尿液标本的细菌学检验操作规程SOP微-003

单位及实验室名称项目汉源县人民医院检验科尿液标本的细菌学检验操作

编号：LAB/SOP/HY/微-003

日期：2010年5月3日

版本：第一版，第0次修订

第1页，共3页

一、【标本采集】

1.采用无菌导尿法，取尿液5-10ml，盛于无菌试管中送检。

2.尿路感染一般采集中断尿：其方法为：（1）女患者先用肥皂水及1：1000高锰酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口，留取中段尿；（2）男患者应先翻转包皮冲洗，用2%红汞或1：1000苯扎溴铵消毒尿道口，留取中段尿；（3）儿童、婴儿先消毒其阴部，将无菌小瓶直接对准尿道，待排尿后立即送检。

3.若取左右两侧肾盂尿，应由泌尿科医师采取，左右侧的标签应标记明确，以免出现错误。

4.做结核杆菌检查时，可收集24h尿液，将沉淀部分盛于洁净瓶内送检。伤寒杆菌等其它细菌的培养检查，可取清晨第一次尿液送检。

5.膀胱穿刺：此法主要用于厌氧菌培养。

二、【检验方法】

1.直接涂片检查

（1）一般细菌涂片：以无菌方法吸取尿液10—15ml置于无菌试管内，经3000r/min，离心沉淀15-20分钟，倒去上清液，取沉渣涂成薄膜镜检，自然晾干，革兰染色镜检，可以得出初步报告“找到革兰ⅹ菌，形似ⅹⅹ细菌”。

（2）结核分枝杆菌：尿液经高压消毒后，将尿液离心取沉淀物涂片，抗酸染色镜检，根据镜检可报告：“找到或未找到抗酸杆菌”。

（3）假丝酵母菌涂片：取尿液离心沉淀物置于洁净玻片上，加以盖玻片，轻轻加压，用高倍镜检查。如沉渣太多可滴加100g/L的KOH 溶液使其溶解后再镜检。若发现有发亮的芽丝胞子和假菌丝，经革兰染色镜检时有酵母样细胞时，可报告“找到酵母样细胞，形似假丝酵母菌”。否则可报告“未找到假丝酵母菌”。

2.细菌培养

（1）一般细菌培养：将接种环灭菌后挑取离心沉淀物，分别接种在血平板及中国兰平板上，35℃培养18-24h，观察有无细菌生长，根据菌落特征和涂片、染色结果，选择相应的方法做进一步鉴定，如培养2天无细菌生长，则报告“经48h培养无细菌生长”。

（2）厌氧菌培养：必须用膀胱穿刺尿进行培养，接种厌氧琼脂平板，置厌氧环境。

三、【检验程序】

尿液—————————————————————————————

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离心沉淀涂片染色镜检定量培养分离培养结核杆菌检查

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细菌计数厌氧环境培养普通及CO2环境培养罗氏培养基涂片镜检

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菌落观察

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↓↓↓生化反应试验→血清学检查←自动化鉴定

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药敏试验

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报告结果

四、【结果判定】

清洁中段尿标本中革兰阴性杆菌菌落计数>105cfu/ml，革兰阳性球菌菌落计数>104cfu/ml有诊断意义，如培养48h无细菌生长，则报告“培养48h无细菌生长”。

作者：肖德慧

时间：2010-5-3