临床生物化学检验-第7章 临床酶学检验技术
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1
酶活性的国际单位定义; 酶活性测定的连续监测法的概念、计算和分 类;酶活性测定的影响因素及最适条件的确定原则。
血清酶变化的病理机制;酶动力学参数的含义;电泳法和免疫抑制法 测定同工酶的原理。
酶蛋白质量测定的优点;定时法测定临床常用诊断酶的原理和评价; 同工酶的其他检测方法。
2
第一阶段(1908 ~ 1950) :利用化学和有机化学的反应原理测定酶促反应生成量或底物消耗量定 时法测定AMY (1908年, Wohlgemuth)、 LPS、ALP、ACP等几种酶。
2. 国际酶学委员会将每种酶用4个数字加以系统编号: 数字前冠以EC ,数字之间用黑点 隔开。第一个数字表示酶的类别 ,第二个表示亚类 ,第三个表示亚-亚类 ,第四个表示 酶的编号序数:如EC1.1.1.27 LD (乳酸脱氢酶)。
3. 同工酶:催化相同化学反应, 但酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的
心梗、肌病、颅脑损伤、肿瘤 心梗、肌病、肺梗死、肝病、肿瘤 肝胆疾病、骨病、妊娠、结肠炎、肿瘤
红细胞、前列腺、溶酶体 γ-GT1、 γ-GT2、 γ-GT3、γ-GT4
前列腺癌、血液病、骨肿瘤 肝癌、梗阻性黄疸
P-AMY(P1、P2、P3)、S-AMY(S1、 S2、 S3、S4) ALT、 mALT AST、 mAST
18
连续监测法(continuous monitoring assay): 在多个时间点连续测定产物生成量或底物消耗量 ,选取线性期的速率来
计算酶活性 ,又称速率法。将酶与底物在特定条件 (缓冲液、温度等) 下孵育 ,每隔一定时间 (2s∼60s) 连续测定酶促反应过程中某一底物或产物的特征信 号的变化 ,从而计算出每分钟的信号变化速率 ,求 出酶活性浓度。 尤其适合在自动化分析仪上使用
11
1. 灵敏度高: 灵敏度达到ng/L至μg/L的水平。 2. 特异性高: 测定的影响因素较少 ,几乎不受体液中激活剂、抑制剂的影响 ,不受药 物的干扰。 3. 可测定一些酶活性很难测定的酶: 如不表达酶活性的酶原或脱辅基的酶蛋白或失活 的酶蛋白。 4. 与酶活性测定一起 ,计算免疫比活性: 有可能为临床应用提供新的资料和信息。
GPDA
-
-
4NA(405nm) 9.88
2. NAD (P) H
NAD (P) H 340nm NA (P) +
260nm
ALT AST CK ADA 5′- NT 5′- NT AMY Lipase
IFCC
IFCC
IFCC
GLDH
5′- AMP
ADA-GLDH
5′- IMP
NP-XOD-POD
EPS
5. 在同工酶测定中的应用:与电泳法和层析法相比 ,免疫学法测定简单快速灵敏度高, 标本量少 ,重复性好。与化学抑制法相比特异性好。
12
1. 惯用单位:酶活性测定方法的建立者所规定的单位。由于单位定义不同 ,参考值差别很 大 ,难以进行比较。 2. 国际单位(international unit, IU) :在特定的条件下 ,每分钟转化1μmol底物的酶 量为一个国际单位。 3. 酶活性浓度 1U= 1 μmol/min = 1 ×10-6/60s = 16.67 nkatal
1. 绝大部分的酶是蛋白质 ,有些酶是核酸和酶蛋白组成的复合体,极少数酶是核酸 (ribozyme) 。 2. 具有极高的催化效率、高度的特异性 (specificity) 及催化作用的可调节性等特点。 3. 由酶所催化的反应称为酶促反应。
酶活性 (activity) 、底物 (substrate)、 产物 (product)、 激活剂 (activator)、抑制剂 (inhibitor)
17
测定酶与底物作用反应一定时间后底物或产物变化的总量 ,计算酶促反应 平均速度。 1. 优点:比较简单 ,最后测定时因酶促反应已被终止 ,故所用仪器无需恒温装 置 ,显色剂的选择也可不考虑对酶活性的影响。 2. 缺点:无法知道在整个酶促反应进程中是否都处于线性期。利用该法测定酶 活性浓度 ,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要非常精确 ,否则会 引起较大误差。
GP-BB、 GP-LL、 GP-MM (GP1,GP2,GP3)
GST1和GST2(GST-α)、GST3(GST-μ)、 GST4、 GST5 (GST-π) ALD-A、 ALD-B、 ALD-C
NAG-A、 NAG-B、 NAG-I
急、慢性胰腺炎、腮腺炎 心梗、肝病 心梗、肝病 心梗、脑损伤、 肾病、肌病
1. 直接法 :在不终止酶促反应条件下 ,直接通过测定反应体系中底物或产物理化 特性的变化如吸光度、荧光、旋光性、pH、电导率、粘度等计算出酶活性浓度。 只有底物与产物之间 ,在理化性质等方面有显著差异时 ,才能使用直接法。 2. 间接法 :采用酶偶联反应是间接法测定酶活性的主要技术特点。
特点:无须终止酶促反应 ,可观察到整个反应过程; 选择线性反应期来计算酶活性 ,结果准确可靠; 要求检测仪器具有恒温装置及自动检测功能。
19
1. K
2.
Vs (ml) ε
Vt (ml) b (cm)
20
ALP
4-
4-
PNP (405nm) 18.5
1.
GGT
3- -γ-L-
5- -2-
(405nm, P-
-α-
-
2- 2-CP (405nm, PH 6.0 ) 6.1
AFU
2- -
-α-
2-CP (405nm, PH 6.5 ) 6.2
5
(二) 血清酶的去路 1. 肾小球滤过从尿液中排出: 是小分子蛋白酶(如淀粉酶)的主要清除方式。 2. 网状内皮系统清除:CKMM、 LD5、AST等由肝脏枯否细胞受体介导的內吞作用清除。 3. 血管内失活或灭活(主要清除方式):酶离开细胞内环境后,因环境不同、稀释作用、 蛋白酶分解、解聚或聚合作用、抑制剂等都可使酶失活或灭活。
22
(Kinetics of Enzyme-Catalyzed Reaction)
S (Subestrate):
E (Enzyme):
AMY活性升高。
8
1. 1961年国际酶学委员会(Enzyme Committee, EC)根据酶所催化的反应类型和机 理 分类: 氧化还原酶类 (oxidoreductases) 、 转 移 酶 类 (ransferases) 、 水 解 酶 类 (hydrolases) 、 裂解酶类( 或裂合酶类)(lyases) 、 异构酶类(somerases) 、 合成酶类 (synthetases)或连接酶类(ligases)
µmol/min ,便是以国际单位表示的酶活性。
15
ΔA/min
Vs:
(ml)
Vt:
(ml)
ε:
b
(cm)
16
测定酶
AST/AST、LD
ALP/ACP、 5′-NT ALP/ACP CK、 GGT ADA AMS
LD、MD、 G6PD、 GLD
产物/底物
α-酮酸
无机磷 苯酚 萘胺 氨 淀粉 NADH
反应原理 α-酮酸与2,4-二硝基苯肼在酸性环境生成2,4-二
硝基苯腙化学物,后者在碱性环境呈棕红色 无机磷与钼酸铵在酸性环境下生成钼蓝 酚与4-氨基比林、铁氰化钾生成醌衍生物 萘胺与重氮试剂反应生成偶氮化合物 波氏、奈氏反应 碘遇直链淀粉生成蓝色化合物 还 原 NBT生 成 不 溶 于 水 的 甲 臜
4
(一)血清酶的来源(除凝血酶和纤溶酶外,血清酶与血浆酶基本一致)
1. 血浆固有酶: 是血浆的固有成分 ,在血浆中发挥特定的催化作用 ,如凝血酶原、纤 溶酶原; 大多数由肝脏合成 ,血浆内含量较高。血清胆碱酯酶是反映肝脏的合成功能 的指标之一。
2. 非血浆固有酶: ① 外分泌酶:来源于外分泌腺的酶 ,包括前列腺酸性磷酸酶、胰淀粉酶、胃(胰)蛋 白酶、胰脂肪酶等。在血液中的含量与相应分泌腺的功能及疾病有关。 ② 细胞内酶:在生理情况下存在于组织细胞内参与物质代谢的酶。当其大量出现于血 清中时 ,提示酶的来源组织细胞受损 ,是临床最常用的诊断酶。
单位体积样品中的酶活性单位, 习惯用U/L来表示体液中酶活性即酶活性浓度。 4. 正常上限升高倍数(upper limits of normal, ULN):用测得的酶活性结果除以参考范 围上限。
13
fixed time assay continuous monitoring assay
定时法 测总变化量,平均速度 含延滞期或非线性期 终止酶促反应 多用化学方法检测
GK-GPO-POD
LD* HK
(ADA) NP XOD
CK CPO
LD MD G6PD GLD GLD POD
αPOD
3. Trinder 4.
Lipase 5′- NT CHE ACP
+4-
+ /TMB/DAB/OT
DTNB
5-TNBA
TR
*: LD并 不 是 真 正 意义 上的 辅 酶。 21
连续监测法 测速率 只计算线性期速度 酶促反应一直进行 多用酶偶联反应
14
定时法(fixed time assay) :将酶与底物在特定条件(缓冲液、温 度等)下孵育 ,经过一定时间后 ,用终止液终止反应 ,通过化学或生物化 学的方法测出底物或产物的总变化量 , 除以时间即可计算出底物消耗速度
( -d [S] /min ) 或 产 物 生 成 速 度 (d [P] /min ) ,将 速 度 换 算 为
6
(一)生理变化 1. 性别 CK、ALP、ACP及GGT等酶有性别差异, 与血清酶的来源组织有关。 2. 年龄 血清酶的活性随年龄而变化, 如ALP和GGT到老年时可有轻度升高。 3. 进食 过量饮酒可使血清GGT明显升高。 4. 运动 CK、LD、AST、ALT等多种血清酶活性升高,升高的幅度与运动量、 持续 时间、运动频率及骨骼肌所含的酶量有关。 5. 妊娠 胎盘组织可分泌一些酶进入母体血液,如耐热ALP、 LD、LAP和ALT等。 6. 其他 一些酶活性与体重、身高的增长、体位改变、昼夜变化及家庭因素有关。
一组酶。
9
CK LD ALP ACP γ-GT AMY ALT AST GP
GST
ALD NAG
肌酸激酶 乳酸脱氢酶 碱性磷酸酶 酸性磷酸酶 γ-谷氨酰基转移酶
淀粉酶 丙氨酸氨基转移酶 门冬氨酸氨基转移酶 糖原磷酸化酶
谷胱甘肽转移酶
果糖二磷酸醛缩酶 β-N-乙酰基-D-氨基葡萄糖苷酶
/
CK-BB,CK-MB,CK-MM (CK1,CK2,CK3) LD1、 LD2、 LD3、 LD4、 LD5 肝、小肠、骨、胎盘、肾
肺癌、肝炎
肝癌、肝炎、神经细胞癌 肝病、 肾病
10
原理:利用酶蛋白的抗原性,制备特异性抗体, 然后以免疫学方法直接 测定酶蛋白质量(浓度), 一般以mg/L 、 μg/L 、 ng/L来表示。
1. 目前临床上测定的酶有:神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase, NSE)、 前列腺酸性磷酸酶(prostate-specific acid phosphatase, PACP) 、肌酸激酶同工酶 (creatine kinase isoenzymes MB, CK-MB)、 胃蛋白酶原(pepsinogen 1、2)等。 2. 测定方法: 免疫荧光或化学发光技术等。
第二阶段(1950 ~ 1980):Karmen、La Due、Wroblewski等建立连续监测法,结合酶偶联技术, 测定LD、ALT、AST、CK等近百种酶。
第三阶段(1980 ~
):1980年以来测定同工酶及亚型 ,及利用免疫学技术测定酶蛋白质量, 提高了疾病诊断的敏感性和特异性。
3
(enzyme)
7
(二)病理变化 1. 酶合成异常:①合成减少:实质细胞数量减少、组织大面积坏死等;②合成增多: 骨细胞增生、外分泌腺增生、肿瘤的细胞增生等。 2. 细胞内酶的渗漏:细胞内酶释放入体液的程度依赖于细胞膜的完整性;影响释放速 度与程度的因素有 ① 细胞内外酶浓度的梯度差; ② 酶的相对分子量; ③ 在细胞内的 定位和存在形式。 3. 酶进入血液的方式:细胞中的酶有三种途径进入血液: ①直接进入血液; ②先进入 相邻脏器再进入血液; ③主要经淋巴系统入血:酶幅度的增高低而缓慢。 4. 其他:血管内的抑制作用、清除速度都影响血清酶的含量。如肾功能减退时 ,血中
酶活性的国际单位定义; 酶活性测定的连续监测法的概念、计算和分 类;酶活性测定的影响因素及最适条件的确定原则。
血清酶变化的病理机制;酶动力学参数的含义;电泳法和免疫抑制法 测定同工酶的原理。
酶蛋白质量测定的优点;定时法测定临床常用诊断酶的原理和评价; 同工酶的其他检测方法。
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第一阶段(1908 ~ 1950) :利用化学和有机化学的反应原理测定酶促反应生成量或底物消耗量定 时法测定AMY (1908年, Wohlgemuth)、 LPS、ALP、ACP等几种酶。
2. 国际酶学委员会将每种酶用4个数字加以系统编号: 数字前冠以EC ,数字之间用黑点 隔开。第一个数字表示酶的类别 ,第二个表示亚类 ,第三个表示亚-亚类 ,第四个表示 酶的编号序数:如EC1.1.1.27 LD (乳酸脱氢酶)。
3. 同工酶:催化相同化学反应, 但酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的
心梗、肌病、颅脑损伤、肿瘤 心梗、肌病、肺梗死、肝病、肿瘤 肝胆疾病、骨病、妊娠、结肠炎、肿瘤
红细胞、前列腺、溶酶体 γ-GT1、 γ-GT2、 γ-GT3、γ-GT4
前列腺癌、血液病、骨肿瘤 肝癌、梗阻性黄疸
P-AMY(P1、P2、P3)、S-AMY(S1、 S2、 S3、S4) ALT、 mALT AST、 mAST
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连续监测法(continuous monitoring assay): 在多个时间点连续测定产物生成量或底物消耗量 ,选取线性期的速率来
计算酶活性 ,又称速率法。将酶与底物在特定条件 (缓冲液、温度等) 下孵育 ,每隔一定时间 (2s∼60s) 连续测定酶促反应过程中某一底物或产物的特征信 号的变化 ,从而计算出每分钟的信号变化速率 ,求 出酶活性浓度。 尤其适合在自动化分析仪上使用
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1. 灵敏度高: 灵敏度达到ng/L至μg/L的水平。 2. 特异性高: 测定的影响因素较少 ,几乎不受体液中激活剂、抑制剂的影响 ,不受药 物的干扰。 3. 可测定一些酶活性很难测定的酶: 如不表达酶活性的酶原或脱辅基的酶蛋白或失活 的酶蛋白。 4. 与酶活性测定一起 ,计算免疫比活性: 有可能为临床应用提供新的资料和信息。
GPDA
-
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4NA(405nm) 9.88
2. NAD (P) H
NAD (P) H 340nm NA (P) +
260nm
ALT AST CK ADA 5′- NT 5′- NT AMY Lipase
IFCC
IFCC
IFCC
GLDH
5′- AMP
ADA-GLDH
5′- IMP
NP-XOD-POD
EPS
5. 在同工酶测定中的应用:与电泳法和层析法相比 ,免疫学法测定简单快速灵敏度高, 标本量少 ,重复性好。与化学抑制法相比特异性好。
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1. 惯用单位:酶活性测定方法的建立者所规定的单位。由于单位定义不同 ,参考值差别很 大 ,难以进行比较。 2. 国际单位(international unit, IU) :在特定的条件下 ,每分钟转化1μmol底物的酶 量为一个国际单位。 3. 酶活性浓度 1U= 1 μmol/min = 1 ×10-6/60s = 16.67 nkatal
1. 绝大部分的酶是蛋白质 ,有些酶是核酸和酶蛋白组成的复合体,极少数酶是核酸 (ribozyme) 。 2. 具有极高的催化效率、高度的特异性 (specificity) 及催化作用的可调节性等特点。 3. 由酶所催化的反应称为酶促反应。
酶活性 (activity) 、底物 (substrate)、 产物 (product)、 激活剂 (activator)、抑制剂 (inhibitor)
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测定酶与底物作用反应一定时间后底物或产物变化的总量 ,计算酶促反应 平均速度。 1. 优点:比较简单 ,最后测定时因酶促反应已被终止 ,故所用仪器无需恒温装 置 ,显色剂的选择也可不考虑对酶活性的影响。 2. 缺点:无法知道在整个酶促反应进程中是否都处于线性期。利用该法测定酶 活性浓度 ,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要非常精确 ,否则会 引起较大误差。
GP-BB、 GP-LL、 GP-MM (GP1,GP2,GP3)
GST1和GST2(GST-α)、GST3(GST-μ)、 GST4、 GST5 (GST-π) ALD-A、 ALD-B、 ALD-C
NAG-A、 NAG-B、 NAG-I
急、慢性胰腺炎、腮腺炎 心梗、肝病 心梗、肝病 心梗、脑损伤、 肾病、肌病
1. 直接法 :在不终止酶促反应条件下 ,直接通过测定反应体系中底物或产物理化 特性的变化如吸光度、荧光、旋光性、pH、电导率、粘度等计算出酶活性浓度。 只有底物与产物之间 ,在理化性质等方面有显著差异时 ,才能使用直接法。 2. 间接法 :采用酶偶联反应是间接法测定酶活性的主要技术特点。
特点:无须终止酶促反应 ,可观察到整个反应过程; 选择线性反应期来计算酶活性 ,结果准确可靠; 要求检测仪器具有恒温装置及自动检测功能。
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1. K
2.
Vs (ml) ε
Vt (ml) b (cm)
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ALP
4-
4-
PNP (405nm) 18.5
1.
GGT
3- -γ-L-
5- -2-
(405nm, P-
-α-
-
2- 2-CP (405nm, PH 6.0 ) 6.1
AFU
2- -
-α-
2-CP (405nm, PH 6.5 ) 6.2
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(二) 血清酶的去路 1. 肾小球滤过从尿液中排出: 是小分子蛋白酶(如淀粉酶)的主要清除方式。 2. 网状内皮系统清除:CKMM、 LD5、AST等由肝脏枯否细胞受体介导的內吞作用清除。 3. 血管内失活或灭活(主要清除方式):酶离开细胞内环境后,因环境不同、稀释作用、 蛋白酶分解、解聚或聚合作用、抑制剂等都可使酶失活或灭活。
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(Kinetics of Enzyme-Catalyzed Reaction)
S (Subestrate):
E (Enzyme):
AMY活性升高。
8
1. 1961年国际酶学委员会(Enzyme Committee, EC)根据酶所催化的反应类型和机 理 分类: 氧化还原酶类 (oxidoreductases) 、 转 移 酶 类 (ransferases) 、 水 解 酶 类 (hydrolases) 、 裂解酶类( 或裂合酶类)(lyases) 、 异构酶类(somerases) 、 合成酶类 (synthetases)或连接酶类(ligases)
µmol/min ,便是以国际单位表示的酶活性。
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ΔA/min
Vs:
(ml)
Vt:
(ml)
ε:
b
(cm)
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测定酶
AST/AST、LD
ALP/ACP、 5′-NT ALP/ACP CK、 GGT ADA AMS
LD、MD、 G6PD、 GLD
产物/底物
α-酮酸
无机磷 苯酚 萘胺 氨 淀粉 NADH
反应原理 α-酮酸与2,4-二硝基苯肼在酸性环境生成2,4-二
硝基苯腙化学物,后者在碱性环境呈棕红色 无机磷与钼酸铵在酸性环境下生成钼蓝 酚与4-氨基比林、铁氰化钾生成醌衍生物 萘胺与重氮试剂反应生成偶氮化合物 波氏、奈氏反应 碘遇直链淀粉生成蓝色化合物 还 原 NBT生 成 不 溶 于 水 的 甲 臜
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(一)血清酶的来源(除凝血酶和纤溶酶外,血清酶与血浆酶基本一致)
1. 血浆固有酶: 是血浆的固有成分 ,在血浆中发挥特定的催化作用 ,如凝血酶原、纤 溶酶原; 大多数由肝脏合成 ,血浆内含量较高。血清胆碱酯酶是反映肝脏的合成功能 的指标之一。
2. 非血浆固有酶: ① 外分泌酶:来源于外分泌腺的酶 ,包括前列腺酸性磷酸酶、胰淀粉酶、胃(胰)蛋 白酶、胰脂肪酶等。在血液中的含量与相应分泌腺的功能及疾病有关。 ② 细胞内酶:在生理情况下存在于组织细胞内参与物质代谢的酶。当其大量出现于血 清中时 ,提示酶的来源组织细胞受损 ,是临床最常用的诊断酶。
单位体积样品中的酶活性单位, 习惯用U/L来表示体液中酶活性即酶活性浓度。 4. 正常上限升高倍数(upper limits of normal, ULN):用测得的酶活性结果除以参考范 围上限。
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fixed time assay continuous monitoring assay
定时法 测总变化量,平均速度 含延滞期或非线性期 终止酶促反应 多用化学方法检测
GK-GPO-POD
LD* HK
(ADA) NP XOD
CK CPO
LD MD G6PD GLD GLD POD
αPOD
3. Trinder 4.
Lipase 5′- NT CHE ACP
+4-
+ /TMB/DAB/OT
DTNB
5-TNBA
TR
*: LD并 不 是 真 正 意义 上的 辅 酶。 21
连续监测法 测速率 只计算线性期速度 酶促反应一直进行 多用酶偶联反应
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定时法(fixed time assay) :将酶与底物在特定条件(缓冲液、温 度等)下孵育 ,经过一定时间后 ,用终止液终止反应 ,通过化学或生物化 学的方法测出底物或产物的总变化量 , 除以时间即可计算出底物消耗速度
( -d [S] /min ) 或 产 物 生 成 速 度 (d [P] /min ) ,将 速 度 换 算 为
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(一)生理变化 1. 性别 CK、ALP、ACP及GGT等酶有性别差异, 与血清酶的来源组织有关。 2. 年龄 血清酶的活性随年龄而变化, 如ALP和GGT到老年时可有轻度升高。 3. 进食 过量饮酒可使血清GGT明显升高。 4. 运动 CK、LD、AST、ALT等多种血清酶活性升高,升高的幅度与运动量、 持续 时间、运动频率及骨骼肌所含的酶量有关。 5. 妊娠 胎盘组织可分泌一些酶进入母体血液,如耐热ALP、 LD、LAP和ALT等。 6. 其他 一些酶活性与体重、身高的增长、体位改变、昼夜变化及家庭因素有关。
一组酶。
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CK LD ALP ACP γ-GT AMY ALT AST GP
GST
ALD NAG
肌酸激酶 乳酸脱氢酶 碱性磷酸酶 酸性磷酸酶 γ-谷氨酰基转移酶
淀粉酶 丙氨酸氨基转移酶 门冬氨酸氨基转移酶 糖原磷酸化酶
谷胱甘肽转移酶
果糖二磷酸醛缩酶 β-N-乙酰基-D-氨基葡萄糖苷酶
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CK-BB,CK-MB,CK-MM (CK1,CK2,CK3) LD1、 LD2、 LD3、 LD4、 LD5 肝、小肠、骨、胎盘、肾
肺癌、肝炎
肝癌、肝炎、神经细胞癌 肝病、 肾病
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原理:利用酶蛋白的抗原性,制备特异性抗体, 然后以免疫学方法直接 测定酶蛋白质量(浓度), 一般以mg/L 、 μg/L 、 ng/L来表示。
1. 目前临床上测定的酶有:神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase, NSE)、 前列腺酸性磷酸酶(prostate-specific acid phosphatase, PACP) 、肌酸激酶同工酶 (creatine kinase isoenzymes MB, CK-MB)、 胃蛋白酶原(pepsinogen 1、2)等。 2. 测定方法: 免疫荧光或化学发光技术等。
第二阶段(1950 ~ 1980):Karmen、La Due、Wroblewski等建立连续监测法,结合酶偶联技术, 测定LD、ALT、AST、CK等近百种酶。
第三阶段(1980 ~
):1980年以来测定同工酶及亚型 ,及利用免疫学技术测定酶蛋白质量, 提高了疾病诊断的敏感性和特异性。
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(enzyme)
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(二)病理变化 1. 酶合成异常:①合成减少:实质细胞数量减少、组织大面积坏死等;②合成增多: 骨细胞增生、外分泌腺增生、肿瘤的细胞增生等。 2. 细胞内酶的渗漏:细胞内酶释放入体液的程度依赖于细胞膜的完整性;影响释放速 度与程度的因素有 ① 细胞内外酶浓度的梯度差; ② 酶的相对分子量; ③ 在细胞内的 定位和存在形式。 3. 酶进入血液的方式:细胞中的酶有三种途径进入血液: ①直接进入血液; ②先进入 相邻脏器再进入血液; ③主要经淋巴系统入血:酶幅度的增高低而缓慢。 4. 其他:血管内的抑制作用、清除速度都影响血清酶的含量。如肾功能减退时 ,血中