2019届高考生物总复习第十二单元生物技术实践第39讲微生物的培养与应用课下作业新人教版
高考生物大一轮复习 第十二单元 生物技术实践 第43讲 微生物的培养与应用课件
比较项目
平板划线法
稀释涂布平板法
每次划线前后均需灼烧 稀释度要足够高，为确保
注意事项
接种环
实验成功可以增加稀释度
选择培 入某些化学 物对某些物质 物中分离所 分离得到酵
养基
物质
的特殊需求或 需的微生物 母菌和霉菌
抗性而设计
鉴别培 养基
培养基中加 入某种指示 剂或化学药
鉴别不同种 产生特定的颜
类的微生物 色或其他变化
用伊红—美 蓝培养基鉴 别大肠杆菌
品
2.培养基的配制原则 (1)目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确 定配制的培养基种类。 (2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。 (3)pH 要适宜：细菌为 6.5～7.5，放线菌为 7.5～8.5，真菌为 5.0～6.0，培养不同微生物所需 pH 不同。
↓ 选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的数量
↓ 梯度稀释
↓ 涂布平板：将样品涂布于含 CR 的鉴别纤维素分解菌的培养
基上 ↓ 挑选产生透明圈的菌落：产生__纤__维__素__酶______的菌落周围出
现透明圈
1.(2016·北京海淀区期末)培养基中一般都含有水、碳源、氮 源和无机盐四种成分。( ) √ 2.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上分离分解尿素的 细菌，是否无菌操作影响较小。( )√ 3.培养基分装到培养皿后进行灭菌。( )× 4.从有机废水中分离微生物用于废水处理时，接种后的培养 皿须放在光照培养箱中培养。( )× 5.外植体消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消 毒剂对细胞的伤害。( )√
毒水源
接种工具
玻璃器皿、金 属工具
培养基及容器
4.大肠杆菌的纯化 (1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长 成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。 (2)纯化微生物的接种方法
高三生物一轮复习必备精品：专题19(微生物的培养和应用)
专题十九 微生物的培养和应用一、考点解读1、考点盘点2、考点解读本专题主要考点有微生物的分离和培养、微生物数量的测定、选择培养基的利用、利用微生物发酵来生产人类需要的的产物以及微生物的其他方面的引用。
微生物的培养、培养基对微生物的选择利用、利用微生物发酵来生产特定的产物是高考热门。
近年来不少地方的试题都多有涉及。
微生物的培养和应用是选修一选修部分的重点，高考的时候也经常考到。
从命题角度看主要是以微生物的应用为考察对象，进行实验设计或者其他考察，考察的内容多种多样。
二、知识网络土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 分解尿素菌的分离与计数 实验设计 1、土壤取样 2、普通培养基与选择培养基的制备原理 3、培养与计数 3、不同种类加酶洗衣粉的洗涤效果比较 微生物的实验室培养 培养基制备 无菌操作技术 1、目的要明确 2、营养要协调 3、pH 要适宜 1、灭菌与消毒 2、方法和原理 分解纤维素的微生物的分离 分解纤维素菌的分离 实验设计1、分离原理 1、土壤取样三、本单元分课时复习方案一．微生物的实验室培养（一）培养基（1）培养基可分为液体培养基和固体培养基（按照物理性质）。
在液体培养基中加入凝固剂琼脂后，制成琼脂固体培养基。
微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。
根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。
（2）各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种营养物质。
满足微生物生长还需要适宜的pH、氧气的要求（根据微生物的需求提供有氧或无氧环境）、特殊营养物质等。
碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。
如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、蛋白质、脂肪等有机碳源。
异养微生物只能利用有机碳源。
单质碳不能作为碳源。
氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。
如N2、NH3、NO3-、NH4+、蛋白质、氨基酸等。
只有固氮微生物才能利用N2。
（二）无菌技术（1）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
微生物的培养与应用ppt课件
考点三
考情 解读
微生物的数量测定 本考点内容在生物技术实践中占有比较重要的 地位，有关特定微生物的数量测定广泛应用于食品 及水质检测等实践中，具重要的应用价值，近年高 考常将微生物计数与微生物培养及筛选综合命题， 故2013年备考仍需重点关注。
41
[做一题] [例3] 急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化 道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量 是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水 有关的问题： (1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀
2
2．消毒和灭菌
项目
消毒
灭菌
使用 较为温和
条件
的
使用 强烈 的理化因素
理化方法
杀死物体表面或内部
杀死物体内外
一部分对人体有害的
所有的
结果 微生物(不包括芽孢和 微生物，包括芽孢和
孢子)
孢子
3
项目 适用
常用 方法
消毒
灭菌
实验操作的空间、操作者 培养器皿、接种用具和培
的衣着和手
养基等
煮沸 消毒法， 巴氏 消 灼烧 灭菌、 干热 灭 毒法，酒精、氯气、石炭 菌、 高压蒸汽 灭菌
()
成分 含量
NaN O3
3g
K2H PO4
1g
MgS KCl O4·7
H2O
0.5 0.5 gg
FeS O4
(CH2 O)
H2O
1 0.0
30 g 000 1g
mL
青霉 素
0.1 万单
位
35
A．依物理性质划分，该培养基属于液体培养基 B．依用途划分，该培养基属于选择培养基 C．培养基中的唯一碳源是(CH2O)，唯 一氮源是NaNO3 D．若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去(CH2O)，
1.2.2+微生物的培养技术及应用(教学设计)-高二下学期生物(2019人教版选择性必修3)
1.2.2微生物的培养技术及应用一、教学目标：学习目标：1.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。
2.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。
核心素养：1.生命观念：各类微生物都能适应其生活环境。
2．科学思维：根据微生物的代谢类型配制选择培养基。
3．科学探究：讨论土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的方法。
二、教学过程：【导入】自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，更难实现。
那么我们又如何达成这一目标呢？选择性培养基一、选择培养基1、实例：寻找耐高温的DNA聚合酶1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而从这种菌中提取出耐高温的DNA聚合酶。
聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。
筛选原因：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。
2、实验室中微生物的筛选：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或组织其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。
思考讨论选择培养基配方的设计尿素含氮量高，化学性质稳定，是一种重要的农业氮肥，尿素施入土壤后，被某些细菌分解成NH3，NH3再转化成NO3-、NH4+等才能被植物吸收。
土壤中尿素分解菌之所以能将尿素分解，是因为它们能合成脲酶：请同学们小组为单位思考以下问题？1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？设计一种选择培养基,用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来。
2. 该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。
高考生物一轮复习生物技术实践第39讲微生物的培养及应用限时训练提升考能新人教版选修1
第39讲微生物的培养及应用限时训练提升考能(时间：15分钟)1.牛奶是微生物培养的良好培养基，牛奶在饮前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物，为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图所示操作。
用无菌吸管从锥形瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中，混合均匀，如些再重复2次。
请回答下列有关问题：(1)巴氏消毒的方法是________，使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是________。
(2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布，应选择的涂布工具是图中的________。
(3)图中所示方法为稀释培养法，理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。
若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为35个、33个、34个，则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为________个，运用这种方法统计的结果往往较实际值________(填“偏大”或“偏小”)，原因是________。
(4)消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死，若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量，则在操作步骤上应做什么改动？____________。
(5)从生牛奶取样培养得到的菌落中，混有各种杂菌，从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加入________，菌落具有________特征的可以认定为大肠杆菌。
答案(1)70～75 ℃煮30分钟(80 ℃煮15分钟) 牛奶的营养成分不被破坏(2)B (3)3.4×106偏小个别菌落可能是由2个或多个细菌形成的(4)稀释次数减少(5)伊红美蓝(金属光泽的紫)黑色2.(2015·山东潍坊一模)地球上植物产生的纤维素中有40%～60%被土壤中的某些微生物利用，从土壤中分离并研究这些微生物有利于人们更有效地利用植物秸秆中的纤维素。
请回答：(1)分离纤维素分解菌，宜从________的土壤中取样。
纤维素分解菌之所以能够利用纤维素，是因为其细胞内含有________。
人教(2019)生物高考复习：第38讲 微生物的培养与应用
知识点二 土壤中分解尿素的细菌的分离 [自主学习]
【答案】酚红 样品稀释 培养观察 以尿素为唯一氮源 稀释涂 布平板法
[自主检测]
1．思考判断
(1)选择培养基可以鉴定某种微生物的种类。
()
(2)从物理性质的角度看，选择培养基多属于液体培养基。 ( )
(3)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。
()
KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖 10.0 g
尿素 1.0 g 琼脂 15 g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1 000 mL
(1)该培养基可筛选的细菌是__________________，判断的依据是 __________________。
(4)筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中，尿素是唯一的氮源。
()
(5)分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养
基的pH降低。
()
(6)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，
则说明筛选到分解尿素的细菌。
()
【答案】(1)× (2)× (3)√ (4)√ (5)× (6)×
① 牛 肉 膏 、 蛋 白 胨 在 培 养 基 中 的 作 用 是 提 供 ___________ 、 __________、__________等营养物质。
②要用表中所给材料配制观察细菌菌落状况的培养基，还需添加的 成分是__________。
③表中各成分含量确定的依据是___________________________。 ④培养基配制好后，分装前应进行的工作是__________________。 ⑤从配制培养基直到培养完成，所采用的预防杂菌污染的方法是 ____________、____________、____________等。 (3)微生物接种的方法很多，最常用的是________________________ 和__________________。
全国版2019版高考生物一轮复习第40讲微生物的培养与应用课件
(2)纯化大肠杆菌
① 平板划线 法(图中 A)：通过 接种环 在琼脂固体 培养基表面 连续划线 的操作，将聚集的菌种逐步
稀释分散到培养基的表面。
② 稀释涂布平板 法(图中 B)：将菌液进行一系列的
梯度稀释，然后将 不同稀释度 的菌液分别涂布到
琼脂固体培养基
的表面，进行培养。当稀释倍
数足够高时，即可获得单个细菌形成的 菌落 。
(3)菌种的保藏 ①对于频繁使用的菌种，可以采用 临时保藏 法。 ②对于需要长期保存的菌种，可以采用 甘油管藏
法。 二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1．筛选菌株 (1)自然界中目的菌株筛选的依据：根据它对
生存环境 的要求，到相应的环境中去寻找。
A．图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作 为唯一碳源
B．如果要测定②中活细菌的数量，常采用稀释涂布平 板法
C．若图中④为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一碳 源
2．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是 ()
A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C．等培养基冷却至 50 ℃左右时进行倒平板 D．待平板冷却凝固 5～10 min 后将平板倒过来放置
解析 操作顺序为先灭菌再倒平板，A 错误；应该将称 好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，B 正确；培养基冷却 至 50 ℃左右既没有凝固，同时又不烫手，可以进行倒平板， C 正确；为了防止冷却过程中培养皿盖上凝集的水珠对平板 的污染，培养基冷却凝固后就要将平板倒过来放置，D 正确。
第十一单元 生物技术实践
第40讲 微生物的培养与应用
[考纲明细] 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用 4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其 他方面的应用
2019版高考生物一轮复习生物技术实践第2讲微生物的培养与应用课件
(1)图中步骤①称为________消毒法。步骤②是________。 (2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供________。进行步骤③操作时，应选 用下列中的哪种工具？________。为了避免杂菌污染，此步骤应在________ 附近进行。
(3)将接种后的培养基和作为对照的________________同时放入 37 ℃恒温培 养箱中，培养 36 小时。取出后统计各平板的菌落数，结果如下表所示。应 该选择其中稀释倍数为 ____________ 的平板进行计数，经过消毒后的牛奶 中，细菌数大约是____________/mL。 牛奶稀释倍数 平板 1 菌落数 平板 2 菌落数 平板 3 菌落数 102 87 83 85 103 10 12 10 104 1 1 0
(2)纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见
较纯的菌种 。 的菌落，即可获得___________ 接种 。 ②纯化大肠杆菌的关键步骤：_____
平板划线 法接种获得的平板；下图乙可表示 ③接种方法：下图甲可表示用_________
用_____________ 稀释涂布平板 法接种获得的平板。
选修
第2讲
生物技术实践
微生物的培养与应用
栏目 导航
考点一 考点二 真题验收
微生物的实验室培养 微生物的分离与计数 感悟高考 淬炼考能
课时分层集训
考纲要求 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择 作用
全国卷五年考情 2017· 卷ⅠT37,2016· 卷ⅠT39,2016· 卷ⅢT39,2015· 卷 ⅠT39,2014· 卷ⅠT39,2014· 卷ⅡT39,2013· 卷ⅡT39 2016· 卷ⅠT39,2014· 卷ⅡT39 2017· 卷ⅠT37,2016· 卷ⅢT39,2014· 卷ⅠT39,2013· 卷 ⅡT39
高三总复习生物检测题 微生物的培养技术及应用
微生物的培养技术及应用一、概念检测1．下列关于微生物培养的说法，错误的是()A．倒平板时，培养基倒入培养皿后要立即倒置放置B．实验中锥形瓶、培养皿常用干热灭菌法灭菌C．用记号笔标记培养皿中菌落时应标记在皿底D．纯化培养时，培养皿应倒置培养在恒温培养箱中解析：选A倒平板时，培养基倒入培养皿后需要等培养基凝固后，才能倒置放置，A 错误。
2．下列关于消毒和灭菌的理解正确的是()A．无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌B．培养皿、MS培养基可用干热灭菌法灭菌C．高压蒸汽灭菌完成后，待压力表降至零时，再打开排气阀排气D．外植体消毒时常用硝酸银溶液处理1～2 min解析：选C无菌技术中，若处理对象为液体，可以用高压蒸汽灭菌法灭菌，A错误；培养皿可用干热灭菌法灭菌，培养基一般用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，B错误；高压蒸汽灭菌完成后，待压力表降至零时，再打开排气阀排气，C正确；外植体消毒一般采用体积分数为70%的酒精和次氯酸钠溶液处理，D错误。
3．平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。
下列相关叙述错误的是()A．两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度B．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，所得数据往往比实际值偏小C．获取纯培养物的过程中，应根据微生物的种类调整培养基的pHD．对10 mL土样样液稀释106倍后，取0.1 mL稀释液涂布，测得的菌落数分别为218、266、305，则该10 mL土样中目的菌数为2.63×1010个解析：选D用稀释涂布平板法统计微生物的数量时，一般选择菌落数在30～300的至少3个平板进行重复计数，求出平均值，D错误。
4．在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种(甲)、培养结果(乙)如图。
下列有关叙述错误的是()A．甲中a区域为划线的起始位置B．接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌C．连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落D．接种过程中至少需要对接种环灼烧5次解析：选A每次划线的菌种来自上一区域的末端，因此划线的起始区域菌落最多。
高考生物专题复习 微生物的实验室培养课件
按照培养基用途（功能）分
基础培养基 选择培养基 鉴别培养基
按照培养基的成分来分 各自优缺点？
合成培养基、天然培养基、半合成培养基
精选ppt
3
选择培养基
不加氮源的无氮培养基:
分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基:
分离自养型微生物
加入四环素等抗生素的培养基:
分离导入了目的基因的受体细胞
不加氨基嘌呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的
培养基:
分离杂交瘤细胞
加入高浓度食盐的培养基:
分离金黄精选色ppt 葡萄球菌
4
从成分上判断：
牛肉膏蛋白胨培养基 天然培养基
麦芽汁培养基
天然培养基
葡萄糖铵盐培养基 合成养基
马铃薯蔗糖培养基 半合成养基
精选ppt
5
3. 成分：
水、无机盐、碳源、氮源、（生长因子）
+满足微生物对pH、特殊营养物质、氧气的 要求
课题1 微生物的实验室培养
合适的营养和环境条件 微生物的实验 室培养条件：
确保其他微生物无法混 入
精选ppt
1
一. 培养基
1. 概念：
按照微生物对营养物质的不同 需求，配制出供其生长繁殖的营 养基质。
需要加入琼脂（凝固剂）
多糖
精选ppt
2
2. 种类：
按物理形态分
液体培养基、半固体培养基 固体培养基 应用微生物分离、鉴定、计数和
加而逐步减少，最终能得到由单个细菌
繁殖而来的菌落
精选ppt
25
菌液
稀释涂布平板法
系列梯度稀释
涂布到 培养基
稀释度足够高的菌液里，微生物被 分散成单个细胞，从而在培养基表 面形成单个菌落
[配套K12]2019版高考生物一轮复习 第二部分 第十二单元 生物技术实践 第39讲 微生物的培养与应用练习 新人
![[配套K12]2019版高考生物一轮复习 第二部分 第十二单元 生物技术实践 第39讲 微生物的培养与应用练习 新人](https://img.taocdn.com/s3/m/4e6f1a14f01dc281e53af0f9.png)
第39讲微生物的培养与应用1．(2018·广东惠州模拟)日前微博传言手机细菌比马桶多。
如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。
回答下列相关问题：(1)该实验需制备培养基，培养基一般都含有水、碳源、________。
(2)据图，两电视台均采用________法接种，该方法需要________(多选)。
A．接种环B．酒精灯C．移液管D．涂布器E．无菌水(3)通过观察菌落的________，可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。
两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因是：___________________。
(4)按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10 mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1 mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为________个/平方厘米。
该实验对照组该如何设置________________________。
解析：(1)微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐。
(2)根据图形分析，该实验的接种方法为稀释涂布平板法，该方法用到的工具有酒精灯、移液管、涂布器、无菌水等。
(3)不同的菌落形态、大小不同，图示两个电视台调查的手机屏幕和马桶按钮都有多种形态的菌落，即存在多种微生物。
两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，可能是因为手机的取样和马桶的取样都不相同。
(4)根据提供的数据进行计算，某手机屏幕的细菌数＝(48＋50＋52)÷3×102÷0.1×10÷(5×5)＝2×104(个/平方厘米)。
答案：(1)氮源和无机盐(2)稀释涂布平板BCDE(3)形态、大小手机的取样和马桶的取样都不相同(4)2×104取培养基涂布0.1 mL无菌水进行培养2．(2018·吉林长春模拟)下面是筛选抗链霉素大肠杆菌的实验步骤及相关图解。
2023年高考等级考生物一轮复习多维练(全国通用)39 微生物的培养与应用(含详解)
专题十三传统发酵技术与微生物的应用课时39 微生物的培养与应用1．培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶，上述内容所采用的灭菌或消毒方法依次是（）①化学药物消毒①灼烧灭菌①干热灭菌①紫外线消毒①高压蒸汽灭菌①巴氏消毒法A．①①①①①①B．①①①①①①C．①①①①①①D．①①①①①①2．不同的微生物对营养物质的需求各不相同。
下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是（）A．氮源物质为该微生物提供必要的氮元素B．碳源物质也是该微生物的能源物质C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D．为制成固体培养基往往需要加入琼脂作为凝固剂3．下列关于微生物纯化培养的叙述，错误的是（）A．涂布平板时应先将培养皿盖置于实验操作台上B．微生物的纯化培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤C．用平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落D．倒平板操作应等培养基冷却至50①左右时，在酒精灯火焰附近进行4．在稀释涂布平板法对微生物进行计数时的错误操作是（）A．将1mL样品稀释10倍，需加入10mL无菌水B．吸取菌液的移液管需要干热灭菌避免杂菌污染C．将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃D．稀释涂布平板法既能分离纯化微生物，又能计数5．下列关于灭菌和消毒的叙述，正确的是（）A．灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子B．无菌操作时，需要对实验操作的空间、操作者的衣物和手进行灭菌C．灼烧法灭菌的对象是金属器具，不可以是玻璃器具D．常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等6．下列关于微生物培养的叙述，正确的是（）A．配制培养基时，一般先调pH再灭菌B．培养微生物用到的接种环、培养皿、培养基等都用干热灭菌法灭菌C．培养乳酸菌时，除了基本的碳源、氮源、水和无机盐，还需要添加抗生素D．用平板划线法和稀释涂布平板法进行微生物的计数时，所得数据往往比实际数据偏小7．高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是（）A．将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上C．将分解尿素的细菌接种到无菌培养基上，进行分离和计数D．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上8．某种物质X（一种含有C、H、O、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解X。
2019版高考生物一轮复习生物技术实践第二讲微生物的培养与应用精盐件
不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：
①配制培养基 (成分：牛肉膏、蛋白胨、 NaCl、X、H2O)； ②制作无菌平板；
③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；
④将各组平板置于 37 ℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌
落的平均数。
回答下列问题：
(1)该培养基中微生物所需的氮来源于 ______________________ 。若
解析
重难点拨
常用选择培养基与鉴别培养基实例归纳
类型
选择培 养基
鉴别培 养基
实例 培养基中加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 培养基中加入高浓度的食盐用于分离得到金黄色葡萄 球菌 以尿素作为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细 菌 不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物 石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物 的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离能 消除石油污染的微生物的目的 培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物
生长因子。 (3) 若要观察微生物的菌落特征，培养基中应添加的成分是 凝__固__剂__(_琼__脂__)。
(4)若用该培养基来分离尿素分解菌，应除去表中 ① 成分(填表
中序号)，加入 尿素 和不含氮元素的有机物。
2．下图是倒平板的操作，请据图填空
(1)请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程： 丙→乙→甲→丁 。 (2)甲、乙、丙中的灭菌方法是 灼烧灭菌 。 (3)丁中的操作需要等待 平板冷却凝固 后才能进行。
4．连线以下几种选择培养基和鉴别培养基及其应用
NO.2
考点突破
——题点化 ·重点 化
考点一 培养基及微生物的纯化培养技术
命题点(一) 培养基的成分、功能和制备
1．(2016·全国卷Ⅰ )空气中的微生物在重力等作用下， 可以一定程度地沉
2019届高考生物一轮复习第十二单元生物技术实践第40讲微生物的培养与应用课件
管号 苯酚浓度(mg/L)
1
2
3
4
5
6 1
如果废水为 50 mg/L 苯酚溶液，降解后约有 21%的苯酚残留， 则需将残留液稀释________(填序号：①5 ②10 ③20)倍后，再进行比色。
解析：(1)富集培养基中蛋白胨、苯酚都是含 C 的有机物，可作 为碳源。(2)欲富集酚降解菌，需随转接次数增加逐渐增加培养 基中苯酚的含量；若接种培养后平板上菌落过于密集，则应进 一步稀释后再进行涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落计 数与分离；平板培养基是固体培养基，除含有水、营养物质(碳 源、氮源、无机盐等 )外，还需添加琼脂作为凝固剂。 (3)利用 连续划线法接种时， 最后的划线区域(③)中， 菌体的密度较小， 容易获得单菌落。(4)因系列浓度梯度中 6 号比色管中苯酚浓度 为 1 mg/L，故 1～5 号比色管中的苯酚浓度应分别为 0 mg/L、 0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、0.8 mg/L；根据题意，废水为
答案：(1)琼脂 (4)稀释
淀粉
(2)C
(3)搅拌
高压蒸汽灭菌 扩大
稀释涂布平板
(5)淀粉酶
考向 2
微生物的纯化技术
2．(2017· 高考江苏卷)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中， 对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理 废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：
答案：不是。微生物的接种技术还包括斜面接种、穿刺接种等 方法，其核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。
考向 1
培养基及其制备方法及无菌技术的操作
1．(2018· 湖南长沙浏阳四中一模 )高温淀粉酶在大规模工业生 产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选出了能高效生产高 温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示。回答下列问题：
1.2.1微生物的培养技术及应用教学设计2023-2024学年高二下学期人教版2019选择性必修3
1.2.1微生物的培养技术及应用教学设计-2023-2024学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3主备人备课成员教学内容本章节内容选自人教版（2019）选择性必修3《生物》教材第1.2.1节“微生物的培养技术及应用”。
本节课主要介绍了微生物培养技术的基本原理和常见方法，包括平板划线法、稀释涂布平板法、液体培养基的制备和灭菌等。
此外，还涉及微生物在工业、农业、医药和环保等方面的应用，如发酵工业、食品生产、生物农药和生物降解等。
教学目标1. 知识与技能：（1）了解微生物培养技术的基本原理和常见方法，如平板划线法、稀释涂布平板法、液体培养基的制备和灭菌等。
（2）掌握微生物培养技术在工业、农业、医药和环保等领域的应用，如发酵工业、食品生产、生物农药和生物降解等。
2. 过程与方法：（1）通过实验操作，培养学生动手能力和观察能力，提高其科学素养。
（2）运用对比分析法，帮助学生理解不同微生物培养技术的优缺点。
3. 情感态度与价值观：（1）培养学生对微生物培养技术的兴趣，激发其对生命科学的热爱。
（2）通过学习微生物在实际生产中的应用，使学生认识到生物技术在人类社会发展中的重要作用。
（3）培养学生关注生态环境保护的意识，提高其社会责任感。
教学难点与重点（1）微生物培养技术的基本原理和常见方法，如平板划线法、稀释涂布平板法、液体培养基的制备和灭菌等。
（2）微生物在工业、农业、医药和环保等领域的应用，如发酵工业、食品生产、生物农药和生物降解等。
（3）微生物培养技术的实验操作，培养学生动手能力和观察能力。
（4）微生物培养技术在实际生产中的应用，提高学生对生物技术重要性的认识。
2. 教学难点：（1）微生物培养技术的原理和操作方法，如平板划线法、稀释涂布平板法、液体培养基的制备和灭菌等。
（2）微生物培养技术的实验操作，如无菌操作、培养基的配制和灭菌等。
（3）微生物培养技术的应用，如发酵工业、食品生产、生物农药和生物降解等。
2019届高考生物总复习第十二单元生物技术实践第39讲微生物的培养与应用课件新人教版
考向一
培养基及微生物的纯化培养技术
1． (2016· 高考全国卷Ⅲ)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料 分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙 而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回 答下列问题： (1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用________对泡菜滤液进行 梯度稀释，进行梯度稀释的理由是_________________。
解析：(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液 进行梯度稀释；进行梯度稀释的理由是在稀释度足够高的菌 液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在 培养基表面形成单个的菌落。(2)在分离纯化所用的培养基中 加入碳酸钙的作用有：中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和 利于乳酸菌的识别和分离；分离纯化时应挑选出在平板上有 溶钙圈的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在－20 ℃长期保存时， 菌液中常需要加入一定量的甘油。
(2)纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理：在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉
菌落 ，即可获得较纯的菌种。 眼可见的_______ 接种 。 ②纯化大肠杆菌的关键步骤：_______
③常用的微生物接种方法有两种
接种环 在琼脂固体培养基表面连 a． 平板划线法： 是通过__________
续划线的操作， 将聚集的菌种逐步稀释分散到培养与应用
第十二单元
生物技术实践
1.微生物的分离和培养 的测定 3.培养基对微生物的选择作用
2.某种微生物数量
培养基及微生物的纯化培养技术 1．培养基
营养物质 的不同需求，配制 (1)概念：人们按照微生物对____________ 生长繁殖 的营养基质。 出供其____________ 水、碳源、氮源 和无机盐。此 (2)营养组成：一般都含有_________________
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
第39讲微生物的培养与应用【课下作业】1．(2018·泰安一模)多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物，呈油状液体，污染土壤后，很难清除。
研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用，为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出可以分解多氯联苯的菌株。
据此回答下列问题：(1)筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品______，接种到以________为唯一的碳源培养基上，从功能上讲，该培养基属于________。
(2)对初步提取到的菌株要进行________，一般操作方法有两种，如图是________法。
(3)若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下直接计数。
若用________________法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是________________________________________________________________________。
(4)将1 mL酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57、58，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为________。
解析：(1)依题意可知：筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品稀释(溶解)接种到以多氯联苯为唯一的碳源培养基上。
在该培养基中，只有能降解多氯联苯的微生物才能生长，而其他微生物则不能生长，所以从功能上讲，该培养基属于选择培养基。
(2)对初步提取到的菌株要进行纯化。
如图采用的操作方法是平板划线法。
(3)若要测定培养液酵母菌的菌体数，既可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用稀释涂布平板(或涂布平板)法统计活菌数目。
在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是：检验培养基平板灭菌是否成功(倒平板是否感染杂菌或是否彻底灭菌)。
(4)将1 mL酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57、58，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为( 56＋57＋58)÷3÷0.1×100×103＝5.7×107个。
答案：(1)稀释(溶解) 多氯联苯选择培养基(2)纯化平板划线(3)稀释涂布平板(或涂布平板) 检验培养基平板灭菌是否成功(倒平板是否感染杂菌或是否彻底灭菌)(4)5.7×1072．(2018·湖南长郡中学模拟)急性肠胃炎是由细菌通过消化道进入人体导致的。
因此检验饮用水中细菌的含量是有效监控疾病发生的必要措施。
请回答下列与检验饮用水有关的问题：(1)在检验大肠杆菌的含量时，该小组将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为44、43和42，据此可得出每升水样中的活菌数为________。
但通常计算出来的活菌数目往往比实际的数目低，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组？________。
为什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
(3)有三种材料或用具需要消毒或灭菌：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻璃棒、试管和烧瓶；③实验操作者的双手。
其中需要消毒的是________，需要灭菌的是________________________________________________________________________。
(4)下图所示的四种菌落分布中，不可能由稀释涂布平板法得到的是________。
(5)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸、产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具有塞子的试管，应如何判断水样中是否有大肠杆菌？___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
解析：(1)由题意知1 mL水样中的菌落数是(44＋43＋42)÷3÷0.1×100＝4.3×104个，每升水样中的活菌数为 4.3×104×103＝4.3×107个。
当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落导致通常计算出来的活菌数目往往比实际的数目低；(2)因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格)，所以用该方法统计样本菌落数时需要对照组；(3)在使用操作过程中，实验操作者的双手应当进行消毒，培养细菌用的培养基与培养皿应当进行灭菌，玻璃棒、试管、烧瓶和吸管等玻璃器皿应当进行干热灭菌；(4)题干所述方法为稀释涂布平板法。
据图分析，A、B、C三个培养皿的菌落分布均匀，应该属于稀释涂布平板法得到的，D属于平板划线法接种得到的，不可能由稀释涂布平板法得到，故选D；(5)通过无菌操作向试管内注入一定量待测水样，再注入适量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液，塞上塞子，混匀后置于37 ℃恒温箱培养24 h。
若试管内有气泡生成，则说明水样中有大肠杆菌，否则，说明水样中无大肠杆菌。
答案：(1)4.3×107当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(2) 需要因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格) (3)③ ①② (4)D (5)通过无菌操作向试管内注入一定量待测水样，再注入适量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液，塞上塞子，混匀后置于37 ℃恒温箱中培养24 h。
若试管内有气泡生成，则说明水样中有大肠杆菌，否则，说明水样中无大肠杆菌3．(2018·襄阳调研)生活饮用水经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理，含微生物很少，但当其水源水不洁或处理达不到要求时，仍然会含相当量的微生物甚至含有致病性微生物。
供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染。
因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。
我国生活饮用水水质标准(GB5749－85)中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL，大肠杆菌不得大于3个/L。
据此回答下列问题：(1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为________________。
(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？为什么？________________________________________________________________________。
(3)如分别取0.1 mL已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中大肠杆菌数为________个。
(4)纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用________法灭菌，________(填“可”或“不可”)用加入抗生素的方法防止杂菌污染。
(5)如果要测定水中的病毒种类，可以用________技术使其遗传物质扩增，然后用________________技术进行鉴定。
答案：(1)稀释涂布平板法(2)需要。
因为需要判断培养基是否被污染(3)1.61×108(4)高压蒸汽灭菌不可(5)PCR DNA分子杂交4．(2018·石家庄一模)“节约一张纸，增添一片绿”。
纸的主要成分是木质纤维，以纤维素类物质生产燃料乙醇的研究越来越受重视。
据此回答下列问题：(1)该技术需要从土壤中获得纤维素分解菌，获得该菌的方法是在含有纤维素的培养基上加入________染料，筛选周围有________的菌落。
其产生的分解纤维素的酶至少包括________________________三种组分，在这三种酶协同作用下，纤维素最终被水解成________。
(2)用获得的糖液发酵生产乙醇，常用的微生物是_______________________，在________的发酵液中，该菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物受到抑制。
发酵过程中检测该菌数量可采用________________法计数，示意图A和B中，图________表示的是用该法接种培养后得到的结果。
答案：(1)刚果红透明圈C1酶、C x酶、葡萄糖苷酶葡萄糖(2)酵母菌缺氧呈酸性稀释涂布平板 B5．(2018·贵州贵阳模拟)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。
请回答下列问题：(1)自然界中获取的微生物，必须经过____________________后才能应用于工业生产。
(2)图甲中，过程②③的选择、接种需要重复几次的目的是_________________________。
(3)某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。
该同学的接种方法是________________；推测该同学接种时可能的操作失误是________________。
(4)在微生物的培养过程中，需将培养皿______________放在培养箱中培养，以防止冷凝水影响酵母菌的生长。
(5)若以淀粉为原料，在相同的适宜条件下密闭发酵时，相对于普通酵母菌菌种，接种工程酵母菌的发酵罐需要先排气，其原因是_______________________________________。
(6)上述工程酵母菌培养过程中，下列有关操作错误的是________。
A．接种工具用酒精灯火焰灼烧进行灭菌B．配制好的培养基分装到锥形瓶后进行高压蒸汽灭菌C．倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行D．获得的菌种如果需要保藏，可置于37 ℃，恒温保藏解析：(1)自然界中的微生物需要经过分离和纯化后才能应用于工业生产。