荧光光谱法研究绿原酸与胰脂肪酶相互作用

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食
ＦｏｏｄａｎｄＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＳｃｉｅｎｃｅｓ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
品与Ｖｏ１．５３，Ｎｏ．６
荧光光谱法研究绿原酸与胰脂肪酶相互作用
ＡｇｒｉｃｕｈｕｒｌａｎｄａＡｑｕａｔｉｃＰｒｏｄｕｃｔｓ，ｌｎｆｚｈｏｕＬｉａｏｎｉｎｇ１２１０１３，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｃｈｌｏｒｇｅｎｉｃａｃｉｄａｎｄｐｏｒｃｉｎｅｐａｎｃｒｅａｓｌｉｐａｓｅ（ＰＰＬ）ｗａｓｒｅｓｅａｒｃｈｅｄｂｙｌｆｕｏｒｅｓ —
猝灭．最大吸收波长红移，属于静态猝灭。２５ ℃和３７ｃｃ下结合常数分别为４．３８￣１０４和７．８１ｘｌＯ，热力学参数ＡＨ＞Ｏ且ＡＳ＞０．表明结合反应是自发进行的吸热反应，相互作用主要表现为疏水作用力。绿原酸对胰胰脂肪酶表现为非竞争性抑制．抑制活性为ＩＣ为１．２２￣０．０４ｍｇ／ｍＬ。四种金属离子一定程度上降低结合常数和结合住点数，说明金属离子抑
ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＣｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃＡｃｉｄａｎｄＰａｎｃｒｅａｔｉｃＬｉｐａｓｅｂｙＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＳｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ
制了绿原酸与胰脂肪酶的结合。关键词：胰脂肪酶；绿原酸；荧光猝灭；金属离子；抑制活性
中图分类号：ＴＳ２０７．３
文献标识码：Ａ
文章编号：１６７４－５０６Ｘ（２０１７）０６－０１０６ — ０００５
摘要：采用荧光光谱法研究了绿原酸与胰脂肪酶的相互作用，主要包括荧光猝灭特性及结合常数、结合位点数的计算。抑制酶活性及抑制类型，金属离子对相互作用的影响。结果表明：绿原酸加入后胰脂肪酶产生了呈规律性的荧光
范金波，李鑫芮，葛春辉，章神
（渤海大学食品科学与工程学院，辽宁省食品安全重点实验室，生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心，辽宁锦州１２１０１３）
ｃｅｎｃｅｓｐｅｃｔＩ０ｌｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｔｈｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕｅｎｃｈｉｎｇｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ｃａｌｃｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｂｉｎｄｉｎｇｃｏｎｓｔａｎｔｓａｎｄｂｉｎｄｉｎｇｓｉｔｅｓ，ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｏｙｔｒｙｐｅｏｆｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄＯｆｐｏｒｃｉｎｅｐａｎｃｒｅａｔｉｃｌｉｐａｓｅ，ｅｆｆｅｃｔｏｆｍｅｔａｌｉｏｎｓｏｎｔｈｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｔｈａｔ：ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｏｆｈａｖｅｓｔｒｏｎｇｌｆｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕｅｎｃｈ — ｉｎｇｅｆｆｅｃｔｏｎｐｏｒｃｉｎｅｐａｎｃｒｅａｓｌｉｐａｓｅ，ｍａｘｉｍｕｍａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｒｅｄｓｈｉｌ，ｍａｆｉｎｌｙｂｅｌｏｎｇｓｔｏｓｔａｔｉｃｑｕｅｎｃｈ — ｉｎｇ．Ｂｉｎｄｉｎｇｃｏｎｓｔａｎｔｕｎｄｅｒ２５￣Ｃａｎｄ３７ ℃ ４．３８￣１０５ａｎｄ７．８１ｘ１０４ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ａｎｄｔｈｅｔｈｅｒｍｏｄｙｎａｍｉｃｐａｒａｍｅ — ｔｅｒｓＡＨ＞０ａｎｄＡＳ＞Ｏ，ｓｈｏｗｔｈａｔｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｉｓａｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｅｎｄｏｔｈｅｒｍｉｃｒｅａｃｔｉｏｎ，ｔｈｅｍａｉｎｆｏｒｃｅｏｆｈｙｄｒｏｐｈｏ — ｂｉｃｆｏｒｃｅｓ．Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｔｙｐｅｏｆｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｏｎｐａｎｃｒｅａｔｉｃｌｉｐａｓｅｗａｓｎｏｎｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓＩＣ５０１．２２￣０．０４ｍｇ／ｍＬ．Ｗｈｅｎｔｈｅｒｅａｒｅｆｏｕｒｋｉｎｄｓｏｆｍｅｔａｌｉｏｎｂｉｎｄｉｎｇｃｏｎｓｔａｎｔａｎｄｂｉｎｄｉｎｇｐｏｉｎｔｓａｒｅｒｅ —
Ｎａｔｉｏｎａｌ＆ＬｏｃａｌＪｏｉｎｔＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｉｒｔｅｒＤ厂Ｓｔｏｒａｇｅ，ｒｏＰｃｅｓｓｉｎｇａｎｄＳａｆｅｔｙＣｏｎｔｒｏｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｆｏｒＦｒｅｓｈ
ＦＡＮＪｉｎ — ｂｏ，ＬＩＸｉｎ — ｒｕｉ，ＧＥＣｈｕｎ－ｈｕｉ，ＺＨＡＮＧＹｉ
（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｃｅｎａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＢｏｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ；ＦｏｏｄＳａｆｅｔｙＫｅｙＬａｂＬｉａｏｎｉｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ；