黄连碱对人脐静脉内皮细胞内质网应激的影响

different concentrations for 24 h. The CCK8 was used to detect the effects of different concentrations of coptisine on the activity of
HUVECs and activity of HUVECs induced by TM. The mRNA expression levels of CHOP and GRP78 in each group were detected using
Hospital,Shanghai Jiao Tong University School of Medicine,Shanghai 200001,China)
[Abstract] Objective:To endoplasmic reticulum stress cell model of human umbilical vein endothelial cells( HUVECs) ,to estoblish
蚌埠医学院学报 2019 年 12 月第 44 卷第 12 期
1577
[ 文章编号] 1000鄄2200(2019)12静脉内皮细胞内质网应激的影响
胡摇 曦1 ,沈敏燕2 ,朱摇 静2 ,张光亚2 ,毛子明2 ,陈凤玲2
[ 摘要] 目的:建立人脐静脉内皮细胞( HUVECs) 内质网应激细胞模型,观察黄连碱对 HUVECs 以及内质网模型细胞生长活性 的影响,对 CHOP、GRP78 基因以及蛋白表达的影响。 方法:使用 10 滋g / mL 的衣霉素诱导 HUVECs 18 h 后,加入不同浓度的黄 连碱再处理 24 h。 CCK8 法检测不同浓度黄连碱对 HUVECs 的活性影响以及黄连碱对衣霉素诱导后的 HUVECs 的活性影响; 采用 RT鄄RCR 法比较各组细胞中 CHOP、GRP78 的 mRNA 的表达情况;采用 Western blotting 和细胞免疫荧光法比较各组细胞 中 CHOP,GRP78 的蛋白表达情况。 结果:随着黄连碱浓度的增加,在 1 ~ 20 滋mol / L 范围内的黄连碱对 HUVECs 的活性无影 响,浓度为 20 滋mol / L 黄连碱作用 24 h 后,对衣霉素诱导的 HUVECs 活性具有保护作用( P < 0. 01) 。 加入衣霉素诱导 18 h, HUVECs 中 CHOP、GRP78 mRNA 水平的表达增高( P < 0. 01) ,再加入黄连碱继续诱导 24 h 后,黄连碱可以抑制衣霉素所诱导 的 HUVECs 中 CHOP、GRP78 mRNA 水平的表达增高( P < 0. 01) 。 加入衣霉素诱导 18 h,HUVECs 中 CHOP、GRP78 蛋白水平 的表达增高( P < 0. 01) ,再加入黄连碱继续诱导 24 h 后,发现黄连碱可以抑制衣霉素所诱导的 HUVECs 中 CHOP、GRP78 蛋白 水平的表达增高( P < 0. 01) ,与衣霉素诱导组相比数据具有统计学意义,细胞免疫荧光染色结果与 Western blotting 结果相似。 结论:黄连碱可以减轻由衣霉素诱导的 HUVECs 过度内质网应激反应,并可提高受损细胞的活性;并可通过下调 CHOP、 GRP78 的表达改善 HUVECs 过度内质网应激反应。 [ 关键词] 黄连碱;衣霉素;HUVECs;内质网应激 [ 中图法分类号] R 589. 2 摇 摇 摇 [ 文献标志码] A摇 摇 摇 DOI:10. 13898 / j. cnki. issn. 1000鄄2200. 2019. 12. 001
Effect of coptisine on endoplasmic reticulum stress in human umbilical vein endothelial cells
HU Xi1 ,SHEN Min鄄yan2 ,ZHU Jing2 ,ZHANG Guang鄄ya2 ,MAO Zi鄄ming2 ,CHEN Feng鄄ling2 (1. School of Graduate,Bengbu Medical College,Bengbu Anhui 233030;2. Department of Endocrinology,Shanghai Ninth People忆s
RT鄄PCR. The protein expression levels of CHOP and GRP78 in each group were detected using Western blotting and cellular
immunofluorescence. Results:With the concentration of coptisine increasing,the coptisine in the range of 1 - 20 滋mol / L had no effect
observe the effects of coptisine on the growth activity of HUVECs cells,and expression levels of CHOP and GRP78 gene and protein.
Methods:HUVECs were induced by tunicamycin( TM) at a concentration of 10 滋g / mL for 18 h,and then treated with coptisine at
on the activity of HUVECs. After 24 hours,the concentration of coptisine in the range of 20 滋mol / L played a protective effect on the