酶联免疫 ppt课件

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• 洗去未结合的抗体 • 加入酶催化变色的底物 • 抗原浓度与酶的浓度成正比
竞争法
• 直接竞争法:标记抗原,与检测样品中
的抗原竞争抗体
• 间接竞争法:标记抗体,固相抗原与液
相抗原(样本)竞争标记抗体
直接竞争法


竞争
待测
竞底争
抗原
抗原
抗物 原
待测 抗原
载体ห้องสมุดไป่ตู้
载体
载体
直接竞争法:标记抗原,与检测样品中的抗 原竞争抗体

待测
间接竞争法抗原
待测

底 物
抗原
待测 抗原

竞争 抗原
载体
竞争 抗原
载体
竞争 抗原
载体
间接竞争法:标记抗体,固相抗原与液相抗 原(样本)竞争标记抗体
结束
谢谢!
号变化
常见的检测方法有以下几种:
• 直接法/间接法 • 双抗体(抗原)夹心法 • 竞争法
直接法
• 在微孔板的孔中加入含有待测
抗原的缓冲溶液,放置一段时 间使抗原通过静电作用吸附到 载体上
• 加入与反应无关的蛋白溶液
(如牛血清蛋白),将载体上 未被抗原覆盖的部分摭住
• 加入酶标抗体,与待测抗原结

将可溶性的抗原或抗体结合到聚 苯乙烯等固相载体上,利用抗原 抗体结合专一性进行免疫反应的
定性和定量检测方法
ELISA基本规则
• 抗原或抗体的固相化、特异性结合以及抗原或
抗体的酶标记
• 体系中的抗原和抗体保持免疫学活性 • 体系中的酶保持活性 • 所有未被固定的部分会被洗去 • 酶标物与受检样本的含量能呈现出特定的比例 • 根据酶对底物的催化会产生某种可以检测的信
竞争法直接法在微孔板的孔中加入含有待测抗原的缓冲溶液放置一段时间使抗原通过静电作用吸附到载体上加入与反应无关的蛋白溶液如牛血清蛋白将载体上未被抗原覆盖的部分摭住抗原浓度与酶的浓度成正比间接法双抗体抗原夹心法通过信号的变化检测抗原含量竞争法直接竞争法
酶联免疫吸附测定(ELISA)
作者:雷雨田 2016年8月
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