Waters-LC-MS-日常维护参考手册 PPT课件

灵敏度低下
灵敏度低下
LC侧
流动相污染 确认注入量
灵敏度低下
MS侧 离子源污染
确认喷雾 质量轴偏差
真空度 付附加着イ离オ子ン
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灵敏度低下（附着离子）：附着质子
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M M
H+
— 进样针的更换 o 进样针的材质不同，吸附度也不同。
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MS各部分的功能
MS
— Probe o 样本离子化后喷雾
— 离子源 o 将喷雾样本（离子）导入MS内部（分析器、检测器）
— 分析器 o 依据m/z分离离子
— 检测器 o 检测离子
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故障在MS侧
分析器 真空
检测器
数据系统
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确认原因分类（I）LC侧的问题
UV检测器
色谱柱
Probe
离子源
UV检测器与MS的结果中均未见峰值
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故障在LC侧 （未注射样本？）
分析器 真空
检测器
数据系统
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LC/MS系统的日常维护
LC/MS系统
— HPLC o泵 o 自动进校器
— MS o 离子源 o Probe o 分析器
— 附属设备 o 真空泵（回转泵、涡旋泵） o 氮气发生仪器 o 数据系统
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100 %
监测离子
50 %
12 %
0%
609
610
m/z
质量轴发生偏差会引起灵敏度低下 本次测试中，出现了约1/8（12%透过率/100透过率）灵敏度低下
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灵敏度低下
灵敏度低下
LC侧
流动相污染 确认注入量
灵敏度低下
MS侧 离子源污染
防止不锈钢毛细管堵塞的注意要点
— 分析后输送流动相（有机溶剂），清洗不锈钢毛细管的内部。
— 为防止不锈钢毛细管内部发生堵塞，不可使用无挥发性的缓冲剂。
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Probe的维护
不锈钢毛细管的更换 Probe 探头的更换
— 喷雾气体（喷雾样本的气体）不稳定
建议客户实施的维护
LC/MS需要注意哪些要点？ 需要实施哪些维护？ 有哪些复杂的操作？
LC/MS看上去很复杂，但如果可以区分每个功能模块，并理解其功能要点， 那就不复杂了。
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熟练使用LC/MS的方法：内容
日常维护的相关事项 故障对应 稳定检测的条件
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Probe的注意要点
确认喷雾
— 通过气流的流动状态，仔细确认Probe前端的喷雾 。 o 是否向正前方喷雾 o 是否有堵塞（喷雾是否有断断续续的现象）
*难以确认喷雾状态时，可借助手电筒等确认。
确认压力
— 与通常分析时的压力比较 o 如拆下Probe的线管后出现压力下降，则应存在不锈钢毛细管08 Nihon Waters K.K. 13
MS各部分的功能
色谱柱
Probe
离子源
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分析器 真空
检测器
数据系统
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Probe的功能
Probe
— 对输送的流动相与样本施加高电压，进行离子化 。 — 将流动相与样本转换为细微的液滴，并进行喷雾。
— 更换过滤器
*生产商不同，维护的内容也不同。详细内容请确认附带的操作手册。
设置环境
— 氮气发生仪器周围必须保留一定的空间 — 由于其属于高产热的设备，因此必须注意周围的温度 — 尘埃（尘埃导致仪器内部温度上升）
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N2 Supplier Model 24S (仪表自动化系统）
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自动采样机的注意要点
自动进样器
— 延迟 o 选择合适的针阀清洗溶剂 • 清洗溶剂可充分溶解样本物质 • 清洗溶剂与样本极性相符
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自动采样机的维护
自动进样器的维护
防止离子源受污染的工作
— 不可注射极高浓度的样本 — 使用阀门，仅将检测样本导入离子源 。
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离子源的维护
离子源（样本锥孔<口>）的定期超声波清洗
— 参照检测样本的性质，选择能够充分溶解的溶剂 o 如有多个检测样本，可选择水/乙腈/甲醇/异丙醇。
日常维护非常重要
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什么是维护
什么是维护？
— 确保仪器持续正常运作的保养、点检作业 o 仪器的环境条件保持最佳状态。同时，为防患于未然，避免发生故障，
建议客户实施的日常维护
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LC各模块的功能
泵
— 稳定输送流动相
自动进样器
— 准确注射检测样本
样品管理器
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检测器 色谱柱恒温箱 自动进样器 泵
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泵机的注意要点
泵
— 确认压力 o 确认⊿压力（确认压力的变动值） • 如压力发生变动，则基线与稳定时间会出错
— 确认流动相 o 使用符合HPLC 要求等级与LC/MS 要求等级的流动相 • 避免使用无挥发性的缓冲剂（磷酸缓冲剂等） o 流动相排气 o 定期更换流动相 • 保持使用新鲜的水 • 更换时，泵的各管路残留溶剂不应继续使用 。
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MS附属设备的功能
MS附属设备
— 真空泵（回转泵，涡旋泵） o 维持仪器真空
— 氮气发生仪器 o 提供样本喷雾所必需的氮气
— 数据系统（Software） o 控制LC/MS系统
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数据系统的维护
数据系统
— 定期备份 o 硬盘可能会在某天突然崩溃。因此必须定期备份重要的数据。
— 碎片整理
— 检查剩余空间
— 定期重新启动 o 通过将内存区域导入闪存，实现数据系统的稳定 。
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熟练使用LC/MS的方法：内容
UV检测器的结果是否正常？ （UV可明确显示峰值，UV检测结果稳定）
YES
NO
问题在MS侧 （LC没有问题）
问题在LC侧
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确认原因分类（I）MS侧的问题
UV检测器
色谱柱
Probe
离子源
如在UV检测器结果中可见到峰值， 但在MS结果中无峰值
— 可能有些样本锥孔（口）的表面覆盖有绝缘膜，因此不能用超声波清洗， 而必须使用纤维毛刷 o 研磨时，需注意避免压坏样本锥孔等孔洞。
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质量分离部（物质分离部）（分析器）的功能
质量分离部（分析器）
— 依据m/z分离离子化的样本 o 通过MRM测定与SIR（SIM）检测时，仅通过特定的样本。
LC/MS的熟练使用方法
日本WATERS株式会社 技术服务部
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LC/MS的故障
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熟练使用LC/MS的条件
熟练使用LC/MS的条件
— 保持仪器环境条件处于良好状态 — 减少故障 — 发生故障时，能妥善处理
无油涡旋泵的维护
无油涡旋泵
— 叶端密封 o 更换叶端密封（每6个月至1年一次）
— 震气
o 将泵机内部的密封垫排出至泵机外（每 日）
*无油涡旋泵不代表无需维护。
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XDS35i (EDWARDS)
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氮气发生仪器的维护
依照运转时间进行的维护
机械泵的维护
回转泵
— 润滑油 o 确认润滑油量（有无漏油）、颜色 o 确认泵机的声音 o 更换润滑油（每6个月至1年一次）
— 过滤器（油雾滤芯·齿形过滤器） o 定期更换过滤器（每6个月至1年一次）
— 震气 o 将包括油的水分等物质排出至泵机外（每周一次）
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©2008 Nihon Waters K.K. 22
质量分离部（分析器）的维护
校准
— 必须定期进行质量轴的修正（校准） o 抽真空后 o 每6个月
*一般象TOF-MS那样检测精密质量的MS，其校准的频度也会相应增高。 （与四极杆MS（四极杆质谱仪）相比）
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— 衍生离子的生成（MS/MS）
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质量分离部（分析器）的注意要点
确认真空度
— 确认分析器与碰撞室的真空度 o 通过每日确认，明确仪器的环境条件 。
仪器周围的温度
— 温度变化引起的质量轴偏离 o 特别要注意短时间内急剧的温度变化
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离子源的功能
离子源
— 离子化的样本经过离子源，进入质量分离部。
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离子源的注意要点
离子源是易受污染的部分
— 注射样本时，仅注射作业就会导致离子源的污染。 也就是说，防止离子源受污染的工作很重要。
确认原因分类（II）
确认注入
— 直接连接注射器与Probe，输送标 准品（校正品等）
— 确认MS单体的峰值
o 强度 o 稳定性
Probe
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注射泵
Quattro Premier XE
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故障应对
灵敏度低下 不出峰 重现性不良 交叉污染 质量轴偏差
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故障发生在LC？还是MS？
LC/MS发生故障时，区分故障原因在于LC侧还是MS侧，可有助于 更快地恢复故障。
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LC
MS
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确认原因分类（1）
连接UV检测器进行检测
— 为了用UV检测器确认，需准备高浓度样本
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泵机的维护
泵的维护
— LC系统的清洗 o 拆卸色谱柱， 按水/乙腈/甲醇/异丙醇 = 1:1:1:1 的比例输送液体（添 加乙酸使最终浓度为0.2%，可提高清洗效果）
o 清洗后，用水/甲醇（乙腈）= 1:1的比例充分清洗。
＊使用符合HPLC 要求等级与LC/MS 要求等级的溶剂 清洗溶剂时避免流至MS侧。（可能会造成MS侧的污染）
2020/3/31
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灵敏度低下
灵敏度低下
LC侧
流动相污染 确认注入量
灵敏度低下
MS侧 离子源污染
确认喷雾 質质量量軸轴の偏ズ差レ
真空度 附着离子
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灵敏度低下：质量轴的偏差
日常维护的相关事项 故障对应 稳定检测的要求
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面对故障时...
首先，初步点检项目
— 确认已选择的方法 — 确认流动相•样本的配置方法 — 确认移动向的调整日期
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确认喷雾 质量轴偏差
真空度 附着离子
2020/3/31
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灵敏度低下（真空度）
真空状态不佳时
Ｍ+
2020/3/31
41
©2008 Nihon Waters K.K. 41
灵敏度（真空度）
真空状态良好时
Ｍ+
2020/3/31
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©2008 Nihon Waters K.K. 42