PPARγ配体罗格列酮和GW9662对3T3-L1脂肪细胞内脏脂肪素mRNA表达的影响

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白细胞介素-6和罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞VaspinmRNA表达的影响

４５．８５；Ｒ７７９．１；Ｒ７９７．１５
Ｔｑ酶（国Ｐｏｇ公司）Ｖｓｉａ美ｒｍｅａ，ａｐｎ和Ｂａｔ－ｃｎ引物ｉ由大连宝生物有限公司合成。１２细胞培养及诱导分化．将３３Ｌ细胞接种于Ｔ．１培养瓶中，用含１％胎牛血清及１０ｕｍｌ００／双抗的高糖ＤＭ培养液（ＭＥ完全培养液）３￣５Ｃ的在７Ｃ，％Ｏ
文献标识码Ａ文章编号１０００—１９（０９０ —０２０４２２０）１０６— ６
条件下培养，天更换培养液，隔当细胞融合至８％，０
Ｖｓｉａｐｎ是２００５年Ｈｄｔｌ新识别出来的一ｉａｅａ种脂肪细胞因子，于由内脏脂肪组织产生的丝不是Ｉ－表ａｐｎ基Ｌ６致胰岛素抵抗的位
点。罗格列酮能上调ＶｓｉＲＡ的表达，明ＶｓｉａｐｎｍＮ说ａｐｎ可
格列酮（苏豪森药业）重组小鼠Ｉ－Ｐｐｏｅｈ江，Ｌ６（ｅｒｔｃ
Ａｉ公司）ＴＩｏ（ｎｉｏｅｓａ，ＲＺｌＩｖｒｇｎ公司）Ｒｔ，Ｔ试剂盒及
酸蛋白酶抑制物家族，可能是某一种我们目前未很
知的蛋白酶的抑制物，过抑制该蛋白的活性参与通胰岛素敏感性的调节。白细胞介素（Ｌ６作为一Ｉ－）种炎症因子，与了胰岛素抵抗的发生和发展，参而噻唑烷二酮（Ｚ类药物罗格列酮是过氧化物酶ＴＤ）

大黄素激活AMPK、PPARγ对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的影响

大黄素激活AMPK、PPARγ对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的影响洪海棉;谢秀利;洪桂祝;赖文芳【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2015(31)11【摘要】Aim To investigate glucose uptake effects and mechanism of emodin in 3T3-L1 adipocytes. Methods LPS-induced differentiated 3 T3-L1 adipo-cytes were divided into control group and emodin ( 1 , 10, 50μmol · L-1 ) groups. Then, 6-NBDG uptake and the expression of cell surface GLUT4 , PPARγ, AMPKα1/2 , p-AMPKα1/2 , IRS-1 , p-IRS-1 , Adi-ponectin, chREBP-α and chREBP-β were detected. The ability of 6-NBDG uptake in LPS-induced 3 T3-L1 adipocytes was also evaluated following interference with AMPK inhibitor and PPARγinhibitor, respective-ly. Meanwhile, STZ-induced diabetic rats were ran-domly divided into control group and emodin treatment group. The mRNA expression of Adiponectin and pro-tein expression of cell surface GLUT4 , AMPKα1/2 , p-AMPKα1/2 were measured. Results Compared with the control group, emodin improved the mRNA expres-sion of cell surface GLUT4, Adiponectin, chREBP-αand chREBP-β, and protein expres sion of cell surface GLUT4 , PPARγ, IRS-1 , p-IRS-1 , AMPKα1/2 and p-AMPKα1/2 in3T3-L1 adipocytes(P<0. 05). Emodin enhanced 6-NBDG uptake and the uptake of emodin group was both decreased following interference withAMPK inhibitor and PPARγ inhibitor, res pectively ( P<0. 05 ) . Emodin also increased the mRNA expression of Adiponectin and protein expression of cell surface GLUT4 , AMPKα1/2 and p-AMPKα1/2 in adipose tis-sue of T2 DM rats ( P <0. 05 ) . Conclusion Emodin can enhance glucose uptake in 3 T3-L1 adipocytes and the mechanism is probably associated with activating Adiponectin and IRS-1 , thereby activating AMPK and PPARγ.%目的：研究大黄素对3 T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的影响,并探讨其作用机制。

PPARγ——中枢神经系统损伤治疗的新靶点

PPARγ——中枢神经系统损伤治疗的新靶点【关键词】过氧化物酶增殖物激活受体γ; 中枢神经系统损伤; 神经保护过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)是一类由配体激活的核转录因子，为核受体超家族中的成员之一。

1990年Isseman等首次发现其存在于脂肪细胞的分化调控通路中，故又称为脂激活转录因子〔1〕。

PPARγ具有多种生物学效应，是体内糖、脂代谢的关键调节因子，对细胞生长、分化及凋亡具有重要影响，且与炎症、心血管疾病、糖尿病及肿瘤等多种疾病密切相关。

PPARγ的激活对缺血性脑血管疾病、阿尔茨海默病(AD)、帕金森病(PD)、多发性硬化(MS)等疾病具有潜在的保护作用而成为研究热点。

1 PPARγ的结构、配体及靶基因的关系人类PPARγ基因位于染色体3p25，全长>100 kb，有9个外显子，由479个氨基酸组成，与PPARα、PPARβ一样，它由4个功能结构域和6个结构区A～F组成。

①氨基端结构域，由A/B结构区形成，丝裂素原激活蛋白激酶(MAPK)可磷酸化此结构域的某些丝氨酸残基，抑制PPARγ的活性。

②DNA结合区(DBD)，由C结构区形成，通过此结构域PPARγ与DNA上相应的反应元件结合而调节基因转录。

③转录活性调节结构域，由D结构区形成，许多核因子与此结构域结合后可影响PPARγ的活性。

④配基结合区(LBD)，由E/F结构区形成，该结构域在从激素信号至转录激活的转导过程中起关键作用。

PPARγmRNA分为4种亚型，由于启动子和剪切方式的不同，编码两种蛋白质，其中PPARγ1 mRNA、PPARγ3 mRNA、PPARγ4 mRNA翻译的蛋白相同，而PPARγ2 mRNA翻译的蛋白N末端比前者多30个氨基酸残基〔2〕。

PPARγ的配体可分为内源性和外源性配体两大类。

外源性配体类型包括胰岛素增敏剂噻唑烷二酮类药物如匹格列酮、环格列酮、曲格列酮及罗格列酮等，此类配体与PPARγ亲和力很高，目前主要用于临床2型糖尿病(T2DM)的治疗;而含有酪氨酸结构的药物如GW1929、GW7845等，苯乙酸的衍生物L796449及某些非甾体类抗炎药物如布洛芬等，则为较弱的PPARγ配体。

罗格列酮提高胰岛素抵抗大鼠大网膜脂肪细胞PPAR-γmRNA的表达水平

罗格列酮提高胰岛素抵抗大鼠大网膜脂肪细胞PPAR-γmRNA的表达水平王开成;方朝晖;王佑民;费爱华;刘玲;胡国平【期刊名称】《江西医药》【年(卷),期】2006(041)011【摘要】目的观察胰岛素抵抗(IR)大鼠大网膜脂肪细胞过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPAR-γ)mRNA的表达水平以及罗格列酮对PPAR-γmRNA表达水平的影响.方法雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、罗格列酮组,正常组喂以普通饲料,模型组与治疗组注射小剂量STZ并喂以高热量饲料,常规测定各组大鼠治疗前后的空腹血糖(FPG)和治疗后各组大鼠的空腹血清胰岛素水平(FIns),计算胰岛素敏感性指数(ISI),测定各组血脂水平,提取大网膜脂肪组织总RNA,采用逆转录PCR技术扩增PPAR-γ基因片段,检测其表达水平.结果模型组PPAR-γmRNA表达比正常组明显减少(P＜0.01),与模型组比较,罗格列酮组PPAR-γmRNA表达显著增加(P ＜0.01).结论 R大鼠脂肪细胞PPAR-γnRNA表达减少,而罗格列酮能有效提高PPAR-γmRNA的表达.【总页数】4页(P847-850)【作者】王开成;方朝晖;王佑民;费爱华;刘玲;胡国平【作者单位】浙江省杭州市萧山第三人民医院,萧山,311251;安徽中医学院第一附属医院,合肥,230031;安徽医科大学第一附属医院,合肥,230021;安徽中医学院第一附属医院,合肥,230031;安徽医科大学第一附属医院,合肥,230021;安徽医科大学第一附属医院,合肥,230021【正文语种】中文【中图分类】R9【相关文献】1.APS对2-DM胰岛素抵抗大鼠PPAR-γ mRNA表达的影响 [J], 刘洪凤;宋铁军;宋宇亮;韩智学2.罗格列酮对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞脂联素、瘦素及抵抗素的分泌及mRNA 表达的影响 [J], 孙殿静;刘晴晴;耿建林3.胰岛素抵抗大鼠肝脏SREBP-1c mRNA表达及罗格列酮的干预作用 [J], 孙楠;崔景秋;高志红;冯凭4.糖调节受损模型大鼠肝脏组织PPAR-γ、GLUT2、InsRmRNA表达水平及胰岛β-细胞超微结构变化 [J], 古丽娜扎尔; 艾比拜·玉素甫; 麦合苏木·艾克木5.丹蛭降糖胶囊对胰岛素抵抗大鼠PPAR-γ mRNA表达的影响 [J], 方朝晖;王佑民;王开成;郭彦;刘玲;胡国平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

罗格列酮对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞脂联素、瘦素及抵抗素的分泌及

Ｃ，ＤａｎｄＥｗｅｒｅｇｉｖｅｎ０，０．１，０．５，１．０／￣ｍｏｌ／Ｌｒｏｓｉｇｌｉｔａｚｏｎｅ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎｏｆｇｌｕｃｏｓｅｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｓｅ —
ｌｅｐｔｉｎａｎｄｒｅｓｉｓｔｉｎｉｎ３Ｔ３一Ｌ１ａｄｉｐｏｃｙｔｅｓｗｉｔｈｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ
ＳｕｎＤｉａｎｊｉｎｇ，ＬｉｕＱｉｎｇｑｉｎｇ，ＧｅｎｇＪｉａｎｌｉｎ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥ０ｃｒ０Ｚｏｇ，ＨａｒｒｉｓｏｎＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＰｅａｃｅＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｈｅｎｇｓｈｕｉ，Ｈｅｂｅｉ０５３０００，Ｃｈｉｎａ）Ｉ－Ａｂｓｔｒａｃｔ］０ｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｒｏｓｉｇｌｉｔａｚｏｎｅｏｎｔｈｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎａｎｄｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｄｉｐｏｎｅｃｔｉｎ，ｌｅｐｔｉｎ
重庆医学２０１６年１２月第４５卷第３５期

罗格列酮对高糖环境中3T3-L1脂肪细胞血管紧张素Ⅱ受体基因表达的调控作用

罗格列酮对高糖环境中3T3-L1脂肪细胞血管紧张素Ⅱ受体基因表达的调控作用徐茜;宁光;张志国;金丽娜;石国军;杨洋;田秀丽;张杉杉;崔斌;汤正义【摘要】目的研究不同浓度葡萄糖培养环境及罗格列酮干预对分化成熟脂肪细胞血管紧张素Ⅱ受体1(ATIR)和受体2(AT2R)基因表达的影响.方法取分化成熟的脂肪细胞3T3-L1,分别用含不同浓度葡萄糖(空白对照、5.6、11.2、25.0 mmol/L)的培养基和含不同浓度葡萄糖并添加10 nmol/L罗格列酮的培养基分组培养24 h,Real-time PCR检测3T3-L1脂肪细胞AT1R和AT2R基因表达.结果 5.6 mmol/L葡萄糖处理组AT1R基因表达明显低于空白对照和11.2、25.0 mmol/L 葡萄糖处理组(P<0.05);AT2R基因表达随着葡萄糖浓度的升高而明显上调(P<0.05).随着葡萄糖浓度的升高,罗格列酮干预组AT1R和AT2R基因表达呈下降趋势.与相应浓度的葡萄糖处理组比较,罗格列酮干预组AT1R表达均显著上调(P<0.05).作用随葡萄糖浓度的升高而减弱;AT2R基因表达显著下调(P<0.05),作用随葡萄糖浓度的升高而加强.结论罗格列酮对高浓度葡萄糖导致的脂肪细胞AT1R 和AT2R基因表达变化具有调控作用.【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2010(030)004【总页数】4页(P390-393)【关键词】葡萄糖;血管紧张素Ⅱ受体;罗格列酮;脂肪细胞【作者】徐茜;宁光;张志国;金丽娜;石国军;杨洋;田秀丽;张杉杉;崔斌;汤正义【作者单位】上海交通大学医学院瑞金医院内分泌代谢病科,上海市内分泌代谢病临床医学中心,上海市内分泌代谢病研究所,上海200025;上海交通大学医学院瑞金医院内分泌代谢病科,上海市内分泌代谢病临床医学中心,上海市内分泌代谢病研究所,上海200025;上海交通大学医学院瑞金医院内分泌代谢病科,上海市内分泌代谢病临床医学中心,上海市内分泌代谢病研究所,上海200025;上海交通大学医学院瑞金医院内分泌代谢病科,上海市内分泌代谢病临床医学中心,上海市内分泌代谢病研究所,上海200025;上海交通大学医学院瑞金医院内分泌代谢病科,上海市内分泌代谢病临床医学中心,上海市内分泌代谢病研究所,上海200025;上海交通大学医学院瑞金医院内分泌代谢病科,上海市内分泌代谢病临床医学中心,上海市内分泌代谢病研究所,上海200025;上海交通大学医学院瑞金医院内分泌代谢病科,上海市内分泌代谢病临床医学中心,上海市内分泌代谢病研究所,上海200025;上海交通大学医学院瑞金医院内分泌代谢病科,上海市内分泌代谢病临床医学中心,上海市内分泌代谢病研究所,上海200025;上海交通大学医学院瑞金医院内分泌代谢病科,上海市内分泌代谢病临床医学中心,上海市内分泌代谢病研究所,上海200025;上海交通大学医学院瑞金医院内分泌代谢病科,上海市内分泌代谢病临床医学中心,上海市内分泌代谢病研究所,上海200025【正文语种】中文【中图分类】R587;Q786脂肪组织可通过分泌大量脂肪因子进行自分泌及旁分泌的功能调节[1]。

PPAR(配体罗格列酮对内毒素诱导急性肺损伤的保护作用

PPARγ配体罗格列酮对内毒素诱导急性肺损伤的保护作用华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科（430022）刘东, 曾邦雄，张诗海，王月兰，曾涟目的:过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator- activated receptor γ,PPARγ)属于核激素受体超家族，是一类依赖配体激活的转录因子，具有抗炎和免疫调节效应。

新近发现，PPARγ激动剂罗格列酮(rosiglitazone, ROSI)能减轻角叉菜胶胸膜炎引起的肺损伤以及酵母聚糖诱导的多器官损伤。

但ROSI对内毒素诱导的急性肺损伤（ALI）有何影响国内外未见报道。

本实验拟研究ROSI对大鼠内毒素诱导ALI的保护作用，并利用PPARγ特异性拮抗剂GW9662探讨ROSI的作用机制。

方法：雄性Wistar大鼠36只，3 %戊巴比妥钠50 mg/kg腹腔内注射麻醉。

将动物随机分为6组 (n = 6):(1)单纯DMSO组(对照组):静脉注射10 % DMSO(溶媒)2 ml/kg，30 min后静脉注射生理盐水2 ml/kg;(2)单纯ROSI组:处理同DMSO组，以0.3 mg/kg ROSI代替DMSO;(3)单纯GW9662组:处理同DMSO组，以0.3 mg/kg GW9662代替DMSO;(4)LPS组:静脉注射LPS 6 mg/kg, 30 min后给予DMSO;(5)ROSI预处理组(ROSI-LPS组):静脉注射0.3 mg/kg ROSI，30 min后给予LPS 6 mg/kg;(6)GW9662拮抗组(GW9662-ROSI):在给予ROSI前20 min静脉注射0.3 mg/kg GW9662，其余处理同ROSI-LPS 组。

注射LPS后4 h处死动物，光镜下观察肺组织病理学变化并作ALI评分，测定肺组织湿/干重比（W/D）、髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛（MDA）和一氧化氮(NO)含量，检测肺组织iNOS蛋白(Western blot)和硝基酪氨酸（NT，免疫组化）的表达。

GPCR信号通路调控人体脂质代谢评估

GPCR信号通路调控人体脂质代谢评估GPCR（G蛋白偶联受体）信号通路在人体脂质代谢调控中起着重要的作用。

脂质代谢是维持机体能量平衡和体内脂肪分布的重要过程。

正常的脂质代谢对于健康非常重要，而脂质代谢紊乱则与多种疾病的发生发展密切相关。

GPCR是一类广泛存在于细胞膜上的受体蛋白，能够感知外界信号分子，如激素、神经递质和药物等。

当GPCR受体与配体结合时，会激活下游的信号转导通路，从而调控细胞内的生理活动。

在脂质代谢中，多个GPCR信号通路参与其中，影响脂肪细胞的分化、脂肪合成、脂解以及胆固醇代谢等关键过程。

首先，GPCR信号通路在脂肪细胞的分化中起着重要作用。

脂肪细胞的分化是从前体细胞向成熟的脂肪细胞发展的过程，被广泛研究的PPARγ（过氧化物酶增殖物激活受体γ）是其中的关键调控因子。

PPARγ是一种核受体，主要通过激活下游的转录因子来促进脂肪细胞分化和脂肪合成。

多个GPCR信号通路可以通过激活PPARγ来促进脂肪细胞分化，如β3-AR（β3-肾上腺素受体）和FFAR（游离脂肪酸受体）等。

这些GPCR受体在脂肪细胞的分化过程中起着不可或缺的作用。

其次，GPCR信号通路对脂肪合成和脂解也具有重要调控作用。

脂肪合成是指细胞内无机物质、如糖类和胺基酸，转化为脂质的生物合成过程。

多个GPCR信号通路可以调控脂肪合成的关键酶活性和基因表达，如MC4R（4型酪氨酸受体）和MC5R（5型酪氨酸受体）等。

同时，GPCR信号通路还能够调节脂肪细胞内脂解的过程，将脂肪分解为游离脂肪酸和甘油。

β3-AR和FFAR等GPCR受体的激活可以促进脂解，释放出游离脂肪酸供机体能量代谢所需。

最后，GPCR信号通路还参与调控人体胆固醇代谢。

胆固醇是一种重要的脂类物质，在机体中具有多种生理功能。

高胆固醇水平与心血管疾病等疾病的发生密切相关。

多个GPCR信号通路能够调控胆固醇代谢，包括LDL受体（低密度脂蛋白受体）和PPARα（过氧化物酶增殖物激活受体α）等。

替米沙坦上调3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的机制

替米沙坦上调3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的机制郑振伟【摘要】目的探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)在替米沙坦调节脂肪细胞脂联素表达中的作用.方法体外培养3T3-L1脂肪细胞,采用替米沙坦(10μmol/L)和,或PPARγ阻断剂GW9662(30 μmol/L)干预313-L1脂肪细胞,采用实时定量RT-PCR和Westem blot方法检测313一L1脂肪细胞的脂联素表达水平.结果与空白对照组相比,经GW9662干预后313-L1脂肪细胞脂联素mRNA 表达水平明显降低(P<0.05);替米沙坦组脂联素mRNA和蛋白表达水平明显增加(P<0.05);替米沙坦+GW9662组(替米沙坦+GW组)脂联素mRNA和蛋白表达水平有增高趋势,但与空白组相比无统计学差异(P>0.05).结论PPARγ活性在替米沙坦上调313-L1脂肪细胞脂联素表达过程中可能起着一定程度的作用.【期刊名称】《实用医药杂志》【年(卷),期】2010(027)005【总页数】3页(P454-456)【关键词】替米沙坦;脂联素;过氧化物酶体增殖物活化受体γ【作者】郑振伟【作者单位】450052,河南,郑州,153医院急诊科【正文语种】中文【中图分类】R962血管紧张素受体阻断剂（angiotensin receptor blockers，ARBs）目前已广泛用于高血压病的治疗。

近年来相关研究显示替米沙坦等ARBs除具有拮抗肾素-血管紧张素系统的作用外，还可以通过上调脂联素表达来调节糖脂代谢[1-6]。

而糖脂代谢和动脉粥样硬化密切相关[7]。

目前研究发现替米沙坦上调脂联素的表达可能与激活过氧化物酶体增殖物活化受体γ（peroxisome proliferator-activated receptor γ，PPARγ）有关[8，9]，但是具体的机制尚不清楚。

基于此，笔者通过观察替米沙坦和PPARγ阻断剂GW9662对体外培养3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响，探讨PPARγ在替米沙坦上调脂联素表达中的作用。

PPARγ对人胰腺癌细胞中抑癌基因PTEN表达的影响

PPARγ对人胰腺癌细胞中抑癌基因PTEN表达的影响【摘要】目的: 观察PPARγ对人胰腺癌细胞中抑癌基因PTEN表达的影响。

方法: 体外培养人胰腺癌细胞株PANC1, 使用罗格列酮和GW9662细胞分别处理PANC1细胞, RT PCR检测PANC1细胞中PTEN基因表达的变化; SABC法检测PTEN蛋白表达的变化, FCM 法检测PTEN蛋白表达的百分率的变化。

结果: PPARγ激动剂罗格列酮能够诱导抑癌基因PTEN的高表达, 同时抑制剂GW9662能够抑制抑癌基因PTEN的表达, 并呈一定的量效关系。

结论: 胰腺癌细胞中PPAR γ的表达与抑癌基因PTEN的表达呈一定的平行关系, PPARγ可能通过一定信号转导通路调节抑癌基因PTEN的表达, 从而发挥抗肿瘤的作用。

【关键词】 PPARγ胰腺癌罗格列酮基因治疗近年胰腺癌发病率在国内外呈上升趋势, 起病隐蔽, 发展迅速, 又缺乏有效的早期诊断和系统治疗方法, 胰腺癌早期诊断以及治疗水平均较低, 促使人们不断寻求其新型有效的治疗分子靶点[1]。

目前, 胰腺癌基因治疗还处于探索阶段, 抑癌基因将在胰腺癌基因治疗中发挥重要作用。

研究发现人类胰腺癌表达PPARγ, PPARγ配体可以抑制巨噬细胞的活化以及浸润, 是肿瘤新生血管形成重要的调节因子[2], 激活PPARγ能够产生抗胰腺癌生长的效应。

PTEN基因, 是迄今发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因, 参与细胞周期调控, 同时调节细胞正常生长和发育[3]。

有研究表明50%的胰腺癌有染色体10q 的缺失[1], 而10q正是PTEN基因位点所在。

近年来随着对肿瘤发病机制的不断深入研究, 发现PPARγ、 PTEN与胰腺癌发生、发展有着密切的联系。

本研究中通过体外培养人胰腺癌细胞株, 给予PPARγ激动剂罗格列酮, 利用RT PCR、免疫细胞化学、流式细胞术（FCM）检测等方法, 观察胰腺癌细胞株中抑癌基因PTEN表达的影响, 为进一步探讨PPARγ抑制胰腺癌的机制提供一定的理论支持, 为胰腺癌基因治疗提供新思路。

抗糖尿病药物通过cdk5抑制肥胖相关的PPARγ磷酸化

抗糖尿病药物通过cdk5抑制肥胖相关的PPARγ磷酸化在小鼠中, 高脂饮食诱导的肥胖能够激活脂肪组织中的细胞周期素依赖性激酶5( Cdk5), 从而使得调控脂肪形成和脂肪细胞基因表达的过氧化物酶体增殖物激活受体( PPARγ) 第273位的丝氨酸磷酸化。

这种修饰并不影响PPARγ的脂肪形成能力, 但导致一系列肥胖相关基因的功能失调和表达变化, 如胰岛素增敏激素，脂联素( adiponectin)的表达减少。

Cdk5对PPARγ的磷酸化作用可被具有抗糖尿病作用的PPARγ配体( 如罗格列酮和MRL24)所阻断。

这种抑制作用在体内和体外均有效, 且完全不依赖经典的受体转录激活途径。

在肥胖病人中, 罗格列酮抑制PPARγ磷酸化与其抗糖尿病作用密切相关。

综上所述, 该研究表明Cdk5介导的PPARγ磷酸化可能参与了胰岛素抵抗的发病机制, 同时揭示了通过PPARγ改良抗糖尿病药的可能性。

脂肪组织处于代谢综合征治疗研究的中心地位。

过多的身体脂肪被叫做肥胖，可以导致胰岛素抵抗，脂代谢紊乱，2型糖尿病，某些癌症和心血管疾病等。

对于联系这一系列病理过程与脂肪组织生物学的分子机制的研究，具有最重要的科学和医学价值。

脂肪细胞和组织可以分泌一系列的细胞因子和细胞因子样分子，称之为脂肪因子，它们对胰岛素敏感性，脂循环水平，以及食欲都有正面或负面的影响。

在肥胖的人体内，脂肪组织分泌肿瘤坏死因子-а（TNF-а），白细胞介素-1（IL-1），和抵抗素，从而抑制周边组织中胰岛素的作用。

相反地，在瘦的个体体内，脂肪组织分泌的脂联素含量会比在肥胖个体中的高，这是一种循环蛋白，在肝脏和其它组织内具有胰岛素增敏作用。

PPARγ的作用核受体PPARγ可以看作是脂肪细胞生物学和细胞分化的“主控”基因，对于将成纤维细胞前体细胞转化为脂肪细胞既是必要条件又是充分条件。

其他关键的转录因子，如C/EBP（CAAT区/增强子结合蛋白）和EBF蛋白（早期B细胞因子early B-cell factor）则调控着PPARγ的表达。

以PPARγ为靶点调节糖脂代谢的中药有效成分研究进展

以PPARγ为靶点调节糖脂代谢的中药有效成分研究进展时珍国医国药2011年第22卷第3期LISHIZHENMEDICINEANDMA TERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.3 以PPARy为靶点调节糖脂代谢的中药有效成分研究进展王国强,尚文斌(南京中医药大学第一临床医学院临床医学实验中心江苏省中医医院,江苏南京210046)摘要:过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARy)是一种细胞核受体,是配体激活的核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)的一种亚型.众多研究证实PPARy具有多种生物效应,与脂肪细胞分化,糖脂代谢,癌症发生,动脉粥样硬化形成及炎性反应关系密切;以PPARy为信号通路的中草药提取物的相关研究成为药物开发新热点;诸多中草药有效成分,可以作为PPARy激动剂或是拮抗剂,影响脂肪细胞分化及糖脂代谢.文章意在探讨以PPARy为靶点的中药有效成分对于糖脂代谢的调节及影响,为今后进一步的实验及临床研究提供理论依据和思路.关键词:PPARy:糖脂代谢;中药有效成分DOI标识:doi:10.3969/i.issn.1008-0805.2011.03.088中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1008—0805(2011)03~706—03 ResearchProgressinPPAR~,TargetedEffectiveComponentsofChineseMedicineonthe- RegulationofCarbohydrateandLipidMetabolismW ANGGuo-qiang,SHANGWen—bin(MedicalResearchCenter,FCollegeofClinicalMedicine,』]V0ngUniversityofTraditiona lChineseMedic—ne;DepartmentofEndocrinology,JiangsuProvinceHospitalofTraditionalChineseMedici ne,Nanjing210046,China)Abstract:Peroxisomeprolferator—activatedreceptor^y(PPARy)isanuclearreceptorthatactsasasubtypeofligand—activa—tednucleartranscriptionfactorperoxisomeproliferator—activatedreceptor(PPARs).SeverallinesofevidenceindicatePPARy hasmanybiologicaleffects,iscloselyrelatedwithadipocytesdifferentiation,glucoseandlipi dmetabolism,theformationofather—osclerosis,inflammation,cancer,insulinsensitivity.StudiesoneffectivecomponentsofChi nesemedicinethatactthroughPPARy signalingpathwayhavebecomeanewhotspotofdrugdevelopment.Inaddition,thecurrentst udyhasconfirmedthattheactivein—gredientsofmanyChinesemedicinecanbeusedasPPAR-yagonistorantagonist,influencead ipocytedifferentiationandcarbohy—drateandlipidmetabolism.WearegoingtodiscussthatPPARytargetedeffectivecomponents ofChinesemedicineintheregula—tionandinfluenceofcarbohydrateandlipidmetabolism,whichmayprovideatheoreticalbasi sandideasforthefurtherexperi—mentalandclinicalresearches.Keywords:PPARy;Glucoseandlipidmetabolism;ActivecomponentsinChineseherbs过氧化物酶体增殖物激活受体(Peroxisomeprolferator—activatedreceptor^v,PPARy)是一种细胞核受体,是配体激活的核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)的一种亚型.PPAR~主要在脂肪组织,肠细胞及巨噬细胞中表达,同时在骨骼肌和内皮组织也有少量的表达,可以调节胰岛素的敏感性,是噻唑烷二酮类(thiazolidinediones,TZDs)胰岛素增敏药物的作用靶点.众多研究证实PPARy具有多种生物效应,与脂肪细胞分化,糖脂代谢,癌症发生,动脉粥样硬化形成及炎性反应关系密切.其对于脂肪细胞分化,糖脂代谢影响的研究为热点之一.目前的研究证实诸多中草药的有效成分.可以作为PPARy激动剂或是拮抗剂,影响脂肪细胞分化及糖脂代谢.相关研究结果可以指导糖尿病,肥胖,动脉粥样硬化等代谢疾病的临床治疗.收稿日期:2010-06-04;修订日期:2010-08—10基金项目:江苏省高校自然科学基金(N0.08KJB360012);江苏省中医内科学重点学科开放课题(No.ZN091002)作者简介:王国强(1982一),男(汉族),山东东营人,现为南京中医药大学在读硕士研究生,主要从事中西医结合内分泌代谢疾病的研究工作.通讯作者简介:尚文斌(1966一),男(汉族),江苏南京人,现任南京中医药大学第一临床医学院内科研究所医学实验中心副研究员,硕士研究生导师,博士学位,主要从事中西医结合内分泌代谢疾病的研究工作.706?1PPARy激动剂,脂肪组织是PPAR激动剂TZDs主要的靶组织.在脂肪细胞中TZDs有选择性刺激脂肪生成的作用,增加胰岛素敏感性,导致更多的胰岛素抑制脂肪分解.在一项有关中草药有效成分的筛选试验中发现,有的有效成分单独激活PPAR-y,有的可以激活PPARo./-,/或同时激活PPARc~/y/8.从近些年的研究中可以看出,部分中药有效成分可以作为PPAR'v激动剂,促进葡萄糖转运及周围组织,靶器官对糖的利用,维持血糖和血脂稳态,改善脂代谢异常,抑制脂肪分解.1.1人参皂苷(Ginsenoside)人参PanaxginsengC.A.Meyer及西洋参Panaxquinquefolius系五加科植物.人参的有效成分被认为是由一组甾体皂苷组成的人参皂苷.人参皂苷都具有相似的基本结构,分为两类:人参二醇类和人参三醇类.人参二醇类包含了最多的人参皂苷,如人参皂苷Rb,Rb:,Rb,R,R,Rg,Rh及糖苷基PD.人参三醇类包含了人参皂苷Re,Rg,,R,Rh及糖苷基.人参和其组成成分对于中枢神经,心血管,内分泌,免疫系统具有复杂的药理学作用.Rb是人参根部含量最多的人参皂苷,其以剂量依赖的方式作为促进3T3一L1细胞中的脂肪形成的诱导剂,可以增加脂质聚集.用Rb.处理正在分化的脂肪细胞,能使其mRNA以及PPARy及C/EBPoL蛋白表达增加,同时也增加了脂肪酸结合蛋白(ap2)的mRNA的表达.用Rb处理正在分化的脂肪细胞后, LISHIZHENMEDICINEANDMA TERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.3时珍国医国药2011年第22卷第3期伴随着mRNA和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白水平及胰岛素介导的葡萄糖摄取显着增加.富含人参皂苷R的人参醋提取物对胰岛素抵抗大鼠有明显的抗高血糖及抗肥胖作用.用其治疗的胰岛素抵抗大鼠较用媒介物处理的大鼠有较低的胰岛素水平.实验组的大鼠通过腹膜内2h糖耐量实验后证实总的葡萄糖波动下降了21.5%,预示R能改善葡萄糖耐量.治疗组大鼠肝脏重量,内脏脂肪含量,体质量及血清丙氨酸转移酶也较对照组要低.这些效应与R作用下PPARy的表达增加以及在肝脏和肌肉中腺苷磷酸激活蛋白激酶磷酸化有关.1.2大黄素(Emodin)大黄为蓼科植物掌叶大黄Rheumpalma—turnL,唐古特大黄RheumtanguticumMaxim.exBalf或药用大黄RheumofficinaleBaill的干燥根及根茎.虎杖为蓼科植物虎杖PolygonumcuspidatumSieb.etZucc的干燥根茎和根.大黄素的化学名为1～38一三羟基一6一甲基蒽醌,是中药大黄和虎杖的主要活性成分.具有抗肿瘤活性,抗微生物生长,免疫抑制作用,解痉,止咳作用.经大黄素治疗后的非酒精性脂肪肝的小鼠体重,肝指数,谷丙转氨酶,血脂和甘油三酯显着降低,肝组织学表现也大大改善.同时,肝脏的PPAR-ymRNA表达明显增加.同时纤维结合蛋白,腺苷磷酸化蛋白激酶p38,磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(CREB)及结缔组织生长因子(CTGF)的蛋白表达显着减少,PPARy蛋白质水平明显升高.同时促进3T3一L1成纤维细胞向脂肪细胞的转化,三磷酸甘油脱氢酶的活性和脂肪细胞aP2 基因的mRNA的表达增加得以证明这一点,此外使与C/EBPct 及PPAR~/mRNA的表达水平增加有关的甘油三酯的蓄积加快.1.3肉桂提取物(CinnamomiCassiaeextract)肉桂为樟科植物肉桂CinnamomumcassiaPresl的树皮.肉桂皮含有1%～2%挥发油,主要成分是肉桂醛(CHO).现代药理研究其有镇静作用,降温,降血压,杀菌,祛痰镇咳,利尿,控制血糖,防治糖尿病的作用.肉桂提取物治疗的2型糖尿病C57BL/Ksdb/db小鼠的空腹血糖和餐后2h血糖水平均明显低于对照组,而肉桂治疗组血清胰岛素和脂联素水平明显低于对照治疗组.肉桂组小鼠血脂和肝脂肪含量也明显改善.相比对照组肝脏中PPARctmRNA和脂肪组织中PPARymRNA的表达水平显着增加12J.肉桂,被广泛的用作食品制作的调味剂和传统的抗糖尿病药物,其能激活PPARy和d,改善高热量饮食引起的肥胖和db/db小鼠胰岛素抵抗,降低空腹血糖,游离脂肪酸,低密度脂蛋白一胆固醇和谷草转氨酶水平.在体外研究表明,肉桂增加在3T3一L1前脂肪细胞过氧化物酶体增殖物激活受体PPARy/ct.肉桂水提取物可以充当PPARy和仅的双重激动剂,并可能在肥胖有关的糖尿病和高脂血症的治疗中充当PPARy的激动剂的角色.1.4黄芪提取物(Astragalusextract)中药材黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus (Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)的根.现代研究发现,黄芪含皂苷,蔗糖,多糖,多种氨基酸,叶酸及硒,锌,铜等多种微量元素,有增强机体免疫功能,保肝,利尿,抗衰老,抗应激,降压和较广泛的抗菌作用.黄芪多糖(astragaluspolysaccharides,APS)对1型糖尿病拥有免疫治疗的作用.给予APS治疗后,在脾脏中血糖水平下调, 血清胰岛素浓度上调,13细胞数量增加,B细胞凋亡百分率降低, Thl/Th2细胞因子比下调和PPA的基因表达上调.研究发现黄芪及葛根提取物可以明显激活PPARct和PPARy.从黄芪中分离出的芒柄花黄素,能够活化PPAR~的驱动受体基因活性并诱导3T3一L1前脂肪细胞分化.黄芪甲苷可明显促进胰岛素诱导前脂肪细胞分化,能改善脂肪细胞在高糖诱导下产生的胰岛素抵抗,显着提高胰岛素诱导的葡萄糖摄取,抑制内皮细胞中肿瘤坏死因子一诱导的细胞凋亡和细胞活力的丧失.1.5葛根素(Puerarin)葛根为豆科植物野葛Puerarialobata (Willd)Ohwi或甘葛藤PuerariathomsoniiBenth的干燥根.葛根素化学名为4,7一二氢基一8B—D葡萄糖基异黄酮,是葛根的有效活性成分之一,对肝组织免疫损害具有保护作用,可有效逆转化学诱导的肝纤维化,增强心肌收缩力,保护心肌细胞及能扩张血管,降低血压,改善微循环等作用.据报道葛根素有全面的治疗糖尿病和心血管疾病的药理作用.葛根素可以使胰岛素诱导脂肪细胞分化增强,促进高糖诱导的胰岛素抵抗下脂肪细胞的葡萄糖摄取,防止肿瘤坏死因子一仅诱导细胞凋亡和血管内皮细胞丧失活力.此外,这些影响可能是由于部分通过促进PPARy的表达和抑制异常TNF一,而引起的血管内皮细胞细胞内自由钙离子的积累所致.葛根素对于公认的包括肥胖,2型糖尿病和心血管疾病等代谢症候群有综合的药理作用:.2PPARy拮抗剂近期的一项研究表明,适度的减弱PPARy的活性对于治疗肥胖和胰岛素抵抗有益,PPAR-/拮抗剂可作为治疗肥胖和糖尿病的潜在药物.充当PPAR~拮抗剂调节糖脂代谢的中药有效成分相关研究证实,PPARy拮抗剂抑制PPARy依赖的脂肪细胞分化,抑制脂滴的积累,降低脂肪量和体重,改善糖耐量,改善糖血液和肝脏中的糖脂代谢.可以用于肥胖,2型糖尿病等疾病的防治.2.1小檗碱(Berberin~)黄连为毛茛科植物黄连Copt/schinensis Franch,三角叶黄连CoptisdeltoideaC.Y.ChengetHsiao或云连copt/~teetaWall的干燥根茎.小檗碱是一种异喹啉生物碱,又称黄连素,是中药黄连的主要有效成分.小檗碱有抗菌作用,并有增强白血球吞噬作用,近年来将其改善胰岛素抵抗,降血糖,纠正脂质紊乱的作用作为研究重点,广泛应用于2型糖尿病,肥胖,代谢综合征等代谢相关性疾病的防治.用游离脂肪酸棕榈酸处理L6肌细胞建立胰岛素抵抗细胞模型,小檗碱使其葡萄糖消耗和胰岛素介导的葡萄糖摄取分别降低了43%和63%.小檗碱治疗增加了在正常细胞中葡萄糖消耗和胰岛素介导的葡萄糖摄取,提高了游离脂肪酸诱导的胰岛素抵抗细胞中的葡萄糖摄取.小檗碱作用下葡萄糖摄取的改善伴随着PPAR和骨骼肌脂肪酸转位酶及CD36蛋白表达降低'j.有研究显示,小檗碱以时间和剂量依赖的方式抑制由分化培养基诱导的3T3一L1前脂肪细胞的分化及有丝分裂的克隆扩增.小檗碱抑制与脂肪形成有关的转录因子PPAR~,C/EBPoL及它们上游调节子C/EBPBmRNA的蛋白水平.结果证实PPARy和0【转录活性受到小檗碱抑制,涉及脂肪细胞分化的过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR)的靶基因,诸如脂肪酸结合蛋白(aP2),CD36,脂酰辅酶A氧化酶(ACO),脂蛋白脂肪酶(LPL)都受~Ufl, 檗碱的抑制[2o3.小檗碱降低糖尿病大鼠体重,肝重和肝体比.小檗碱可以降低升高的血糖,糖化血红蛋白,总胆固醇,甘油三酯,低密度脂蛋白胆固醇,载脂蛋白B和降低高密度脂蛋白胆固醇,载脂蛋白AI.并减缓了肝脏的病理进展并恢复升高的肝糖原,甘油三酯,使其接近正常水平.使得糖尿病大鼠肝脏中PPARoJ8的表达增加和PPARy的表达减少并接近对照组.小檗碱可能是通过调节与代谢相关的PPARc~/8/y在肝脏中的蛋白表达,从而改善糖尿病大鼠血液和肝脏中的糖脂代谢.2.2桔梗皂苷(P1atycodin)桔梗为桔梗科植物桔梗Platycodongrandiflorum(Jacq.)A.DC的根.桔梗中主要含有皂苷,黄酮,甾醇,多聚糖,酚类,聚炔,脂肪油,脂肪酸,氨基酸,无机元素,挥发油等成分.桔梗皂苷为其主要活性成分之一.现代药理学研究表明桔梗有免疫调节,抗炎,祛痰,保肝等作用.桔梗的提取物桔梗皂苷D处理3T3一L1细胞后,与脂质代谢有关的脂肪酸结合蛋白4和脂蛋白脂肪酶基因的表达水平显着下调.导致PPAR'y表达及其目的DNA序列结合均减少.在PPARy上游的各种调节因子中,抗脂肪形成因子Kruppel样因子707?时珍国医国药2011年第22卷第3期LISHIZHENMEDICINEANDMA TERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.3 (KLF2)的表达,经桔梗皂苷D处理后显着上调.当KLF2上调被KLF2siRNA抑制时,PPARy的表达和其与靶序列的结合显着增加.可见,桔梗皂苷D抗脂肪形成的作用涉及对KLF2表达的上调和对PPAR~表达的下调.2.3丹参酮(Tanshinone)丹参为双子叶植物唇形科丹参Sal—viam.Bge.的干燥根及根茎.丹参酮ⅡA是丹参根中含有的二萜醌类色素中的一种,被广泛用于治疗心血管疾病,最近发现其可以减轻体重,降低血脂.丹参酮ⅡA抑制3T3一L1前脂肪细胞分化,并抑制PPAR~的配体结合域的转录活性,提示丹参酮可能是PPARy的天然拮抗剂.丹参酮ⅡA在不改变高脂肪饮食引起的肥胖动物模型的食物摄入量的同时,可以降低脂肪量和体重,改善糖耐量,降低低密度脂蛋白与高密度脂蛋白的比值.3问题与展望目前研究证实许多中药有效成分能够调节PPARy的活性,并以此为药物靶点对于机体的糖脂代谢有明显影响,这些研究结果提示这些活性成分可用于糖尿病,肥胖,动脉粥样硬化等以糖脂代谢障碍为特点的代谢疾病的治疗,但目前的研究面临一些问题和不足.首先,目前已发现以PPAR~为靶点的中药成分对糖脂代谢的调节作用活性较弱,有待于在前期的研究基础上,透过对其化学结构的改造,提高其药物活性;其次,对于其确切的临床疗效临床研究缺乏,总体疗效尚不清楚,并且缺乏将有效成分与中医药理论和实践紧密结合的研究,所以,一方面需要继续筛选PPAR~ 的活性成分,另一方面,对已探明活性得有效成分加大基础和临床研究力度,开发新型PPARy调节剂;此外,PPAR~激动剂往往产生水肿,体重增加,肝肾损害等副作用,应针对此类中药及活性成分的毒副作用进行监测,评估其药物安全性.总之,进一步开展以PPARy为药物靶点中药及其有效成分的研究,有望开发出具有自主知识产权的调节糖脂代谢的新药物.参考文献:[2][3][4][5][6]QuinnC,HamiltonP,LoekhartC,eta1.Thiazolidinediones:effeetson insulinresistanceandthecardiovascularsystem[J].BritishJournalof 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小檗碱对脂肪胰岛素抵抗细胞PPARγ及脂肪分泌因子表达的影响

小檗碱对脂肪胰岛素抵抗细胞PPARγ及脂肪分泌因子表达的影响脂肪分泌細胞因子与脂肪组织胰岛素抵抗（IR）密切相关，在糖尿病的发生发展研究中越来越受到重视。

该实验主要研究小檗碱对脂肪胰岛素抵抗（IR）细胞PPARγ和脂肪分泌因子mRNA表达的影响，探讨小檗碱增强胰岛素敏感性的分子机制及微滴数字PCR（ddPCR）方法的应用优势。

该实验采用ddPCR绝对定量分析简单直观确定合适的内参基因，ddPCR和荧光定量法（qPCR）方法比较研究不同剂量（10，20，50，100 μmol·L-1）小檗碱干预IR 3T3-L1脂肪细胞中PPARγ、脂联素、抵抗素和瘦素mRNA表达；加入GW9662研究PPARγ和脂联素mRNA表达的内在关联。

ddPCR结果发现β-actin 在脂肪细胞中表达稳定，适合作为内参基因对定量PCR数据标准化。

ddPCR和qPCR方法均显示与IR模型组相比，10，20，50，100 μmol·L-1小檗碱呈现剂量依赖降低脂联素mRNA 表达（P＜0.01）。

对于PPARγ，qPCR显示20，50，100 μmol·L-1小檗碱呈现剂量依赖降低其表达（P＜0.01），而ddPCR仅在50，100 μmol·L-1降低其表达（P ＜0.05）。

PPARγ特异拮抗剂GW9662干预实验表明脂联素基因表达受PPARγ直接调控（P＜0.05）。

ddPCR探针法检测到各剂量小檗碱均剂量依赖显著降低抵抗素和瘦素mRNA表达（P＜0.01）。

结果揭示小檗碱调节脂联素起到胰岛素增敏作用并非通过PPARγ依赖途径在转录调控水平上调脂联素表达，推测可能是在翻译后调控水平上调高聚体脂联素比例。

小檗碱下调抵抗素和瘦素表达减轻脂解改善IR。

ddPCR比qPCR具有更好线性范围和灵敏度，对低丰度表达基因检测具有明显的技术优势。

标签：小檗碱；胰岛素抵抗；PPARγ；脂肪细胞因子；微滴数字PCR （ddPCR）[Abstract] Adipocytokines are closely associated with insulin resistance （IR）in adipose tissues，and they are more and more seriously taken in the study of the development of diabetes. This experiment was mainly to study the effect of berberine on mRNA expression levels of PPARγ and adipocytokines in insulin resistant adipocytes，and investigate the molecular mechanism of berberine in enhancing insulin sensitization and application advantages of droplet digital PCR （ddPCR）. ddPCR absolute quantification analysis was taken in this experiment to simply and intuitively determine the appropriate reference genes. ddPCR and quantitative Real-time PCR （qPCR）were used to compare the effect of different doses of berberine （10，20，50，100 μmol·L-1）on mRNA expression levels of PPARγ，adiponectin，resistin and leptin in IR 3T3-L1adipocytes. Antagonist GW9662 was added to study the inherent correlation between PPARγ and adiponectin mRNA expression levels. ddPCR results sho wed that the expression level of β-actin in adipocytes was stable，and suitable as reference gene for normalization of quantitative PCR data. Both of ddPCR and qPCR results showed that，as compared with IR models，the mRNA expression levels of adiponectin were decreased in the treatment with berberine （10，20，50，100 μmol·L-1）in a dose-dependent manner （P＜0.01）；the expression of PPARγ was decreased by 20，50，100μmol·L-1berberine in a dose-dependent manner in qPCR assay （P＜0.01）and decreased only by 50 and 100 μmol·L-1berberine in ddPCR assay （P＜0.05）. PPARγ specific antagonist GW9662 intervention experiment showed that adiponectin gene expression was directly relevant with PPARγ （P＜0.05）. ddPCR probe assay showed that various doses of berberine could significantly reduce mRNA expression levels of resistin and leptin （P＜0.01）in a dose-dependent manner. In conclusion，berberine enhanced insulin sensitization effect not by up-regulating adiponect in expression of transcriptional level in PPARγ-dependent manner，but may by the elevated multimerization of adiponectin in the posttranslational regulation level. Berberine down-regulated the resistin and leptin expression levels，which could alleviate lipolysis and improve IR in adipocytes. ddPCR provided better sensitivity and linear range than qPCR，with obvious technical advantages for the detection of low abundance expression of target genes.[Key words] berberine；insulin resistance；PPARγ；adipocytokines；droplet digital PCR （ddPCR）doi：10.4268/cjcmm20161103近年来临床调查发现我国18岁以上糖尿病患者多达1.139亿[1]，控制血糖是防治糖尿病的关键。

罗格列酮通过激活PPARγ改善肺动脉高压大鼠肺动脉内皮依赖性舒张功能

罗格列酮通过激活PPARγ改善肺动脉高压大鼠肺动脉内皮依赖性舒张功能李赫;王东亮;赵洪文【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2013(029)003【摘要】目的:探索过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮对肺动脉高压大鼠模型肺动脉血管内皮功能的影响.方法:(1)SD大鼠40只,分为正常对照组、模型组、罗格列酮组和罗格列酮+ GW9662(PPARγ拮抗剂)干预组,每组10只,以野百合碱(60 mg/kg)一次性皮下注射复制肺动脉高压大鼠模型,再灌胃给予罗格列酮(2.0 mg·kg-1·d-1)或罗格列酮+GW 9662 (0.3 mg·kg-1·d-1)干预.4周后,取血浆测一氧化氮(NO)及内皮素-1(ET-1)的水平,分离肺动脉二级分支,以微血管张力测定仪测定肺动脉血管功能变化情况.(2)体外培养人肺动脉内皮细胞株(HPAECs),探讨罗格列酮对HPAECs NO生成的影响.结果:罗格列酮可显著改善肺动脉高压大鼠血管内皮依赖性舒张功能,但不能显著改善非内皮依赖性舒张功能；罗格列酮干预可降低血浆ET-1水平,升高NO水平；但罗格列酮的以上作用在同时给予PPARγ拮抗剂GW9662时显著被减弱.体外实验证实,罗格列酮可显著增加HPAECs的NO生成,但该作用同样可被GW9662所阻断.结论:罗格列酮通过激活PPARγ改善肺动脉高压大鼠的血管内皮依赖性舒张功能可能是其治疗肺动脉高压的基础.【总页数】5页(P549-553)【作者】李赫;王东亮;赵洪文【作者单位】中国医科大学附属第一医院呼吸病研究所,辽宁沈阳110001【正文语种】中文【中图分类】R543.2【相关文献】1.替米沙坦激活PPARγ改善衰老大鼠脑血管内皮依赖性舒张功能 [J], 张黎黎;杨震;刘爱东;黄鸣清;周鹏;王沛坚2.慢性低氧肺动脉高压大鼠肺部PPARγ表达变化的意义 [J], 向光明;刘焰3.PPARγ配体罗格列酮防治实验性心力衰竭大鼠左室重构改善心功能的分子机制研究 [J], 雷健;刘洪智;戚本玲;罗兵;李佐民;周军;贺立群;曹林生4.硫化氢可通过改善肺动脉内皮间质转化减轻野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压 [J], 张卉; 蔺艳军; 毛承誉; 潘建安; 张绘莉5.盐酸罗格列酮对COPD肺动脉高压大鼠血管重塑影响 [J], 王琛;韩伟;唐华平;梁忆波;曹继兰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞chemerin表达的影响

罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞chemerin表达的影响狄靓亮;袁国跃;周丽斌;贾珏;王东;陈军建【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2011(051)012【摘要】目的观察罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞chemerin基因表达的影响.方法用实时荧光定量PCR方法检测罗格列酮对chemerin基因表达的影响.结果 3T3-L1前脂肪细胞在诱导分化过程中第2、4、6、8、10天chemerin基因的表达水平表现出逐渐上调的趋势,除第0天与第2天差异无显著性外,其余各时间点之间均有显著性差异(P<0.05).与对照组相比,10 μmol/L罗格列酮促进第2、4、6、8、10天chemerin基因的表达(P<0.01).在诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞中,0.1、1、10 μmol/L的罗格列酮作用24 h使chemerin基因表达分别增加142%、230%、293%(P<0.01),表现出剂量依赖趋势.结论罗格列酮促进3T3-L1前脂肪细胞及诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞中chemerin基因的表达,提示chemerin可能参与了脂肪细胞的分化,并可能与肥胖、代谢综合征等疾病的发生相关.【总页数】2页(P67-68)【作者】狄靓亮;袁国跃;周丽斌;贾珏;王东;陈军建【作者单位】江苏大学附属医院,江苏镇江212001;江苏大学附属医院,江苏镇江212001;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市内分泌代谢病研究所;江苏大学附属医院,江苏镇江212001;江苏大学附属医院,江苏镇江212001;江苏大学附属医院,江苏镇江212001【正文语种】中文【中图分类】R589.2【相关文献】1.罗格列酮对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞脂联素、瘦素及抵抗素的分泌及mRNA 表达的影响 [J], 孙殿静;刘晴晴;耿建林2.重组chemerin蛋白对3T3-L1脂肪细胞visfatin、MCP-1基因表达的影响 [J], 焦谊;常曦;王丽凤;李俊红;关亚群3.白细胞介素-6和罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞Vaspin mRNA表达的影响 [J], 孙莉;王长江;代芳;张德园4.罗格列酮对肿瘤坏死因子-α诱导3T3-L1脂肪细胞急性血清淀粉样蛋白A表达的影响 [J], 叶夏云;宋锦文;葛秀洁;赵玲5.3T3-L1前脂肪细胞烟碱样胆碱能受体α7亚型功能状态对chemerin及其受体chemerinR基因表达的影响 [J], 吴静;卢慧玲;胡秀芬;梁晓燕;林汉华;王宏伟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞AMPK＼PPARγ的表达及意义-

胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞AMPK＼PPARγ的表达及意义*目的观察胰岛素抵抗的的水平变化，探讨胰岛素抵抗脂肪细胞的分子机制。

方法体外培养前脂肪细胞, 并诱导其分化成熟,地塞米松诱导成熟脂肪细胞形成胰岛素抵抗，利用RT-PCR 技术检测和葡萄糖转运子4表达变化。

结果地塞米松作用于3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗量明显降低, 地塞米松诱导的胰岛素抵抗状态下AMPK、PPARγ和GLUT4 mRNA表达水平显著下调。

结论地塞米松降低3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗量产生胰岛素抵抗，提示其表达水平下降可能是3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗原因之一。

标签：地塞米松;3T3-L1脂肪细胞;胰岛素抵抗;腺苷酸活化蛋白激酶;过氧化物酶增殖受体γ;葡萄糖转运子4【Abstract】Objective To observe the changes of insulin resistance level, to investigate the molecular mechanism of insulin resistance adipocytes. Cultured preadipocytes in vitro, and induce its differentiation induced by dexamethasone in mature adipocytes,insulin resistance, change 4 expression was measured by RT-PCR technique and glucose transporter. Results dexamethasone effects on glucose consumption of 3T3-L1 cells decreased significantly, state AMPK, PPAR γ and GLUT4 mRNA expression was significantly lower in the dexamethasone induced insulin resistance. Conclusion dexamethasone reduced glucose consumption of 3T3-L1 fatty cells produce insulin resistance, suggesting that the gene expression level decreased may be one reason of insulin resistance in 3T3-L1 adipocytes 【key words 】dexamethasone; 3 t3 - L1 fat cells; Insulin resistance; Amp activated protein kinase; Receptor gamma peroxidase proliferation; The glucose transporter*基金资助：河北省科技厅《二甲双胍对同型半胱氨酸及脂源性激素的影响研究》资助，课题编号122777104；唐山市科技局《二甲双胍对同型半胱氨酸的影响研究》资助，课题编号13130266Z。

罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞增殖及胰岛素抵抗的作用

罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞增殖及胰岛素抵抗的作用郭晓农【摘要】Objective：To investigate the influence of rosiglitazone on proliferation of 3T3 -L1 adipocytes and insulin resistance. Methods 3T3 - L1 preadipocytes were cultured, the proliferation of 3T3 - L1 preadipocytes was detected by MTT method. Insulin resistant 3T3 - L1 adipocytes cell model was induced by dexamethasone and the change of glucose concentration in cell culture was determined after rosiglitazone treatment. Results In the high glucose DMEM culture media, MTT method showed that the absorbance at 570nm of 3T3 -L1 preadipocytes were increased and that of 3T3 - L1 adipocytes were decreased. rosiglitazone significantly increased glucose consumption in 3T3 - L1 preadipocytes and adipocytes culture with a concentration - dependent effect. Rosiglitazone improved the sensitivity of 3T3 - L1 adipocytes to insulin. Conlcusions Rosiglitazone can promote the proliferation of 3T3 - L1 adipocytes and inhibited the proliferation of 3T3 - L1 preadipocytes, rosiglitazone can significantly improve insulin resistance induced by dexamethaone.%目的：探讨罗格列酮对脂肪细胞增殖和胰岛素抵抗的影响．方法：培养3T3-L1前脂肪细胞。