紫外及其联合褪黑素处理对发芽大豆异黄酮富集影响
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分析检测 Analysis and Testing
光照发芽箱（金坛市水北科普实验仪器厂）。
1.3 方法
1.3.1 大豆发芽处理 选用 100 g 优质大豆种子。经去离子水冲洗后于
1%（v/v）次氯酸钠水溶液消毒 15 min，之后用去离 子水冲洗至 pH 中性，于 30 ℃的去离子水中浸泡 6 h； 浸泡后的大豆于 30 ℃发芽，进行如下处理。①紫外 辐射时长的影响。发芽温度 30 ℃，发芽时间 4 d， 25 μmol·L-1 褪黑素，紫外辐射时长为 3 ～ 15 h·d-1。②褪 黑素浓度的影响。发芽温度 30 ℃，发芽时间 4 d，9 h·d-1 紫外辐射时长，褪黑素浓度为 10 ～ 70 μmol·L-1。③发 芽时间的影响。发芽温度 30 ℃，发芽时间为 2 ～ 6 d， 紫外辐射 9 h·d-1 和 25 μmol·L-1 褪黑素。每隔 12 h 喷 施培养液。各处理发芽结束后分别测定大豆芽长及异
Keywords：germinated soybean; isoflavone; UV-B stress; melatonin treatment Merr.）是我国的四大粮油作 物之一。目前在大豆中已经发现有 12 种异黄酮，大豆 发芽后异黄酮的含量显著提升 [1]，表明发芽大豆适宜 富集异黄酮。大豆异黄酮可以预防更年期综合症 [2]， 减轻骨质疏松症和某些癌症 [3]，受到广泛关注 [4]。
关键词：发芽大豆；异黄酮；紫外胁迫；褪黑素处理
Abstract：To study the effect of UV and its combined melatonin treatment on the content of isoflavones in germinated soybeans. Through single-factor experiments, the effects of UV treatment time, melatonin concentration and germination days on soybeans were studied, and the physiological index changes and the isoflavones were studied. Enrichment situation. The results showed that after 9 h·d-1 ultraviolet radiation and 25 μmol·L-1 melatonin treatment for 4 days of germination, the isoflavone content in the germinated soybean was as high as 766.23 μg·g-1.
黄酮含量。
1.3.2 异黄酮含量的测定 采用紫外分光光度法测定 [6]，以染料木素为标准
品，用 80% 的乙醇配制不同浓度的染料木素溶液，测 定在 260 nm 下的吸光值，以异黄酮浓度（μg·mL-1） 为 横 坐 标， 吸 光 值 为 纵 坐 标， 得 到 标 准 曲 线 方 程 为 y=0.130 5x+0.009 3，R2=0.999 4。
注：小写字母表示处理间差异达显著水平（P ＜ 0.05）， 下同。
图 2 紫外辐射下异黄酮含量变化图
2.2 不同褪黑素浓度处理下发芽大豆形态和异黄酮
含量变化
由图 3 可知，大豆的生长抑制随褪黑素浓度的上 升逐渐解除，褪黑素浓度大于 55 μmol·L-1 后芽长超过 对照组。图 4 显示，异黄酮含量随褪黑素浓度增加而 显著上升（P ＜ 0.05），浓度高于 25 μmol·L-1 后异黄 酮含量降低。经 25 μmol·L-1 褪黑素处理的大豆中异黄 酮含量最高，是对照的 1.41 倍。
doi:10.16736/41-1434/ts.2021.12.042
Analysis and Testing 分析检测
紫外及其联合褪黑素处理对发芽大豆 异黄酮富集影响
Effect of UV and Combined Melatonin Treatment on Isoflavone Enrichment of Germinated Soybean
大豆发芽期间受到紫外胁迫异黄酮的含量会显著 增加 [5]。但大豆是敏感型作物，其在经紫外胁迫后生 长和生物量均受到严重抑制，使得产量大大降低。为 提高大豆的生物量及黄酮含量，本研究通过褪黑素缓 解紫外胁迫，研究紫外辐射时长、褪黑素浓度以及发
芽时间对发芽大豆生长和富集异黄酮的影响。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 大豆籽粒购于 2018 年，产自东北吉林省，保存于
4 ℃。褪黑素购自美国 Sigma 公司，其他试剂均购自 国药集团化学试剂有限公司。 1.2 仪器与设备
752N 紫外分光光度计（苏州嘉仕德科学仪器有限 公司）；发芽机（永康市贝欣五金电器厂）；PJX-250D
作者简介：古明朗（2000—），男，本科在读，研究方向为植物功能物质富集机理及技术。 XIANDAISHIPIN 现代食品 /153
◎ 古明朗，田 欣，程语轩 ( 扬州大学 食品科学与工程学院，江苏 扬州 225127)
GU Minglang, TIAN Xin, CHENG Yuxuan (School of Food Science and Engineering, Yangzhou University, Yangzhou 225127, China)
摘 要：研究紫外及其联合褪黑素处理对发芽大豆中异黄酮含量的影响，通过单因素实验，研究紫外处理 时长、褪黑素浓度以及发芽天数对大豆的影响，研究其生理指标变化及异黄酮的富集情况。结果显示，经 9 h·d-1 紫外辐射及 25 μmol·L-1 褪黑素处理发芽 4 d 的情况下，发芽大豆中异黄酮含量最高达 766.23 μg·g-1。
分析检测 Analysis and Testing
光照发芽箱（金坛市水北科普实验仪器厂）。
1.3 方法
1.3.1 大豆发芽处理 选用 100 g 优质大豆种子。经去离子水冲洗后于
1%（v/v）次氯酸钠水溶液消毒 15 min，之后用去离 子水冲洗至 pH 中性，于 30 ℃的去离子水中浸泡 6 h； 浸泡后的大豆于 30 ℃发芽，进行如下处理。①紫外 辐射时长的影响。发芽温度 30 ℃，发芽时间 4 d， 25 μmol·L-1 褪黑素，紫外辐射时长为 3 ～ 15 h·d-1。②褪 黑素浓度的影响。发芽温度 30 ℃，发芽时间 4 d，9 h·d-1 紫外辐射时长，褪黑素浓度为 10 ～ 70 μmol·L-1。③发 芽时间的影响。发芽温度 30 ℃，发芽时间为 2 ～ 6 d， 紫外辐射 9 h·d-1 和 25 μmol·L-1 褪黑素。每隔 12 h 喷 施培养液。各处理发芽结束后分别测定大豆芽长及异
Keywords：germinated soybean; isoflavone; UV-B stress; melatonin treatment Merr.）是我国的四大粮油作 物之一。目前在大豆中已经发现有 12 种异黄酮，大豆 发芽后异黄酮的含量显著提升 [1]，表明发芽大豆适宜 富集异黄酮。大豆异黄酮可以预防更年期综合症 [2]， 减轻骨质疏松症和某些癌症 [3]，受到广泛关注 [4]。
关键词：发芽大豆；异黄酮；紫外胁迫；褪黑素处理
Abstract：To study the effect of UV and its combined melatonin treatment on the content of isoflavones in germinated soybeans. Through single-factor experiments, the effects of UV treatment time, melatonin concentration and germination days on soybeans were studied, and the physiological index changes and the isoflavones were studied. Enrichment situation. The results showed that after 9 h·d-1 ultraviolet radiation and 25 μmol·L-1 melatonin treatment for 4 days of germination, the isoflavone content in the germinated soybean was as high as 766.23 μg·g-1.
黄酮含量。
1.3.2 异黄酮含量的测定 采用紫外分光光度法测定 [6]，以染料木素为标准
品，用 80% 的乙醇配制不同浓度的染料木素溶液，测 定在 260 nm 下的吸光值，以异黄酮浓度（μg·mL-1） 为 横 坐 标， 吸 光 值 为 纵 坐 标， 得 到 标 准 曲 线 方 程 为 y=0.130 5x+0.009 3，R2=0.999 4。
注：小写字母表示处理间差异达显著水平（P ＜ 0.05）， 下同。
图 2 紫外辐射下异黄酮含量变化图
2.2 不同褪黑素浓度处理下发芽大豆形态和异黄酮
含量变化
由图 3 可知，大豆的生长抑制随褪黑素浓度的上 升逐渐解除，褪黑素浓度大于 55 μmol·L-1 后芽长超过 对照组。图 4 显示，异黄酮含量随褪黑素浓度增加而 显著上升（P ＜ 0.05），浓度高于 25 μmol·L-1 后异黄 酮含量降低。经 25 μmol·L-1 褪黑素处理的大豆中异黄 酮含量最高，是对照的 1.41 倍。
doi:10.16736/41-1434/ts.2021.12.042
Analysis and Testing 分析检测
紫外及其联合褪黑素处理对发芽大豆 异黄酮富集影响
Effect of UV and Combined Melatonin Treatment on Isoflavone Enrichment of Germinated Soybean
大豆发芽期间受到紫外胁迫异黄酮的含量会显著 增加 [5]。但大豆是敏感型作物，其在经紫外胁迫后生 长和生物量均受到严重抑制，使得产量大大降低。为 提高大豆的生物量及黄酮含量，本研究通过褪黑素缓 解紫外胁迫，研究紫外辐射时长、褪黑素浓度以及发
芽时间对发芽大豆生长和富集异黄酮的影响。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 大豆籽粒购于 2018 年，产自东北吉林省，保存于
4 ℃。褪黑素购自美国 Sigma 公司，其他试剂均购自 国药集团化学试剂有限公司。 1.2 仪器与设备
752N 紫外分光光度计（苏州嘉仕德科学仪器有限 公司）；发芽机（永康市贝欣五金电器厂）；PJX-250D
作者简介：古明朗（2000—），男，本科在读，研究方向为植物功能物质富集机理及技术。 XIANDAISHIPIN 现代食品 /153
◎ 古明朗，田 欣，程语轩 ( 扬州大学 食品科学与工程学院，江苏 扬州 225127)
GU Minglang, TIAN Xin, CHENG Yuxuan (School of Food Science and Engineering, Yangzhou University, Yangzhou 225127, China)
摘 要：研究紫外及其联合褪黑素处理对发芽大豆中异黄酮含量的影响，通过单因素实验，研究紫外处理 时长、褪黑素浓度以及发芽天数对大豆的影响，研究其生理指标变化及异黄酮的富集情况。结果显示，经 9 h·d-1 紫外辐射及 25 μmol·L-1 褪黑素处理发芽 4 d 的情况下，发芽大豆中异黄酮含量最高达 766.23 μg·g-1。