Pifithrin-α_hydrobromide_SDS_MedChemExpress
CFDA SE (细胞增殖示踪荧光探针) 说明书
CFDA SE (细胞增殖示踪荧光探针) 产品编号产品名称包装C1031 CFDA SE (细胞增殖示踪荧光探针) 5mg产品简介:CFDA SE 的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester ,是一种近年来被广泛应用的细胞增殖检测用荧光探针,也可以用于细胞的荧光示踪。
基于CFDA SE 荧光标记的细胞增殖检测和[3H]-thymidine 掺入、BrdU 标记获得的检测结果完全一致,但同时可以提供更多的细胞增殖信息。
使用CFDA SE 检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数,同时如果和其它荧光探针联用,可以获取不同分裂次数细胞的其它相关信息。
CFDA-SE 的分子式为C 29H 19NO 11,分子量为557.47,CAS number 为150347-59-4。
CFDA SE 可以通透细胞膜,进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE ,CFSE 可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine 残基或其它氨基发生结合反应,并标记这些蛋白。
在加入荧光探针CFDA SE 后大约24小时,即可充分标记细胞。
被CFDA SE 标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数个月。
CFDA SE 标记细胞的荧光非常均一,比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。
由于CFDA SE 标记细胞的荧光非常均匀和稳定,每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半,这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞,分裂一次的细胞(1/2的荧光强度),分离两次的细胞(1/4的荧光强度),分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。
采用CFDA SE 通过流式细胞仪检测获得的检测结果参考右图。
每一个峰代表一种分裂次数的细胞,从右至左的峰通常依次为分裂0次、1次、2次、3次等次数的细胞。
天然环庚三烯酚酮类化合物的生物合成及生物活性研究进展
DOI: 10.3969/j.issn.1673-713X.2021.02.008·综述·天然环庚三烯酚酮类化合物的生物合成及生物活性研究进展张丛,武临专,王丽非,洪斌环庚三烯酚酮(tropolone)类化合物最早在真菌的次级代谢天然产物中被发现,随后,在细菌次级代谢产物、植物和海洋生物中也发现了此类化合物的存在[1]。
它的核心基团为独特的环七-2,4,6-三烯酮非苯芳香环结构。
环庚三烯酚酮类化合物目前已被报道具有广泛的生物学活性,主要包括抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗炎、杀虫等作用[2]。
构效关系研究表明,一些环庚三烯酚酮类化合物的活性来自于核心的非苯芳香环结构,针对某些生理相关的金属酶,该结构具有金属螯合和氧化还原能力[3-5]。
本文主要对天然的环庚三烯酚酮类化合物的结构多样性、生物合成机制以及相关的生物活性报道进行综述。
1 结构多样的环庚三烯酚酮类天然产物1942 年,研究人员最初从一株青霉菌属(Penicillium stipitatum)真菌代谢产物中提取并分离得到密挤青霉酸(stipitatic acid),然而并没有确证它的结构[6]。
1945 年,科学家猜想密挤青霉酸可能包含非苯环的芳香环结构[7]。
直到1950 年,该化合物的结构才被证实,即包含七元非苯基芳香环结构,这种结构被命名为环庚三烯酚酮[8]。
自此,开启了人们对非苯环芳香族化合物的研究热潮。
迄今为止,随着化学分离技术、测序技术、分子生物学技术的发展,已在真菌、细菌和植物的代谢产物中提取、分离与鉴定了200 多种天然的环庚三烯酚酮化合物,但是在天然产物中环庚三烯酚酮的核心母核结构依然十分少见[2]。
常见的环庚三烯酚酮类化合物根据母核结构上取代基团的性质,取代基团上碳环的数目以及杂原子的存在与否,大体分为9 类:环庚三烯酚酮和羟基环庚三烯酚酮(hydroxytropolone)、环庚三烯酮(tropone)、欧侧柏酚(thujaplicin)及其类似物、环庚三烯酚酮酸、简单的双环环庚三烯酚酮、含有一个环庚三烯酚酮单元的多环结构、含有两个环庚三烯酚酮单元的多环结构、含硫原子的环庚三烯酚酮、含氮原子的环庚三烯酚酮,展现了这一类化合物的结构多样性(表1)[1, 9]。
新型聚多巴胺-肝素_季铵盐_聚丙烯酰胺水凝胶的制备及其应用
摘要慢性伤口是目前全球伤口疾病中的一个很严峻的问题,对人类生活造成了严重的影响。
由细菌和其他微生物感染的慢性伤口是导致并发症的主要因素之一,研发具有抗菌性的水凝胶敷料是提高伤口愈合效率的有效方法。
通常抗菌水凝胶是将水凝胶作为载体,封载抗菌药物或银纳米颗粒。
抗菌药物的滥用会引起耐药性的影响,而银离子的生物安全性一直存疑。
因此,研发出一种新型具有抗菌效果的多功能水凝胶敷料具有重要意义。
本文采用自由基聚合的合成方法,将多巴胺(DA) 、肝素(HP)、抗菌剂2-丙烯酰氧基-乙基-N,N-二甲基-6-溴化铵季铵盐(AEDMHA)和丙烯酰胺(AM)有效地结合在高分子网络中,制备出一种既能满足创口对敷料多种物理性能的需求,还可以实现抗菌性能且生物相容性良好的复合水凝胶敷料。
将制得的水凝胶通过系列的理化性能表征和生物学性能表征,得到以下结果:(1)通过简单的自由基聚合制备得到聚多巴胺-肝素/聚丙烯酰胺水凝胶,该水凝胶制备方法简便,反应条件温和。
制备得到的水凝胶具有组织粘附性,物理机械性能良好,吸水性能和保持水分能力好。
(2)将制备得到的聚多巴胺-肝素/聚丙烯酰胺水凝胶进行抗菌实验,发现对革兰氏阴性菌-大肠杆菌(E.coil)与革兰氏阳性菌-金黄色葡萄球菌(S.aureus)均具有一定的抗菌效果,且抗细菌粘附性能良好;对该水凝胶进行细胞毒性评价,其对小鼠3T3成纤维细胞无毒性,生物相容性良好。
(3)成功合成2-丙烯酰氧基-乙基-N,N-二甲基-6-溴化铵季铵盐(AEDMHA);再将AEDMHA加入到聚多巴胺-肝素/聚丙烯酰胺凝胶前驱液体系中,用以增强原凝胶体系的抗菌效果,通过自由基聚合制得聚多巴胺-肝素/季铵盐/聚丙烯酰胺水凝胶,该凝胶也具有组织粘附性、物理机械性能好、吸水性能好的优点。
(4)将制备得到的聚多巴胺-肝素/季铵盐/聚丙烯酰胺水凝胶进行抗菌实验,发现对E.coil与S.aureus均具有抗菌效果;对该水凝胶进行细胞毒性评价,其对小鼠3T3成纤维细胞有轻度毒性,生物相容性较好。
cas944118-01-8_Peficitinb_MedBio_合成路线
1、Peficitinib物理参数:
常用名
吡西替尼
英文名
Peficitinib
CAS号
944118-01-8
分子量
326.393
密度
1.5±0.1 g/cm3
沸点
无资料
分子式
C18H22N4O2
熔点
无资料
闪点
无资料
2、Peficitinib技术资料:
体外研究
Peficitinib是一种口服JAK抑制剂,JAK1,JAK2,JAK3和Tyk2的IC50分别为3.9,5.0,0.7和4.8 nM。Peficitinib抑制IL-2诱导的T细胞增殖,IC50为10 nM。Peficitinib还抑制大鼠和人全血中IL-2诱导的STAT5磷酸化,平均IC50分别为124 nM和127 nM [1]。
893449-38-2
10mg
≥98%
品牌
货号
中文名称
英文名称
CAS
包装
纯度
MedBio
MED11761
AK-7
AK-7
420831-40-9
100mg
≥98%
品牌
货号
中文名称
英文名称
CAS
包装
纯度
MedBio
MED11682
Sirtinol
Sirtinol
410536-97-9
10mM (in 1mL DMSO)
激酶实验
使用链霉抗生物素蛋白包被的96孔板进行人JAK1,JAK2,JAK3,TYK2-结构域测定。反应混合物含有15mM Tris-HCl(pH7.5),0.01%吐温20,2mM二硫苏糖醇,10mM MgCl2,250nM生物素-Lon-底物-2(对于JAK1,2和3)或生物素-IRS1-底物(对于TYK2)和ATP(终浓度为200μM[JAK1],10μM[JAK2],8μM[JAK3]和4μM[TYK2])。将培立替尼或托法替尼溶于DMSO中。通过添加激酶结构域引发反应,然后在室温下孵育1小时。使用磷酸酪氨酸特异性ELISA,使用HRP缀合的抗磷酸酪氨酸抗体(HRP-PY-20)测量激酶活性,作为生物素-Len-Substrate-2或生物素-IRS-底物的磷酸化速率。Peficitinib的TYK2激酶测定在ATP浓度为10μM时进行[1]。
SDSPAGE原理
在有去污剂十二烷基硫酸钠存在下的聚丙烯酰胺凝胶电泳。SDS-PAGE只是按照 分子大小分离的,而不是根据分子所带的电荷和大小分离的。
SDS带有大量负电荷,当其与蛋白质结合时,所带的负电荷大大超过了蛋白质原 有的负电荷,因而消除或掩盖了不同种类蛋白质间原有电荷的差异,使蛋白质均 带有相同密度的负电荷,因而可利用Mr差异将各种蛋白质分开。
丙烯酰胺属中等毒类,对眼睛和皮肤有一定的刺激作用,可经皮肤、呼吸道和消化道吸收, 在体内有蓄积作用,主要影响神经系统,急性中毒十分罕见。密切大量接触可出现亚急性中毒, 中毒者表现为嗜睡、小脑功能障碍以及感觉运动型多发性周围神经病。长期低浓度接触可引起 慢性中毒,中毒者出现头痛、头晕、疲劳、嗜睡、手指刺痛、麻木感,还可伴有两手掌发红、 脱屑,手掌、足心多汗,进一步发展可出现四肢无力、肌肉疼痛以及小脑功能障碍等。
过硫酸铵的应用:过硫酸铵提供驱动丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚合所必需的自由基。须 新鲜配制。 过硫酸铵是乳胶或丙烯酸单体聚合液、醋酸乙烯、氯乙烯等产品的引发 剂,同时也是苯乙烯、丙烯腈、丁二烯等胶体发生共聚作用的引发剂。
过硫酸铵-TEMED(四甲基乙二胺)系统 :在Acr 和Bis的溶液中放入这个 催化系统后,过硫酸铵[(NH4)2S2O8]产生出游离氧原子使单体成为具有 游离基的状态,从而发生聚合作用。聚合的初速度和过硫酸铵浓度的平方 根成正比。这种催化系统需要在碱性条件下进行。例如,在pH 8.8条件下7 %的丙烯酰胺溶液30分钟就能聚合完毕;在 pH 4.3时聚合很慢,要90分钟 才能完成。温度与聚合的快慢成正比。通常在室温下就很快聚合,温度升 高聚合更快。如将混合后的凝胶溶液放在近0℃的地方,就能延缓聚合。一 般来讲,温度过低,有氧分子或不纯物质存在时都能延缓凝胶的聚合。为 了防止溶液中气泡含有氧分子而妨碍聚合,在聚合前须将溶液分别抽气, 然后再混合。
SDS聚丙烯酰胺凝胶的配制
SDS聚丙烯酰胺凝胶的配制
(1)试剂:丙烯酰胺和N-N’-亚甲双丙烯酰胺
(电泳极)
将温热的去离子水、29%(W/V)丙烯酰胺、1%(W/V)N-N’-亚甲双丙烯酰胺进行配制,使PH 小于7.0,将配好的储存液置于棕色瓶中,室温保存。
(2)SDS(十二烷基硫酸铵)电泳极
用去离子水配成10%(W/V)储存液保存于室温。
(3)分离胶和积层胶的Tris缓冲液
Tris碱,见附录13,1.5Tris(PH=8.8) 1.0M Tris(PH=6.8)
(4)TEMED(N,N,N’,N’-四甲基乙二烷)电泳极
(5)过硫酸铵去离子水配制小量10%(W/V)储存液,4℃保存。
(6)Tris-甘氨酸电泳缓冲液
25mmol/L Tris碱,250mmol/L 甘氨酸(电泳极)(PH=8.3)0.1%SDS,可配成5X储存液备用。
即900ml去离子水+15,1g Tris碱+94g甘氨酸+50ml 10%(W/V)的电泳极SDS储存液,用去离子水补至1000ml,则为5X储存液。
2016年度精品--sigma弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂说明书
sigma弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂说明书生物商城 / 2011-02-08一、定义:弗氏佐剂(Freundadjuvant),这是目前最常用于动物实验的佐剂,它是将抗原水溶液与油剂(石蜡油或植物油)等量混合,再加乳化剂(羊毛脂或叶吐温80)制成油包水抗原乳剂,称之为不完全弗氏佐剂。
如在不完全佐剂中加入分枝杆菌(如死卡苗)则称为完全弗氏佐剂。
二、制备方法:弗氏佐剂是现在动物实验中最常用的佐剂,分为不完全弗氏佐剂和完全弗氏佐剂。
不完全弗氏佐剂是液体石蜡与羊毛脂混合而成,组分比为1~5:1,可根据需要而定,通常为2:1。
不完全佐剂中加卡介苗(最终浓度为2~20mg/ml)或死的结核分枝杆菌,即为完全弗氏佐剂(FCA)。
一般首次注射时用1/2体积FCA 加上1/2体积的抗原进行乳化,第二次或第三次注射时用不完全佐剂或不用佐剂。
如不加佐剂,则抗原量增大10-20倍。
配制方法:按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内,用超声波使之混匀,高压灭菌,置4℃下保存备用。
在免疫动物前,先将弗氏佐剂与抗原按一定比例混合,佐剂和抗原体积比一般为1:1,制备成"油包水"乳状液。
因为含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化复合物,注射入动物体内时一定要保持乳化状态。
抗原用量视抗原分子量不同及免疫原性及免疫动物不同而有一定差异,无统一标准和固定模式。
一般是每兔(约2kg重)或每羊(约20kg重)第1次注射抗原1mg,以后逐次增加抗原量,最多每次不超过3mg。
佐剂与抗原乳化可按如下方法进行:(1)研磨法:先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内,待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液,边滴边按同一方向研磨,滴加抗原的速度要慢。
待抗原全部加入后,继续研磨一段时间,使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。
本法适于制备大量的佐剂抗原,缺点是研钵壁上粘附大量乳剂,抗原损失较大。
(2)注射器混合法:将等量的弗氏佐剂和抗原溶液分别吸入两个注射器内,两注射器之间以一细胶管相连,注意排净空气,然后交替推动针管,直至形成粘稠的乳剂为止。
CAS号60477-34-1_Pifithrin-β_MedBio参考用途
MedBio
MED11342
山奈酚
Kaempferol
520-18-3
50mg
≥98%
MedBio
MED11304
PD-1/PD-L1 Inhibitor 3
PD-1/PD-L1 Inhibitor 3
1629654-95-0
5mg
≥98%
MedBio
MED11209
YM-155盐酸盐
YM-155 hydrochloride
25mg
≥98%
355406-09-6
25mg
≥98%
MedBio
MED11287
變棉子酚
(+)-Apogossypol
66389-74-0
5mg
≥98%
MedBio
MED11195
芸苔素内酯
Brassinolide
72962-43-7
5mg
≥98%
MedBio
MED11300
醋酸艾塞那肽
A-1155463
1235034-55-5
CAS
1、Pifithrin-β物理参数:
常用名
Pifithrin-β
英文名
Pifithrin-β
CAS号
60477-34-1
分子量
268.37700
密度
无资料
沸点
无资料
分子式
C16H16N2S
熔点
无资料
2、Pifithrin-β技术资料:
体外研究
Pifithrin-α是p53蛋白的抑制剂,被认为是癌症和神经退行性疾病治疗的先导化合物。Pifithrin-α在培养基中非常不稳定,并迅速转化为其缩合产物pifithrin-β,即N-乙酰基衍生物[2]。24小时后,活力测定显示1和10μMpifithrin-β的预处理发挥神经保护作用[3]。
氟喹诺酮类药物沙拉沙星分子印迹聚合物的制备
034 (m 1, 解 在 1m .4g 4 mo)溶 5 L二 氯 甲 烷 中 , 声 振 超
合成抗菌素药物 , 这类药物具有广谱抗菌活性 。最 近研 究表 明 ,一 些 氟 喹 诺 酮 类 药 物 具 有抗 肿 瘤 活 性 , 一 种潜 在 力 的治 疗 癌 症 的 药 物 , 在 与其 它 是 但
何 丹凤 王俊 涛 , , 佟艳 斌
(1大庆师范学院 化学化工学院 , . 黑龙江 大庆 1 3 1 ;2黑龙 江八 一农垦大 学 文理学院 . 672 . 黑龙江 大庆 1 0 3 6 0 9)
摘
要 : 文采 用本体聚合法 , 本 以沙拉沙 星为模 板分子合成 了沙 拉沙星分子 印迹 聚合 物 , 用高效液相 并
色谱法研究了印迹 聚合物 的识别性能及作 为色谱 固定相 的分 离及 影响因素 ,该固定相对模板分子有较好 的
的 特 异 性 识别 能力 。
关键词 : 分子印迹聚合物 ; 高效液相色谱法 ; 沙拉沙星 ; 本体聚合
中 图 分 类 号 :6 13 0 2- 文 献标 识 码 : A
HE Da -e g , AN J n to T n fn W G u -a , ONG n bn Ya — i
Ab t a t T e sr c : h MI s s n h sz d i s r f x cn s e l t i g u k oy rz t n, a d h g P wa y t e i w t a a o a i a tmp ae Usn b l p lme a i e h l i o n ih p r r n e l u d c r mao r p y wa mp o e o su y t e r c g i o r p r s p r t n a d i f e cn e f ma c i i h o t g a h s e ly d t t d h e o n t n p o e t e a ai n n l n i g o q i y, o u fc os a h tt n r h s h o t g a h c o h e u t g MI . e sai n r h s e o iin o mp a e a t r s t e s i ay p a e c r ma o r p i ft e r s l n P T t t a y p a e r c g t ft ao i h o n o e lt ee n s w t p cf d n i c t n c p bl y t e e e p ce e aa in efc . lme t i a s e i c i e t a i a a i t o me tt x e td s p r t fe t h i i f o i h o
衍生化HPLC法测定低分子肝素钠中过氧化氢残留
衍生化
HPLC法测定低分子肝素钠中过氧化氢残留
浦 雨 伟 \ 陈 宁 2, 丁逸梅以
南 京 工 业 大 学 1 药学院, 2江苏省药物研究所有限公司, 南 京 210009
摘 要 目 的 : 建立测定低分子肝素钠中痕量过氧化氢残留的方法。方 法 : 用 4 - 氨基安替比 林和苯酚溶液在过氧化物酶的作用下与过氧化氢的衍生化反应, 以 Thermo ODS -2 hypernl C 1 8 色谱柱(4.6mmx 250 mm , 5 pm )在流动相( 甲醇-水=60:40)的条件下, 分离检测过氧化氢的浓度。 结果: 该方法专属性好, 过氧化氢的最低检测限为0.0302 pg • mL-1, 定量下限为0.1007 pg • mL-1, 在 0.1〜 2.0|x g .mL-1的浓度范围内线性关系良好; 平均回收率为97.58°%, R S D 为 4.3°%。结 论 : 建立的 方法可对低分子肝素钠中痕量过氧化氢残留进行测定。 关 键 词 过氧化氢; H PLC法; 衍生化; 4-氨基安替比林; 苯酚; 过氧化物酶 中图分类号
4-氨基安替比林( 纯 度 95.9%, 批 号 160217)、 *
作者简介浦雨伟, 男, 硕 士 研 究 生 E— mail: pulin_7@ 通讯作者 丁逸梅, 女, 研究员 E— mail: jsyws@ 收稿日期
2016—11—09
修回日期
2016—12—11
1. 0m L 储备液②, 加缓冲液稀释定容至 20mL , 即得。
衍生 化 试 液 :分 别 精 密 称 取 4 - 氨基安替比林 10 mg、 苯 酚 400 mg、 辣根过氧化物酶4 U , 置 100 mL 量瓶中, 用 pH 7.0缓冲液定容, 临用现配。 对照品溶液:精密量取1.0m L 过氧化氢(5.0 pg mL-1)置 10 m L 量 瓶 中 , 加 入 1.0m L 衍 生 化 试 剂 , 用
一种合成Frutinone A及其衍生物的新方法
一种合成Frutinone A及其衍生物的新方法张娜;陈志卫【摘要】以4-羟基香豆素和水杨醛为原料,在哌啶催化下,甲苯中回流反应,得到具抗真菌活性的天然化合物Frutinone A及其类似物,该方法具有步骤少、环境友好、收率较高等优点。
%The natural fungicidal compounds, Frutinone A and its derivatives, were synthesized by refluxing 4-hydroxyxoumarins and salicylaldehyde in toluene. The catalyst was piperidine. This method has the advantages of brief reaction steps, environmental friendliness and higher yield.【期刊名称】《浙江化工》【年(卷),期】2014(000)008【总页数】3页(P14-16)【关键词】Frutinone A;4-羟基香豆素;水杨醛;哌啶【作者】张娜;陈志卫【作者单位】浙江工业大学药学院,浙江杭州 310014;浙江工业大学药学院,浙江杭州 310014【正文语种】中文香豆素是具有苯骈α-吡喃酮母核的一类天然产物的总称,其衍生物是一类重要的有机杂环化合物,由于具有抗菌[1]、抗氧化[2]、抗肿瘤[3]、抗凝[4]和抗HIV[5]等多种生物活性而倍受人们的关注。
1989 年,Paolo 等人首次从远志科植物金露梅的叶和根中提取得到Frutinone A、B、C 三种色原酮香豆素类化合物,结构如图1 所示,活性测试实验表明Frutinone A 对黄瓜黑星病菌(Cladosporium cucumerinum)具有强烈的杀菌活性[6]。
1997 年,Bergeron 等人从非洲植物P.gazensis Bak 和P.teretifoliaL 中也提取分离得到了化合物Frutinone A,同时发现其对白色念珠菌表现出抗菌活性[7]。
SDS-PAGE各试剂作用
之答禄夫天创作Tonight convenient? Our lab dinner is in the evening, we will punctually departure from the laboratory at five thirty聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成,聚合过程由自由基催化完成.催化聚合的经常使用方法有两种:化学聚合法(经常使用)和光聚合法.PAGE根据其有无浓缩效应,分为连续系统和不连续系统两年夜类.连续系统电泳:体系中缓冲液pH值及凝胶浓度相同;带电颗粒在电场作用下,主要靠电荷和分子筛效应.不连续系统:由于缓冲液离子成份、pH、凝胶浓度及电位梯度的不连续性;带电颗粒在电场中泳动不单有电荷效应,分子筛效应,还具有浓缩效应,因而其分离条带清晰度及分辨率比连续系统电泳的较好.不连续体系由电极缓冲液、浓缩胶及分离胶所组成.浓缩胶是由AP催化聚合而成的年夜孔胶,凝胶缓冲液为pH6.7的Tris-HC1.分离胶是由AP催化聚合而成的小孔胶,凝胶缓冲液为pH8.9 Tris-HC1.电极缓冲液是pH8.3 Tris-甘氨酸缓冲液.2种孔径的凝胶、2种缓冲体系、3种pH值使不连续体系形成了凝胶孔径、pH值、缓冲液离子成份的不连续性,这是样品浓缩的主要因素.SDS-PAGE各试剂作用1.过硫酸铵(APS)为催化剂2.四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂:在聚合过程中,TEMED催化过硫酸铵发生自由基,后者引发丙烯酰胺单体聚合,同时甲叉双丙烯酰胺与丙烯酰胺链间发生甲叉键交联,从而形成三维网状结构3.SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏卵白分子的二、三级结构.4.强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂.在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成卵白- SDS胶束,所带的负电荷年夜年夜超越了卵白原有的电荷量,这样就消除分歧分子间的电荷不同和结构不同.5.聚丙烯酰胺——为卵白质电泳提供载体,其凝固的好坏直接关系到电泳胜利与否,与促凝剂及环境密切相关;制胶缓冲液选择tris-HCL系统;AP——提供自由基;TEMED——催化剂,催化自由基引起的聚合反应进行;十二烷基硫酸钠(SDS)——阳离子去污剂,作用:去卵白质电荷、解离卵白质之间的氢键、取消卵白分子内的疏水作用、去多肽折叠.6.7.8.9.10.1112.⒈配胶缓冲液系统对电泳的影响?在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCl 缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统.在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而Cl离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,卵白分子就介于二者之间泳动.由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压梯度,压着卵白质分子聚集到一起,浓缩为一狭窄的区带.当样品进入分离胶后,由于胶中pH的增加,呈碱性,甘氨酸年夜量解离,泳动速率增加,直接紧随氯离子之后,同时由于分离胶孔径的缩小,在电场的作用下,卵白分子根据其固有的带电性和分子年夜小进行分离.所以,pH对整个反应体系的影响是至关重要的,实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况,应首要考虑该因素,固然其他的因素也可以从多方面考虑.⒉样品如何处置?根据样品分离目的分歧,主要有三种处置方法:还原SDS处置、非还原SDS处置、带有烷基化作用的还原SDS处置.1)还原SDS处置:在上样buffer中加入SDS和DTT(或β-巯基乙醇)后,卵白质构象被解离,电荷被中和,形成SDS与卵白相结合的分子,在电泳中,只根据分子量来分离.一般电泳均按这种方式处置,样品稀释适当浓度,加入上样Buffer,离心,沸水煮5min,再离心加样.2)带有烷基化作用的还原SDS处置:碘乙酸胺的烷基化作用可以很好的并经久牢固的呵护SH基团,获得较窄的谱带;另碘乙酸胺可捕集过量的DTT,而防止银染时的纹理现象.100ul样品缓冲液中10ul 20%的碘乙酸胺,并在室温保温30min.3)非还原SDS处置:生理体液、血清、尿素等样品,一般只用1%SDS沸水中煮3min,未加还原剂,因而卵白折叠未被破坏,不成作为测定分子量来使用.⒊ SDS-PAGE电泳凝胶中各主要成份的作用?聚丙烯酰胺的作用:丙烯酰胺与为卵白质电泳提供载体,其凝固的好坏直接关系到电泳胜利与否,与促凝剂及环境密切相关;制胶缓冲液:浓缩胶选择pH6.8,分离胶选择pH8.8,选择Tris-HCl系统,TEMED与AP:AP 催化剂,催化单丙和双丙聚合成聚丙烯酰胺.TEMED四甲基乙二胺,催凝剂,加速AP催化作用;十二烷基磺酸钠(SDS):阴离子去污剂,作用有四:去卵白质电荷、解离卵白质之间的氢键、取消卵白分子内的疏水作用、去多肽折叠.⒋提高SDS-PAGE电泳分辨率的途径?聚丙烯酰胺的充沛聚合,可提高凝胶的分辨率.建议做法:待凝胶在室温凝固后,可在室温下放置一段时间使用.忌即配即用或4度冰箱放置,前者易招致凝固不充沛,后者可招致SDS结晶.一般凝胶可在室温下保管4天,SDS可水解聚丙烯酰胺.一般经常使用的有氨基黑、考马斯亮蓝、银染色三种染料,分歧染料又各自分歧的染色方法,具体可参照郭尧君编著的《卵白质电泳技术手册》P82-103.⒌“ 微笑”(两边翘起中间凹下)形带原因?主要是由于凝胶的中间部份凝固不均匀所致,多呈现于较厚的凝胶中.处置法子:待其充沛凝固再作后续实验.⒍“皱眉”(两边向下中间鼓起)形带原因?主要呈现在卵白质垂直电泳槽中,一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净.处置法子:可在两板间加入适量缓冲液,以排除气泡.⒎为什么带呈现拖尾现象?主要是样品融解效果欠安或分离胶浓渡过年夜引起的.处置法子:加样前离心;选择适当的样品缓冲液,加适量样品促溶剂;电泳缓冲液时间过长,重新配制;降低凝胶浓度.⒏为什么带呈现纹理现象?主要是样品不溶性颗粒引起的.处置法子:加样前离心;加适量样品促溶剂.⒐什么是“鬼带”,如何处置?“鬼带”就是在跑年夜分子构象复杂的卵白质分子时,常会呈现在泳道顶端(有时在浓缩胶中)的一些年夜分子未知条带或加样孔底部有沉淀,主要由于还原剂在加热的过程中被氧化而失去活性,致使原来被解离的卵白质分子重新折叠结合和亚基重新缔合,聚合成年夜分子,其分子量要比目标条带年夜,有时不能进入分离胶.但它却于目标条带有相同的免疫学活性,在WB反应中可见其能与目标条带对应的抗体作用.处置法子:在加热煮沸后,再添加适量的DTT或Beta巯基乙醇,以弥补缺乏的还原剂;或可加适量EDTA来阻止还原剂的氧化.⒑为什么溴酚蓝不能起到指示作用?我们在实验中常会遇到溴酚蓝已跑出板底,但卵白质却还未跑下来的现象.主要与缓冲液和分离胶的浓度有关.处置法子:更换正确pH值的Buffer;降低分离胶的浓度.⒒为什么电泳的条带很粗?电泳中条带很粗是罕见的事,主要是未浓缩好的原因.处置法子:适当增加浓缩胶的长度;保证浓缩胶贮液的pH正确(6.7);适当降低电压;⒓为什么电泳电压很高而电流却很低呢?这种现象一般初学者易呈现.比如电压50v以上,可电流却在5mA以下.主要是由于电泳槽没有正确装配,电流未形成通路.包括:a.内外槽装反;b.外槽液过少;c.电泳槽底部的绝缘体未去失落(比如倒胶用的橡胶皮).处置法子:电泳槽正确装配即可.⒔浓缩胶与分离胶断裂、板间有气泡对电泳有影响吗?这主要呈现在初学者中,一般对电泳不会有太年夜的影响.前者主要原因是拔梳子用力不均匀或过猛所致;后者是由于在解除制胶的夹子后,板未压紧而致空气进入引起的.⒕凝胶时间分歧毛病,或慢或快,怎么回事?通常胶在30MIN-1H内凝.如果凝的太慢,可能是TEMED,APS剂量不够或者失效.APS应该现配现用,TEMED不稳定,易被氧化成黄色.如果凝的太快,可能是APS和TEMED用量过多,此时胶太硬易裂,电泳时易烧胶.⒖电泳时间比正常要长?可能由于凝胶缓冲系统和电级缓冲系统地PH选择毛病,即缓冲系统地PH和被分离物质的等电点分歧太小,或缓冲系统的离子强度太高.⒗分离胶加上后为什么要立即加水?加入分离胶后,立即覆一层双蒸水,一是为了使分离胶界面坚持水平,用水就可以把它压平,使卵白质分子跑时在同一水平线上;二是阻止空气中的氧气对凝胶聚合的抑制作用.⒘尿素20--50g10×TBE缓冲液8ml30%丙烯酰胺10mlAPS(过硫酸铵)500--800ul [注:现配现用]。
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Inhibitors, Agonists, Screening LibrariesSafety Data Sheet Revision Date:May-24-2017Print Date:May-24-20171. PRODUCT AND COMPANY IDENTIFICATION1.1 Product identifierProduct name :Pifithrin-α (hydrobromide)Catalog No. :HY-15484CAS No. :63208-82-21.2 Relevant identified uses of the substance or mixture and uses advised againstIdentified uses :Laboratory chemicals, manufacture of substances.1.3 Details of the supplier of the safety data sheetCompany:MedChemExpress USATel:609-228-6898Fax:609-228-5909E-mail:sales@1.4 Emergency telephone numberEmergency Phone #:609-228-68982. HAZARDS IDENTIFICATION2.1 Classification of the substance or mixtureNot a hazardous substance or mixture.2.2 GHS Label elements, including precautionary statementsNot a hazardous substance or mixture.2.3 Other hazardsNone.3. COMPOSITION/INFORMATION ON INGREDIENTS3.1 SubstancesSynonyms:Pifithrin hydrobromide; Pifithrin⁻α hydrobromide; PFTα hydrobromideFormula:C16H19BrN2OSMolecular Weight:367.30CAS No. :63208-82-24. FIRST AID MEASURES4.1 Description of first aid measuresEye contactRemove any contact lenses, locate eye-wash station, and flush eyes immediately with large amounts of water. Separate eyelids with fingers to ensure adequate flushing. Promptly call a physician.Skin contactRinse skin thoroughly with large amounts of water. Remove contaminated clothing and shoes and call a physician.InhalationImmediately relocate self or casualty to fresh air. If breathing is difficult, give cardiopulmonary resuscitation (CPR). Avoid mouth-to-mouth resuscitation.IngestionWash out mouth with water; Do NOT induce vomiting; call a physician.4.2 Most important symptoms and effects, both acute and delayedThe most important known symptoms and effects are described in the labelling (see section 2.2).4.3 Indication of any immediate medical attention and special treatment neededTreat symptomatically.5. FIRE FIGHTING MEASURES5.1 Extinguishing mediaSuitable extinguishing mediaUse water spray, dry chemical, foam, and carbon dioxide fire extinguisher.5.2 Special hazards arising from the substance or mixtureDuring combustion, may emit irritant fumes.5.3 Advice for firefightersWear self-contained breathing apparatus and protective clothing.6. ACCIDENTAL RELEASE MEASURES6.1 Personal precautions, protective equipment and emergency proceduresUse full personal protective equipment. Avoid breathing vapors, mist, dust or gas. Ensure adequate ventilation. Evacuate personnel to safe areas.Refer to protective measures listed in sections 8.6.2 Environmental precautionsTry to prevent further leakage or spillage. Keep the product away from drains or water courses.6.3 Methods and materials for containment and cleaning upAbsorb solutions with finely-powdered liquid-binding material (diatomite, universal binders); Decontaminate surfaces and equipment by scrubbing with alcohol; Dispose of contaminated material according to Section 13.7. HANDLING AND STORAGE7.1 Precautions for safe handlingAvoid inhalation, contact with eyes and skin. Avoid dust and aerosol formation. Use only in areas with appropriate exhaust ventilation.7.2 Conditions for safe storage, including any incompatibilitiesKeep container tightly sealed in cool, well-ventilated area. Keep away from direct sunlight and sources of ignition.Recommended storage temperature:Powder-20°C 3 years4°C 2 yearsIn solvent-80°C 6 months-20°C 1 monthShipping at room temperature if less than 2 weeks.7.3 Specific end use(s)No data available.8. EXPOSURE CONTROLS/PERSONAL PROTECTION8.1 Control parametersComponents with workplace control parametersThis product contains no substances with occupational exposure limit values.8.2 Exposure controlsEngineering controlsEnsure adequate ventilation. Provide accessible safety shower and eye wash station.Personal protective equipmentEye protection Safety goggles with side-shields.Hand protection Protective gloves.Skin and body protection Impervious clothing.Respiratory protection Suitable respirator.Environmental exposure controls Keep the product away from drains, water courses or the soil. Cleanspillages in a safe way as soon as possible.9. PHYSICAL AND CHEMICAL PROPERTIES9.1 Information on basic physical and chemical propertiesAppearance White to off-white (Solid)Odor No data availableOdor threshold No data availablepH No data availableMelting/freezing point No data availableBoiling point/range No data availableFlash point No data availableEvaporation rate No data availableFlammability (solid, gas)No data availableUpper/lower flammability or explosive limits No data availableVapor pressure No data availableVapor density No data availableRelative density No data availableWater Solubility No data availablePartition coefficient No data availableAuto-ignition temperature No data availableDecomposition temperature No data availableViscosity No data availableExplosive properties No data availableOxidizing properties No data available9.2 Other safety informationNo data available.10. STABILITY AND REACTIVITY10.1 ReactivityNo data available.10.2 Chemical stabilityStable under recommended storage conditions.10.3 Possibility of hazardous reactionsNo data available.10.4 Conditions to avoidNo data available.10.5 Incompatible materialsStrong acids/alkalis, strong oxidising/reducing agents.10.6 Hazardous decomposition productsUnder fire conditions, may decompose and emit toxic fumes.Other decomposition products - no data available.11.TOXICOLOGICAL INFORMATION11.1 Information on toxicological effectsAcute toxicityClassified based on available data. For more details, see section 2Skin corrosion/irritationClassified based on available data. For more details, see section 2Serious eye damage/irritationClassified based on available data. For more details, see section 2Respiratory or skin sensitizationClassified based on available data. For more details, see section 2Germ cell mutagenicityClassified based on available data. For more details, see section 2CarcinogenicityIARC: No component of this product present at a level equal to or greater than 0.1% is identified as probable, possible or confirmed human carcinogen by IARC.ACGIH: No component of this product present at a level equal to or greater than 0.1% is identified as a potential or confirmed carcinogen by ACGIH.NTP: No component of this product present at a level equal to or greater than 0.1% is identified as a anticipated or confirmed carcinogen by NTP.OSHA: No component of this product present at a level equal to or greater than 0.1% is identified as a potential or confirmed carcinogen by OSHA.Reproductive toxicityClassified based on available data. For more details, see section 2Specific target organ toxicity - single exposureClassified based on available data. For more details, see section 2Specific target organ toxicity - repeated exposureClassified based on available data. For more details, see section 2Aspiration hazardClassified based on available data. For more details, see section 212. ECOLOGICAL INFORMATION12.1 ToxicityNo data available.12.2 Persistence and degradabilityNo data available.12.3 Bioaccumlative potentialNo data available.12.4 Mobility in soilNo data available.12.5 Results of PBT and vPvB assessmentPBT/vPvB assessment unavailable as chemical safety assessment not required or not conducted.12.6 Other adverse effectsNo data available.13. DISPOSAL CONSIDERATIONS13.1 Waste treatment methodsProductDispose substance in accordance with prevailing country, federal, state and local regulations.Contaminated packagingConduct recycling or disposal in accordance with prevailing country, federal, state and local regulations.14. TRANSPORT INFORMATIONDOT (US)This substance is considered to be non-hazardous for transport.IMDGThis substance is considered to be non-hazardous for transport.IATAThis substance is considered to be non-hazardous for transport.15. REGULATORY INFORMATIONSARA 302 Components:No chemicals in this material are subject to the reporting requirements of SARA Title III, Section 302.SARA 313 Components:This material does not contain any chemical components with known CAS numbers that exceed the threshold (De Minimis) reporting levels established by SARA Title III, Section 313.SARA 311/312 Hazards:No SARA Hazards.Massachusetts Right To Know Components:No components are subject to the Massachusetts Right to Know Act.Pennsylvania Right To Know Components:No components are subject to the Pennsylvania Right to Know Act.New Jersey Right To Know Components:No components are subject to the New Jersey Right to Know Act.California Prop. 65 Components:This product does not contain any chemicals known to State of California to cause cancer, birth defects, or anyother reproductive harm.16. OTHER INFORMATIONCopyright 2017 MedChemExpress. The above information is correct to the best of our present knowledge but does not purport to be all inclusive and should be used only as a guide. The product is for research use only and for experienced personnel. It must only be handled by suitably qualified experienced scientists in appropriately equipped and authorized facilities. The burden of safe use of this material rests entirely with the user. MedChemExpress disclaims all liability for any damage resulting from handling or from contact with this product.Caution: Product has not been fully validated for medical applications. For research use only.Tel: 609-228-6898 Fax: 609-228-5909 E-mail: tech@Address: 1 Deer Park Dr, Suite Q, Monmouth Junction, NJ 08852, USA。