪器之一,其中最常见的是PCR仪。以下是PCR仪的使用步骤:

- 将待扩增的DNA模板、引物和试剂添加至PCR管或96孔板中;

- 根据所需的扩增程序,在PCR仪面板上设置合适的温度和时间参数;

- 启动PCR仪,开始扩增;

- 扩增结束后,及时取出试管或孔板,并进行下一步实验操作。

2. 凝胶电泳仪

凝胶电泳仪主要用于观察DNA、RNA或蛋白质的迁移情况以及分子大小的测定。以下是凝胶电泳仪的使用步骤:

- 准备所需的琼脂糖凝胶,并注入到电泳槽中;

- 将待检测的样品混合液加入到电泳槽中的样品孔中;

- 在电泳槽两侧连接正负极电源,并设置合适的电压和时间参数;

- 启动电源,进行电泳;

- 电泳结束后,取出凝胶,进行染色或进一步分析。

3. 离心机

离心机用于分离混合物中的固体颗粒和液体,是分子生物学实验室必备的仪器之一。以下是离心机的使用步骤:

- 将待离心的样品均匀加入离心管中,并保持离心管的平衡;

- 将离心管放入离心机转盘的相应位置,并注意转盘的平衡;

- 根据离心速度和时间要求,设置合适的参数;

- 启动离心机,开始离心过程;

- 离心结束后,小心取出离心管,注意避免离心管的倾斜或颠倒。

三、常见问题及处理方法

实验常用仪器的主要用途和使用方法

实验常用仪器的主要用途和使用方法

实验常用仪器的主要用途和使用方法实验室是科学研究和教学的重要场所,各种仪器设备在实验中扮演着关键角色。在这篇文章中,我们将介绍一些实验常用仪器的主要用途和使用方法。

一、显微镜

显微镜是实验室中最常见的仪器之一、显微镜主要用于观察微小物体的结构和特性。它可以放大细胞、细菌、植物和动物组织等微观物质。使用显微镜时,首先需要将待观察的样本放置在载玻片上,然后用调焦旋钮将样本调焦到清晰图像,在低倍镜下初步观察,再切换到高倍镜进行详细观察。

二、色谱仪

色谱仪广泛用于分析和检测混合物中的化学成分。色谱仪可以通过将混合物分离成各个成分,从而确定各个组分的含量。常见的色谱仪包括气相色谱仪和液相色谱仪。使用色谱仪时,首先将混合物通过气流或溶剂将其分离出来,然后在探测器中测定各个组分的浓度。

三、分光光度计

分光光度计是用于测量物质吸光度的仪器。它可以分析和测定溶液中物质的浓度,并通过与标准曲线进行比较来确定样品中成分的含量。使用分光光度计时,首先需要设置合适的波长和吸光度值范围,然后将待测溶液放入光束中测量吸收的光线强度。

四、天平

天平是测量物质质量的仪器。它通过测量两个物体之间的力的差异来

确定物体的质量。天平广泛用于化学实验和药学制剂的制备中。使用天平时,首先需要将待测物体放在天平盘上,然后调整天平的精确度,读取其

质量。

五、离心机

离心机用于分离液体中的固体颗粒或悬浮液中的液体。离心机基于离

心力的作用原理,通过迅速旋转样品来分离样品中的组分。使用离心机时,首先将样品加入离心管中,然后将离心管放入离心机的转子中,再选择适

分子生物学实验教案

分子生物学实验教案
4. 离心机:TGL-16G 台式高速离心机,最大转速 20000rpm,主要用于核酸提取时蛋白质 的沉淀和有机相与水相的分层,PCR 检测的瞬时离心。
5. 微量取液器:主要用于精确量取微量液体体积和核酸水相的转移。 6. 匀浆器:5ml、10ml 玻璃匀浆器。
主用于组织细胞的破碎。 7. 凝胶成像分析系统
3
1. 真空加热干燥箱:核酸在硝酸纤维素膜和尼龙膜上固定,用于杂交实验。 2. 电泳凝胶干燥箱:电泳后的凝胶进行脱水干燥的仪器,一般可将凝胶干燥到一些玻
璃纸上,干燥后的凝胶易于保存。 3. 液氮冷冻干燥:适用于活性蛋白质样品的干燥与结晶。 4. 真空泵:许多实验都需要抽真空。如:乙醇沉淀后核酸样品的干燥,电泳凝胶的干
①电泳仪:HV-3000 型高度三恒多用电泳仪(恒压、恒流、恒功率) ②电泳槽:水平式两种。 12.微波炉:主要用于琼脂糖的快速溶解。
【小测验】
1.可调式微量取液器的使用方法?使用该取液器的注意事项? 2.分子生物学实验室的常规仪器设备有哪几大类?简单说明。 3.蒸馏水与去离子水的区别?PCR 技术需要哪种纯度的水?
主用于核酸样品琼脂糖凝胶和 PCR 电泳结果的紫外观察和照像。 8. PCR 仪:PTC-200 基因扩增仪
体外扩增核酸的仪器 9. 蒸汽消毒锅:用于实验用试剂、器皿、用具等的灭菌清毒
有电加热式、电炉加热式两种。 10. 超净台:JJT-1300 型洁净工作台,侧流式。

分子生物学科耗材及仪器

分子生物学科耗材及仪器

分子生物学科耗材及仪器

以下是一些常见的分子生物学科耗材及仪器:

1. 实验耗材:

- 移液器和吸头:用于准确量取液体。

- 离心管和离心机:用于分离和沉淀细胞、核酸和蛋白质等。

- 培养皿和培养箱:用于细胞培养和微生物培养。

- PCR 管和 PCR 仪:用于聚合酶链式反应(PCR)实验。

- 电泳槽和电泳仪:用于核酸和蛋白质的电泳分离。

- 试剂瓶和移液器:用于储存和分配试剂。

- 一次性手套和实验服:用于保护实验人员的安全。

2. 实验仪器:

- 紫外可见分光光度计:用于测定核酸和蛋白质的浓度。

- 凝胶成像系统:用于观察电泳结果。

- 实时荧光定量 PCR 仪:用于定量检测基因表达。

- 离心机:用于分离和沉淀细胞、核酸和蛋白质等。

- 移液器:用于准确量取液体。

- 生物安全柜:用于处理危险的生物样本,提供安全的实验环境。

这些耗材和仪器是分子生物学实验中常用的工具,它们的选择和使用将取决于具体的实验需求和研究目的。在进行分子生物学实验时,正确选择和使用合适的耗材及仪器是确保实验成功和结果准确性的重要因素。

分子生物学常用仪器介绍2-文档资料

分子生物学常用仪器介绍2-文档资料

METTLER TOLEDO AG285 天平
天平种类
• • • • • 分析天平 电子天平 精密电子天平 托盘天平 砝码
工作原理
• 天平是称量物体质量的衡器。 • 常用天平都采用单杠杆结构,运用 “杠杆平衡时加在等力臂上的力相 等”这一原理制成。
• 电子天平是用电磁力平衡被称物体 重力的天平。
如何选择天平
• 用一台实际标尺分度值d为1mg,检定标尺分 度值e为10mg,最大称量为200g的Mettler电 子天平,用来称量7mg的物体,这样是不能得 出准确结果的。 • 在《JJG98-90非自动天平试行检定规程》中 规定,最大允许误差与检定标尺分度值“e” 为同一数量级,此台天平的最大允许误差为 1e,显然不能称量7mg的物体 。
Fluorescence image, DNA in blue and Microtubules in green
细胞增殖试剂盒 Cy5-连接的抗-BrdU 来检测细胞增 殖
CypHer 5 荧光素 酸度敏感的荧光素,用于活细胞受体 激活/内陷测定
CyDye荧光-连接的二抗,用于固 定细胞测定
细胞培养中显微镜的运用
• 细胞数量记录 • 细胞形态观察 • 细胞动力学记录
NIKON TE2000-U 倒置荧光显微镜
工作原理
• 荧光显微镜是利用一个高发光效率 的点光源,经过滤色系统发出一定 波长的光(如紫外光3650入或紫蓝光 4200入)作为激发光,激发标本内的 荧光物质发射出各种不同颜色的荧 光后,再通过物镜和目镜的放大进 行观察。

分子生物学实验室仪器操作简介

分子生物学实验室仪器操作简介

2010
分 子实 生验
物 9学
注意事项:
1、离心机在运转时,不得移动离心机,不要打开门盖。
2、安放离心机的台面应坚实平整,四只橡胶机脚都应与 台面接触和均匀受力,以免产生振动。
3、离心管加液要平衡,若加液差异过大运转时会产生大 的振动,此时应停机检查,使加液符合要求,离心试管必 须对称放入。
4、若运转时有离心试管破裂,会引起较大振动应立即停 机处理。
➢基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品
的分离制备实验中都离不开低温离心技术
➢本实验室所用离心机:台式高速离心机( Thermo ),配有
角式转头:24×1.5ml;极限转速13000rpm ;台式低温高速
离心机(sigma),极限转速20000rpm。
2010
分 子实 生验
物 8学
台式高速离心机使用步骤
2010
分 子实 生验
物 15 学
系统简介:
系统可以通过紫外/可见光分析装置及透光扫描仪直接 获得核酸、蛋白质凝胶电泳图像。系统配置有 SmartView生物电泳图像分析软件,可以进行密度扫 描、密度定量、分子量计算等电泳分析。此外,该系统 含有多种图像滤波器,可降低图像的噪音,从而获得较 清晰的图像。
PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域,
如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医

生物化学实验设备使用指南

生物化学实验设备使用指南

生物化学实验设备使用指南实验室是生物化学研究的重要场所,而实验设备的正确使用对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。本指南旨在帮助初学者正确、安全地使用生物化学实验设备,以提高实验效率和保障个人安全。

一、常用实验设备

1. 水浴锅:用于固定温度恒温加热。

2. 离心机:用于离心沉淀、离心分离。

3. 分光光度计:用于测量吸光度,常用于测量DNA/RNA浓度。

4. PCR仪:用于核酸扩增实验。

5. 培养箱:用于培养微生物、细胞。

6. pH计:用于测量溶液的酸碱度。

7. 电泳仪:用于核酸、蛋白电泳分析。

8. 冷冻机:用于保存试剂和样品。

二、实验设备的正确使用方法

1. 在使用水浴锅前,确保水的加热速度和温度符合实验要求,不要使用过高的温度。

2. 使用离心机时,不可超过其最大承载限制,避免出现不平衡导致的震动。

3. 分光光度计使用时,先校准仪器,避免背景干扰对测量结果产生

影响。

4. PCR仪使用前检查反应管是否密封,避免反应出现泄漏。

5. 培养箱中应定期清洁和消毒,避免细菌感染交叉污染。

6. 在使用pH计时,避免电极受到损坏,使用后应清洁干净并进行

存放。

7. 电泳仪使用时,注意电解液浓度和电压设置,确保实验安全进行。

8. 冷冻机设置恰当的温度,避免温度过高导致样品变质。

三、实验设备的安全使用注意事项

1. 实验过程中需穿戴实验服、手套、护目镜等防护用具,严格遵守

实验室安全规定。

2. 注意不可在设备工作状态下对设备进行维修保养,避免发生意外

事故。

3. 严禁未经许可私自调节实验设备参数或操作,避免损坏设备或影

分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作

分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作

分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作

一、验室的常规仪器、设备

(一) 温度控制系统:

1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具

备不同控温级别的冰箱,最常使用的有:4℃、-20℃、-80℃冰箱。

4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。

-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。

-80℃适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温

处理消化液等的保存。

0-10℃的冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。

2.液氮罐:有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯

化的样品等,要求速冻和长期保存在超低温环境下,就需要一个液

氮罐(-196℃)具有经济、省力和较好地保持细胞生物学特性的优点。

3.培养箱:37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。

CO2培养箱适用于培养各种细胞,可恒定地提供一定量的CO2

(通常5%),用来维持培养液的酸度(pH值)。

37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。

4. 水浴锅:用于保温。

25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验,各种生物化学酶反应

等试验的保温。

25-100℃水浴箱用于常规试验。

5. 烘箱:主用于烘干实验器皿,有些需要温度高些,有些需要

温度低些。用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干,

有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。

(二)水的净化装置:随着分子生物学的飞速发展,许多实验

对水纯度的要求越来越高。

1. 蒸馏水皿:单蒸水常难以满足实验要求。双蒸水、三蒸水配液,许多实验要去离子水。

多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质,不能完全除去水中溶解的

实验室常用仪器和常用研究方法

实验室常用仪器和常用研究方法

实验室常用仪器和常用研究方法

常用仪器包括显微镜、天平、离心机、恒温培养箱、分光光度计等。显微镜用于放大微观物体,天平用于测量物质的质量,离心机用于离

心分离混合物,恒温培养箱用于提供恒定的温度环境,分光光度计用

于测量物质的吸光度。常用研究方法包括PCR、西方印迹、流式细胞术、酶联免疫吸附试验等。PCR用于复制DNA片段,西方印迹用于检

测特定蛋白质,流式细胞术用于分析细胞表面标记物,酶联免疫吸附

试验用于测定特定分子的含量。这些常用仪器和研究方法在实验室中

起着至关重要的作用,帮助科研人员开展各种实验和研究。

关于分子生物学实验室常用仪器设备简介(精)

关于分子生物学实验室常用仪器设备简介(精)

实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介

实验室主要仪器,设备的简介及使用方法

微量移液器

微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器,其装有直接读数容量计。

微量移液器有多种规格,在移液器量程范围内能连续调节读数。移液器常见的四种规格分别是:

0.5~10μl(读数窗显示0.5~10.0,每转1档为0.1μl);

10~100μl(读数窗显示10.0~100, 每转1档为1μl);

20~200μl(读数窗显示20~200, 每转1档1μl);

100~1000μl(读数窗显示100~1000, 每转1档为5μl).

量液的操作步骤:

1.将微量移液器装上吸头(不同规格的移液器用不同的吸头)

2.将微量移液器按钮轻轻压至第一停点;

3.垂直握持微量移液器,使吸嘴浸入液样面下几毫米,千万不要将吸嘴直接插到液体底部;4.缓慢、平稳地松开控制按钮,吸上样液。否则液体进入吸嘴太快,导致液体倒吸入移液器内部,或吸入体积减少;

5.等一秒钟后将吸嘴提离液面

6.平稳地把按钮压到第一停点,再把按钮压至第二停点以排出剩余液体;

7.提起微量移液器,然后按吸嘴弹射器除去吸嘴。

量液操作注意问题:

1.未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。

2.一定要在允许量程范围内设定容量,千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围,否则会造成损坏。

3.不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。

4.不要用大量程的移液器移取小体积样品。

5. 移液器使用完后,将刻度调到最大刻度,收藏。

低温台式高速离心机

离心机的分类

低速:每分钟几千转

高速:每分钟1 ~ 3万转

分子生物学实验室需要的仪器配置

分子生物学实验室需要的仪器配置

1培养箱在分子生物学试验中,有很多反应都是在特定温度下进行的,这时就需要一个控温的装置.例如:用于细菌的平板培养,我们通常设定为37℃于培养箱倒置培养;其他分子生物学实验如酶切等需要25℃,30℃,37℃等条件.

2冰箱冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器.分子生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存,有些要求是负20度保存,实验人员一定要看清试剂的保存条件,放置在恰当的温度下保存.具体来说,不同温度下保存的物品如下:

a.4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等.

b.-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等.

c.-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液,感受态等的保存.

d.0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验.

3摇床摇床是实验室常用仪器,一般有常温型和低温型两种.对于分子生物学实验室,如果能配置低温型摇床,就可以适应不同的实验需求.例如:用于大肠杆菌,酵母菌等生物工程菌种的振荡培养及蛋白的诱导表达,培养通常为28度和37度,诱导表达需要20-37度;在感受态的制备过程中,需要有18度的温度控制;用于蛋白凝胶的染色脱色时振荡,常温使用;用于大肠杆菌常规转化时振荡复苏,常为37度.对于控制温度低于室温时,我们需要低温型摇床来控温.

4水浴锅水浴锅也是一种控温装置,水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分.例如,用于42度的大肠杆菌转化时的热激反应;用于DNA杂交过程中水浴控温.

5烘箱烘箱是用于灭菌和洗涤后的物品烘干.烘箱有不同的控温范围,用户可以根据实验需求进行选择.例如,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干;用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干.

分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作

分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作

分子克隆
总结词
分子克隆是一种将外源DNA片段插入到载体DNA中,并在宿主细胞中进行复制 和表达的过程。
详细描述
分子克隆的基本步骤包括载体DNA的制备、限制性酶切、连接、转化和筛选等。 所需的仪器设备包括研磨仪、离心机、PCR仪和电泳仪等。
基因表达分析
总结词
基因表达分析是一种检测特定基因在 不同条件下的表达水平的技术。
DNA提取是分子生物学实验中的基础操作,用于 从生物样本中分离出DNA。
详细描述
DNA提取通常包括破碎细胞、释放DNA、去除杂 质和纯化DNA等步骤。常用的仪器设备包括研磨 仪、离心机、磁力架和PCR仪等。
PCR扩增
总结词
PCR扩增是一种通过循环加热和冷却过程,将特定的DNA片段在体外大量扩增的方法。
详细描述
PCR扩增的基本步骤包括模板准备、加样、变性、退火、延伸和最终延伸等。所需的仪器设备 包括PCR仪、电泳仪和凝胶成像系统等。
凝胶电泳
总结词
凝胶电泳是一种分离和检测DNA或 RNA片段的技术,通过电场作用使 带电分子在凝胶中移动。
详细描述
凝胶电泳可用于分析DNA片段的大小 、检测ຫໍສະໝຸດ Baidu因突变和比较基因表达等。 所需的仪器设备包括电泳仪、电源、 制胶器和凝胶成像系统等。
分子生物学实验室的
常规仪器设备及有关
操作

分子生物学常用实验方法与基本仪器操作

分子生物学常用实验方法与基本仪器操作

分子生物学实验常用方法与仪器
1.1 灭菌方法
微生物
杀灭几类主要微生物的湿热条件
营养细胞
孢子或芽孢
酵母菌
50-60℃,5分钟
霉菌
62℃,30分钟
细菌 (中温细菌) 50-70℃,10分钟
病毒
60℃,30分钟
70-80℃,5分钟
80℃,30分钟 2-800分钟,100℃;或 120℃,5-12分钟
分子生物学实验常用方法与仪器
分子生物学常用实验方法与基本仪器操作
Nobel medal
Half a pound of 23-karal gold. 2.5 inches across
分子生物学发展简史 近半个世纪以来
分子生物学发展简史 近半个世纪以来
1.1支撑学科的掘起
分子生物学发展简史
Matthias Schleiden
原理:因为湿热中菌体吸水,蛋白质容易凝固 所有的细菌繁殖体。但杀死芽胞则需一
。蛋白质凝固时所需温度与其含水量成反比关系 至数小时。如在水中加入1%碳酸钠即
,即蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低;湿 可提高沸点,增强杀灭芽胞作用,同时
热的蒸气有潜热存在。湿热的穿透力比干热大。 又可防止金属器械生锈。如水中加2~

分子生物学发展简史
时间 1983 1989
得主 巴巴拉·麦克林托克 悉尼·奥尔特曼&托马斯·切赫

生物学实验教学中的仪器使用指南

生物学实验教学中的仪器使用指南

生物学实验教学中的仪器使用指南实验是生物学教学中至关重要的一环,而仪器的正确使用则是实验

顺利进行和结果准确可靠的关键。本文将为您提供生物学实验教学中

常见仪器的使用指南,帮助您在实验中正确操作仪器,获得准确的实

验结果。

一、显微镜的使用

显微镜是生物学实验中不可或缺的仪器之一,它能帮助我们观察微

小的细胞和组织结构。下面是使用显微镜的步骤:

1. 准备显微镜:首先需要将显微镜放在平整的台面上,确保其稳固。调节镜头高度,使镜头离玻片的距离适中。

2. 安装玻片样本:取出已经准备好的玻片样本,并在其上方滴上一

滴显微镜油。轻轻将玻片放置在显微镜的镜台上。

3. 照明和调节:打开光源,通过调节光源亮度使得样本清晰可见。

同时,通过旋转调节镜头,使样本在显微镜中清晰聚焦。

4. 观察和记录:使用目镜观察样本,并通过旋转目镜调节焦距,使

得目标细胞或组织清晰可见。同时,可以使用显微镜配备的目镜标尺

对样本进行测量。观察完毕后,及时记录所看到的结构和现象。

二、离心机的使用

离心机是生物实验中常用的分离和沉淀物质的仪器,适用于细胞离心、DNA提取等实验。以下是使用离心机的步骤:

1. 准备样品:将待离心的液体样品均匀放置在离心管中,并确保管

盖紧闭,以防止样品散落。同时,将离心管放在离心仪的转子中。

2. 选择合适的离心速度:根据实验需求,选择合适的离心速度和时间。通常,较小的离心力可用于较轻微的分离,而较高的离心力适用

于更大的颗粒。

3. 开始离心:关闭离心机的盖子并设定离心速度和时间。按下启动

按钮,离心机将开始旋转。

4. 离心结束和取样:离心时间完成后,离心机会自动停止旋转。小

分子生物学实验室常用仪器设备简介精

分子生物学实验室常用仪器设备简介精

实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介

实验室主要仪器,设备的简介及使用方法

微量移液器

微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器,其装有直接读数容量计。

微量移液器有多种规格,在移液器量程范围内能连续调节读数。移液器常见的四种规格分别是:

~10μl(读数窗显示~,每转1档为μl);

10~100μl(读数窗显示~100, 每转1档为1μl);

20~200μl(读数窗显示20~200, 每转1档1μl);

100~1000μl(读数窗显示100~1000, 每转1档为5μl).

量液的操作步骤:

1.将微量移液器装上吸头(不同规格的移液器用不同的吸头)

2.将微量移液器按钮轻轻压至第一停点;

3.垂直握持微量移液器,使吸嘴浸入液样面下几毫米,千万不要将吸嘴直接插到液体底部;4.缓慢、平稳地松开控制按钮,吸上样液。否则液体进入吸嘴太快,导致液体倒吸入移液器内部,或吸入体积减少;

5.等一秒钟后将吸嘴提离液面

6.平稳地把按钮压到第一停点,再把按钮压至第二停点以排出剩余液体;

7.提起微量移液器,然后按吸嘴弹射器除去吸嘴。

量液操作注意问题:

1.未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。

2.一定要在允许量程范围内设定容量,千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围,否则会造成损坏。

3.不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。

4.不要用大量程的移液器移取小体积样品。

5. 移液器使用完后,将刻度调到最大刻度,收藏。

低温台式高速离心机

离心机的分类

低速:每分钟几千转

高速:每分钟1 ~ 3万转

超速:每分钟3万转以上

离心机的功能:分离,纯化

分子生物学领域常用的实验室仪器介绍

分子生物学领域常用的实验室仪器介绍

分子生物学领域常用的实验室仪器介绍

分子生物学领域是现代生命科学的重要分支之一,它研究的是生物分子层面的生命过程,旨在深入揭示生命的本质和机制。而在分子生物学研究中,实验室仪器则是不可或缺的工具,它们不仅可以帮助研究者进行实验操作,还能够提高实验结果的可靠性和精度。本文将为大家介绍分子生物学领域常用的实验室仪器。

一、PCR扩增仪

PCR(聚合酶链式反应)扩增技术是分子生物学领域中最常用的实验技术之一,是通过对核酸单链进行不断反复的扩增,从而获得足够多的样品用于后续的实验研究。PCR扩增仪是一种能够精确控制温度并产生稳定温度的设备,它可以通过快速升温和降温的方式对PCR反应的反应体系进行加热和冷却,以满足PCR反应各个步骤所需的不同温度条件。根据不同的实验需求,PCR扩增仪通常有单块、双块和四块等不同规格型号。

二、电泳仪

电泳是一个常见的探测和分离生物分子的方法,尤其在DNA

和RNA分子的研究中应用广泛。电泳仪则是进行电泳实验的设备。电泳仪根据不同的实验需求、对样品大小和数量的要求,可以选

择垂直电泳仪、平板电泳仪、毛细管电泳仪、聚丙烯酰胺凝胶等

不同类型的电泳仪。其中,聚丙烯酰胺凝胶电泳仪是目前应用最

广泛的电泳仪之一,它可以以高效、稳定和可重复的方式对生物

分子进行分离、检测和纯化。

三、荧光定量PCR仪

荧光定量PCR(实时PCR)技术是PCR技术的一种延伸,它

通过检测PCR反应过程中荧光信号的变化动态监测扩增产物的累

积情况,从而实时定量测定PCR反应产物的含量。荧光定量PCR

仪是荧光定量PCR技术实验的核心设备,它通过荧光信号的强度

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实验指导

目录

实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取-碱裂解法

实验三琼脂糖凝胶电泳

实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定

实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化

实验六动物组织细胞基因组 DNA提取

实验七 DNA的定量

实验八 PCR基因扩增

实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA 实验十 DNA重组

实验十一动物组织细胞总RNA的提取

实验一分子生物学实验室常用仪器及使用

事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。

一、冷冻离心机

低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。配有角式转头:6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。极限转速20000rpm。

1. 安装与调试

离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在0~30℃之间,相对湿度小于80%。试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。

2. 操作程序

(1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。

(2)设定机器的工作参数,如工作温度,运转时间,工作转速等。

(3)将预先平衡好的样品放置于转头样品架上,关闭机盖。

(4)按控制面板的运转键,离心机开始运转。在预先设定的加速时间内,其运速升至预先设定的值。

(5)在预先设定的运转时间内(不包括减速时间),离心机开始减速,其转速在预先设定的减速时间内降至零。

(6)按控制面板上的停止键,数码管显示dedT,数秒钟后即显示闪烁的转速值,这时机器已准备好下一次工作。

3. 注意事项

(1)离心机应始终处于水平位置,外接电源系统的电压要匹配,并要求有良好的接地线,机器不使用,要拔掉电源插头。

(2)开机前应检查转头安装是否牢固,机腔中有无异物掉入。

(3)样品应预先平衡,使用离心筒离心时离心筒与样品应同时平衡。

(4)挥发性或腐蚀性液体离心时,应使用带盖的离心管,并确保液体不外漏以免腐蚀机腔或造成事故。

(5)除工作温度、运转速度和运转时间外,不要随意更改机器的工作参数,以免影响机器性能。转速设定不得超过最高转速,以确保机器安全运转。

(6)使用中如出现0.00或其它数字,机器不运转,应关机断电,10秒钟后重新开机,待所设转速显示后,再按运转键,机器将照常运转。

(7)不得在机器运转过程中或转子未停稳的情况下打开盖门,以免发生事故。

(8)每次操作完毕应做好使用情况记录,并定期对机器各项性能进行检修。

二、电泳仪

电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳大类,自由界面电泳不需支持物,如等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。区带电泳需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶―G薄层等,分子生物学实验中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。应用电泳法可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备。下面以DYY-12型电脑三恒多用电泳仪(北京六一仪器厂)为例介绍其使用方法。

1.使用方法

(1)按电源开关,显示屏出现“欢迎使用DYY-12型电脑三恒多用电泳仪…”等字样后,同时系统初始化,蜂鸣4声,设置常设置。屏幕转成参数设置状态,见图一:

U: 0V U= 100V | Mode: STD

I: 0mA I = 50mA |

P: 0W P= 50W |

T: 00:00 T= 01:00 |

其中:左侧大写U: I: P: T: 为电泳时实际值;中间部分显示程序的常设值(预置值)。Mode(模式):STD(标准);TIME(定时);VH(伏时);STEP(分步)

(2)设置工作程序。用键盘输入新的工作程序。例如,要求工作电压U=1000V,电流I 限制在200mA以内,功率W限制在100W以内,时间T为3小时20分,并且到时间自动关掉输出。则操作步骤如下:

①按“模式”键,将工作模式由标准(STD)转为定时(TIME)

模式。每按一下模式键,其工作方式按下列顺序改变:STD®TIME®VH®STEP®STD。

②先设置电压U,按“选择”键,先将其反显,然后输入数字键即可设置该参数的数值。按数字1000,则电压即设置完成。

③设置电流I,按“选择”键,先使I反显,然后输入数字200。

④设置功率P,按“选择”键,先使P反显,然后输入数字100。

⑤设置时间T,按“选择”键,先使T反显,然后输入数字320。如果输入错误,可以按“清除”键,再重新输入。

⑥确认各参数无误后,按“启动”键,启动电泳仪输出程序。在显示屏状态栏中显示Start! 并蜂鸣4声,提醒操作者电泳仪将输出高电压,注意安全。之后逐渐将输出电压加至设置值。同时在状态栏中显示“Run”,并有两个不断闪烁的高压符号,表示端口已有电压输出。在状态栏最下方,显示实际的工作时间(精确到秒)。

⑦每次启动输出时,仪器自动将此时的设置数值存入“MO”号存储单元。以后需要调用时可以按“读取”键,再按“0”键,按“确定”键,即可将上次设置的工作程序取出执行。

⑧电泳结束,仪器显示:“END”,并连续蜂鸣提醒。此时按任一键可止鸣。

2.注意事项

(1)U、I、P三个参数的有效输入范围是:U:5~3000V;I: 4~400mA;P:4~400W.

(2)一般情况下,当No Load!时,首先应关机检查电极导线与电泳槽之间是否有接触不良的地方,可以用万用表的欧姆档逐段测量。

(3)如果输出端接多个电泳槽,则仪器显示的电流数值为各槽电流之和,此时应选择稳压输出,以减小各槽的相互影响。

(4)注意保持仪器的清洁,不要遮挡仪器后方进风通道。严禁将电泳槽放在仪器顶部,避免缓冲液洒进仪器内部。

(5)本仪器输出电压较高,使用中应不避免接触输出回路及电泳槽内部,以免发生危险。

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