2.1_微生物的实验室培养11
【人教版】生物选修一：2.1《微生物的实验室培养》课后习题(含解析)
【优化设计】2018—2019学年高中生物专题2 课题1 微生物的实验室培养课后习题（含解析）新人教版选修1课时演练·促提升1。
含C、H、O、N的大分子有机化合物可以作为( ）A。
异养微生物的氮源、能源B.异养微生物的碳源、能源C.自养微生物的碳源、氮源、能源D。
异养微生物的碳源、氮源、能源解析：含C、H、O、N的大分子有机化合物一般是蛋白质，因此可给异养微生物提供碳源、氮源、能源。
答案:D2。
培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是（）①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消毒⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A.⑤③②①④⑥B.①②③④⑤⑥C.⑥②③④①⑤D.③④②①⑥⑤解析：培养基用高压蒸汽灭菌;培养皿能耐高温，用干热灭菌;接种环可通过灼烧灭菌达到迅速、彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用紫外线消毒;牛奶可采用巴氏消毒法,使营养成分不被破坏.答案：A3.下列说法正确的是( ）A。
为微生物的生长繁殖提供营养基质的是固体培养基B。
培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C。
固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的菌落解析:培养基是微生物生长繁殖的营养基质，根据培养基的物理性质不同，可将培养基分成固体培养基、液体培养基和半固体培养基；液体培养基不加凝固剂。
答案：D4。
三个培养皿中分别加入10 mL不同的培养基,然后接种相同的大肠杆菌样液。
培养36 h后，计算菌落数，结果如表所示。
下列选项错误的是（)培养皿培养基成分菌落数Ⅰ琼脂、葡萄糖35Ⅱ琼脂、葡萄糖、生长因子250Ⅲ琼脂、生长因子0A。
该实验采用的是固体培养基B.该实验可采用稀释涂布平板法接种C。
Ⅰ和Ⅲ对照,说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D。
Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类解析:培养基中均加入了琼脂,故为固体培养基;微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法或稀释涂布平板法;Ⅰ组和Ⅲ组存在两个变量，不能说明大肠杆菌的生长是否需要生长因子；Ⅱ组和Ⅲ组对照,自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌的生长需要糖类。
微生物的实验室培养
生物量的测定
通过测定菌体干重、蛋白质含量或 DNA含量等方法来反映微生物的生 长情况。
代谢产物的测定
通过测定培养基中代谢产物如有机酸、 酒精等的含量变化来了解微生物的代 谢状况。
05
微生物的分类与鉴定
传统分类方法
01
02
03
形态学特征
通过观察微生物的形态、 大小、结构等特征进行分 类。
生理生化特性
合成生物学
利用基因编辑和合成技术，设计和构建具有特定 功能的微生物细胞或生物系统。
3
微生物资源开发与利用
发掘和利用具有特殊功能的微生物资源，如极端 环境微生物、深海微生物等，为生物技术和产业 创新提供新的思路和方法。
THANKS
感谢观看
氧化磷酸化
通过电子传递链将 NADH和FADH2氧化为 NAD+和FAD，同时生
成ATP。
氮代谢
包括氨基酸的合成与分 解、氮的固定与转化等
过程。
微生物的生长曲线与测定
生长曲线
描述微生物在液体培养基中生长繁殖 过程的曲线，包括延滞期、对数期、 稳定期和衰亡期。
生长速率常数
反映微生物生长速度的参数，与培养 基成分、温度、pH等因素有关。
代谢组学和蛋白质组学技术
通过分析微生物的代谢产物和蛋白质组成，揭示微生物的代谢途径 和调控机制。
微生物鉴定流程
样品采集与处理
选择合适的采样点，采集具有代表性的样品， 并进行适当的处理以便后续分析。
微生物分离与纯化
将样品中的微生物进行分离和纯化，获得单一菌 落或菌株。
形态学观察
对分离得到的微生物进行形态学观察，记录其形态、 大小、结构等特征。
生物安全柜使用
高中生物选修1《生物技术实践》课件2.1微生物的实验室培养
1．连一连
2．判一判 (1)培养基中碳源物质不可能同时是氮源。( × ) 解析：有些碳源可同时是氮源。
(2)培养基中只要有碳源、氮源、无机盐和水就能满足微生物的 生长需要。( × )
解析：培养基中一般含有碳源、氮源、无机盐和水，但对于某 些微生物来说，还需要特殊营养物质才能满足其生长需要。
(3)液体培养基含有水，而固体培养基不含水。( × ) 解析：液体培养基与固体培养基都含有水，它们的区别为是 否添加凝固剂。
(3) 平 板 划 线 法 ： 通 过 _接__种__环___ 在 琼 脂 固 体 培 养 基 表 面 连 续 ___划__线___的操作，将聚集的菌种逐步__稀__释____分散到培养基的表 面。其具体操作是：
①将__接__种__环__放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。 ②在火焰旁冷却__接__种__环__，并打开棉塞。 ③将试管口通过_酒__精 ___灯__火__焰__。 ④将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液。 ⑤将试管口通过火焰，并塞上棉塞。 ⑥左手将皿盖打开一条缝隙，右手将蘸有菌种的接种环迅速伸 入平板内，划三至五条__平__行____线，盖上皿盖。注意不要划破培养 基。
质配成)
工业生产 分类、鉴定
用途
选择培养基 鉴别培养基
培养基中加入 某种化学物 质，以抑制不 需要的微生物 的生长，促进 所需要的微生 物的生长
培养、分离出特定微生 物(如培养酵母菌和霉 菌，可在培养基中加入 青霉素；培养金黄色葡 萄球菌，可在培养基中
加入高浓度食盐)
根据微生物的 代谢特点，在 培养基中加入 某种指示剂或
3．消毒和灭菌
消毒
灭菌
概念
使 用 较 为 __温__和____ 的 物 理 或 化 学 方 法 杀 死 物 体 _表__面_____ 或内部的部分微生物(不包括 __芽__孢__和__孢__子__)
高中生物选修一学案12：2.1 微生物的实验室培养
微生物的实验室培养[学习目标]了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。
[重点和难点]无菌技术的操作。
[课前预习]1.根据培养基外观的物理状态，可分为①培养基和②培养基。
各种培养基一般都含有③，此外还要满足微生物生长对④、⑤以及⑥的要求。
2.消毒是指是指使用①仅杀死物体表面或内部②。
常用的方法有③等消毒法。
灭菌则是指使用④杀死物体内外⑤，包括⑥。
常用的方法有⑦等。
3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是：①、②、③、④、⑤。
倒平板要待培养基冷却至⑥℃左右时在⑦附近操作进行。
4.微生物接种最常用的是①法和②法，其结果是在培养基上得到③。
不论哪种方法都有在④进行操作。
[课堂探究]一、微生物培养基下表是某微生物培养基成分，据表分析：（1）该培养基是液体培养基还是固体培养基？①。
为什么？②。
（2）表中的KH2PO4、NaHPO4和MgSO4·7H2O主要为微生物提供①，葡萄糖为微生物提供②，尿素为微生物提供③。
（3）不同微生物所需的pH不同，培养细菌时需要将pH调至①；培养乳酸杆菌时要在培养基中添加维生素，目的是要满足乳酸杆菌的②。
二、无菌技术1.下列关于无菌技术的叙述正确的是①A.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和灭菌。
B.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行消毒。
C.为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
D.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2.消毒与灭菌的区别3.思考下列问题：（1）无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？①。
（2）哪些用具适于使用烧灼灭菌法？①。
（3）利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？①。
（4）物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是①；为达到良好的灭菌效果，一般要求的是②；灭菌结束后气压务必降至零时才能打开锅盖，其目的是③。
高中生物选修一课时作业3：2.1微生物的实验室培养(二)
微生物的实验室培养(二)40分钟课时作业基础过关知识点一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1.以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序正确的是()A.计算→称量→倒平板→溶化→灭菌B.计算→称量→溶化→倒平板→灭菌C.计算→称量→溶化→灭菌→倒平板D.计算→称量→灭菌→溶化→倒平板[答案]C2.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的具体描述正确的是()①等培养基冷却至40 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰④用左手的拇指和食指打开皿盖⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖⑥等待平板冷却5～10 s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上A.①②③④B.④⑤⑥C.③⑤D.①②④⑥[答案]C[解析]①培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板；②将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿盛有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；④用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是打开皿盖；⑥等待平板冷却5～10 min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上。
改正后的①～⑥步骤为倒平板的具体操作。
3.下列有关倒平板操作错误的是()A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C.将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上D.等待平板冷却凝固后需要倒过来放置[答案]C知识点二纯化大肠杆菌4.用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是()A.平板上的一个菌落就是一个细菌B.菌落中的细菌数是固定的C.此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D.此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同[答案]C5.能够测定样品活菌数的方法是()A.稀释涂布平板法B.重量法C.直接计数法D.比浊法[答案]A[解析]利用稀释涂布平板法能够在不影响生活的情况下，将细菌个体从固体培养基上分离出来，并可以繁殖形成菌落，可根据菌落数测定样品活菌数。
微生物实验室生物安全操作规程
微生物实验室生物安全操作规程微生物实验室生物安全操作规程一、目的本规程旨在保障微生物实验室工作人员的健康安全、实验设备的安全卫生，以及防止对外界环境造成污染。
二、适用范围本规程适用于微生物实验室人员的人身安全、卫生健康安全管理及设备安全。
三、职责实验室工作人员必须严格遵守安全操作规程。
四、安全操作规程：1.员工安全操作规程1.1实验室入口处必须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。
1.2禁止非工作人员进入实验室。
参观实验室等特殊情况必须经实验室负责人批准后方可进入，做好卫生防护，并在有关人员陪同下方可进入，同时注意做好环境维护及保密工作。
1.3进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。
免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室工作。
1.4接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。
1.5禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。
1.6尽量以移液器吸取液体，禁止口吸。
1.7实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。
1.8每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。
1.9工作人员应接受必要的免疫接种和检测，如乙型肝炎疫苗、卡介苗等。
工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。
每年要接受一次最新的培训。
人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案。
1.10禁止将无关动物带入实验室。
2.无菌室安全操作规程2.1无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面一次(拖布专用)，紫外线照射消毒30分钟以上，超净工作台台面每次实验前要用75％酒精擦洗。
然后紫外线消毒30分钟。
操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。
生物安全试题及答案
生物安全试题一、填空题(每空0.5分，共40分)1、我国一直以来高度重视实验室生物安全工作，国家陆续颁布了一系列法律、法规和标准，包括______________________________________________、_________________ __________________________等。
各种菌（毒）株所需实验室的生物安全级别参见卫生部__________________________________有关规定。
2、尽管生物安全实验室内存在各种潜在感染的风险，但是随着人们认识的深入及实验室设备设施条件的改善，防范感染事件发生的能力不断得到提高。
通过开展______________________________、确定________________________和___________ ___________、制定____________________和__________________等措施，将会减少或避免实验室感染事件的发生。
3、二级实验室适用于进行我国危害程度分类为_____________和_____________________的病原微生物检测实验活动。
4、二级实验室在一级实验室的基础上，增加了_______________、_____________________等安全设备。
5、依据现行国家标准，三级实验室由_____________、_____________和_____________三部分组成。
整个平面布局为_____________→_____________→_____________→_____________→_____________。
6、液体进行压力蒸汽灭菌时，液体体积不得超过__________________________。
应该__________________________，保证蒸汽能够进入。
7、BSL-2实验室操作规范：(1) 人员进入二级实验室，需经过__________________________，并经_____________________同意，方可进入；(2) 进入实验室后，应做好_____________、___________等记录；(3) 实验室工作人员根据工作内容，在实验室生物风险评估的基础上，选择并穿戴好___________________；通常情况下，应穿上鞋套，穿防护服或反穿式隔离服，戴好帽子、口罩、手套，必要时根据操作内容可戴上防护眼镜；戴帽子时，不应___________________；(4) 二级实验室内，各种可能产生___________的操作，应在生物安全柜内或其他物理保护装置中进行；(5) 将实验所需物品放入生物安全柜，按照实验步骤进行操作；如果是两个人进行操作，相互应配合，但不能影响_____________________________；(6) 实验产生的废物，应该放在生物安全柜内的废物盒里；(7) 实验结束后，首先撤出主要实验材料，随后再撤出剩余实验用品，实验废物应放在废物处理桶中并在二级实验室内进行灭菌；(8) 撤离结束后，对安全柜内所用的物品进行消毒处理，实验废物放在废物桶中，还要对生物安全柜进行消毒处理；(9) 实验产生的废物放在____________________中进行灭菌；(10) 整个实验结束后，在实验室出口处脱去个人防护装备，脱去手套，脱去防护服，脱下防护眼镜、口罩，摘掉帽子，最后脱去鞋套；并仔细_______________；(11) 在离开二级实验室之前，需要做好________________________________。
高中生物《选修1》必记知识清单
高中生物《选修1》必记知识清单1.1 果酒和果醋的制作一、基础知识（一）．果酒制作1、菌种：酵母菌①代谢类型：异养兼性厌氧型 ②生殖方式：主要是出芽生殖③生物类型：真核生物 ④生长繁殖的适宜温度和PH ：20℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵的温度是在18℃～25℃，pH 最好是弱酸性。
⑤来源：附在葡萄皮上的野生型酵母菌。
2、原理： ① 有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖。
反应式为：C 6H 12O 6+6H 2o+6O 2 → 6CO 2 + 12H 2O + 能量 ② 无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。
反应式为：C 6H 12O 6 → 2C 2H 5OH + 2CO 2 + 能量3、在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。
4、酒精的检测：用重铬酸钾检测。
原理是在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
（二）．果醋制作1、菌种：醋酸菌①代谢类型：异养好氧型 ②生殖方式：二分裂③生物类型：原核生物 ④生长繁殖的适宜温度: 醋酸菌生长的最适温度是在30℃～35℃2、原理：① 当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸； ② 当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸。
反应式为：C 2H 5OH+O 2→CH 3COOH + H 2O ；二、实验设计（一）实验流程： 挑选葡萄—→冲洗—→榨汁—→酒精发酵—→醋酸发酵↓ ↓果酒 果醋(二)操作提示1、材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先冲洗除去污物，再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会；不能反复冲洗，以免使酵母菌菌种流失而导致酵母菌数量减少，发酵周期延长，产品中酒精含量下降。
2、防止发酵液被污染的措施①榨汁机要清洗干净，并晾干。
②发酵瓶要清洗干净，用体积分数为70%的酒精消毒。
③装入葡萄汁后，封闭充气口。
3、发酵①葡萄汁装入发酵瓶时，要留有1/3的空间，并封闭充气口。
2.1 微生物的实验室培养(2)
B.在皿底上标记日期等方便
C.正着放臵容易破碎
D.防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染
解析 平板倒臵主要是防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。
是平板划线法和稀释涂布
平板法。下列有关这两种方法的叙述错误的是( B )
1
2
3
4
A.均将大肠杆菌接种在固体培养基的表面
孢子繁殖形成，这种菌落才符合要求。
解析答案
1
2
3
4
4.右表是从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。请回答下面的问题。
(1) 培养基的类型很多，但培养基中一
般都含有水、碳源、 氮源 和无机盐。
上述培养基配方中能充当碳源的成分
试剂
用量
试剂
用量
牛肉膏/g
蛋白胨/g
5
10
琼脂/g —
20 —
是 牛肉膏和蛋白胨 。培养基配制完成
答案
应用示例
2.右图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法操作结果。 下列叙述中，错误的是( 后才能取菌液 )
A.甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却 B.对于浓度较高的菌液，如果甲中的
稀释倍数仅为102，则所得的菌落不
是由单一的细胞或孢子繁殖而成
C.乙中培养皿中所得的菌落都符合要求
D.乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端
2.1微生物的实验室培养
注意：
最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖 最常用的氮源是铵盐、硝酸盐 对异养生物而言，含C、H、O、N的化合 物既是碳源，又是氮源，如蛋白质 之所以补充生长因子，是由于缺少合成这 些物质的酶或合成能力有限
思考：
C
（三）培养基
培养基（培养液）是由人工方法配 制而成的，专供微生物生长繁殖使用的 混合营养液。
否 是
用途
主要用于 工业生产
分类、鉴定
合成培养基
按培养基的功能（用途）分
种类 制备方法 原理 用途 举例
选择 加入某种 培养 化学物质 基 鉴别 加入某种 培养 试剂或化 基 学药品
依据某些微 从众多微生 加入青霉素 生物对某些 物中分离所 分离得到酵 物质的抗性 需的微生物 母菌和霉菌
依据微生物的 代谢产物与特 鉴别不同种 伊红和美蓝 定试剂或化学 培养基可鉴 药品反应，产 类的微生物 别大肠杆菌 生明显的特征 变化
1.培养基的类型及用途
按物理性质分
种类 是否含凝 固剂 是 是 用途 分离、计数等 观察微生物的运动、 鉴定菌种等 工业生产
固体培养基 半固体培养基 液体培养基
否
固体培养基：菌落
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
按化学成分分
种类 天然培养基
化学成 分是否 明确
选择培养基
培养基 应用
加入青霉素
分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐 不加氮源
分离金黄色葡萄球菌 分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养 分离自养型微生物 基 加入青霉素等抗生素 分离导入了目的基因的受体细胞 加入氨基喋呤、次黄嘌呤和 分离杂交瘤细胞 胸腺嘧啶核苷
选修一2.1微生物实验室培养(上新课用)
⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当
⑶适宜的pH值：加入缓冲剂 细菌偏碱，真菌偏酸。
细菌培养基pH中性或偏碱性pH为：6.5-7.5，霉菌培 养基呈酸性pH为：5.0-6.0。放线菌pH为：7.5-8.5。
二 、无菌技术：
• （看教材15页回答）
• 1.获得纯净培养物的关键是什么？ • 2.无菌技术包括哪四大方面？ • 3.消毒与灭菌有什么区别？
4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅 在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养 微生物吗？为什么？
空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养 基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
四、大肠杆菌的纯化培养
分散成单个细胞,形成单个菌落
1.定义： 单个 固体培养基上 或少数菌体 大量繁殖
子细胞群体
酒紫8精0外℃、线、氯1气5m、in石炭酸等
物高压品蒸，汽16灭0～菌170℃ 1培～养2小基时，
100KPa、
121℃、15～30min
3.常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法：
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min 或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……
二、无菌技术 防止外来杂菌的污染
2.消毒与灭菌：
消毒
灭菌
较为温和理化方法， 强烈的理化方法， 定义 杀死部分有害菌体 杀死所有微生物
（不包括芽孢、孢子） （包括芽孢、孢子）
煮沸消毒法
灼烧灭菌
方法 巴10氏0℃消、毒5法~6min 化70学~7药5℃剂、30min
2.1微生物的实验室培养
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个 椭圆形的休眠体，叫做芽孢。 特点：对恶劣的环境，如干旱、高温等，有很强 的抵抗力。 在生物体的一定部位产 生一种特殊的生殖细胞叫孢 子。孢子的特点是能直接长 成新个体。
无菌技术： 分类 定义 方法
灭菌法
物理法：热力、辐射、微波、 杀灭一切微生物 等离子体 化学法：醛类、烷化剂
无机盐功能 构成微生物细胞的组成成分 调解微生物细胞的渗透压， PH值和氧化还原电 位 有些无机盐如S、Fe还可做为自养微生物的能源 构成酶活性基的组成成分，维持酶活性。Mg、 Ca、K是多种酶的激活剂
（4）特殊营养：
微生物生长不可缺少的微量有机物质，维生素、碱基等 （生长因子）。（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）
病毒: 微生物
一般指肉眼看 不见的生物
无细胞结构 原核细胞
原核生物: 细菌、蓝藻 原生生物：单细胞的动植物
如草履虫、单细胞藻类等
真菌: 如酵母菌
真核细胞
一、培养基
微生物生存的环境和营养物质 在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要 1、培养基的种类 的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。 液体培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种 例如，在培养基中加入青霉素，以抑制细菌、 指示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种 半固体培养基 据物理性质分 放线菌的生长，从而分离到酵母菌和霉菌。又 类的微生物。例如，在培养基中加入伊红和美 如，在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制多 固体培养基 常用于工业生产 蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在 种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生 大肠杆菌等细菌：如果有大肠杆菌，其代谢产 长。 常用于观察微生物的 天然培养基 物就与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并 运动、鉴定菌种 据化学成分分 用于微生物的分离、计数 带有金属光泽。 合成培养基 常用于工业生产 选择培养基 据用途分 鉴别培养基常用于分类、鉴定
(完整版)选修1_专题2_课题1微生物的实验室培养导学案及答案
中学高效课堂高二生物选修1导学案课题专题2 课题1 微生物的实验室培养导学案备课时间授课时间编号备课教师备课组长课型学习目标1.了解培养基的用途、种类及一般成分，2.掌握培养基制作的一般的步骤，3.掌握微生物分离中的划线法和涂布法。
4.学会一般的消毒、灭毒的方法，进行无菌技术的操作。
德育渗透通过本节学习，了解和掌握生物技术在日常生活中的应用，所以要认真学好生物知识。
学习重点培养基的制备、微生物的培养的操作。
学习难点培养基的制备和微生物的分离。
学法指导课前预习，完成自主学习内容。
课前阅读教材，完成自主学习部分，为课上合作探究作好准备。
自主学习内容教师活动（一）培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其营养基质称为培养基。
可分为培养基和培养基。
2．营养构成：各种培养基一般都含有水、、和无机盐，此外还要满足微生物生长对、特殊营养物质以及氧气的要求。
3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
（二）无菌技术A、获得纯净培养物的关键是防止外来的人侵，具体操作如下：1．对实验操作的、操作者的和进行清洁和消毒。
2．将用于微生物培养的、接种用具和培养基等器具进行。
3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
B、消毒和灭菌1．消毒是指使用较为的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。
常用的方法有消毒法和消毒法。
2．灭菌是指使用的理化因素杀死物体内外的微生物。
常用的方法有：灭菌、灭菌、灭菌。
（三）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板1.计算：根据比例，计算100mL培养基各成分用量。
2.称量：牛肉膏较黏稠，可用玻棒挑取，同一同称量。
称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。
3.溶化：加水加热熔化牛肉膏与称量纸→取出称量纸→加入蛋白胨和氯化钠继续加热→加入→用蒸馏水定容到100mL（整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）。
2021-2022学年高二生物人教版选修三同步课时作业 微生物的实验室培养(有解析)
2.1微生物的实验室培养——2021-2022学年高二生物人教版选修一同步课时作业1.下列有关培养基配制的描述,正确的是( )A.液体培养基常用于菌种的分离、计数、鉴定B.任何培养基都必须含有碳源、氮源、水、无机盐等成分C.依据微生物的需求,配制出的供微生物生长繁殖的营养基质D.微生物的生长除受营养因素影响外,还受到pH、渗透压等的影响2.培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖所需的营养基质。
下列相关叙述正确的是( )A.培养乳酸杆菌时，培养基中的蛋白胨含有有机氮、维生素等成分B.培养霉菌时，培养基配制时需要将pH调至中性或者弱碱性C.培养基中的凝固剂琼脂，通常在98 ℃以上熔化，50 ℃以下凝固D.微生物生长不包括在一定时间和条件下细胞数量的增加的过程3.下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是( )A.由表格可知，该培养基属于液体培养基B.该培养基中，乳糖可以为微生物提供碳源和能源，提供氮源的是蛋白胨C.培养过程中，调节好培养基的pH后就可以直接接种D.用该培养基培养细菌时，应将pH调至酸性4.如表为某培养基的配方（该培养基可用于检测水中大肠杆菌的含量），下列有关叙述正确的是( )A.从成分看，该培养基不含动物成分B.该培养基中，葡萄糖可以为微生物提供碳源和能源，提供氮源的是蛋白胨C.该培养基中含有能提供维生素的物质，调好培养基的pH后就可以直接接种D.用该培养基培养大肠杆菌时应将pH调至酸性5.塑料的主要成分PET是一种较稳定、不易降解的有机物，科学家发现土壤中某种细菌能够降解PET，现欲从土壤中分离出该细菌。
下列叙述正确的是( )A.可用含PET的牛肉膏蛋白胨培养基分离该细菌B.在制备选择培养基时宜采用干热灭菌法C.在选择培养基上生长并形成菌落的即目的菌D.获得目的菌后，可用液体培养基扩大培养6.细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。
下列与此有关的说法正确的是( )A.乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B.无机氮源不可能作为细菌的能源物质C.琼脂是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质D.以纤维素为唯一碳源的培养基上长出的不都是能分解纤维素的微生物7.下列对灭菌和消毒的理解不正确的是( )A.灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子B.消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物C.消毒和灭菌都是采用物理方法杀灭微生物D.常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等8.微生物的实验室培养要进行严格灭菌和消毒。
生物选修一21微生物的实验室培养教案设计
生物选修一21微生物的实验室培养教案设计教案设计：微生物的实验室培养一、教学目标：1.了解微生物的培养方法及培养基的制备；2.掌握微生物的纯化和分离方法；3.培养并观察常见的微生物菌株。
二、教学重点：1.微生物的培养方法；2.微生物的纯化和分离方法；3.常见微生物菌株的培养和观察。
三、教学准备：1.实验室耗材：琼脂培养基、平板培养基、试管、培养瓶等；2.实验设备：培养箱、恒温水浴等；3.微生物菌株：如大肠杆菌、酵母菌等；4.教学资料：微生物培养方法的手册。
四、教学内容及步骤：1.培养基的制备：a.准备琼脂培养基的原料，按照比例混合，并加热至完全溶解；b.倒入试管或培养瓶中，待其凝固后即可使用。
2.微生物的准备：a.打开培养箱，调整温度至适宜的培养温度（如37°C）；b.从冷冻保存的微生物样品中选择需要培养的菌株；c.使用燃酒灯烧热的针头进行接种。
3.微生物的培养：a.将接种的微生物菌株均匀涂布于琼脂培养基的平板上；b.将涂布好的平板放入培养箱中，待培养一段时间；c.观察培养的微生物菌落形态和生长情况。
4.微生物的纯化和分离：a.选取观察到的单一菌落，使用消毒液进行表面消毒；b.将消毒后的菌落接种至新的琼脂培养基平板上；c.观察新平板上培养的微生物菌落，重复步骤a和b，直到培养出单一菌株。
5.微生物的观察：a.使用显微镜观察培养的微生物样本；b.观察其形态特征、生物学特性等；c.记录观察结果并进行比较分析。
五、教学示范：1.教师示范制备琼脂培养基；2.教师示范接种和涂布平板培养基；3.教师示范观察菌落形态和生长情况；4.教师示范消毒和纯化微生物菌落；5.教师示范使用显微镜观察微生物样本。
六、实验总结:1.学生对实验中遇到的问题进行总结和讨论；2.教师进行实验结果的总结与评价；3.引导学生思考并回答问题，加深对实验内容的理解。
七、拓展延伸：1.讲解微生物菌株的应用领域和研究进展；2.组织学生进行微生物培养实验的设计和操作。
2021高中生物人教版选修一课件：专题2 课题1 微生物的实验室培养
01微生物的实验室培养课题1ꢀ微生物的实验室培养刷基础题型1ꢀ培养基的成分及种类分析1．[黑龙江大庆实验中学2019高二下月考]下列有关微生物培养基种类及配制原则的表述，正确的是(ꢀꢀ)CA．任何培养基都必须含有碳源、氮源、水、无机盐及生长因子B．液体培养基可用于观察菌落，固体培养基可用于工业生产C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、O2、渗透压等的影响D．培养霉菌时需将培养基的pH调节到中性或微碱性解析培养微生物的培养基一般含有碳源、氮源、水、无机盐及生长因子，但是培养某些特殊微生物的时候可以缺少部分成分，如能利用空气中CO2的自养生物，培养基中可以不提供碳源；能进行固氮作用的微生物，培养基中可以不提供氮源等，A错误。
固体培养基可用于观察菌落，液体培养基可用于工业生产，B错误。
微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、O2、渗透压等的影响，C正确。
培养不同的微生物需要有一些不同的特殊条件，培养细菌时需将培养基的pH调节到中性或微碱性，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，D错误。
2．[四川宜宾南溪区二中2019高二下月考]下列叙述错误的是(ꢀꢀ)BA．培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素B．培养霉菌时需将培养基的pH调至碱性C．培养细菌时需将pH调至中性或微碱性D．培养产甲烷杆菌时需要提供无氧的条件解析维生素是乳酸菌生长繁殖所必需的，其自身又不能合成，因此要在培养乳酸菌的培养基中添加维生素，A正确；培养霉菌时应将培养基的pH调至酸性，碱性条件下霉菌不易繁殖，甚至会死亡，B错误；细菌生长繁殖所需要的pH是中性或微碱性，所以培养细菌时需将培养基pH调至中性或微碱性，C正确；产甲烷杆菌是一类以产生大量甲烷气体作为能量代谢终产物的特殊原核微生物，广泛存在于各种极端厌氧环境中，厌氧微生物在有氧气存在时，无氧呼吸受抑制，因此培养产甲烷杆菌时需要提供无氧的条件，D正确。
题型2ꢀ无菌技术3．[吉林延边2019高二下月考]在培养基配制和微生物接种的过程中，确保无杂菌污染被称为无菌操作。
生物安全试题及答案
生物安全试题一、填空题(每空0.5分，共40分)1、我国一直以来高度重视实验室生物安全工作，国家陆续颁布了一系列法律、法规和标准，包括______________________________________________、_________________ __________________________等。
各种菌（毒）株所需实验室的生物安全级别参见卫生部__________________________________有关规定。
2、尽管生物安全实验室内存在各种潜在感染的风险，但是随着人们认识的深入及实验室设备设施条件的改善，防范感染事件发生的能力不断得到提高。
通过开展______________________________、确定________________________和___________ ___________、制定____________________和__________________等措施，将会减少或避免实验室感染事件的发生。
3、二级实验室适用于进行我国危害程度分类为_____________和_____________________的病原微生物检测实验活动。
4、二级实验室在一级实验室的基础上，增加了_______________、_____________________等安全设备。
5、依据现行国家标准，三级实验室由_____________、_____________和_____________三部分组成。
整个平面布局为_____________→_____________→_____________→_____________→_____________。
6、液体进行压力蒸汽灭菌时，液体体积不得超过__________________________。
应该__________________________，保证蒸汽能够进入。
7、BSL-2实验室操作规范：(1) 人员进入二级实验室，需经过__________________________，并经_____________________同意，方可进入；(2) 进入实验室后，应做好_____________、___________等记录；(3) 实验室工作人员根据工作内容，在实验室生物风险评估的基础上，选择并穿戴好___________________；通常情况下，应穿上鞋套，穿防护服或反穿式隔离服，戴好帽子、口罩、手套，必要时根据操作内容可戴上防护眼镜；戴帽子时，不应___________________；(4) 二级实验室内，各种可能产生___________的操作，应在生物安全柜内或其他物理保护装置中进行；(5) 将实验所需物品放入生物安全柜，按照实验步骤进行操作；如果是两个人进行操作，相互应配合，但不能影响_____________________________；(6) 实验产生的废物，应该放在生物安全柜内的废物盒里；(7) 实验结束后，首先撤出主要实验材料，随后再撤出剩余实验用品，实验废物应放在废物处理桶中并在二级实验室内进行灭菌；(8) 撤离结束后，对安全柜内所用的物品进行消毒处理，实验废物放在废物桶中，还要对生物安全柜进行消毒处理；(9) 实验产生的废物放在____________________中进行灭菌；(10) 整个实验结束后，在实验室出口处脱去个人防护装备，脱去手套，脱去防护服，脱下防护眼镜、口罩，摘掉帽子，最后脱去鞋套；并仔细_______________；(11) 在离开二级实验室之前，需要做好________________________________。
课件1：2.1微生物的实验室培养
(2) 干热灭菌：160～170℃下加热1～2h
(3) 高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15～30min
灭菌的方法：
1、灼烧灭菌：
2、干热灭菌： 160～170℃下加热1～2h。
3、高压蒸气灭菌： 100kPa、121℃条件下维持15～30min。
思考：
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外， 还有什么目的？ 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
肽聚糖的合成
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
其细胞壁是由纤 维素、几丁质、
葡聚糖组成
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物
加入四环素、卡那霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞
菌落:
单个或少数细菌在 固体培养基上大量 繁殖时，就会形成 一个肉眼可见的， 具有一定形态结构 的子细胞群体，叫 菌落。 菌落是鉴定菌种的 重要依据。
②涂布分离法:是指将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的 菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 在稀释度足够的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成单个的细胞，从 而能在培养基表面形成单个菌落。
应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的 距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯 火焰周围等等。
答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生， 因此最好不要用这个平板培养微生物。
（二）纯化大肠杆菌
接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法
①平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚 集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面.在数次划线后,可以分离到由一个 细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.
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4.某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生 的劳动技术课内容,首先对食用菌实验室进行清扫和 消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然 后从菌种站购来各种食用菌菌种.请回答以下问题:
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却 后再进行划线？
答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什 么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起 始处要少，每次从上一次划线的末端开始， 能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步 减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌 落。
（2）稀释涂布法P19
稀释涂布法是将菌液进行一系列梯度稀释， 然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培 养基的表面，进行培养。
讨论
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。 结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想 一想，第2步应如何进行无菌操作？
答：应从操作的各个细节保证“无菌”。例如， 酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何 其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等。
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
（１）消毒定义：
指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表 面或内部一部分对人体有害的微生物。（不包括芽
孢和孢子）
（2）灭菌的定义：
使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物， 包括芽孢和孢子，而达到完全无菌之过程。 灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最 重要的技术。
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
固体培养基：菌落，菌苔
菌落：
• 单个或少数细菌在固体培养 基上大量繁殖时，就会形成 一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫 做菌落。 • 不同的细菌的菌落特征不同 • 菌落是鉴定菌种的重要依据。
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2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 (参考教材 附录内容P85)
•无菌技术除了用来防止实验室的培养物被 其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 答：无菌技术还能有效避免操 作者自身被微生物感染。
思考题
请你判断以下材料或用具是否需要消 毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手
专题2 :微生物的培养与应用
病毒 细菌
微生物包括五类：
病毒界 原核生物界 真菌界 原生生物界
放线菌
真菌 原生动物
特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用 光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有 细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作 用.微生物包括细菌、病毒、霉菌、酵母菌等
不同的平板划线法
培 养 基 表 面 的 单 菌 落
议一议
1. 为什么在操作的第一步以及每次划线 之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时， 仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免 接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划 线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接 种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上 的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划 线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减 少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能 及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环 境和感染操作者。
原生动物（protozoan）
是动物界中最低等的一类真核单细胞动物，个体由单个细胞组成。
大变形虫
草履虫
想一想
在制作果酒、果醋、腐乳等时可用优良菌 种直接接种，以提高产品的质量，那么，这些 肉眼看不到的微生物是怎样获得呢？
一、基础知识：
（一）培养基 培养基是人们按照微生物对营养物质的不 同需求，配置的供其生长繁殖的营养基质。 1.培养基的类型和用途
4. 在倒平板的过程中，如果不小心将培 养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板 还能用来培养微生物吗？为什么？
答：空气中的微生物可能在皿盖与皿 底之间的培养基上滋生，因此最好不要用 这个平板培养微生物。
2、纯化大肠杆菌P18
（1）平板划线法
平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表 面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到 培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到有 一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。
蛋白质 脂肪酸
②不同微生物所利用的碳源不同 a.异养型微生物的碳源为 含碳有机物（有机碳） b.自养型微生物的碳源为 含碳无机物（无机碳）
（2）氮源
① 可作为氮源的物质有: 硝酸盐 a. 含氮无机物： 氮气 、氨气 、 氨盐 、 b. 含氮有机物：
蛋白胨 尿素
牛肉膏
②固氮微生物所利用的氮源是 氮气
3、培养基的营养构成
注意
不管哪种培养基，一般都含有水、
碳源、和氮源、无机盐等营养物质，
另外还需要满足微生物生长对pH、特
殊营养物质例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不
能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶) ，
以及氧气等的要求。
（1）碳源
① 可作为碳源的物质有: 碳酸氢盐 、二氧化碳等 a. 含碳无机物: 碳酸盐 、 b. 含碳有机物： 糖类（主要）
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000mL
（2）称量
注意
牛肉膏和蛋白胨都容易吸潮，称取时 动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖。
（3）溶化 （4）灭菌
在压力为100kPa，温度为121℃条 件下，灭菌15-30min。
（5）倒平板
讨论
1. 培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左 右时，才能用来倒平板。你用什么办法来 估计培养基的温度？
病毒（virus)
是由一个核酸分子（DNA或RNA）与蛋白质构成的非细胞 形态的营寄生生活的生命体。
SARS病毒、
禽流感病毒、
细菌（bacteria）
• 单细胞不分枝的原核微生物。 • 细菌细胞微小而透明，通常用适当染料染色后显微镜观察
细菌的外形与大小
葡萄球菌
图1-1
大肠杆菌
常见的三种细菌典型形态
思考:
1)无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微 生物污染外，还有什么目的？ 无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 2)消毒和灭菌有何不同？ 灭菌 条件 强烈 作用 物体表面或内部一部 物体内外所有微生物, 范围 分,不包括芽孢和孢子 包括芽孢和孢子 3)为什么消毒牛奶要用巴氏消毒法? 营养成分不被破坏 4)请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果 需要，请选择合适的方法。 ①培养细菌用的培养基与培养皿 灭菌 ②玻棒、试管、烧瓶和吸管 灭菌 ③实验操作者的双手 消毒 消毒 温和
答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
3.常用的消毒与灭菌的方法 (1)消毒的方法：
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min
或 80 ℃ 下煮15min
3、化学药剂消毒法:用75%酒精等进行
皮肤消毒;氯气消毒水源
4、紫外线消毒
……
(2)灭菌的方法：
1、灼烧灭菌 接种环、接种针、试管口 2、干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。 3、高压蒸气灭菌： 100kPa、121 ℃下维持 15-30min.
4、微生物实验室培养的基本操作程序 1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存
的 常用灭菌方法 培 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 养 实验操作
纯化大肠杆菌
结果分析与评价
练习1（多项选择）
• 1、下列细菌中，能利用含碳无机物作碳源的是 A.C • A 光合细菌 B 根瘤菌 C 硝化细菌 D 乳酸菌 • 2、培养大肠杆菌的培养基中，必需含有的碳源和氮 源是 A.C • A 糖、有机酸等 B 二氧化碳、碳酸盐 • C 蛋白质 D 无机氮化物 • 3、下列叙述不正确的是 B.C. • A 培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 • B 液体培养基和固体培养基所含的最基本物质不相同 • C 微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见 的单个细菌
霍乱弧菌
放线菌（Actinomycete）
结构： 单细胞原核 分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）
应用: 链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素
微生物中发现了几千种抗生素， 其中2/3是由放线菌产生的
真菌（Fungus）
是一种真核生物 ，通常又分为三类，即酵母菌、霉菌 和蕈菌（大型真菌）
（二）、无菌技术
1、什么是无菌技术
无菌技术泛指在培养微生物的操作中， 所有防止杂菌污染的方法。
注意事项
对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清 洁和消毒。
将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等 进行灭菌。 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近进行。 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周 围的物品相接触。
二、实验操作
本实验采用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠 杆菌的纯化培养，实验过程分为两个阶段：
1、制备培养基 2、纯化大肠杆菌
大肠杆菌
1、制备培养基
（1）计算
根据下列培养基配方比例，计算配置100mL 培养基时，各成分的用量。 牛肉膏蛋白胨固体培养基配方 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g
液体培养基 据物理性质分
半固体培养基
固体培养基 天然培养基
据化学成分分
合成培养基
选择培养基
据用途分
鉴别培养基
培养基的种类
常用于工业生产 液体培养基
常用于观察微生物的运动、 鉴定菌种
据物理性质分 半固体培养基 固体培养基
用于微生物的分离、计 数
常用于分类、鉴定 在培养基中加入某种化学物质，以抑制不 常用于工业生产 需要的微生物的生长，促进所需要的微生 天然培养基 物的生长。例如，在培养基中加入青霉素， 以抑制细菌、放线菌的生长，从而分离到 据化学成分分 合成培养基 酵母菌和霉菌。又如，在培养基中加入高 浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长，但 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种 不影响金黄色葡萄球菌的生长。 指示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种 选择培养基 类的微生物。例如，在培养基中加入伊红和美 据用途分 蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在 鉴别培养基 大肠杆菌等细菌：如果有大肠杆菌，其代谢产 物就与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并 带有金属光泽。