落射荧光显微镜介绍(doc6)共6页word资料

落射荧光显微镜
（一）、说明
将显微镜下的标本物质做特异染色，由于各种物质对不同荧光色素的吸收，具有一定的选择性，所以当一种物质吸收特定波长范围的光能量后，即发出荧光，借助荧光显微镜观察荧光现象的一种专门技术，叫荧光显微术，它广泛应用于组织学细胞学、微生物学和免疫学
适用于医院、大专院校、防疫站、公检法、研究所等单位，开展对微生物学、免疫学、病理学、血液学、生物化学、药物学和肿瘤血等学科的研究，亦可用于石油勘探考古等部门使用。

该仪器具有普通透射照明和落射荧光照明，既作一般普通显微术和显微照相使用，又能观察荧光显微术。

一机多用，体积小，造型美观，使用方便。

（三）、仪器结构各部件名称如（图一A）
1、相接头或摄像接头紧固
钉
2、目镜
3、三目或双目棱镜筒紧固
钉
4、B、G分色镜紧固钉
5、紫外线防护罩
6、物镜
7、载物台
8、纵向移动手轮
9、横向移动手轮
10、集光镜
11、底座
12、电器底盘
13、 聚光镜紧固钉轮 14、 聚光镜升降手轮 15、 汞灯电源开关 16、 工作指示灯 17、 微动手轮 18、 粗动手轮
19、 B 、G 转换手柄 20、 输入线接口
21、 汞灯左右调整手轮 22、 汞灯上下调整手轮 23、 汞灯架紧固钉 24、 照相或摄像接筒 25、 目镜视度调节圈
（四）、 各部件的配置（如图一B ） （五）、 光学数据
1、
粗微调：
旋转粗动调焦手轮1（图二），能使载物台快速升降，旋转微动调焦手论4（图二）能使载物台缓慢升降，微动调焦手轮格值为0.002mm ，
在左边粗动手轮内侧有一松紧调节环3
（图二），可以按操作者的要求自由决定松紧程度，若调节环太松，载物台容易下
落使标本脱离焦点。

注：按顺时针旋转松紧调节环，粗调手轮变松；按逆时针旋转松紧调节环，粗调手轮变紧。

在粗微调手轮右边有一带把限位环2（图二），它的作用是限制载物台的升降范围。

调焦时先以10×物镜调焦，看清清晰像后将限位环2（图二）顺时针方向紧锁，可使载物台不再上升，以免调焦时失误而损坏物镜。

2、无论使用高倍或低倍物镜，一般都要用聚光镜来配合。

一方面使观察的物体获得足够的照
明，另一方面使照明光线获得
一个与物镜孔径相适应的孔径角，以
保证物镜鉴别率的充分利用，聚光镜
下装有孔径光栏，转动孔径光栏调节
手柄5（图二）可连续改变聚光镜孔
径角以配合物镜的数值孔径。

调整聚
光镜升降手轮14（图一），可使聚光
镜作高低升降运动。

3、三目镜筒
双目镜调节：使用时先用双手捏住棱
镜壳两端的调整滑板1和5 （图三），向左右移动调整滑板，使两目镜的距离与观察者两眼间的瞳距相同，然后旋转任意一目镜调节圈4（图三），使其刻度值2（图三）与调整滑板上的刻度值3（图三）读数相等。

转动微动手轮，使这个目镜中的像清晰，同样的方法调整另一个目镜调整圈，至图像清晰即可双目同时观察。

（七）、照明
本仪器具有汞灯和卤钨灯两种光源，当作生物观察时可采用卤钨灯照
明标本，卤钨灯的规格为6V15W，打开底座上的灯源开
关1（图四），即可进行照明，调节滑动电位器3（图四），
可改变光的强弱，使其满足观察者的需要。

当作荧光观察
时可采用GCQ100W直流汞灯电源。

（八）、汞灯操作
1、汞灯的点燃
（1）首先接好电源线和输出连接线，并检查
电路连接是否正确。

（2）打开电源开关15（图一），同时指示灯
16（图一）亮，汞灯点
燃，点燃后15分钟左右弧光稳定。

（3）汞灯点然后在15分钟内不要关闭汞灯，
以免损坏汞灯，关闭后重新点燃使，必
须等汞灯冷却后再行启动。

2、汞灯的更换与安装
（1）务必将电源关闭，将输入线从接线座5
（图五）上拔下。

（2）将灯架紧固螺钉8（图五）松开，上端向
外拉出一公分，向上
一提，便可平行拉出灯架9（图五）。

（3）松开灯泡上下紧固螺钉1、3（图六），将灯泡2（图六）取下，
换上新灯泡，使灯泡中心对准绝缘板上的黑点。

在安装灯泡时，不要触摸灯泡部分，并检查灯泡表面是否有灰尘和指纹，如果灯泡弄脏，用少量的酒精乙醚溶液或汽油擦拭。

然后拧紧灯泡紧固钉1、3（图六）即可。

（4）将灯架上端稍向内倾斜放入灯室12（图五）内，向上提起，将
灯架下段限位块4（图六）卡在灯室框上，拧紧灯架紧固螺钉8（图五）即可。

3、汞灯对中心：
在灯弧稳定以后，汞灯对中心按下列步骤：
（1）打开遮光板。

（2）取下10×物镜，旋转转换器，
使物镜座孔对准光路，让光线
通
过物镜座空孔。

（3）放置一张白纸在载物台上使汞
灯像投影在白纸上。

（4）用聚焦手柄11（图五）聚焦弧
像，调整对中心旋钮6、7（图
五）使灯泡位置可作上下、左右移动（白纸上
的灯弧像前后、左右移动）使灯弧像的亮点在中
心。

（5）每次换汞灯都要重复上述步
骤，汞灯点燃时不要打开灯室。

4、落射荧光显微镜的使用
（1）使用汞灯观察时要用紫外线防护罩，以免伤害眼睛。

（2）把标本放在载物台上，先用卤钨灯透射光调焦使标本进入视野
观察。

（3）关闭卤钨灯，使用汞灯，并根据标本选择好B或G（二向分色
镜）和激发滤光片（兰光B或绿光G）。

（4）注意事项
A、用100×油浸物镜时采用无荧光油，使用后，用纱布蘸二甲苯
擦浸油残液，不能使用酒精或乙醚。

B、短暂停止观察时，为使标本荧光不易猝灭应将遮光板挡住光线，不要关掉汞灯。

可延长汞灯灯泡使用寿命。

（1）波长和连续光谱在490mm附近（435nm-490nm）用于荧光色素异硫氰酸荧光黄FITC、吖啶黄和吖啶橙黄、阿的平、荧光抗体法金胺、四环素。

（2）绿光：波长546nm。

用于荧光色素、荧光抗体、罗达明。

（九）、显微照相的使用：
1、在三目照相筒上，按上照相接头，并将照相目镜装入接头内，在装上ZA装置
和照相机机身。

2、将三目棱镜壳上转换手柄拉出，使100%光线进入照相筒，通过照相观察筒观察，
作如下调整：
（1）调整照相观察筒视度圈，使分划板上的空双“十”字线“╬”形状分辨清晰，该作用是为了校正人们眼睛的视度差，以便调整物镜调焦手轮，使物
体成像在照相底片上的清晰度最佳。

（2）调整调焦手轮，使观察筒内的像最清晰即可拍照。

拍黑白片安装上照相滤色片。

3、将两根快门线分别接在中心快门和135机身快门上。

4、当使用135机身时，将内反光镜抬起索住。

把速度盘拨到B门，把快门打开，
用快门线下端的螺钉索住。

使帘布快门处于常开位置，用中心快门或半自动装
置进行拍照即可，当拍荧光照片时，曝光时间需在5分钟以上。

（十）、显微摄像：
1、旋下CCD摄像头上的防尘盖，将摄像接头拧上。

2、将CCD摄像接头插入三目头上，并用紧固螺钉上紧。

3、转录线一端插入摄像头视频输出，另一端插在彩显视频输入上（若需配置微机，
将他插在主机视频输入上）。

4、CCD摄像头与电源变压器的连接，一端插入电源变压器输出上（或插入光标发
生器电源输出口），另一端插入CCD摄像头的输入上。

5、在完成上述步骤后，把分光棱镜拉杆拉出到位，同时分别打开摄像与彩电（或
微机）电源开关，显示屏上将出现还原逼真的彩色显微图像。

（十一）、维护与保养：
1、安置：
仪器安置应选择干燥和清洁的房间，以免光学元件发霉，及尘土粘满仪器。

显微镜使用完毕应擦干净、罩好，拿掉目镜后必须盖上目镜防尘盖。

擦拭仪器应选用清洁的细软布，如擦拭透镜上的指纹或浮土，用脱脂棉蘸少量乙醚酒精混合液擦拭。

注意透镜表面不要划出条纹。

2、清洁目镜：
当目镜有灰尘时，首先清洁上表面，下面有灰尘时，要用竹笺卷脱脂棉蘸酒精乙醚混合液擦拭干净。

3、清洁物镜：
物镜片上有灰尘，不影响成像，但照明亮度损失，观察时模糊不清，清洁物镜只限于物境外表面，特别是前片表面，被药物污染后应立即用酒精乙醚混合液擦拭，香柏油须用二甲苯擦拭。

恒温板安装说明
（一）、技术指标：
1、电源电压：220V±10%，AC 45—60HZ
2、温度设定方式：预置
3、温度控制范围：30°C—40°C
4、系统工作环境温度：15°C—30°C
（二）、使用说明：
1：首先将你的显微镜平台移动尺上面两颗固定螺丝拧下，取下夹切片的弹簧压板。

2：将恒温工作台的背面的不干胶去掉，贴着显微镜工作台往里插，插到底为止，这时你的显微镜就如同有了一个新的工作台。

再将弹簧压板固定，上面的弹簧压片也能和从前一样工作，就说明你安装正确。

3：将恒温工作台的导线接口插入温控仪的输出接口（芯线请对准）。

4：将温控仪的电源接通，把仪表的电源开关打开。

这是黄灯亮就开始加温工作。

直到绿灯亮，这是就是你需要的保温温度。

加温时间一般为20分钟左右。

5：温度设定：（在仪器正常加温工作情况下进行，温度调节有四档）。

调节旋钮，选择合适的温度。

6：用完关上电源即可，恒温台一般不取下，你平时可照常工作。