SOP-QC 萘普生检验操作规程

萘普生检验操作规程
1. 目的
建立萘普生检验标准操作规程，使萘普生检验操作规范化。

2. 范围
适用于萘普生的质量检验。

3. 术语或定义
3.1 GMP：药品生产质量管理规范(Good Manufacturing Practice)的英文简称。

3.2 SMP：标准管理程序（Standard Management Procedure），用于指导工作的管理类文件。

3.3 SOP：标准操作程序（Standard Operating Procedure），用于指导如何完成一项工作的文件。

4. 职责
质量控制部对本规程的实施负责。

5. 程序
5.1 检验依据
5.1.1 《中国药典》2020年版二部（1444页）。

5.1.2 萘普生质量标准（质量标准编号：）。

5.1.3 《中国药典》2020年版四部。

1.【性状】
1.1本品为白色或类白色结晶性粉末；无臭或几乎无臭。

本品在甲醇、乙醇或三氯甲烷中溶解，在乙醚中略溶，在水中几乎不溶。

1.2熔点
依熔点测定法操作规程进行测定。

本品的熔点为153～158℃。

1.3比旋度
1.3.1仪器与用具
天平（感量0.1mg）、自动旋光仪、量瓶（50ml）
1.3.2操作方法
取本品，精密称定，加三氯甲烷溶解并定量稀释制成每1ml 中约含10mg 的溶液，依旋光度测定检验操作规程测定其旋光度，按下式计算本品比旋度：
[]lc
t D αα比旋度100= 式中：l 为测定管的长度，dm ；
α为测得的旋光度；
c 为100ml 溶液中含有被测物质的重量，g （按干燥品或无水物计算）。

1.3.3标准规定
本品比旋度应为＋63.0°至＋68.5°。

2.【鉴别】
2.1鉴别⑴
2.1.1试剂
甲醇
2.1.2仪器与用具
紫外可见分光光度计、天平（感量0.1mg ）、容量瓶（50ml ）
2.1.3操作方法
取本品，加甲醇制成每1ml 中含30μg 的溶液，照紫外-可见分光光度法检验操作规程（10-SOP-509-00-01）进行测定，在262nm 、271nm 、317nm 与331nm 的波长处有最大吸收。

2.2鉴别⑵
2.2.1仪器与用具
双光束红外分光光度计、压片机、玛瑙研钵
2.2.2操作方法
取供试品约1mg ，置入玛瑙研钵研细，再取溴化钾粉(约200mg)，在玛瑙研钵中充分研磨混匀，移置于直径13mm 的压模中，使铺布均匀，加压至20MPa ，约60秒取出。

目视检查应均匀，无明显颗粒。

将供试片置于仪器的样品光路中，进行光谱扫描。

供试品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集432图）一致。

3.【检查】
3.1氯化物
依氯化物检查法检验操作规程检查。

3.1.1试药与试液
标准氯化钠溶液：称取氯化钠0.165g ，置1000ml 量瓶中，加水适量使其溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。

临用前，精密量取贮备液10ml ，置100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml 相当于10μg 的Cl ）。

稀硝酸、硝酸银试液
3.1.2仪器与用具
天平（感量1mg ）
纳氏比色管（50ml）、刻度吸管（1ml、10ml）、移液管（5ml）
3.1.3操作方法
取本品0.50g，加水50ml，振摇10分钟，滤过（滤纸先用稀硝酸湿润），取续滤液25ml，加稀硝酸10ml，置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，摇匀，即得供试溶液；另取7.5ml 标准氯化钠溶液，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，摇匀，即得对照溶液。

于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0ml，用水稀释使成50ml，摇均匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，供试溶液与标准氯化钠对照溶液比较，不得更浓（0.030%）。

3.1.4注意事项
3.1.
4.1供试溶液与对照溶液应同时操作，加入试剂的顺序应一致。

3.1.
4.2应注意按操作顺序进行，先制成40ml的水溶液，再加入硝酸银试液1.0ml，以免在较大浓度的氯化物下局部产生浑浊，影响比浊。

3.1.
4.3供试溶液与对照溶液在加入硝酸银试液后，应立即充分摇匀，以防止局部过浓而影响产生的浑浊；并在暗处放置5分钟，避免光线直接照射。

3.1.
4.4纳氏比色管用后立即用水洗，不应用毛刷刷洗，以免划出条痕损伤比色管。

3.2有关物质
照高效液相色谱法检验操作规程试验。

3.2.1试药
6-甲氧基-2-萘乙酮对照品
甲醇、0.01mol/L磷酸二氢钾溶液
3.2.2仪器与用具
天平（感量0.1mg、0.01mg）、高效液相色谱仪、酸度计
量瓶（25ml、200ml）、移液管（1ml、2ml）
3.2.3色谱条件与系统适应性试验
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.01mol/L磷酸二氢钾溶液（75：25）用磷酸调节pH值至3.0为流动相，检测波长为240nm。

理论板数按萘普生峰计算不低于5000，萘普生峰与各杂质峰的分离度应符合要求（大于1.5）。

3.2.4操作方法
避光操作。

取本品适量，精密称定，加流动相适量，充分振摇使萘普生溶解并定量稀释制成每1ml中含0.5mg的溶液作为供试品溶液，另取6-甲氧基-2-萘乙酮（杂质Ⅰ）对照品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含50μg的溶液，作为对照品溶液；分别精密量取供试品溶液1ml和对照品溶液2ml，置同一200ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。

精密量取供试品溶液与对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰
保留时间的2.5倍。

3.2.5计算公式
%10010%3-⨯⨯⨯⨯=I s I I s
C A C A ）含量（杂质
式中：A s 表示供试品溶液中杂质I 的峰面积；
A I 表示对照溶液中杂质Ⅰ的峰面积；
C s 表示供试品溶液浓度（m g/ml ）；
C I 表示对照溶液中杂质Ⅰ的浓度（μg/ml ）。

3.2.6标准规定
供试品溶液色谱图中如有与杂质Ⅰ峰保留时间一致的色谱峰，按外标法法以峰面积计算，不得过0.1%，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液中萘普生峰面积的0.4倍（0.2%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液中萘普生峰面积（0.5%）。

3.3干燥失重
依干燥失重测定法检验操作规程测定。

3.3.1仪器与用具
天平（感量0.1mg ）、电热恒温干燥箱、称量瓶
3.3.2操作方法
取供试品约1g ，精密称定，平铺于已干燥至恒重的扁形称量瓶中，置恒温干燥箱中，105℃干燥3小时，取出，放至室温，精密称定，记录测定数据。

3.3.3计算
%100W W W W %1
321⨯-+=干燥失重 式中：W 1为供试品的重量（g ）；
W 2为称量瓶干燥后的重量（g ）；
W 3为（称量瓶+供试品）干燥后的重量（g ）。

3.3.4标准规定
本品减失重量不得过0.5%。

3.3.5注意事项
3.3.5.1干燥时，应将瓶盖取下，置称量瓶旁，或将瓶盖半开。

取出时需将称量瓶盖好。

3.3.5.2供试品平铺厚度不可超过5mm 。

3.3.5.3称定扁形称量瓶和供试品以及干燥后的重量，均应准确至0.1mg 位。

3.4炽灼残渣
依炽灼残渣检查法检验操作规程检查。

3.4.1仪器与用具
天平（感量0.1mg ）、高温电阻炉、电炉、坩埚、硅胶干燥器
3.4.2操作方法
空坩埚恒重：取洁净空坩埚置高温炉内，将坩埚盖斜盖于坩埚上，加热至500～600℃至恒重。

供试品称量：取供试品1.0g ，置已在500～600℃炽灼至恒重的坩埚中，精密称定。

炭化：将盛有供试品的坩埚置电炉上缓缓灼烧，炽灼至供试品全部炭化呈黑色，并不再冒烟，放冷至室温。

灰化：取上述炭化物，滴加硫酸0.5～1ml ，使炭化物全部湿润，继续在电炉上加热至硫酸蒸汽除尽，白烟完全消失。

将坩埚置高温炉内，坩埚盖斜盖于坩埚上，在500～600℃炽灼至恒重。

3.4.3计算公式
%100-%⨯=
供试品重量
空坩埚重量残渣及坩埚重量炽灼残渣 3.4.4标准规定 本品炽灼残渣不得过0.1%。

3.4.5注意事项
3.4.5.1炭化与灰化的前一段操作均应在通风柜内进行。

供试品放入高温炉前，务必完全炭化并除尽硫酸蒸汽。

3.4.5.2坩埚放冷后干燥器内易形成负压，应小心开启干燥器，以免吹散坩埚内的轻质残渣。

3.4.5.3开关炉门时，应注意勿损坏高质耐火绝缘层。

3.4.5.4恒重，系指在规定温度下连续两次炽灼后的重量差异在0.3mg 以下，第二次炽灼时间不少于30分钟。

3.5重金属
依重金属检查法检验操作规程第二法检查。

3.5.1试药与试液
标准铅溶液：精密称取在105℃干燥至恒重的硝酸铅0.1599g ，置1000ml 量瓶中，加硝酸5ml 与水50ml 溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。

临用前，精密量取标准铅贮备液10ml ，置100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

（每1ml 相当于10µg 的Pb ）。

硝酸、盐酸、氨试液、酚酞指示液、醋酸盐缓冲液（pH3.5）、硫代乙酰胺试液
3.5.2仪器与用具
天平（感量0.01g ）、电炉、电热恒温水浴锅
坩埚、纳氏比色管（50ml ）、移液管（2ml ）、刻度吸管（1ml 、2ml ）
3.5.3操作方法
取炽灼残渣3.4.2项下遗留的残渣，加硝酸0.5ml ，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，加盐酸2ml ，置水浴上蒸干后加水15ml ，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液
（pH3.5）2ml ，微热溶解后，移置纳氏比色管（乙管）中，加水稀释成25ml ；另取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml 与水15ml ，微热溶解后，移置纳氏比色管（甲管）中，加标准铅溶液2.0ml ，加水稀释至25ml 。

分别向甲乙两管中加硫代乙酰胺试液各2ml ，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。

3.5.4标准规定
本品含重金属不得过百万分之二十。

3.6微生物限度
按微生物限度检查操作规程、控制菌检查法标准操作规程进行检查。

3.6.1供试品制备方法
称取供试品10g ，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml ，摇匀，制成1：10的均匀供试液。

另取1支灭菌吸管吸取1：10均匀供试液1ml ，加入装有9ml 稀释剂的试管中，混匀即得1：100供试液。

3.6.2检验方法
3.6.2.1需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数：
取供试液1ml ，依微生物计数法项下平皿法（倾注法）进行检查。

3.6.2.2大肠埃希菌
取1：10供试液10ml ，加入100ml 胰酪大豆胨液体培养基中，依控制菌检查法项下大肠埃希菌检查方法进行检查。

3.6.3标准规定
本品需氧菌总数每1g 不得过500cfu ，霉菌和酵母菌总数每1g 不得过50cfu ，大肠埃希菌每1g 不得检出。

4.【含量测定】
4.1试药与试液
甲醇、酚酞指示液、氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）
4.2仪器与用具
天平（感量0.1mg ）
三角瓶（150ml ）、量筒（50ml ）、碱式滴定管（25ml ）
4.3操作步骤
取本品约0.5g ，精密称定，加甲醇45ml 溶解后，再加水15ml 与酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。

每1ml 氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）相当于23.03mg 的C 14H 14O 3。

4.4计算公式
()%1001
.0-11003.23)(%O H C -3
031414⨯⨯⨯⨯⨯⨯-=X m C V V
式中：V表示供试品所耗氢氧化钠滴定液（0.1mol/l）体积，ml；
V0表示空白试验所耗氢氧化钠滴定液（0.1mol/l）体积，ml；
C表示氢氧化钠滴定液浓度，mol/l；
X表示供试品干燥失重（%）；
m表示供试品称取重量（g）。

4.5标准规定
本品按干燥品计算，含C14H14O3不得少于98.5%；
两份平行试验测定结果相对偏差不得过0.3%。

6.附件
萘普生检验记录。