靶向抑制胃癌细胞中TROP2基因的表达对胃癌细胞增殖及凋亡的影响研究

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本实验将探究抗肿瘤药物中的顺铂和阿霉素对细胞增殖与凋亡的影响

本实验将探究抗肿瘤药物中的顺铂和阿霉素对细胞增殖与凋亡的影响。

1.材料与方法1.1 材料1.1.1 细胞株人胃癌BGC-823细胞为本实验室常规保存的细胞，于37℃、5％co2培养箱中培养。

1.1.2 主要试剂顺铂（母液浓度5mg/ml），阿霉素（母液浓度5mg/ml），4℃冷藏。

四甲基偶氮唑盐（MTT，母液浓度5mg/ml）液，避光保存。

还有DMSO培养液，胰酶，胎牛血清，DMEM培养基，裂解液（0.01MHCI，10%SDS），PBS，PI染液，Hoechests-33342染液。

1.1.3 主要仪器用具荧光显微镜，CO2培养箱，离心机，酶标测定仪，冰箱，计数器，排枪，96孔板，酒精灯等。

1.2方法1.2.1 原理概述细胞增殖的检测方法很多，本实验选用的MTT检测法是检测细胞增殖活力的一种简便准确的方法。

其原理是在活细胞生长和增殖过程中，线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使黄色的外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。

二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪在测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，生成的甲瓒量的多少与细胞的数量和细胞的活力成正比。

根据测得的吸光度值（OD值），来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强。

其优点是简单、快速、准确，广泛应用于新药筛选、细胞毒性试验，肿瘤放射敏感性实验分析。

IC50是指在用药后存活的细胞数量减少一半时所需的药物浓度。

在MTT法中, 就是以对照组吸光度OD 值减少一半所需的药物浓度为IC50。

除此以外, 半数抑制浓度的含义还相当于药物对培养细胞的最小致死剂量的平均值, 作为反映药效的定量指标, 在各种药物的筛选中广泛应用。

本实验将以此法测定药物对细胞增殖抑制的IC50值所对应的药物浓度。

检测细胞凋亡的方法也有很多。

根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。

本实验选用的Hoechests-PI双染色法是常用的形态学观察法之一。

NS5ATP9抑制血清饥饿诱导的HepG2细胞凋亡

形式的比例增加，而出现去极化电位形式的比例显著减少（Ｐ＜００）而Ｎ５Ｔ９干扰ＲＡ组线粒．５；ＳＡＰＮ体膜电位保持正常形式的比例显著减少（Ｐ＜００）．５。Ｗｅｔｒｌ检测结果显示，ＳＡＰｓｎｂｔｅｏＮ５Ｔ９干扰ＲＡＮ组促凋亡分子Ｂｘａ表达量显著升高（Ｐ＜００）Ｎ５Ｔ９过表达组Ｂｘ表达量则有下降趋势。结．５，ＳＡＰａ
ＣｒｐｎｉｇａｔｏｓＣＥＧＪｎｃｅｇｄ＠ｃ．ｅｕｃ；ＺＡｏｒｏｄｎｕｈｒ：ＨＮｕ，ｈｎ￣ｔｓｃｍｕｄ．ａＨＯｌｇｅｇｈｏａｏ．ｏｏｆｚａ＠ｙｈｏｃｎｎｎ
【ｂｔｃ】ＯｊｃｖＴｎｅｔａｈｆｃｏＮ５Ｔ９ｏｈｐｐｏｉｏＨｐ２ｃｌ．ＡｓａｔｒｂｅｔｅｏｉｖｓｇｔｔｅｅｅｔｆＳＡＰｎｔｅａｏｔｓｆｅＧｅｌｉｉｅｆｓｓ
ＭｅｏｓＮ５Ｔ９ｅｐｅｓｎｐａｍｄ（ＥＦ — １Ｎ５Ｔ９ａｄｍＲＲＡｘｒｓｏｅｔｒｆｒｔｄＳＡＰｘｒｓｏｌｉｐＧＰＮ－ＳＡＰ）ｎｉＮｉｅｐｅｓｎｖｃｓｏｈｉｓｉｏ
【ｙｗｒｓＮ５Ｔ）ｇｎ；ｐｐｏｉ；ｔｃｏｄｉＫｅｏｄ】ＳＡ１ｅｅＡｏｔｓＭｉｈｎｒｘｓｏａ
ＤＩ１．８７ｃａｊｉｎ１７ —３８２１．０．０１Ｏ：０３７／ｍ．．ｓ．６４１５．０２２０ｓ

IL-17A在胃癌中的表达及其对胃癌细胞增殖、凋亡的影响

Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅｔｏ：ＺＥＮＧＺｈｉｒｏｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｚｅｎｇｚｈｉｒｏｎｇ＠ｖｉｐ．１６３．ｃｏｍ
Ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ：Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一１７Ａ（ＩＬ一１７Ａ）ｐｌａｙｓａｃｉｒｔｉｃａｌｒｏｌｅｉｎｉｎｌｆａｍｍａｔｉｏｎ．ＰｒｅｖｉｏｕｓｓｔｕｄｙｈａｓｓｈｏｗｎｔｈａｔＩＬ一１７Ａ
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７０・
ＣｈｉｎＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２０１４，Ｖｏ１．１９，Ｎｏ．２
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● 佥Ｕ
著
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ＩＬ－１７Ａ在胃癌中的表达及其对胃癌细胞增殖、凋亡的影响水
ＴｈｅＳｅｃｏｎｄＡｆｉｌｆｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｆｏＧｕａｎｇｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ（５１０２６０）；ＤｅｐａｔｒｅｎｍｔｆｏＧａｓｔｒｏｅｔｅｎｒｏｌｏｇｙ，
ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＩＬ－１７ＡｉｎＧａｓｔｒｉｃＣａｎｃｅｒａｎｄｉｔｓＥｆｆｅｃｔｏｎＣａｎｃｅｒＣｅｌｌＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄＡｐｏｐｔｏｓｉｓ

抑制miR-21-5p表达通过靶向FOXP2调控肺癌细胞增殖和凋亡

殖情况２５％胰蛋白酶消化肺癌细胞，调整细胞浓度为２×１０４个／ｍｌ，接种于６孔板中，分别转染ｍｉＲ２１５ｐｍｉｍｉｃ、ａｎｔｉｍｉＲ２１５ｐ、ｐｃＤＮＡＦＯＸＰ２及其阴性序列或共转染ａｎｔｉｍｉＲ２１５ｐ、ｓｉＦＯＸＰ２；转染４８ｈ后弃去旧培养基，加入ＭＴＴ２０μｌ混匀，培养４ｈ；然后每孔加ＤＭＳＯ溶液１００μｌ混匀，培养１５ｍｉｎ；采用酶标仪检测吸光值，每组３个复孔。１２７流式细胞仪检测细胞凋亡转染后Ａ５４９细胞培养４８ｈ后，弃去培养基，磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）清洗２次；加入５００μｌ１×结合缓冲液，５μｌＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ，避光孵育１５ｍｉｎ；加入２５μｌＰＩ，孵育５ｍｉｎ，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。１３统计学方法采用ＳＰＳＳ２２０软件进行ｔ检验、单因素方差分析。
崔艳红等抑制ｍｉＲ２１５ｐ表达通过靶向ＦＯＸＰ２调控肺癌细胞增殖和凋亡第１４期
·３０７３·
２ｍｉｎ，９５℃ １５ｓ，６０℃ ２０ｓ，７２℃ ２０ｓ，共４０个循环；反应体系为２０μｌ：２×ＳＹＢＲＭｉｘ１０μｌ，上下游引物各０５μｌ，１０×ｃＤＮＡ模板１μｌ，Ｈ２Ｏ８μｌ。引物序列：ｍｉＲ２１５ｐ：正义链５′ＧＴＧＣＡＧＧＧＴＣＣＧＡＧＧＴ３′，反义链５′ＧＣＣＧＣＴＡＧＣＴＴＡＴＣＡＧＡＣＴＧＡＴＧＴ３′；Ｕ６：正义链５′ＣＴＣＧＴＴＣＡＣＧＡＡＴＴＴＧＣＣＴ３′，反义链５′ ＴＣＡＣＧＡＡＴＴＴＧＣＧＴ３′；ＦＯＸＰ２：正义链５′ＧＧＴＣＡＴＧＡＣＣＣＣＴＧＡＴＴＡＧＧ３′，反义链５′ＡＧＴＣＣＴＣＴＡＧＡＧＧＣＴＴＣＡＴ３′；βａｃｔｉｎ：正义链５′ＣＡＧＣＧＡＣＡＣＣＣＡＣＴＣＣＴＣ３′，反义链５′ＴＧＡＧＧＴＣＣＡＣＣＡＣＣＣＴＧＴ３′。分别以Ｕ６、βａｃｔｉｎ为ｍｉＲ２１５ｐ、ＦＯＸＰ２的内参基因计算相对表达量。１２３Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测蛋白表达情况肺癌细胞株以５×１０４个／ｍｌ接种于６孔板中贴壁培养２４ｈ，收集细胞，ＲＩＰＡ裂解液冰上裂解５ｍｉｎ提取总蛋白，测定总蛋白浓度，蛋白与样品缓冲液混合后煮沸５ｍｉｎ变性蛋白；１０％十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳＰＡＧＥ）跑胶，转膜至聚偏氟乙烯（ＰＶＤＦ）膜，５％脱脂奶封闭１５ｈ；一抗４℃孵育过夜，ＴＢＳＴ清洗３次／５ｍｉｎ；稀释二抗室温孵育１ｈ，ＴＢＳＴ清洗３次／５ｍｉｎ；ＥＣＬ显影液显影，ＧＩＳ凝胶成像仪采集图片，以ＧＡＰＤＨ为内参计算蛋白表达水平。１２４双荧光素酶实验检测ｍｉＲ２１５ｐ对ＦＯＸＰ２的影响扩增ＦＯＸＰ２基因的转录本３′ＵＴＲ，构建野生型ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ（ＷＴｐＧＬ３ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ）质粒；采用定点突变技术，将３′ＵＴＲ上的与ｍｉＲＮＡ结合的核心区域突变构建突变型ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ（ＭＵＴｐＧＬ３ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ）质粒；将两种质粒分别转染至肺癌细胞，转染４８ｈ后检测荧光强度。１２５细胞转染转染前２４ｈ将细胞接种于２４孔板中，使细胞贴壁密度约８０％。设计并合成ｍｉＲ２１５ｐｍｉｍｉｃ、ａｎｔｉｍｉＲ２１５ｐ及其对应阴性序列，使用ｌｉｐ２０００将合成序列分别转染肺癌细胞，空白对照（ＮＣ）组不做任何处理，无血清ＤＭＥＭ培养６ｈ，换完全培养基培养１８ｈ后进行功能试验，并继续培养筛选稳定低表达ｍｉＲ２１５ｐ的细胞株。

以Trop-2为靶标的抗肿瘤研究进展

《中外医学研究》第19卷第2期（总第478期）2021年1月综述 Zongshu- 189 -*基金项目：国家“重大新药创制”科技重大专项项目（2019ZX09732002）①荣昌生物制药（烟台）股份有限公司　山东　烟台　264006 通信作者：姚雪静以Trop-2为靶标的抗肿瘤研究进展*杨黎娜①　姚雪静①【摘要】　Trop-2是一种跨膜糖蛋白，在多种肿瘤细胞中异常表达，作为细胞内钙信号的传递者参与多种肿瘤发生相关的细胞信号传导途径。

以Trop-2为靶点的抗肿瘤药物主要是抗体药物偶联物，具有广阔的研究前景。

本文针对Trop-2的作用机制、在不同肿瘤中的表达与功能，以及以Trop-2为靶标的抗肿瘤药物研究进行了综述。

【关键词】　Trop-2　靶向药　抗肿瘤　抗体-药物偶联物 doi：10.14033/ki.cfmr.2021.02.074文献标识码　A文章编号　1674-6805（2021）02-0189-03 Research Progress of Anti-tumor Drugs Targeting Trop-2/YANG Lina, YAO Xuejing. //Chinese and Foreign Medical Research, 2021, 19(2): 189-191 [Abstract]　Trop-2 is one kind of transmembrane glycoprotein, and abnormally expressed on a variety of tumor cells. As a transmitter of intracellular calcium signal, Trop-2 is involved in tumor cell signaling pathways related to tumorigenesis. Most of anti-tumor drugs targeting Trop-2 are antibody-drug conjugates, which have broad research prospects. In this paper, the mechanism of action, expression and function of Trop-2 in different tumors, as well as the research of anti-tumor drugs targeting Trop-2 are reviewed. [Key words]　Trop-2　Targeted drug　Anti-tumor　Antibody-drug conjugates First-author ’s address: RemeGen Co., Ltd, Yantai, Yantai 264006, China Trop-2是一种以TACSTD2基因编码表达的细胞表面糖蛋白，为单次跨膜蛋白。

5-氮杂-2’-脱氧胞苷诱导CDX2基因表达对人胃癌细胞株MKN45增殖和凋亡的影响

ｇｓｒａｃｒＣＤ，ｅｕａｏｆｎｅｔａｈｎｔｐ，ｓｓｏｎｔｌｙａｔｍｏ－ｕｐｅｓｖｏｅｉａｔｃｃｎｅ．ｍｓａｔｃｃｎｅ．Ｘ２ａｒｇｌｔｒｏｔｓｎｌｅｏｙｅｉｈｗｏｐａｉｉｉｐｕｒｓｐｒｓｉｅｒｌｎｇｓｒａｃｒＡｉ：ｉ
胃肠病学２１０１年第１第１期６卷１
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５氮杂． ’ ．２．脱氧胞苷诱导ＣＤ２基因表达对Ｘ人胃癌细胞株ＭＫ４Ｎ５增殖和凋亡的影响
术玲１董丽娟张弘２鞠少卿３毛振彪
南通大学附属医院消化内科 ’２６０）消化病实验室外科综合实验室。（２００
ＧａｔｉＣｎｅｅｌｉｅＭＫＮ４ＺＡｉｎｎ，ＩＮＧＷｅＫＡｉｌｇＤＮＧＬｕｎＺＡＮｎ，ＵｓｒａｃｒＣｌＬｎｃ５ＨＮＧＪｆｇＪａｅＡｉＵＩＸａｉ，Ｏ￣ａ，ＨＧＨｏｇＪ，ｏｎＳａｑｎ，Ｍｈｎｉ．ＤｐｒｅｔｆＧ０ｎｒＡｆｉｅｓｉｌｏａｔｎ『拓瑙，Ｎｎｎ，ｉｇｕｈｏｉｇＡ０Ｚｅｂｏｅａｔｎｏ傩ｒ把ｆａｍｅ】ｇｆｌｔＨｏｔＮｎｏｇｃｅｉａｄｐａｆｎａｔｇＪｎｓｏａＰｏｉｅ（２００ｒｎ２６０）ｖｃ
Ｅｆｅｔｏ－ｚ－－ｅｘｃｔｄｎｎｕｅｆｃｆ５ａａ２’ｄｏｙｙｉｉｅＩｄｃｄＣＤＸ２ＧｅｅＥｘｒｓｉｎｏｏｉｒｔｎａｄｎｐｅｓｎＰｒｌｅａｉｎＡｐｐｏｉｆＨｕａｏｆｏｏｔｓｓｏｍｎ

HER--2在胃癌组织中的表达及17号染色体倍体改变与病理特征的相关性分析的开题报告

HER--2在胃癌组织中的表达及17号染色体倍体改变与病理特征的相关性分析的开题报告一、研究背景和意义胃癌是一种常见的恶性肿瘤，是全球范围内造成死亡率较高的肿瘤之一。

HER-2是一种丝裂原活化蛋白受体，它在许多癌症的发生和发展中发挥着重要作用。

HER-2在胃癌中的表达与胃癌的发生和预后有很大关系，因此HER-2已经成为胃癌的重要标志物。

此外，17号染色体倍体改变也与胃癌的发展和预后密切相关。

然而，HER-2表达与17号染色体倍体改变在胃癌中的关系仍不明确。

因此，本研究旨在探讨HER-2在胃癌组织中的表达及17号染色体倍体改变与病理特征的相关性，为胃癌的诊断、治疗和预后判断提供科学依据。

二、研究内容和方法1.研究内容本研究将分析HER-2在胃癌组织中的表达及17号染色体倍体改变与胃癌患者病理特征（如肿瘤大小、淋巴结转移等）的关系。

2.研究方法(1)研究对象选择在我院接受手术治疗的200例胃癌患者作为研究对象，其中男性120例，女性80例，年龄为40-80岁，平均年龄为58岁。

经组织学检查确认为胃癌，并已进行手术治疗。

(2)组织标本处理收集手术切除的胃癌组织标本，进行病理学检查，并对HER-2在胃癌组织中的表达和17号染色体倍体改变进行检测。

(3)数据统计和分析使用SPSS软件对数据进行统计学分析，计算HER-2表达和17号染色体倍体改变与胃癌患者病理特征之间的相关性。

三、预期结果和意义通过分析HER-2在胃癌组织中的表达及17号染色体倍体改变与胃癌患者病理特征之间的相关性，可以得出以下预期结果：(1)HER-2表达与胃癌肿瘤大小、淋巴结转移等病理特征可能存在相关性。

(2)17号染色体倍体改变与HER-2表达、胃癌病理特征之间可能存在相关性。

该研究的意义在于：(1)为胃癌的诊断、治疗和预后判断提供科学依据，为个体化治疗提供理论基础。

(2)为探索胃癌发生机制提供新的思路和方向，进一步了解HER-2与胃癌转移、预后的关系。

靶向EGFR基因RNA干扰对胃癌细胞BGC823细胞增殖和凋亡的影响

第22卷第21期中国现代医学杂志Vol.22No.21 2012年7月China Journal of Modern Medicine Jul.2012文章编号：1005-8982（2012）21-0059-04·临床论著·靶向EGFR基因RNA干扰对胃癌细胞BGC823细胞增殖和凋亡的影响龙辉，李欢，吴清明（武汉科技大学附属天佑医院消化内科，湖北武汉430064）摘要：目的利用R NA干扰技术下调表皮生长因子受体（EGFR）基因的表达，观察其对胃癌BGC823细胞增殖和凋亡的影响。

方法将细胞分为3组，空白对照组、空载体组和实验组（转染EGFR shR NA组）。

构建针对EGFR基因的s和R NA真核表达载体，转染入胃癌BGC823细胞中，运用R T-PCR和Western blot检测EGFR在mR NA和蛋白水平的变化；WST-1法检测细胞增殖的影响：Hoechst33258染色观察细胞核形态学变化。

实验重复3次。

结果成功构建表达质粒pGenSil-EGFR并转染BGC823细胞，shR NA下调EGFR的表达后，与空白对照组相比EGFR在mR NA和蛋白水平的表达均下降，抑制率分别为58.6%和75.2%。

shR NA转染24、48、72h，WST-1法检测胃癌细胞BGC823的增殖情况，与空白对照组相比，24h后三组差异不明显（F=0.326，P>0.05），48h及72h后，细胞增殖明显下降（F=68.25及274.45，P<0.001），有统计学意义。

EGFR shR NA作用BGC823细胞72h后，经Hoechst33258染色发现，实验组细胞核染色质边集，出现凋亡小体。

结论靶向EGFR基因R NA干扰能够阻抑胃癌细胞BGC823细胞的EGFR表达，诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖，EGFR基因有望成为胃癌基因治疗靶点。

关键词：R NA干扰；表皮生长因子受体；BGC823细胞；增殖与凋亡中图分类号：R-33文献标识码：ARNA interference targeting EGFR on proliferation andapoptosis of human gastric carcinoma cell line BGC823LONG Hui,LI Huan,WU Qing-ming(Department of Gastroenterology,the Affiliated Tianyou Hospital of Wuhan University of Scienceand Technology,Wuhan,Hubei430064,P.R.China)Abstract:【Objective】To explore the effect of down-regulating epidermal growth factor receptor(EGFR)ex－pression by RNA interference on the proliferation of gastric carcinoma BGC823cells.【Methods】BGC823cellswere divided into three groups:blank control group,negative control group(transfected with an empty vector),andexperiment group(transfected with EGFR shRNA).The recombinant eukaryotic expression plasmids pGenSil-EGFRwere constructed and transfected into BGC823cells respectively,the mRNA and protein expression of EGFR wasexamined by RT-PCR and Western blot,respectively;cell proliferation was evaluated by WST-1assay;and cellapoptosis was detected by Hoechst33258.【Results】The expressions of EGFR in BGC823cells transfected withpGenSil-EGFR were inhibited significantly at both mRNA and protein levels,with an inhibitory rate of58.6%and75.2%.At48,and72h after transfection,the proliferation rates of BGC823cells transfected with EGFR shRNA sig－nificantly lower than those of non-transfected cells(F=68.25and274.45,P<0.001),24h besides(F=0.326,P>0.05).After72h,the BGC823transfected with EGFR shRNA was proved to be more apoptosis than those of cells ofthe blank control group and negative control by Hoechst33258dyeing.【Conclusion】RNA interference targetingEGFR gene down-regulates the EGFR expression,induces cell apoptosis and inhibits cell proliferation in gastriccarcinoma BGC823cells.EGFR may be a new gene therapy target for gastric cancer.Key words:RNA interference;epidermal growth factor receptor;BGC823;proliferation and apoptosis收稿日期：2011-11-15[通信作者]吴清明，E-mail：wuhe9224@胃癌是世界上第二常见癌，每年新病例的数量不断增加，成为严重危害人类健康的常见恶性肿瘤。

抗能量药物柠檬酸钠对胃癌细胞增殖的影响及其作用机制研究

抗能量药物柠檬酸钠对胃癌细胞增殖的影响及其作用机制研究研究背景和目的胃癌是常见的恶性肿瘤，严重威胁着人类的健康。

胃癌的治疗是世界性的难题，近年来随着以外科手术为主的综合治疗的应用，其预后有所改善，但5年生存率仍不满意。

为了满足胃癌这种复杂疾病的治疗要求，有必要寻找新型有效的抗肿瘤药物。

肿瘤细胞主要依赖糖酵解产生ATP获得能量，抑制糖酵解可诱导细胞凋亡，以抗肿瘤能量代谢为治疗靶点的药物称为抗能量药物，柠檬酸钠（SCT）是其中的代表。

磷酸果糖激酶1（PFK-1）、己糖激酶（HK）、丙酮酸激酶（PK）是催化糖酵解途径的关键酶，其中PFK-1的调控作用最强，若能抑制PFK-1活性，则能抑制糖酵解。

研究资料显示，SCT作为PFK-1的抑制剂，能通过与PFK-1的抑制性结合位点结合从而抑制该酶的活性。

此外还有研究证实，当肿瘤细胞的糖酵解被抑制、ATP枯竭时可产生持续性的DNA降解，导致肿瘤细胞线粒体通透性增强，通过释放细胞色素C（Cyt-C）、激活含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（caspase）而诱导细胞凋亡。

细胞凋亡的启动和进行受到精确调控，具有独特的信号系统。

线粒体是细胞能量的代谢中心，线粒体通路作为凋亡信号传导的重要通路，受多种凋亡基因或蛋白调控，如Bcl-2家族等。

Cyt-C的释放是线粒体凋亡通路激活的标志。

通过对这些凋亡基因或蛋白的研究，能为阐明药物的作用机制提供依据。

本课题前期研究已经证明SCT在体外可抑制胃癌细胞增殖，但其作用机制及其与糖酵解有无联系尚不清楚；此外，SCT在体内对人胃癌裸鼠移植瘤的生长有无抑制作用及其机制未见报道。

通过前期实验，我们推测SCT可能是通过抑制PFK-1活性从而抑制糖酵解，引起凋亡基因或蛋白表达改变，激活线粒体通路引起Cyt-C释放增加,活化caspase来发挥其诱导胃癌细胞凋亡、抑制胃癌生长的作用。

为了证实这一推测，本实验通过应用人胃癌细胞株SGC-7901和人胃癌裸鼠移植瘤模型，研究SCT在体外和体内对胃癌细胞增殖的影响，并探讨其作用机制，以期为胃癌的药物治疗提供新的实验依据和研究思路。

第20讲细胞的分化衰老和坏死-2023年新高一生物暑假课(人教版2019必修1)(原卷版)

第20讲细胞的分化、衰老和死亡【学习目标】1.通过比较同一生物个体的不同细胞在形态、结构和功能上的差异，领悟细胞分化的意义、归纳细胞分化的概念，进而阐明细胞分化的实质是基因的选择性表达。

2.通过分析植物组织培养和植物体细胞移植等生物学事实，阐明植物细胞具有全能性、动物体细胞的细胞核具有全能性，进而归纳细胞全能性的概念和应用。

3.通过对骨髓移植和中华骨髓库相关内容的分析，及对干细胞特点的理解；关注干细胞在医学上的应用，说明生物技术在医学上的应用，提升社会责任感。

4.通过对细胞衰老特征示意图的观察、分析，说出细胞衰老在形态、结构和生理功能等方面的变化，解释老年人出现衰老有关外貌特征和生理变化的原因。

5.通过对“细胞衰老的原因”分析，理解细胞衰老的机制，认同细胞衰老是一种自然的生理现象；通过对“年龄因素与细胞衰老关系资料的分析”资料的分析，辩证说明个体衰老和细胞衰老的关系。

6.通过对涂610和图611的分析，说出细胞凋亡发生的时期及生理意义，阐明细胞凋亡是一种由基因控制的自然生理现象。

【问题探讨】1.在人体内，红细胞的寿命为120d左右，白细胞的寿命为5~7d。

这些血细胞都是失去分裂能力的细胞。

白血病患者的血液中出现大量的异常白细胞，而正常的血细胞明显减少。

通过骨髓移植可以有效地治疗白血病。

思考探讨下面的问题。

①为什么健康人的血细胞数量不会随着血细胞的死亡而减少？②骨髓移植可以有效地治疗白血病，骨髓与血细胞的形成有什么关系？2.1958年，美国科学家斯图尔德用胡萝卜韧皮部细胞成功地培育出了一棵完整的植株。

这一事实说明什么？3.科学家曾用非洲爪檐的蝌蚪做实验，将它的肠上皮细胞的核移植到去核的卵细胞中，结果获得了新的个体。

将非洲爪檐的上皮细胞单独培养能获得新的个体吗？为什么?4.细胞衰老与个体衰老有什么关系?【课前预习】一、细胞分化及其意义1.人体的上皮细胞、骨骼肌细胞、神经细胞形态____________，结构上________区别，功能上__________，但总体上都由_______________________________构成。

胃癌组织中TROP2蛋白的表达及其临床意义

胃癌组织中TROP2蛋白的表达及其临床意义周永清;王先锋;杜文杰;庞景【期刊名称】《皖南医学院学报》【年(卷),期】2018(037)004【摘要】目的:研究胃癌组织中TROP2蛋白的表达,探讨其在胃癌发生发展中的作用.方法:应用免疫组织化学EnVision法检测70例胃癌、15例低级别上皮内瘤变、15例高级别上皮内瘤变和20例正常胃组织中TROP2蛋白表达.结果:TROP2从正常胃黏膜到胃癌组织中的阳性率逐渐增高,差异有统计学意义(P<0.01).胃癌组织中TROP2表达与浸润深度、淋巴结转移和pTNM分期有关(P<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤部位、Lauren分型和分化程度无关(P>0.05).结论:TROP2可能参与了胃癌的发生发展,检测胃癌组织中TROP2表达有助于预测胃癌的临床生物学行为.【总页数】4页(P328-331)【作者】周永清;王先锋;杜文杰;庞景【作者单位】铜陵市第四人民医院病理科,安徽铜陵 244000;铜陵市第四人民医院病理科,安徽铜陵 244000;铜陵市第四人民医院病理科,安徽铜陵 244000;铜陵市第四人民医院病理科,安徽铜陵 244000【正文语种】中文【中图分类】R735.2;R365【相关文献】1.TROP2基因mRNA在胃癌组织中的表达及其意义 [J], 欧文胜;方唯意;王建;刘展2.胃癌组织中TROP2、HER-2蛋白的表达及相关性 [J], 王勇3.胃癌组织中TROP2、HER-2蛋白的表达及相关性 [J], 王勇;4.Trop2与EMT相关蛋白E-Cadherin在鼻咽癌中的表达及临床意义 [J], 陈顺金; 吴笑英; 何锦添; 傅明; 王凤平; 叶伟标; 李伟滔5.Trop2在胃癌组织中的表达及其临床意义的Meta分析 [J], 俞程彬;毛伟征因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

HER2EGFRVEGFR在胃印戒细胞癌中的表达及其临床意义

HER2EGFRVEGFR在胃印戒细胞癌中的表达及其临床意义1. 引言1.1 胃印戒细胞癌简介胃印戒细胞癌是一种罕见但恶性的胃癌亚型，其特点是肿瘤细胞内含有大量的黏液，形成印迹状细胞。

这类肿瘤通常发生在胃黏膜表层，但也可以侵犯深层组织。

胃印戒细胞癌的发病率相对较低，但其恶性程度较高，易于产生远处转移和复发。

临床表现多样，常见症状包括消化道出血、腹痛、体重减轻等。

诊断通常需要通过胃镜检查并进行病理学检查来确认。

胃印戒细胞癌的治疗方案主要包括手术切除、放疗和化疗等综合治疗手段。

传统治疗方法对于晚期胃印戒细胞癌的疗效并不理想，因此急需寻找新的治疗策略。

近年来，一些研究表明HER2、EGFR和VEGFR等生长因子受体在胃印戒细胞癌的发生和发展中起着重要作用，可能成为新的靶向治疗策略的研究方向。

深入了解这些生长因子受体在胃印戒细胞癌中的表达及临床意义对于指导靶向治疗策略的制定具有重要意义。

1.2 HER2、EGFR、VEGFR的作用及在胃印戒细胞癌中的表达HER2、EGFR和VEGFR是三种与胃印戒细胞癌密切相关的重要分子。

HER2是一种酪氨酸激酶受体，EGFR是表皮生长因子受体，VEGFR是血管内皮生长因子受体。

它们在正常细胞中调控细胞生长、增殖和存活，但在胃印戒细胞癌中常出现异常表达和活化。

在胃印戒细胞癌中，HER2的过表达与肿瘤的侵袭性和预后密切相关。

EGFR的异常表达则与肿瘤的生长、转移和耐药性有关。

VEGFR 的过度活化则可促进肿瘤的血管生成和转移。

这些分子的异常表达不仅影响肿瘤细胞的自身特性，还影响了肿瘤的耐药性和预后。

研究表明，HER2、EGFR和VEGFR的联合表达会对胃印戒细胞癌的发展产生协同作用，加重肿瘤的侵袭性、转移性和耐药性。

对这些分子在胃印戒细胞癌中的表达及其相互关系进行深入研究，对于有效地预测患者的预后、指导治疗策略具有重要意义。

【2000字完】1.3 研究目的胃印戒细胞癌是一种罕见但具有高度侵袭性和恶性程度的胃癌亚型。

《2024年TRAIP通过Notch信号通路影响胃癌细胞的增殖、迁移和凋亡》范文

《TRAIP通过Notch信号通路影响胃癌细胞的增殖、迁移和凋亡》篇一TRP通过Notch信号通路影响胃癌细胞的增殖、迁移和凋亡摘要：本文探讨了TRP（肿瘤相关基因的转录激活因子）对胃癌细胞的影响，特别是通过Notch信号通路对胃癌细胞的增殖、迁移和凋亡的作用机制。

通过实验数据和理论分析，揭示了TRP在胃癌发生发展中的潜在作用，为胃癌的预防和治疗提供了新的思路和方向。

一、引言胃癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，其发病原因与多种因素有关。

近年来，研究发现TRP基因在胃癌的发病机制中起着重要作用。

本文着重探讨了TRP基因如何通过Notch信号通路影响胃癌细胞的增殖、迁移和凋亡。

二、研究背景Notch信号通路在细胞增殖、分化和凋亡等过程中发挥着重要作用。

TRP作为一种转录因子，能够调控多种基因的表达。

因此，TRP与Notch信号通路之间的相互作用可能对胃癌细胞的生长和转移具有重要影响。

三、实验方法本研究采用细胞培养、基因敲除、实时荧光定量PCR、Western blot等技术手段，探讨了TRP基因在胃癌细胞中的表达情况及其对Notch信号通路的影响。

同时，通过观察胃癌细胞的增殖、迁移和凋亡等生物学行为，探究TRP基因在胃癌发生发展中的作用机制。

四、实验结果1. TRP基因在胃癌细胞中的表达情况：通过实时荧光定量PCR和Western blot技术，发现TRP基因在胃癌细胞中的表达水平明显高于正常胃黏膜细胞。

2. TRP基因对Notch信号通路的影响：通过基因敲除技术，发现TRP基因能够调控Notch信号通路相关基因的表达，从而影响胃癌细胞的生长和转移。

3. TRP基因对胃癌细胞增殖的影响：研究发现，敲低TRP基因表达能够显著抑制胃癌细胞的增殖能力，而增加TRP基因的表达则能促进胃癌细胞的增殖。

这表明TRP基因对胃癌细胞的增殖具有重要影响。

4. TRP基因对胃癌细胞迁移的影响：通过划痕实验和Transwell迁移实验，发现敲低TRP基因表达能够显著抑制胃癌细胞的迁移能力，而增加TRP基因的表达则能促进胃癌细胞的迁移。

《胃癌分子靶向治疗的研究进展》

《胃癌分子靶向治疗的研究进展》一、引言胃癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，其发病率和死亡率均居高不下。

随着医学的进步，胃癌的治疗方法也得到了极大的发展和改善。

分子靶向治疗作为一种新型的治疗方式，在胃癌治疗中显示出巨大的潜力和优势。

本文将就胃癌分子靶向治疗的研究进展进行详细阐述。

二、胃癌分子靶向治疗概述分子靶向治疗是通过针对肿瘤细胞特有的分子改变，利用特定的药物阻断肿瘤细胞的生长、增殖和转移，从而达到治疗肿瘤的目的。

在胃癌治疗中，分子靶向治疗主要针对的是胃癌细胞中的特定分子靶点，如受体酪氨酸激酶、细胞周期调控因子、凋亡相关蛋白等。

三、胃癌分子靶向治疗的靶点研究1. 受体酪氨酸激酶：针对胃癌细胞中过度表达的受体酪氨酸激酶，如HER2、EGFR等，开发出相应的靶向药物，如曲妥珠单抗、帕尼单抗等。

这些药物能够阻断肿瘤细胞的生长信号，从而达到抑制肿瘤生长的目的。

2. 细胞周期调控因子：针对胃癌细胞周期调控因子的异常表达，如CDK4/6等，开发出相应的靶向药物，如氟维司群等。

这些药物能够阻断肿瘤细胞的增殖过程，从而达到抑制肿瘤生长的目的。

3. 凋亡相关蛋白：针对胃癌细胞凋亡相关蛋白的异常表达，如Bcl-2等，开发出相应的靶向药物，如维罗非尼等。

这些药物能够促进肿瘤细胞的凋亡过程，从而达到治疗肿瘤的目的。

四、胃癌分子靶向治疗的临床研究进展随着对胃癌分子靶点研究的深入，越来越多的分子靶向药物被应用于胃癌的临床治疗。

目前，已经有多款针对不同靶点的分子靶向药物被批准用于胃癌的治疗。

同时，许多正在进行的临床研究也在不断探索新的治疗策略和组合方案。

例如，联合使用多种靶向药物、联合使用靶向药物与化疗药物等，以提高治疗效果和减少耐药性的产生。

五、未来展望随着基因测序技术的不断发展，我们能够更准确地找出胃癌患者的分子靶点，为个体化治疗提供更加精准的依据。

同时，随着新药研发的加速和临床研究的深入，将有更多的新型分子靶向药物应用于胃癌的治疗。

靶向线粒体的mt-roGFP2荧光探针检测人肝癌HepG2细胞线粒体ROS水平动态变化

靶向线粒体的mt-roGFP2荧光探针检测人肝癌HepG2细胞线粒体ROS水平动态变化刘晓宁;薄惠;刘翠娥【摘要】目的通过靶向线粒体的氧化还原敏感绿色荧光蛋白探针(mt-roGFP2荧光探针)检测人肝癌HepG2细胞(以下称HepG2细胞)线粒体活性氧(ROS)水平动态变化,旨在为以线粒体ROS为靶标的肝癌化疗奠定基础.方法采用无缝克隆技术构建pLenti-CMV-mt-roGFP2-PGK-puro慢病毒载体并测序鉴定.将慢病毒载体pLenti-CMV-mt-roGFP2-PGK-puro与包装质粒pVSVg、pRev和pGag-Pol共转染人肾上皮293T细胞,获得mt-roGFP2慢病毒颗粒,并检测病毒滴度.将制备好的mt-roGFP2慢病毒颗粒感染HepG2细胞,通过荧光显微镜和Western blotting法鉴定观察HepG2细胞roGFP表达情况.将对数生长期稳定表达mt-roGFP2的HepG2细胞(HepG2-mtroGFP2细胞)与MitoTracker线粒体荧光探针共温育,采用激光共聚焦显微镜观察mt-roGFP2荧光探针的亚细胞定位.取对数生长期HepG2-mt-roGFP2细胞先后经0.5 mmol/L过氧化氢(H2O2)和1 mmol/L二硫苏糖醇(DTT)处理,采用尼康A1R激光扫描共聚焦显微镜拍摄同一细胞,Image J软件分析荧光图片.结果成功构建pLenti-CMV-mt-roGFP2-PGK-puro慢病毒载体.制备的mt-roGFP2慢病毒平均滴度为4.04×108 IU/mL.mt-roGFP2荧光探针稳定表达在HepG2细胞中,并正确靶向HepG2细胞线粒体,成功构建HepG2-mt-roGFP2细胞.外源性氧化剂H2O2的加入可导致HepG2-mt-roGFP2细胞线粒体ROS水平明显升高,其荧光比值(405 nm/488 nm)从1.19上升到3.98,加入还原剂DTT可使其荧光比值下降至1.25.结论靶向线粒体的mt-roGFP2荧光探针能够实时动态、可逆地检测HepG2细胞线粒体ROS水平变化并实时成像.%Objective To detect the dynamic changes of mitochondrialROS in human hepatoblastoma HepG2 cell line(hereafter called HepG2 cells) by mitochondria-targeted mt-roGFP2 biosensor, and to lay the foundation for the chemotherapy of liver cancer targeting mitochondrial ROS. Methods The lentivirus vector pLenti-CMV-mt-roGFP2-PGK-puro was constructed by seamless cloning technology, and was identified by DNA sequencing. The lentivirus mt-roGFP2 was prepared by co-transfecting the human embryonic kideny 293T cells with the lentivirus vector pLenti-CMV-mt-roGFP2-PGKpuro and packaging plasmids pVSVg, pRev, and pGag-Pol, and then its virus titer was tested. The expression of roGFP in the HepG2 cells infected by the prepared mt-roGFP2 lentivirus particles was analyzed through fluorescence microscope and Western blotting. The HepG2 cells expressing mt-roGFP2 (HepG2-mt-roGFP2 cells) in logarithmic growth phase were incubated with MitoTracker probe, and then the subcellular localization of mt-roGFP2 biosensor was investigated by confocal laser scanning microscopy. The HepG2-mt-roGFP2 cells in the logarithmic growth phase treated with 0. 5 mmol/L H2O2 and 1 mmol/L DTT were imaged by using Nikon A1R confocal laser scanning system, and the fluorescence images were exported to Image J software. Results The lentivirus vector pLenti-CMV-mt-roGFP2-PGK-puro was successfully constructed. The mean titer of mt-roGFP2 was 4. 04 × 108 IU/mL. roGFP biosencor was stably expressed in the HepG2 cells and correctly targeted to mitochondria, indicating the successful construction of HepG2-mt-roGFP2 cells. The addition of exogenous oxidant H2O2 led to a significant increase of mitochondrial ROS in the HepG2-mt-roGFP2 cells, with the 405nm/488 nm fluorescence ratios ranging from 1. 19 to 3. 98, and the injection of reductant DTT declined the fluorescence ratio to 1. 25. Conclusion The mitochondria-targeted mt-roGFP2 biosensor can real-time and reversibly detect the changes of mitochondrial ROS in the HepG2 cells and display the real-time imaging.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2018(058)008【总页数】4页(P14-17)【关键词】肝癌;HepG2细胞;活性氧;线粒体;靶向线粒体的氧化还原敏感绿色荧光蛋白探针【作者】刘晓宁;薄惠;刘翠娥【作者单位】黄河科技学院医学院,郑州 450063;黄河科技学院医学院,郑州450063;黄河科技学院医学院,郑州 450063【正文语种】中文【中图分类】R735.7活性氧(ROS)是生物体内需氧细胞在代谢过程中产生的一系列衍生物，包括等。

模式识别受体TREM2在肝癌预后和治疗中的应用[发明专利]

专利名称：模式识别受体TREM2在肝癌预后和治疗中的应用专利类型：发明专利
发明人：夏景林,张思,杨毕伟,唐文清,苑菲菲,郭梦舟
申请号：CN201810840310.2
申请日：20180727
公开号：CN109112214A
公开日：
20190101
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开模式识别受体TREM2在肝癌预后和治疗中的应用，具体公开用于预测肝癌患者肝癌生存及复发的生物标记物，以及TREM2作为肝癌靶向治疗的新靶点。

研究发现，TREM2在肝癌组织中表达明显减低，显著低于正常组织；肝癌组织中TREM2的低表达与患者的不良预后密切相关，TREM2表达低的患者总生存时间和肿瘤进展时间均短于表达高的患者；在MHCC97H细胞中激活和过表达TREM2后，肝癌细胞增殖能力受到显著抑制。

因此，TREM2可作为预测肝癌患者预后的生物标记物，可以预测肝癌患者生存时间及复发的风险，同时TREM2可作为一个新的治疗靶点，可根据患者TREM2受体水平，进行个性化、精准化的干预治疗。

申请人：复旦大学附属中山医院
地址：200032 上海市徐汇区枫林路180号
国籍：CN
代理机构：上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：周春洪
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TROP-2在结肠癌中表达及临床意义

【摘要】目的探讨结肠癌组织中人滋养层细胞表面抗原２（ＴＲＯＰ⁃２）蛋白表达及临床意义。方法收集２０１７年３
月至２０１８年１２月行手术切除并经病理组织学确诊的结肠癌组织及相应的癌旁组织８５例，采用免疫组化染色法检测组织
ＴＲＯＰ⁃２蛋白表达；分析其表达与结肠癌临床病理特征的关系。采用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型分析影响术后复发转移的因素。结果
临床肿瘤学杂志２０２１年２月第２６卷第２期ＣｈｉｎｅｓｅＣｌｉｎｉｃａｌＯｎｃｏｌｏｇｙ，Ｆｅｂ．２０２１，Ｖｏｌ．２６，Ｎｏ．２
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ＴＲＯＰ⁃２在结肠癌中表达及临床意义
５１０１５０广州
广州医科大学附属第三医院胃肠外科
罗超元，黄南祺，吴小兵，刘文明，李志发１
ｐａｔｉｅｎｔｓｈａｄｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓ，ａｎｄｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｒａｔｅｏｆＴＲＯＰ⁃２ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｈｅｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄ
ｍｅｔａｓｔａｓｉｓｇｒｏｕｐｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｎｏｎ⁃ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓｇｒｏｕｐ［７９４９％（３１／３９）ｖｓ．３９３９％（１３／３３）］，ｗｉｔｈ
ｃｅｌｌｓｕｒｆａｃｅａｎｔｉｇｅｎ２，ＴＲＯＰ⁃２）是一种高表达于多种
１通讯作者，Ｅ⁃ｍａｉｌ：２４３８０１３２＠ｑｑ．ｃｏｍ
上皮性肿瘤细胞表面糖蛋白［１］，但在正常组织中
ＴＲＯＰ⁃２蛋白不表达或低表达［２］。关于ＴＲＯＰ⁃２在

trop2蛋白表达定义

trop2蛋白表达定义
TROP2蛋白是一种I型跨膜糖蛋白，也被称为肿瘤相关钙信号转导子2（TACSTD2）、膜成分染色体1表面标志物1（M1S1）、胃肠道抗原（GA733-1）和上皮糖蛋白1（EGP-1）。

它是通过染色体1P32区域的Tacstd2基因编码表达的细胞表面糖蛋白，与上皮黏附分子Epcam有较高的结构序列相似性，同源性达49%。

TROP2的N-端为胞外域
（Trop2EC），该胞外域通过一个单向跨膜螺旋（TM）与由26氨基酸残基构成的疏水性多肽的胞内短尾（Trop2IC）连接，从而固定于胞膜。

TROP2蛋白在多种肿瘤细胞中高表达，如结肠癌、乳腺癌、卵巢癌等。

其表达水平与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移能力密切相关，可作为多种肿瘤的生物标志物。

因此，TROP2蛋白表达的定义通常是指其在肿瘤细胞或组织中的表达水平，可以作为评估肿瘤恶性程度、预后和治疗反应的重要指标。

如需更多关于“TROP2蛋白表达定义”的信息，建议咨询生物学家或查阅生物学相关书籍。