实验八 重金属离子胁迫下植物组织膜脂过氧化产物的测定

三，实验材料与试剂
材料 Cd 2+处理7d的菹草叶片； 试剂 10%三氯乙酸（TCA）； 0.6%硫代巴比妥酸（TBA）。
四，实验步骤
1. MDA的提取：
0.1g植物叶片洗净、擦干、剪碎，置于 研钵中加少许石英砂、5mLTCA（分次）， 研磨匀浆后转移至离心管。4000 rpm离心 10min，上清液即为样品提取液。
MDA的积累加剧对细胞的伤害。
MDA可与蛋白质、核酸等结合使之失去其活 性, 从而进一步破坏了生物膜及细胞内物质的 结构与功能, 最终导致植物受伤害, 甚至死亡。
在酸性和高温条件下，MDA可以与硫代 巴比妥酸（TBA）反应生成红棕色的三 甲氚，在53TBA反应后，在450nm有最大 光吸收，在532nm也有光吸收，通过公式 排除干扰。
2，显色反应与测定
2mL提取液+2mL TBA，混匀，沸水 浴15min，迅速冷却。
另取２mLTCA+2mLTBA同样操作，为对照 液。
反应液3500rpm离心15min，取上清液， 测量体积（Ｖ），以对照液调零，测定 532nm、600nm、450nm处的光吸收值。
3，计算含量
MDA的浓度： Ｃ(µmol/L)＝6.45(A532-A600)-0.56A450 MDA的含量
实验八 重金属离子胁迫下植物 组织膜脂过氧化产物的测定
——（MDA法）
一，实验目的与要求
掌握比色法测定植物组织MDA含量的方 法和步骤； 观察重金属胁迫下植物组织膜脂过氧化 的程度。
二，实验原理
MDA是植物细胞膜脂过氧化反应的最终产 物之一。
逆境胁迫导致自由基（O
· 2
、OH
•等）积累，
诱导细胞膜中的不饱和脂肪酸发生过氧化反应。
含量( µmol/g FW) =2.5*C (µmol/L) *V(L)/M(g FW)