柳蒿多糖的提取及抑菌作用研究
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第２ 期
２０１ ７定
通托旰 笼警ｊ ５ 宅 ． 学报 （ 自 然 科学）
第３ ８ 卷
总第 ２ ６ ５ 期
柳蒿 多糖 的提取及抑菌作 用研究
秦 汝 兰 ， 赵 颖 ， 姜 瑞 平
摘
要： 目的 ： 从柳 蒿中提 取 多糖 ， 并考察 多糖 对大肠杆 菌、 金黄 色葡 萄球 菌的抑制作 用． 方法： 采 用超
阳药科 大学 中药学 院．
・
１ ２ ・
秦 汝兰 ， 等
柳蒿多糖的提取及抑 菌作用研究
有 限公 司 ） ， 立式 压力 蒸 汽灭 菌器 Ｙ Ｘ Ｑ — Ｌ Ｓ 一 ５ ０ Ｓ Ｉ Ｉ
得 空 白对照 ．
（ 上 海博 讯实 业 有 限公 司 医疗 设 备 厂 ） ， Ｓ Ｐ Ｘ生 化 培养 箱 （ 上 海博讯 实 业有 限公 司医疗设 备 厂 ） ．
声提取 并结合 Ｓ ｅ ｖ ａ ｇ 除蛋 白等方法提取 柳蒿多糖 ， 以苯酚一 硫 酸法显色 ， 在波长 ４ ９ ０ ｎ ｍ处测 定吸 光度值 ， 并应
用 固相 扩散 法研 究柳 蒿 多糖 溶液 对 大肠 杆 菌及金 黄 色葡 萄球 菌 的抑 菌作 用． 结果 ： 柳 蒿 中多糖含 量 为 ８ ． ５ ８ ％， 加样 回收率 ９ ７ ． ０ ６ ％， 柳 蒿 多糖对 大肠杆 菌的抑制作用 强于金黄 色葡萄球菌． 结论 ： 柳 蒿多糖 对大肠杆 菌和金黄 色葡萄球 菌具有 一定的抑 制活性 ， 同时 ， 本方 法简便 ， 灵敏度 高， 重复性好 ， 可作 为柳 蒿 多糖的提取
柳蒿 中文名为菊科蒌蒿 （ Ａ ｒ ｔ ｅ ｍｉ ｓ ｉ ａ ｓ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｅ ｎ ｓ ｉ ｓ Ｔ ｕ ｒ ｃ ｚ ． ） ， 多年 生草 本植 物 ， 民间常 被称 为水 蒿 、 白
本实 验 以长 白山野生柳 蒿 为原 料 ， 以超 声方 法 提 取 多糖 ， 并进 行 抑 菌 活性 的研 究 ， 为充 分 开 发 利
方法．
关键词 ： 柳蒿； 多糖 ； 提取 ； 抑 茵
中图分类号 ： ＴＱ２ ８ 文献标识码 ： Ａ 文 章编 号 ： １ ０ ０ ８ — ７ ９ ７ ４ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ２ ３ ８ ７ ７ ￣ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． ｃ ｎ ２ ２ — １ ２ ８ ４ ． ２ ０ １ ７ ． ０ ４ ． ０ ０ ４
养基 制 成平 板 ， 凝 固后 滴 人 １ ０ １ １ ～１ ０ １ ２ ｃ ｆ ｕ ／ Ｌ 均
柳蒿药材剪碎后于 ６ ０ ℃干燥 ， 粉碎 ， 取１ ５ ０ ｇ 粉末 ， 加入 ｌ ０ 倍量蒸馏水 ， 浸泡过夜 ， 超声提取
３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 共２ 次， 过滤 ， 滤液 合 并 浓 缩． 浓 缩 液 中加 入５ ０ ｍ Ｌ的 Ｓ ｅ ｖ ａ ｇ 试剂 （ 氯仿 ： 正 丁 醇 ＝４ ： １ ） ， 搅
２ ． ３ 粗 多糖 的抑菌 活性 阳
无 水 乙醇 、 ９ ５ ％乙醇 、 正 丁醇 、 氯仿 、 浓 硫酸 、 葡萄糖 、 琼 脂等 均为 化学纯 ．
２ 实验 方 法
２ ． １ 柳 蒿粗 多糖 的提 取
取琼脂 ３ ０ ｇ ， 加人蒸馏水 １ ． Ｏ Ｌ ， 待全部溶解后 于 高压 灭 菌 锅 内灭 菌 ３ ０ ｍ ｉ ｎ ． 将 融 化 后 的灭 菌 培
１ ． ２ 主 要仪 器和 设备
Ｔ Ｄ ４台式 离 心 机 （ 湖 南 仪 器 表 总 厂 离 心 机 厂） ， Ｈ７ ２ ２ 可见分光光度计 （ 天津 市 普 瑞 斯 仪 器
收 稿 日期 ： ２ ｏ １ ６ — １ １ － １ ４
作者简 介 ： １ ． 秦汝兰 ， 吉林通化人 ， 女， 通化师范学院制药与食 品科学 学院教师 ； 姜瑞平 ， 通化 师范 学院（ 吉林 通化 １ ３ ４ ０ ０ ２ ） ． ２ ． 赵颖 ， 沈
用柳蒿资源提供一定的理论依据．
１ 实验仪器与材料
１ ． １ 实 验材 料
柳蒿 （ ２ ０ １ ５ 年７ 月采于通化县 ， 经 通 化 师 范 学 院 制 药 与食 品 科 学学 院于 俊 林 教授 鉴 定 为 菊 科植 物 蒌 蒿 Ａ ｒ ｔ ｅ ｍ ｉ ｓ ｉ ａ ｓ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｅ ｎ ｓ ｉ ｓ Ｔ ｕ ｒ ｃ ｚ ． ） ， 大肠 杆 菌 和 金 黄 色葡 萄 球 菌 由通 化 师 范 学 院制 药 与 食 品科 学 学 院微 生 物实验 室 提供 ．
１ ． ３ 试 剂
（ ４ ） 样 品溶 液 的 配制 ． 称取“ ２ ． １ ” 项 下柳 蒿粉 末１ ０ ０ ｇ ， 加入 ｌ ０ 倍 量蒸 馏 水 ， 浸渍过夜 ， 超 声 提 取３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 共２ 次， 过滤 ， 合并 滤 液 ， 浓缩 ， 转 移 置 ２ ５ ０ ｍ Ｌ容 量瓶 中 ， 并 用蒸 馏 水 定 容 至 刻度 ， 即得 供试 品溶 液．
蒿 …， 多 生 于 低 海 拔 或 中海拔 湿 润 、 半 湿 润 地 区 的草甸 、 灌丛 、 沼泽及 林 地 的边缘 ， 在 我 国东北 地 区具 有 丰 富 的资 源 分 布 ． 因其 质 嫩 味香 ， 风 味 独 特， 营养 价值 丰 富 ， 常被 作为 野菜 食用 ． 此外 ， 现 代药理作用研 究表明 ， 柳蒿具有清热 、 利尿 、 消 炎、 提高 免疫 力 、 抗氧 化等 多种 药理 活性 ． 多糖 （ Ｐ ｏ ｌ ｙ ｓ ａ ｃ ｃ ｈ ａ ｒ ｉ ｄ ｅ ｓ ） 是 所有 生 命 有 机体 的 重 要 组 成 部分 ， 存 在 于一 切 细 胞膜 结 构 中 ， 参 与 多 种 生命 功 能 活动 ． 由于 其 具有 抗 菌 、 抗病 毒 、 清 除 自由基 等抗 氧化 作用 ， 以及抗 肿瘤 调 节免 疫 等 多 种生 物 活性 ， 近几 年 越来 越受 到人 们 的关 注 ． 目前 ， 关 于柳 蒿 多糖 抑 菌作 用 的研 究 未 见 报 道 ，
２０１ ７定
通托旰 笼警ｊ ５ 宅 ． 学报 （ 自 然 科学）
第３ ８ 卷
总第 ２ ６ ５ 期
柳蒿 多糖 的提取及抑菌作 用研究
秦 汝 兰 ， 赵 颖 ， 姜 瑞 平
摘
要： 目的 ： 从柳 蒿中提 取 多糖 ， 并考察 多糖 对大肠杆 菌、 金黄 色葡 萄球 菌的抑制作 用． 方法： 采 用超
阳药科 大学 中药学 院．
・
１ ２ ・
秦 汝兰 ， 等
柳蒿多糖的提取及抑 菌作用研究
有 限公 司 ） ， 立式 压力 蒸 汽灭 菌器 Ｙ Ｘ Ｑ — Ｌ Ｓ 一 ５ ０ Ｓ Ｉ Ｉ
得 空 白对照 ．
（ 上 海博 讯实 业 有 限公 司 医疗 设 备 厂 ） ， Ｓ Ｐ Ｘ生 化 培养 箱 （ 上 海博讯 实 业有 限公 司医疗设 备 厂 ） ．
声提取 并结合 Ｓ ｅ ｖ ａ ｇ 除蛋 白等方法提取 柳蒿多糖 ， 以苯酚一 硫 酸法显色 ， 在波长 ４ ９ ０ ｎ ｍ处测 定吸 光度值 ， 并应
用 固相 扩散 法研 究柳 蒿 多糖 溶液 对 大肠 杆 菌及金 黄 色葡 萄球 菌 的抑 菌作 用． 结果 ： 柳 蒿 中多糖含 量 为 ８ ． ５ ８ ％， 加样 回收率 ９ ７ ． ０ ６ ％， 柳 蒿 多糖对 大肠杆 菌的抑制作用 强于金黄 色葡萄球菌． 结论 ： 柳 蒿多糖 对大肠杆 菌和金黄 色葡萄球 菌具有 一定的抑 制活性 ， 同时 ， 本方 法简便 ， 灵敏度 高， 重复性好 ， 可作 为柳 蒿 多糖的提取
柳蒿 中文名为菊科蒌蒿 （ Ａ ｒ ｔ ｅ ｍｉ ｓ ｉ ａ ｓ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｅ ｎ ｓ ｉ ｓ Ｔ ｕ ｒ ｃ ｚ ． ） ， 多年 生草 本植 物 ， 民间常 被称 为水 蒿 、 白
本实 验 以长 白山野生柳 蒿 为原 料 ， 以超 声方 法 提 取 多糖 ， 并进 行 抑 菌 活性 的研 究 ， 为充 分 开 发 利
方法．
关键词 ： 柳蒿； 多糖 ； 提取 ； 抑 茵
中图分类号 ： ＴＱ２ ８ 文献标识码 ： Ａ 文 章编 号 ： １ ０ ０ ８ — ７ ９ ７ ４ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ２ ３ ８ ７ ７ ￣ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． ｃ ｎ ２ ２ — １ ２ ８ ４ ． ２ ０ １ ７ ． ０ ４ ． ０ ０ ４
养基 制 成平 板 ， 凝 固后 滴 人 １ ０ １ １ ～１ ０ １ ２ ｃ ｆ ｕ ／ Ｌ 均
柳蒿药材剪碎后于 ６ ０ ℃干燥 ， 粉碎 ， 取１ ５ ０ ｇ 粉末 ， 加入 ｌ ０ 倍量蒸馏水 ， 浸泡过夜 ， 超声提取
３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 共２ 次， 过滤 ， 滤液 合 并 浓 缩． 浓 缩 液 中加 入５ ０ ｍ Ｌ的 Ｓ ｅ ｖ ａ ｇ 试剂 （ 氯仿 ： 正 丁 醇 ＝４ ： １ ） ， 搅
２ ． ３ 粗 多糖 的抑菌 活性 阳
无 水 乙醇 、 ９ ５ ％乙醇 、 正 丁醇 、 氯仿 、 浓 硫酸 、 葡萄糖 、 琼 脂等 均为 化学纯 ．
２ 实验 方 法
２ ． １ 柳 蒿粗 多糖 的提 取
取琼脂 ３ ０ ｇ ， 加人蒸馏水 １ ． Ｏ Ｌ ， 待全部溶解后 于 高压 灭 菌 锅 内灭 菌 ３ ０ ｍ ｉ ｎ ． 将 融 化 后 的灭 菌 培
１ ． ２ 主 要仪 器和 设备
Ｔ Ｄ ４台式 离 心 机 （ 湖 南 仪 器 表 总 厂 离 心 机 厂） ， Ｈ７ ２ ２ 可见分光光度计 （ 天津 市 普 瑞 斯 仪 器
收 稿 日期 ： ２ ｏ １ ６ — １ １ － １ ４
作者简 介 ： １ ． 秦汝兰 ， 吉林通化人 ， 女， 通化师范学院制药与食 品科学 学院教师 ； 姜瑞平 ， 通化 师范 学院（ 吉林 通化 １ ３ ４ ０ ０ ２ ） ． ２ ． 赵颖 ， 沈
用柳蒿资源提供一定的理论依据．
１ 实验仪器与材料
１ ． １ 实 验材 料
柳蒿 （ ２ ０ １ ５ 年７ 月采于通化县 ， 经 通 化 师 范 学 院 制 药 与食 品 科 学学 院于 俊 林 教授 鉴 定 为 菊 科植 物 蒌 蒿 Ａ ｒ ｔ ｅ ｍ ｉ ｓ ｉ ａ ｓ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｅ ｎ ｓ ｉ ｓ Ｔ ｕ ｒ ｃ ｚ ． ） ， 大肠 杆 菌 和 金 黄 色葡 萄 球 菌 由通 化 师 范 学 院制 药 与 食 品科 学 学 院微 生 物实验 室 提供 ．
１ ． ３ 试 剂
（ ４ ） 样 品溶 液 的 配制 ． 称取“ ２ ． １ ” 项 下柳 蒿粉 末１ ０ ０ ｇ ， 加入 ｌ ０ 倍 量蒸 馏 水 ， 浸渍过夜 ， 超 声 提 取３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 共２ 次， 过滤 ， 合并 滤 液 ， 浓缩 ， 转 移 置 ２ ５ ０ ｍ Ｌ容 量瓶 中 ， 并 用蒸 馏 水 定 容 至 刻度 ， 即得 供试 品溶 液．
蒿 …， 多 生 于 低 海 拔 或 中海拔 湿 润 、 半 湿 润 地 区 的草甸 、 灌丛 、 沼泽及 林 地 的边缘 ， 在 我 国东北 地 区具 有 丰 富 的资 源 分 布 ． 因其 质 嫩 味香 ， 风 味 独 特， 营养 价值 丰 富 ， 常被 作为 野菜 食用 ． 此外 ， 现 代药理作用研 究表明 ， 柳蒿具有清热 、 利尿 、 消 炎、 提高 免疫 力 、 抗氧 化等 多种 药理 活性 ． 多糖 （ Ｐ ｏ ｌ ｙ ｓ ａ ｃ ｃ ｈ ａ ｒ ｉ ｄ ｅ ｓ ） 是 所有 生 命 有 机体 的 重 要 组 成 部分 ， 存 在 于一 切 细 胞膜 结 构 中 ， 参 与 多 种 生命 功 能 活动 ． 由于 其 具有 抗 菌 、 抗病 毒 、 清 除 自由基 等抗 氧化 作用 ， 以及抗 肿瘤 调 节免 疫 等 多 种生 物 活性 ， 近几 年 越来 越受 到人 们 的关 注 ． 目前 ， 关 于柳 蒿 多糖 抑 菌作 用 的研 究 未 见 报 道 ，