精子质量参数与体外受精结局的相关性

ＤＯＩ：１０．１３６０２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０２１．０４．０８·生殖检验·
精子质量参数与体外受精结局的相关性
王家雄，沈丽燕，刘彩钊，王改改，郑爱燕，孟庆霞，李红，杨慎敏（南京医科大学附属苏州医院生殖与遗传中心，江苏苏州２１５００２）
摘要：目的　观察精子质量参数如精子活动率、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率、前向运动精子总数、正常形态精子总数及正常形态前向运动精子总数与体外受精（ＩＶＦ）结局的相关性。

方法　选取２０１８年１月至２０１９年１２月女方年龄＜３５岁、因单纯输卵管因素行首次ＩＶＦ治疗的５４６对夫妇，严格按照《人类精液检查与处理实验室手册》（第５版）要求对男方精液进行精子浓度、活动率及形态学分析，并采用Ｐｅａｒｓｏｎ分析对精子活动率、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率、前向运动精子总数、正常形态精子总数、正常形态前向运动精子总数与ＩＶＦ受精率、种植率、优质胚胎率及临床妊娠率进行相关性分析。

结果　正常形态精子百分率与受精率、种植率、优质胚胎率无相关性（Ｐ＞０．０５），而精子活动率、前向运动精子百分率与受精率呈正相关（ｒ分别为０．０９２、０．０９３，Ｐ＜０．０５），正常形态精子总数、前向运动精子总数与受精率呈正相关（ｒ分别为０．１５９、
０．４９８，Ｐ＜０．０１），与优质胚胎率亦呈正相关（ｒ分别为０．１５７、０．１１９，Ｐ＜０．０１），仅正常形态前向运动精子总数与受精率、种植率和优质胚胎率均呈正相关（ｒ分别为０．２０１、０．１９６、０．１１２，Ｐ＜０．０１）。

但上述参数与临床妊娠率无相关性。

结论　正常形态前向运
动精子总数相比于正常形态精子百分率、精子活动率、前向运动精子百分率、前向运动精子总数、正常形态精子总数，与ＩＶＦ结局有更好的相关性，但与临床妊娠结局均无相关性。

关键词：精子形态；精子总数；辅助生殖；男性不育
中图分类号：Ｒ４４６．１９；Ｒ６９８＋．２ 文献标志码：Ａ
精子形态学分析中精子形态与自然妊娠、辅助生殖结局以及胚胎质量相关［１ ２］。

临床对于男性生
育力的诊断不能仅仅局限于一个指标，如果患者的精子总数较高，即使正常形态精子百分率低，但是正常形态精子总数也未必异常。

因此，我们认为正常形态精子总数、前向运动精子总数及正常形态前向运动精子总数比单一的百分率指标可能更有潜力成为较好的预测男性生育力的参数。

在本研究中，我们统计比较了精子活动率、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率、前向运动精子总数、正常形态精子总数及正常形态前向运动精子总数对体外受精（ｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ，ＩＶＦ）结局的预测能力差异，从而为临床提供更佳的诊断和预测指标。

１　资料与方法
１．１　研究对象　选取２０１８年１月至２０１９年１２月于我院生殖与遗传中心进行辅助生殖治疗的患者
共计２７６８例，女方年龄２３～５１岁，平均３１岁；男方年龄２２～６５岁，平均３２岁。

纳入标准：（１）第一个治疗周期；（２）促排卵方案为标准方案或常规长方案；（３）女方年龄小于３５岁；（４）双方均没有染色体异常，女方因单纯输卵管因素就诊。

排除标准：（１）女方存在子宫、卵巢等生殖系统疾病；（２）双方体重指数（ｂｏｄｙｍａｓｓｉｎｄｅｘ，ＢＭＩ）存在异常（＞２３
ｋｇ／ｍ２或＜１８．５ｋｇ／ｍ２）；（３）女方存在遗传缺陷、慢性疾病等。

本研究经医院伦理委员会批准通过（伦
理审查号Ｋ２０１７０２８），患者均知情同意。

１．２　仪器与试剂　计算机辅助精液分析系统（ｃｏｍｐｕｔｅｒ ａｉｄｅｄｓｅｍｅｎａｎａｌｙｓｉｓｓｙｓｔｅｍ，ＣＡＳＡ）（上
海北昂医药科技公司）；改良巴氏染色液（南京欣迪生物公司）；重组人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ，英国默克雪兰诺公司）。

１．３　方法
１．３．１　标本采集　患者禁欲２～７ｄ后来我院男科实验室手淫取精，精液３７℃保存。

如多次采集，数
据来自取卵前最后一次精液检测结果。

１．３．２　精液常规与精子形态学分析　待精液完全液化后，用ＣＡＳＡ进行精液常规分析，记录精液量、
基金项目：江苏省卫生健康委科技面上项目（Ｈ２０１８０５０）；江苏省妇幼健康资助面上项目（Ｆ２０１８６６）；中华医学会临床医学研究专项（180****0756）；苏州市科技发展计划（民生科技－医疗卫生应用基础研究）项目（ＳＹＳＤ２０２０１２９）。

作者简介：王家雄，１９８７年生，男，主管技师，硕士，从事生殖男科检验工作。

通信作者：杨慎敏，副主任医师，Ｅ ｍａｉｌ：ｄｒｉｍ２００４＠１２６．ｃｏｍ。

精子总数、精子浓度、精子活动率、前向运动精子百分率等结果。

按照《人类精液检查与处理实验室手册》（第５版）要求，制备精子涂片，采用改良巴氏染色液对精子涂片进行染色后，用光学显微镜观察并记录精子头部异常、中段异常、主段异常和正常形态精子百分率。

通过精液量、精子浓度、前向运动精子百分率和正常形态精子百分率计算前向运动精子总数、正常形态精子总数及正常形态前向运动精子总数。

整个检验过程均由富有经验的检验人员操作，并严格进行质控。

１．３．３　辅助生殖　对患者的妻子执行标准方案或常规长方案促排卵。

当优势卵泡直径≥１８ｍｍ时，
肌肉注射２５０μｇｈＣＧ，注射后３４～３６ｈ行阴道Ｂ超穿刺取卵，取卵后４～６ｈ与经密度梯度离心处理后的精子一起温育直至受精。

１．４　统计学分析　采用ＳＰＳＳ１９．０进行数据分析。

呈正态分布的计量资料以珋ｘ±ｓ表示。

精子活动率、
前向运动精子百分率、正常形态精子百分率、正常形态精子总数、正常形态前向运动精子总数、前向运动精子总数与ＩＶＦ的受精率、种植率、优质胚胎率的相关性采用Ｐｅａｒｓｏｎ相关性分析；精子活动率、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率、前向运动精子总数、正常形态精子总数、正常形态前向运动精子总数正常与异常组活产率的差异采用卡方分析；Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。

２　结果
２．１　一般资料　通过纳入、排除标准的夫妇一共５４６对，男方精液参数与ＩＶＦ结局参数见表１。

表１　５４６对不育夫妇男方精液参数结果及ＩＶＦ结局（珋ｘ±ｓ）
参数结果
精液量（ｍＬ）３．２２±１．３６
精子浓度（×１０６／ｍＬ）５５．８８±３７．６２
精子活动率（％）５３．３５±１８．５３
前向运动精子百分率（％）４４．２３±１６．９３
前向运动精子总数（×１０６）８０．８９±６９．１４
正常形态精子百分率（％）３．４７±２．３７
正常形态前向运动精子总数（×１０６）２．８９±３．８６
正常形态精子总数（×１０６）５．８１±６．３２
受精率（％）６０．４４±２２．９５
种植率（％）７０．０２±３７．４４
优质胚胎率（％）９０．６４±４８．８７
临床妊娠率（％）８８．２８
２．２　精子质量参数与ＩＶＦ结局的关系　对５４６对夫妇男方正常形态精子百分率、正常形态精子总数、正常形态前向运动精子总数、精子活动率、前向运动精子百分率、前向运动精子总数与ＩＶＦ结局进行相关性分析显示，正常形态精子百分率与受精率、种植率、优质胚胎率无相关性（Ｐ＞０．０５），而精子活动率、前向运动精子百分率与受精率呈正相关（ｒ分别为０．０９２、０．０９３，Ｐ＜０．０５），正常形态精子总数、前向运动精子总数与受精率呈正相关（ｒ分别为
０．１５９、０．４９８，Ｐ＜０．０１），与优质胚胎率亦呈正相关（ｒ分别为０．１５７、０．１１９，Ｐ＜０．０１），仅正常形态前向运
动精子总数与受精率、种植率和优质胚胎率均呈正相关（ｒ分别为０．２０１、０．１９６、０．１１２，Ｐ＜０．０１）。

２．３　精子质量参数与妊娠结局的关系　正常形态精子总数、正常形态精子百分率、正常形态前向运
动精子总数、精子活动率、前向运动精子百分率、前向运动精子总数正常与异常组经卡方检验分析，临床妊娠率差异无统计学意义，见表２。

表２　精子质量参数与临床妊娠率的关系
精子质量参数正常
与否
临床妊娠
例数
未妊娠
例数
妊娠率
（％）χ２值Ｐ值正常形态精子是３７１４７８８．７６０．３９３０．５３２总数否１１１１７８６．７２
正常形态精子是１９５２３８９．４５０．４８１０．５８７百分率否２８７４１８７．５０
正常形态前向是３７３４７８８．８１０．４９６０．５２８运动精子总数否１０９１７８６．５１
精子活动率是３６９４５８９．１３１．２０１０．２７９
否１１３１９８５．６１
前向运动精子是３６１４６８８．７００．２７２０．６４７百分率否１２１１８８７．０５
前向运动精子是３２８４１８８．８９０．４１００．５７０总数否１５４２３８７．０１
注： ，正常形态精子总数、正常形态精子百分率、正常形态前向运动精子总数、精子活动率、前向运动精子百分率、前向运动精子
总数分别按照≥１．５６×１０６即３９×１０６×４％、≥４％、≥０．５０×１０６即３９×
１０６×４％×３２％、≥４０％、≥３２％、≥３８．６８×１０６即３９×１０６×３２％分为正常与异常组。

３　讨论
精子形态对精子功能起着至关重要的作用，因此精子形态的观察被认为是对精子质量最为直观
的反映［３］。

对于精子形态的评估标准不断在改进和发展，上世纪９０年代Ｍｅｎｋｖｅｌｄ和Ｋｒｕｇｅｒ开发了严格标准的形态学评定系统，曾一度被广泛使用［４］。

之后ＷＨＯ推出了基于该标准的评定准则，将正常形态精子百分率参考值定为４％［５］。

但对于
ＷＨＯ第５版４％的参考值，许多研究者都持保留意见，Ｊｅｎｓｅｎ等［６］通过统计发现许多患有不同男性生
殖系统疾病的不育患者正常形态精子百分率却都
大于４％。

而ｖａｎｄｅｎＨｏｖｅｎ等［７］通过统计发现，正常形态精子百分率从１９８４年的大约３０％～８０％下降到２００４年后的０％～１０％，但这种下降主要归因于形态学评估标准的变化，对辅助生殖结局没有预测作用。

目前越来越多的专家学者倾向于多因素联合判断精子质量，而非仅仅依赖一项检测的一个数值［８］，或纳入新指标，如精子ＤＮＡ完整性［９］。

如果精子总数够多，即使正常形态精子百分率低，但是正常形态的精子仍然是一个庞大的数量，也足以完成受精的任务。

也有研究者发现运动精子总数要比单独的精子浓度、精子活动率对生育力有更好的指导作用［１０］。

因此，我们认为正常形态精子总数会比相应的百分率更为可靠和具有临床意义，而如果加入前向运动精子百分率，采用正常形态前向运动精子总数预测效果可能更好，分析结果证实了推论，前向运动精子总数和正常形态精子总数与ＩＶＦ受精率和优质胚胎率呈正相关（Ｐ＜０．０１），仅正常形态前向运动精子总数与受精率、种植率和优质胚胎率均呈正相关（Ｐ＜０．０１）。

但我们同时发现，这些参数对于临床妊娠率没有预测作用，可能是因为影响临床妊娠率的因素较多，其中女方因素影响更大。

本研究仍存在一些不足，如样本量有限、检测指标尤其是正常形态精子百分率的结果可能仍有偏差，可能会导致分析结果出现偏移。

另外，我们未使用精液优化处理后的精子参数与妊娠结局进行相关性分析，优选前后精子质量的差异如何，将是未来需要研究的内容之一。

４　参考文献
［１］ＫｏｈｎＴＰ，ＫｏｈｎＪＲ，ＲａｍａｓａｍｙＲ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｓｐｅｒｍｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｎｐｒｅｇｎａｎｃｙｓｕｃｃｅｓｓｖｉａｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅｉｎｓｅｍｉｎａｔｉｏｎ：ａｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｒｅｖｉｅｗａｎｄｍｅｔａ ａｎａｌｙｓｉｓ［Ｊ］．ＪＵｒｏｌ，２０１８，１９９（３）：８１２ ８２２．［２］陆金春．精子形态学分析的标准化与质量控制［Ｊ］．临床检验杂志，２０１２，３０（１０）：８３４ ８３６．
［３］王家雄，史轶超，杨慎敏．畸形精子超微结构观察的研究与应用进展［Ｊ］．中华男科学杂志，２０１６，２２（１）：６７ ７１．［４］ＯｍｂｅｌｅｔＷ，ＭｅｎｋｖｅｌｄＲ，ＫｒｕｇｅｒＴＦ，ｅｔａｌ．Ｓｐｅｒｍｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙａｓ ｓｅｓｓｍｅｎｔ：ｈｉｓｔｏｒｉｃａｌｒｅｖｉｅｗｉｎｒｅｌａｔｉｏｎｔｏｆｅｒｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］．ＨｕｍＲｅｐｒｏｄ
Ｕｐｄａｔｅ，１９９５，１（６）：５４３ ５５７．
［５］世界卫生组织．人类精液检查与处理实验室手册［Ｍ］．第５版．谷翊群，等译．北京：人民卫生出版社，２０１１：４５ ８６．［６］ＪｅｎｓｅｎＣＦＳ，ＫｈａｎＯ，ＮａｇｒａｓＺＧ，ｅｔａｌ．Ｍａｌｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙｐｒｏｂｌｅｍｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｓｔｒｉｃｔｓｐｅｒｍｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｂｅｔｗｅｅｎ５ １４％ｍａｙｂｅｍｉｓｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｕｒｒｅｎｔＷＨＯｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ［Ｊ］．ＳｃａｎｄＪＵｒｏｌ，２０１８，５２（５
６）：４２７ ４３１．
［７］ｖａｎｄｅｎＨｏｖｅｎＬ，ＨｅｎｄｒｉｋｓＪＣ，ＶｅｒｂｅｅｔＪＧ，ｅｔａｌ．Ｓｔａｔｕｓｏｆｓｐｅｒｍｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ：ａｎｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌ
ｖａｌｕｅ［Ｊ］．ＦｅｒｔｉｌＳｔｅｒｉｌ，２０１５，１０３（１）：５３ ５８．
［８］陆金春．精子形态学分析的是与非［Ｊ］．中华男科学杂志，
２０１３，１９（４）：２９１ ２９５．
［９］ＳｏｆｔｎｅｓｓＫＡ，ＴｒｕｓｓｌｅｒＪＴ，ＣａｒｒａｓｑｕｉｌｌｏＲＪ．Ａｄｖａｎｃｅｄｓｐｅｒｍｔｅｓｔｉｎｇ［Ｊ］．ＣｕｒｒＯｐｉｎＵｒｏｌ，２０２０，３０（３）：２９０ ２９５．
［１０］ＨａｍｉｌｔｏｎＪＡ，ＣｉｓｓｅｎＭ，ＢｒａｎｄｅｓＭ，ｅｔａｌ．Ｔｏｔａｌｍｏｔｉｌｅｓｐｅｒｍｃｏｕｎｔ：ａｂｅｔｔｅｒｉｎｄｉｃａｔｏｒｆｏｒｔｈｅｓｅｖｅｒｉｔｙｏｆｍａｌｅｆａｃｔｏｒｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙｔｈａｎｔｈｅＷＨＯｓｐｅｒｍｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ［Ｊ］．ＨｕｍＲｅｐｒｏｄ，２０１５，３０（５）：１１１０ １１２１．
（收稿日期：２０２１ ０１ １５）
（本文编辑：王海燕）。