LC-2010AHT型高效液相色谱仪验证方案

技术标准
目录：
1、概述
2、验证目的
3、验证范围
4、验证人员
5、仪器描述
6、验证条件
7、验证内容与方法
8、验证数据分析
9、验证结论与偏差说明
10、再验证
11、附件
1、概述
本品为岛津公司生产的产品，为了确保使用该仪器检测数据真实可靠，确认该仪器的各项指标能达到该仪器所设计的性能指标，计划对该仪器进行必要的验证。

2、验证目的
按照GMP的要求，需要对该仪器进行安装确认、运行确认、性能确认、以确定目前的实验室环境能满足该仪器的正常操作和使用，以确认高效液相色谱仪的运行、性能确认符合相应的要求，是否可满足验证所接收标准和日常分析测试工作的需要。

3、验证范围
本方案适用于LC-2010AHT型高效液相色谱仪的验证。

4、验证人员
4.1 验证工作小组
4.1.1 负责验证方案的制定并组织实施。

4.1.2 负责收集验证、试验记录，并对结果进行分析，起草验证报告。

4.1.3 负责验证的准备工作
4.1.4 负责根据本验证方案进行具体的实施。

4.2 动力设备部
4.2.1 负责验证所需仪器、设备的安装、调试及矫正。

4.2.2 负责量具的检验及校正。

4.3 验证工作人员名单
5、仪器描述
5.1 仪器型号：设备编号：
5.2 仪器组成
本品是根据质量控制的目的和要求购置的精密仪器，主要用于样品的含量测定、鉴别、
有关物质的检查等，该仪器由输液泵、在线脱气机、自动进样器、紫外检测器、柱温箱及Class VP色谱工作站、电脑、打印机等组成。

6、验证条件
6.1 验证前必须对设备所用仪表进行校验，且在有效期内。

6.2 验证试验过程中所用的纯化水、标准溶液、对照品、试剂等在使用前必须符合规定。

6.3 验证试验所用的清洁器具和玻璃容器应按标准规定清洁且符合要求。

7、验证内容与方法
7.1 验证依据及标准：
《药品GMP指南》2010年版、《高效液相色谱仪标准操作规程》、《中国药典》2010年版7.2 验证判断标准：
7.2.1 运行确认判断标准：安装确认认可后，在不使用试样的条件下，确认该仪器运行正常。

7.2.2 性能确认判断标准：符合《中国药典》2010年版附录要求。

7.3、验证确认
7.3.1 再确认
7.3.1.1检查有关资料完整性。

7.3.1.2 安装场地
7.3.2 运行确认：
严格按《高效液相色谱仪标准操作规程》进行操作，对仪器进行运行试验，确认其运转性能，并将检查结果填于下表中。

7.3.3 性能确认
7.3.3.1 高压恒流泵
7.3.3.1.1流量准确度
可执行标准：＜±3%（以蒸馏水为标准）
测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以蒸馏水为流动相，将流速稳定后，分别设定0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0ml/min六段，在流动相排出口用已恒重的比重瓶收集流动相，同时计时收集10分钟，称重，查表，即得。

7.3.3.1.2流量精确度
可执行标准：＜±0.3%（0.997ml/min～1.003ml/min，以蒸馏水为标准）
测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以蒸馏水为流动相，将流速稳定后，设定流量为1.0ml/min，在流动相排出口用已恒重的比重瓶收集流动相，同时计时收集10分钟，称重，查表，即得，共收集5次。

7.3.3.1.3压力范围
可执行标准：±0.2MPa设定值
测试方法：在进样阀的出口接一个两通，再将两通的另外一端用OD1.6的盲管封住。

启动泵，使压力升至所设定的压力，观察仪器是否自动停泵。

设定值分别为：10.0Mpa、20.0Mpa、30.0Mpa
结论：
检测人：日期：年月日
复核人：日期：年月日7.3.3.2柱温箱
7.3.3.2.1温度准确度
可执行标准：＜±2℃
测试方法：分别依次设定温度25℃、40℃后待温度稳定后读取示值。

结论：
检测人：日期：年月日
复核人：日期：年月日
7.3.3.2.2温度精密度
可执行标准：＜±1℃
测试方法：分别依次设定温度40℃后待温度稳定每小时后读取示值一次。

结论：
检测人：日期：年月日
复核人：日期：年月日
7.3.3.3检测器
7.3.3.3.1噪声与漂移
可执行标准：噪声＜±1.0×10-2mv(250nm)，漂移＜±5.0×10-2mv/hr
测试方法：
将仪器各部连接好，紫外检测器调至250nm，流动相为甲醇，流速为1.0ml/min，待柱平衡稳定后，进行基线的测试，测试时间半小时，观察并记录测试结果。

测试图谱见基线漂移测试。

结论：
检测人：日期：年月日
复核人：日期：年月日7.3.3.3.2系统适用性试验
可执行标准：精密度（峰面积）RSD≤2.0%；
分离度应大于1.5；
测试方法：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液（磷酸二氢钾6.8g，加三乙胺5ml,用水溶解并稀释至1000ml）－乙腈（85：15）（用磷酸调PH值至3.0）为流动相，检测波长为286nm。

精密称取于105℃干燥至恒重的加替沙星对照品适量（来源中国药品生物制品检定所）加流动相制成每1ml中含75μg的对照品溶液。

精密量取上述溶液10μl 注入色谱仪中，连续进样5次，记录色谱图，计算，即得。

A精密度（峰面积）记录及计算。

7.3.3.3.3线性
可执行标准：相关系数≥0.999。

测试方法：用加替沙星滴眼液对照品100μg贮备液经精密稀释，制备5份不同浓度的供试样品，依次为10μg、20μg、50μg、80μg、100μg以测得的峰面积作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归，记录色谱图。

数据要求：列出回归方程、相关系数和线性图。

结果见图谱。

结论：
检测人：日期：年月日
复核人：日期：年月日7.3.3.3.4 重现性：
相同样品，不同实验室设备检验结果对比及同一实验室不同设备检验结果对比，计算
其RSD值。

样品名称：
操作方法：
色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液（磷酸
二氢钾6.8g，加三乙胺5ml,用水溶解并稀释至1000ml）－乙腈（85：15）（用磷酸调PH
值至3.0）为流动相，检测波长为286nm。

对照品溶液的制备:精密称取于105℃干燥至恒重的加替沙星对照品适量（来源中国药品生物制品检定所）加流动相制成每1ml中含75μg的对照品溶液。

供试品溶液的制备:精密量取本品7.5ml，用流动相稀释至100ml，摇匀，做为供试品溶液。

测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。

结果见报告书。

LC-2010AHT 型高效液相色谱仪验证方案 STP-VP
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7.3.4 辅助仪器
设备名称： 生产厂家：
仪器编号： 计量编号： 检定有效期： 8、验证数据分析：
仪器工作环境、灵敏度、检测限、重复性、仪器外观等应符合验证合格标准，如有少量数据超过上述标准，则应进行分析，找出不合格原因，并修订验证方案，再实施，直至缝合验证标准。

9、验证结果与结论：
10．再验证周期：
正常情况下，拟定每年做一次验证。

11、附件：检验原始记录。