4种血清型登革病毒外膜蛋白重组抗原的表达

4种血清型登革病毒外膜蛋白重组抗原的表达
翁育伟;张志珊;林梅清;王金章;黄萌;郑奎城;严延生
【期刊名称】《中国人兽共患病学报》
【年(卷),期】2012(028)009
【摘要】In this study, we expressed the recombinant envelope (env) proteins of dengue virus serotype 1-4 in E". coli-, which expected to be as the raw material for developing rapid dengue viral antibody detection kit. According to the sequences of viral env genes, primer pairs were designed and synthesized. By using PCR method, the truncated env fragments of four serotypes were amplified and inserted into the pET30a(+) vector. The recombinant plasmids were confirmed by restriction reaction and induced with IPTG in K, coli, to express the recombinant proteins in small scale. The two forms of recombinant env proteins of four serotypes, in bacterial lysates or purified, were analyzed by SDS-PAGK and the immunological reactivities were tested by western blotting. Each type of recombinant protein, which could be recognized and bound by the antibodies of distinct serotype, possessed the immunological reactivity.%目的在大肠杆菌中表达重组1-4型登革病毒外膜蛋白,为研制登革病毒抗体快速检测试剂提供原材料.方法根据基因序列设计、合成引物并经PCR方法扩增1-4型登革病毒部分外膜蛋白基因片段,克隆至表达载体pET30a(+)并在大肠杆菌中诱导表达.小量表达以及纯化后的重组蛋白做SDS-PAGE分析并经WB实验验证其免疫活性.结果酶切消化及电泳结果表明4种重组质粒均构建成功.经IPTG诱导后,4种重组大肠杆菌
均可表达相应的重组蛋白.纯化前后的重组蛋白经WB实验表明,4种重组蛋白均能与对应型别的病毒感染者血清反应.结论利用大肠杆菌表达系统,成功表达重组1-4型登革病毒外膜蛋白,4种型别的重组蛋白可被各自血清型的抗体结合,均具有免疫反应活性.
【总页数】4页(P894-897)
【作者】翁育伟;张志珊;林梅清;王金章;黄萌;郑奎城;严延生
【作者单位】福建省疾病预防控制中心,福州,350001;福建省人兽共患病研究重点实验室,福州,350001;福建医科大学公共卫生学院教学基地,福州,350001;福建省泉州第一医院,泉州,362000;福建医科大学,福州,350004;福建省疾病预防控制中心,福州,350001;福建省人兽共患病研究重点实验室,福州,350001;福建医科大学公共卫生学院教学基地,福州,350001;福建省疾病预防控制中心,福州,350001;福建省人兽共患病研究重点实验室,福州,350001;福建医科大学公共卫生学院教学基地,福州,350001;福建省疾病预防控制中心,福州,350001;福建省人兽共患病研究重点实验室,福州,350001;福建医科大学公共卫生学院教学基地,福州,350001;福建省疾病预防控制中心,福州,350001;福建省人兽共患病研究重点实验室,福州,350001;福建医科大学公共卫生学院教学基地,福州,350001
【正文语种】中文
【中图分类】R373.3
【相关文献】
1.登革病毒外膜蛋白DⅢ区融合基因真核表达载体的构建及免疫效果研究 [J], 张志珊;严延生;翁育伟;黄海龙;何似
2.4种血清型登革病毒多表位重组抗原的表达及血清学初步评价 [J], 易方浩;郑碧
英;徐军发;张俊爱;黎四平;贾岩;陈晨;余诗炎;王鑫;代友超;庄泽岗
3.Ⅱ型登革病毒非结构蛋白NS1血清型特异性单克隆抗体的制备与鉴定 [J], 王新帅;丘立文;潘玉先;狄飙;车小燕
4.天津地区鸡致病性大肠杆菌血清型分布及其优势血清型的外膜蛋白型研究 [J], 丁伯良;鄢明华;王英珍;李秀丽;白朋勋;黄金海;赵相华;张健
5.肺炎衣原体主要外膜蛋白重组抗原制备与应用的研究 [J], 陈学勤;陈圆圆;李雪萍;钱利生
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。