Tween20TBS溶液(20×TBST,pH7.4)
tbst洗涤注意事项
tbst洗涤注意事项
使用TBST(TBS Tween)洗涤缓冲液时,以下是一些注意事项:
1. 使用去离子水:在制备TBST缓冲液时,最好使用去离子水,以确保最佳的洗涤效果。
2. 合理稀释:根据具体实验需要,合理稀释TBST缓冲液。
通常情况下,可以将TBST稀释为1X浓度(用去离子水稀释1倍)。
如果需要更高的浓度,则需要相应调整稀释倍数。
3. 保存条件:将未使用的TBST缓冲液保存在4°C的冰箱中,避免暴露在阳光下或高温环境中。
4. 均匀混合:在使用TBST缓冲液前,应将其均匀搅拌混合,确保其中的Tween 20洗涤剂充分溶解。
5. 避免交叉污染:使用TBST缓冲液时,应避免将其接触其他实验室试剂或表面,以防止交叉污染。
6. 足够洗涤时间:根据实验需要,适当延长洗涤时间,以确保彻底去除目标蛋白质的非特异性结合。
7. 彻底清洗:在使用TBST缓冲液进行洗涤后,应彻底清洗实验器具,避免残留的洗涤剂对后续实验结果产生干扰。
请注意,以上仅为一般性的注意事项,具体的使用细节可能会
因实验目的和方法而有所不同。
建议参考相应的文献或相关实验方案,以确保正确使用TBST洗涤缓冲液。
TBSTtaetoweentbe
TBSTtaetoweentbe————————————————————————————————作者:————————————————————————————————日期:TBST是什么?TBST中含有Tris-Hcl,NaCl,tween20这三种物质,是做WESTERN BLOT 中常用的一种缓冲溶液T ris-B uffered S aline and T ween 20可作为缓冲液,也可作洗涤液(可用TBST洗NC膜)TBST洗涤缓冲液的全称试什么?TB S T是TB S+Tween的缩写,TB S是Tris-HCl缓冲盐溶液,为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液用1N HCl调pH至7.4,Tween为一种非离子型去污剂,有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力。
用途:Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。
Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。
Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans)核纤层蛋白(lamin)的中间纤维的形成。
Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。
Tris也被用作滴定标准物。
作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用Tris,最好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。
Tris中文别名:三(羟甲基)氨基甲烷;氨丁三醇;缓血酸铵;三羟甲基氨基甲烷;Tris;英文名称: Tris(hydroxymethyl)aminoethane分子式:C4H11NO3Tris-HCl缓冲液(0.05mol/L,25℃)TRIS是一种最常用的生物缓冲液,常配成PH值为6.8,7.4,8.0,8.8。
其PH值随温度变化很大。
温度每升高一度,PH值下降0.03,应注意温度对于Tris的pKa的影响。
1M TRIS-HCl 6.8和1.5M TRIS-HCl 8.8是SDS-PAGE最常用的试剂。
而由TRIS配成的TAE,TBE等是DNA电泳最常用的试剂,TE(PH8.0)主要用于溶解DNA。
pbst中吐温20的作用
pbst中吐温20的作用PBST(磷酸盐缓冲生理盐水)是一种常用的缓冲液,经常在生物学、分子生物学、免疫学等领域中用作实验中的溶液或试剂。
吐温20(Tween 20)则是一种非离子表面活性剂,具有良好的增溶、分散和乳化性能。
PBST中加入吐温20的目的是为了改善其溶解能力和稳定性,并增强与生物样品的相容性,提高试剂与目标分子的结合效率和检测灵敏度。
以下是PBST中吐温20的主要作用:1.增强稀溶液的稳定性:PBST中加入吐温20后,可以增加试剂或溶液的稳定性,防止试剂的沉淀和结晶。
2.增强试剂与生物样品的相容性:在生物学实验中,涉及到对蛋白质、细胞和细胞器等生物样品的处理。
敏感的生物样品通常需要在一定的缓冲液中进行处理,而PBST中的吐温20可以增加溶液与生物样品之间的相容性,减少可能对生物样品造成的损伤。
3.增强抗原和抗体之间的结合能力:在免疫学实验中,PBST中添加吐温20可以促进抗原和抗体之间的结合,提高抗体结合分子的检测灵敏度。
吐温20作为表面活性剂,可以减小非特异性结合,同时提高特异性结合,增加试剂与目标物质之间的亲和性。
4.减少非特异性结合:非特异性结合是在实验中经常遇到的问题之一、PBST中加入吐温20可以减少非特异性结合的发生,提高实验的特异性,减少干扰因素。
5.增强离子束制备试剂的效果:在离子束制备的过程中,PBST中的吐温20可以起到增溶的作用,提高离子束制备试剂的有效含量,加强离子束制备试剂对靶物质的捕获效果。
总之,PBST中吐温20的加入在各个实验条件下可以发挥相应的作用,从而提高实验的效果和结果的准确性。
它们的使用广泛且多样化,可以根据实验的具体需求进行调整和优化。
TBST缓冲液配制及使用方法
TBST缓冲液配制及使用方法1.材料准备- 10×TBST缓冲液:10倍浓缩的Tween-TBS缓冲液,可以购买现成的或根据配方自制。
-纯水:去离子水或超纯水。
- Tween-20:一种非离子表面活性剂,用于减小蛋白质与试管内表面的非特异性吸附。
2.计算配制量-计算需要的TBST缓冲液总体积,根据实验需求决定,通常在100mL 到1L之间。
-计算所需的10×TBST缓冲液的体积。
3.配制缓冲液- 按照10×TBST缓冲液中Tween-TBS和纯水的比例来计算Tween-TBS和纯水的体积。
- 将计算得出的所需体积的Tween-TBS缓冲液加入容器中。
-加入等量的纯水,搅拌均匀。
4.调整pH值(如果需要)-使用pH计检测缓冲液的pH值。
-如有必要,可使用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)来调节pH值,直至达到所需的范围。
5.储存缓冲液-将配制好的TBST缓冲液分装到小容器中,标注好日期和成分。
-在4℃储存。
1.实验准备-准备含有蛋白质的样品及所需试管或膜。
-加载样品前,可以使用TBST缓冲液对膜进行预洗。
2.膜的洗涤-将膜置于一个容器中,加入足够的TBST缓冲液来完全浸泡膜。
-建议使用摇床、旋转器或烧杯辊转器进行洗涤,方法可根据实验需求来选择。
-进行洗涤的时间和次数可以根据实验需求进行调整,通常洗涤3次,每次5分钟。
3.洗涤液的丢弃-将洗涤液倒入废液容器中,避免直接排入下水道。
4.试管的洗涤-将试管置于容器中,加入足够的TBST缓冲液来完全浸没试管。
-摇动容器,将TBST缓冲液彻底洗涤试管表面。
5.使用洗涤后的试管-待试管干燥后,可以进行进一步的实验步骤,如添加试剂或继续处理样品。
关于TBST缓冲液的注意事项:1. 在配制TBST缓冲液时,严格按照配方比例来计算Tween-TBS和纯水的体积,以确保溶液浓度的准确性。
2.制备好的缓冲液应避免与污染物接触,如灰尘、细菌等。
tween20结构式
tween20结构式Tween20结构式分析Tween20,又称辛醇聚氧乙烯醚硬脂酸酯,是一种非离子型表面活性剂。
它由辛醇和聚氧乙烯醚硬脂酸酯组成,具有极好的表面活性和乳化性能,在多个领域得到广泛应用。
本文将对Tween20的结构式进行详细的分析,以便更好地了解它的化学结构和性质。
1. Tween20的化学结构Tween20的化学式为C58H114O26,摩尔质量为1227.54g/mol。
它属于聚醚类表面活性剂,由若干个氧乙烯基(–C2H4O–)和一个脂肪酸酯基团组成。
具体来说,Tween20有一条辛醇链与20个氧乙烯基形成聚合物,而脂肪酸酯基团则与辛醇链相连。
这种结构使得Tween20既具有脂溶性,又具有亲水性,使其成为一种疏水性和亲水性共存的分子。
2. Tween20的性质Tween20是一种非离子型表面活性剂,它在水中具有良好的溶解性,能够形成透明的溶液。
由于其分子结构中含有氧乙烯基,使得它具有以下性质:2.1. 表面活性Tween20具有极好的表面活性,即在水-油界面上形成极薄的分子层,能够降低水的表面张力,改变液体表面的性质。
这种表面活性使得Tween20在乳化、稳定乳液和分散颗粒等方面发挥重要作用。
2.2. 乳化性能由于Tween20分子结构中的脂肪酸酯基团,使其具有较好的乳化能力。
当Tween20加入水中时,它能够包裹住水-油界面,形成胶束结构,将油滴分散在水相中,从而实现乳化效果。
这种乳化性能使得Tween20广泛应用于食品工业、制药工业和化妆品工业等领域。
2.3. 渗透性Tween20具有较好的渗透性,能够促进其他溶质分子进入脂质双层结构中。
这一特性使得Tween20在药物输送系统中具有重要作用,可以提高药物的渗透性和吸收率。
3. Tween20的应用由于Tween20优异的性质和广泛的应用领域,它被广泛应用于以下几个方面:3.1. 食品工业Tween20在食品工业中常被用作乳化剂、稳定剂和增稠剂等。
免疫印迹(WB)实验操作具体步骤及详细说明
免疫印迹(WB)实验操作具体步骤及详细说明一、试剂和溶液转印缓冲液:0.025M Tris base , 0.187 M 甘氨酸, 25%甲醇氨基黑溶液:0.1% 酸性黑10B 1×TBST:25mM Tris-HCl ( pH 8.0 ) , 0.2 M NaCl , 0.1%Tween 20 封闭液:TBST 配制的5%牛奶抗体稀释液:TBST 配制的5%牛奶显色系统:ECL 显色二、实验步骤1.电泳:将裂解液进行SDS-PAGE 电泳,80v,30 分钟,120v,90 分钟;2.转膜:PVDF 膜在甲醇中浸泡约30 秒左右,滤纸浸泡在转印缓冲液预湿,半干法转印到PVDF 膜上,10v,150 分钟;3.染色:氨基黑染色5 分钟,甲醇褪去背景色,观察条带;4.膜活化:将PVDF 膜置于甲醇活化1min,用纯水洗膜2 次后再用TBST 洗涤3 次;5.封闭:将膜条置于5%牛奶或2% BSA 中,室温混摇2h;6.一抗孵育:将待检抗体用3%牛奶或2% BSA 稀释到合适浓度(参照抗体说明书,根据客户预实验结果,稀释度上下浮动一个数量级都为正常),将膜放入对应的已稀释待检样品中,置4℃混摇孵育过夜;7.洗涤:取出膜放在TBST 中洗涤3×5min;8.二抗孵育:将膜取出放入稀释好的HRP 标记的二抗(参照二抗说明书进行稀释)中,室温混摇2h;9.洗涤:取出膜放在TBST 中洗涤3×5min;10.ECL 显色:将膜取出放入混匀的ECL 显色液中,孵育3min,将膜取出贴在有荧光角标的胶片上,迅速用保鲜膜包好;11.曝光:把底片放在暗盒中,根据荧光强度分别对X 光胶片作不同时间段的曝光,曝光结束后,将底片取出,1min 显影,30s 清洗,1min 定影,30s 清洗,晾干;12.结果分析:用扫描仪将曝光后的X 光胶片扫描,做后续结果分析。
蛋白免疫印迹杂交(WesternBlot)技术手册
蛋白免疫印迹杂交〔Western Blot〕技术手册A蛋白样本提取制备蛋白样品制备是Western Blotting 的第一步,更是打算WB 成败的关键步骤,总体原则和留意事项:1:尽可能提取完全或降低样本简洁度只集中于提取目的蛋白〔通过承受不同提取方法或选择不同的试剂盒产品〕2:保持蛋白的处于溶解状态〔通过裂解液的PH 盐浓度外表活性剂、复原剂等的选择〕3:提取过程防止蛋白降解、聚拢、沉淀、修饰等,〔低温操作,参与适宜的蛋白酶和磷酸酶抑制剂〕4:尽量去除核酸,多糖,脂类等干扰分子〔通过参与核酸酶或实行不同提取策略〕5:样品分装,长期于-80℃中保存,避开反复冻融。
A-1细胞或组织裂解A-1-1细胞裂解裂解液Lysis buffer 或商品化蛋白抽提试剂盒的选择*目的蛋白分布定位推举裂解液Lysis buffe 推举试剂盒全细胞NP-40 or RIPA〔附录1〕全蛋白抽提试剂盒细胞质〔可溶蛋白〕Tris-HCl〔附录1〕胞浆蛋白和核蛋白抽提试剂盒线粒体蛋白提取试剂盒细胞质〔细胞骨架等不溶蛋白〕Tris-Triton〔附录1〕蛋白分级抽提试剂盒细胞质〔磷酸化蛋白〕磷酸化蛋白抽提试剂盒细胞膜NP-40 or RIPA〔附录1〕膜蛋白抽提试剂盒蛋白分级抽提试剂盒细胞核RIPA〔附录1〕核蛋白抽提试剂盒线粒体RIPA〔附录1〕线粒体蛋白抽提试剂盒亚细胞定位蛋白抽提试剂盒细胞裂解操作方法:1培育的细胞经预冷的PBS 漂洗2 次,裂解液中参与蛋白酶和磷酸酶抑制剂〔种类与量见本节2〕2吸净PBS,参与预冷的裂解液,〔(1 ml per 107cells/100mm dish/150cm2flask; 0.5ml per 5x106cells/60mm dish/75cm2flask).3用细胞刮子刮取贴壁细胞,将细胞及裂解液温存地转移至预冷的微量离心管中,44℃摇动30 min54℃离心12,000 rpm,20 min〔根椐细胞种类不同调整离心力〕6轻轻吸取上清,转移至预冷的微量离心管中置于冰上,即为蛋白样本,弃沉淀.A-1-2组织裂解1 用灭菌的预冷的工具分别目的组织,尽量置于冰上以防蛋白酶水解,2 将组织块放在圆底的微量离心管或Eppendorf 管中,参与液氮冻结组织于冰上均质研磨,长期可保存于-80°C,3每约5 mg 参与约300 μl 预冷的裂解液lysis buffer,冰浴匀浆后置于4℃摇动2 小时,裂解液体积与组织样本量有适当比例,〔最终的蛋白浓度至少到达0.1 mg/ml, 抱负的蛋白浓度应为1-5 mg/ml).44℃离心12,000 rpm,20 min,轻轻吸取上清,转移至预冷的微量离心管中置于冰上,即为蛋白样本,弃沉淀,A-2蛋白酶和磷酸酶抑制剂推举购商品化蛋白酶和磷酸酶抑制剂复合试剂盒或COOKTAIL。
Tween 20溶液(10%,无菌)
北京雷根生物技术有限公司
Tween 20溶液(10%,无菌)
简介:
吐温20又称Tween 20或聚氧乙烯20,属于离子表面活性剂,是山梨醇及其一失水、双失水化合物与月桂酸酯按每摩尔山梨醇及其脱水化合物与约20摩尔的环氧乙烷在碱性条件下缩合而制得,CAS 号为9005-64-5。
Tween 20常用浓度为0.1%和1%,其中0.1%的Tween 20常用于漂洗PVDF 膜或硝酸纤维素膜。
通常是先配制成10-20%的ween 20储备液,临用时稀释至所需浓度。
Leagene Tween 20溶液(10%,无菌)主要由Tween 20、去离子水等组成,经无菌处理,常用作去污剂或活性剂等。
该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、该试剂浓度较高,一般稀释至0.1%-2%后使用。
2、当用于漂洗PVDF 膜或硝酸纤维素膜配制TBST 时,其工作浓度为0.05-0.1%。
注意事项:
1、注意无菌操作,避免细菌等污染。
2、温度较冷时,有可能产生絮状无或者结晶,应25-37℃温浴至完全溶解。
有效期:6个月有效。
相关:编号
名称R00288
Storage Tween 20溶液(10%,无菌)
100ml 4℃使用说明书1份
编号
名称DC0032
Masson 三色染色液TC1167尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)。
tbst成分
tbst成分TBST成分(tris-buffered saline with tween-20)是一种常用的缓冲溶液,常用于蛋白质和抗体的免疫检测实验中,其成分包括Tris缓冲液、NaCl盐和Tween-20表面活性剂。
本文将详细介绍TBST 成分的组成以及其在实验中的应用。
首先,我们来了解一下TBST的主要成分之一——Tris缓冲液。
Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常用的缓冲剂,具有良好的缓冲性能和稳定性。
它的pH范围可以调整到酸性和碱性条件下,通常在实验中pH值设置为7.4。
Tris缓冲液可以稳定溶液的酸碱度,有助于保持试样的稳定性。
其次,TBST中的另一个重要成分是NaCl盐。
NaCl是一种常见的盐类,易于溶解在水中。
在实验中,加入适量的NaCl可以调节溶液的渗透压,促进离子的稳定性并提高试样的稳定性。
此外,NaCl还可以调整溶液的结构和性质,并可以防止试样在实验过程中发生变性。
最后一个成分是Tween-20表面活性剂。
Tween-20是一种非离子表面活性剂,是一种具有良好溶解性的高度可溶于水的胆甾醇衍生物。
在实验中,Tween-20可以有效地防止非特异性结合,并降低非特异性背景信号的产生。
它可以增强抗体与目标蛋白质的特异性结合,提高免疫检测实验的灵敏度和特异性。
在实验中使用TBST有很多优点。
首先,TBST中的Tween-20可以有效降低非特异性背景信号,提高实验的灵敏度。
其次,TBST可以帮助防止抗体的非特异性结合,并提高抗体与目标蛋白质的特异性结合。
此外,TBST可以提供良好的缓冲性能,有助于稳定试样和维持实验的稳定性。
最后,TBST的制备相对简单,成本低廉,适用于大规模的实验操作。
当然,TBST也有一些缺点。
首先,Tween-20是一种表面活性剂,在特定条件下可能导致一些蛋白质异常聚集和沉淀。
其次,TBST在某些特定实验中可能无法满足需求,因为某些实验对缓冲液的成分和条件有更高的要求。
0.01M PBS (pH 7.4)配制标准操作规程
编号:YF-001 实验室PBS缓冲液配制标准操作规程
版次:第一版/0 第1页/共1页
0.01M PBS (pH 7.4)配制标准操作规程
1.目的
建立实验室PBS缓冲液配制标准操作规程,确保溶液的配制准确
2.适用范围
0.01M PBS pH7.4缓冲液配制。
3.溶液配制前
3.1 配制前确认药品是否足够,不足的按名称、编号、规格、数量等填写限额领料单给领料员到仓库领料。
3.2 领取的药品需具有合格标签,并在有效期内。
3.3 准备配制所用的试剂瓶、烧杯和烧瓶等,检查是否已清洁并且干燥。
4. 溶液配制(以1000mL为例)
4.1 称量:用电子分析天平按下表称取药品并做好记录,倒入1000ml烧杯中。
4.2 溶解:用量筒量取800mL纯化水倒入烧杯中,放入搅拌转子,并放到磁力搅拌器上搅拌至完全溶解。
4.3 pH调节:用校准后的pH计测量上述溶液的pH,用0.1M的HCl或NaOH调整pH=7.40±0.05。
4.4 定容:将上述完全溶解的溶液到入1000ml容量瓶,并用少量纯化水冲洗烧杯后,倒入容量瓶,重复3次,将容量瓶中的液体用纯化水补充至刻度线,塞上盖子后上下颠倒10次,确保溶液充分混匀。
4.6 过滤:
4.7 移瓶:将定容后的溶液倒入洁净蓝色盖子的玻璃瓶,在瓶身上标明品名、体积、日期、有效期、操作者等信息。
4.8 存储:该溶液于(4~30)℃,可保存6个月。
5.溶液配制完成后
5.1 按要求填写溶液配制记录。
5.2 关闭仪器,填写仪器使用记录。
5.3 清理实验场地,清洗烧杯、容量瓶、转子等。
Westernblot中Tween-20的作用是什么?应该怎么用?
Westernblot中Tween-20的作用是什么?应该怎么用?文章转自英格恩生物技术博客!Western blot的洗液TBST是实验室常用的配制液体,对于TBST 的配方也基本上相差不多,其中配方中就有一种组分是Tween-20,一种黄色或琥珀色澄明的油状液体,具有特殊的臭气和微弱苦味。
用移液枪吸取时会有一种滞后感。
为什么在Western blot的洗液TBST 中要加入这么一种试剂,Tween-20在Western blot 中在发挥什么样的作用呢?Tween-20首先了解一下什么是Tween-20。
Tween-20也写作Tween 20,也称Polyethylene glycol sorbitan monolaurate,中文名为吐温-20或吐温20。
Tween-20为黄色或琥珀色澄明的油状液体,具有特殊的臭气和微弱苦味。
分子中含有较多的亲水性基团,可与水、甲醇、乙醇、异丙醇、丙二醇、乙二醇、棉子油等混溶。
是常用的非离子性去垢剂。
Tween-20的应用Tween-20是一种非离子型表面活性剂。
用途为水包油乳化剂、可用作溶剂、扩散剂、稳定剂、润滑剂和抗静电剂等。
气相色谱固定液(最高使用温度120℃)分离分析挥发油、脂肪酸酯、醇、酮和卤化物。
Tween-20在Western blot 中的作用?Western blot的操作流程中大部分都用到TBST洗液,而且还是封闭,一抗二抗孵育这种比较关键的步骤。
通常Tween-20作为一种非离子型表面活性剂,效果和SDS、BSA作用差不多,主要是封闭膜上蛋白的非结合位点,以降低背景,增强抗体的特异性结合。
理想的封闭剂应该封闭所有未结合位点而不替换膜上的靶蛋白、不结合靶蛋白的表位、也不与抗体或检测试剂有交叉反应。
如果脱脂牛奶封闭效果不好可以提高吐温浓度。
在WB洗液里的吐温是和BSA一样,对抗原抗体蛋白提供保护作用,同时因为是表面活性剂(司盘加成亲水的环氧乙烷基团后的化合物),可以减少抗体对抗原的非特异性作用,用于洗脱未结合的抗体、减少非特异性结合。
Tween20TBS溶液(20×TBST,pH7.4)
北京雷根生物技术有限公司
Tween20/TBS 溶液(20×TBST,pH7.4)
简介:
Tris 缓冲盐溶液简称TBS, 属于常规pH 缓冲液,常用于清洗Western Blot 中蛋白印迹膜,或者配制封闭液,是常用分子生物学试剂。
在TBS 的基础上加入一定比例的Tween 20,能够大大增强TBS 的洗涤作用。
Leagene Tween20/TBS 溶液(20×TBST,pH7.4)主要成分为Tris-HCl(pH7.4)、氯化钠Tween 20、防腐剂等,主要用于Western Blot 中PVDF 、NC 膜的洗涤,亦可作为封闭液的基础试剂。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 根据实验具体要求操作。
2、 一般稀释,进行下游实验。
3、 清洗膜时,重复3次。
注意事项:
1、 如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
相关:
编号 名称 PW0026 Storage Tween20/TBS 溶液(20×TBST,pH7.4) 500ml 4℃ 使用说明书 1份 编号 名称 NR0003
Lezol(总RNA 提取试剂) PT0013
考马斯亮蓝快速染色液 PW0034
Western 转移缓冲液(NC,PVDF) PW0040
Western blot 一抗稀释液 PW0084
丽春红S 染色储存液(10×Ponceau S) TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)。
TBST缓冲液配制及使用方法精选文档
T B S T缓冲液配制及使用方法精选文档TTMS system office room 【TTMS16H-TTMS2A-TTMS8Q8-TBST缓冲液TBST是TBS+Tween的缩写,TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液,为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液用1N HC1调pH至7.4,Tween为一种非离子型去污剂,有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力.如果配置1000ml的TBST:•先称量NaCl40g,倒入烧杯中,加DDW蒸馏水400ml,再称量NaCl47.6g,倒入刚才的那个烧杯中,:由于NaCl的量太多,一次称量不方便,所以分两次称量,且易于溶解)。
往烧杯中加入Tris—HCl缓冲液100ml,最后加吐温20,5ml,转入1000ml容量瓶中,在定容,转移即可。
TBST缓冲液是以进口粉剂为原材料配制,品质稳定。
·主要用于免疫组化和原位杂交,酶联免疫等实验中,清洗免疫印迹膜;·无色液体,0.22 μm膜过滤纯化;·室温储存,效期为18个月;使用说明· 1×TBST缓冲液配制:900 ml去离子水与100 ml 10×TBST缓冲液充分混匀;友情提示·室温条件下保存,如果低温保存溶液,可能会产生沉淀,可摇晃或加热溶解;为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;用来洗细胞的TBS/PBS最好加KCl,这样比较接近体液的电解质比例其他用途如WB 等可以忽略,只要电导和离子浓度符合要求就可以了。
个别去垢剂如SDS遇到钾会沉淀,所以更不能加KClpH和盐浓度看自己需要而定,不用拘泥于书本,当然一般来说是等渗的150mM NaClTrisBufferedsalineTween,10X(TBST缓冲液,10X)产品组成保存条件:1:室温保存,12个月2:如果低温保存溶液,可能会有晶体沉淀产生,可通过摇晃或加热溶解即可使用。
tbs成分
tbs成分TBS成分TBS,即Tween-20、BSA和Tris,是生物化学实验中常用的三种试剂。
它们各自具有不同的性质和作用,被广泛应用于蛋白质分离、免疫印迹、酶联免疫吸附实验等领域。
下面将按照类别分别介绍这三种试剂。
Tween-20Tween-20是一种非离子表面活性剂,具有良好的分散性和稳定性。
它可以在水相和有机相之间形成乳化液,使得水相中的蛋白质分子能够均匀地分散在有机相中。
因此,在蛋白质分离实验中,Tween-20常被用作洗涤剂,可以有效地去除非特异性结合的蛋白质,提高检测的灵敏度和特异性。
此外,Tween-20还可以用于细胞膜的破碎和蛋白质的溶解,有助于提取和纯化膜蛋白和细胞内蛋白。
BSABSA,即牛血清白蛋白,是一种常见的蛋白质标准品。
它具有良好的溶解性和稳定性,可以用于标定蛋白质的浓度和检测蛋白质的纯度。
在免疫印迹和酶联免疫吸附实验中,BSA常被用作阻断剂,可以有效地防止非特异性结合和背景信号的产生。
此外,BSA还可以用于细胞培养基的配制和细胞培养过程中的蛋白质补充,有助于提高细胞的生长和增殖。
TrisTris,即三羟甲基氨基甲烷,是一种缓冲剂。
它具有良好的缓冲能力和稳定性,可以在生物化学实验中维持溶液的pH值。
在蛋白质分离和检测实验中,Tris常被用作电泳缓冲液和显色缓冲液,可以保证电泳和显色的稳定性和准确性。
此外,Tris还可以用于细胞培养基的配制和细胞培养过程中的pH调节,有助于维持细胞的正常生长和代谢。
综上所述,TBS成分是生物化学实验中常用的三种试剂,分别具有不同的性质和作用。
它们的应用广泛,可以提高实验的准确性和可靠性,为生物化学研究提供了重要的支持和保障。
20×TBS缓冲液说明书
北京索莱宝科技有限公司
20×TBS缓冲液说明书
货号:T1080
规格:500ml
保存:室温储存,有效期至少12个月。
产品简介:
TBS缓冲液是生物学中常使用的等渗缓冲盐溶液,主要用于免疫组化和原位杂交,酶联免疫等实验中,清洗免疫印迹实验中非特异性结合的抗体等。
由Tris-HCl构成稳定的PH缓冲体系,NaCl提供等渗条件。
本产品为20×浓缩液,稀释后使用。
组分浓度
Tris200mM
NaCl3M
PH7.5-7.6
使用说明:
1×TBS缓冲液配制:量取50ml20×TBS缓冲液,加入950ml去离子水定容至1L,充分混匀。
注意事项:
4℃保存可延长产品保质期,长期不用建议低温保存。
若产品出现结晶析出,请置于37℃水浴至完全溶解。
使用时稀释成1×,可加入0.05%Tween-20,用于免疫印迹膜清洗。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
第1页共1页。
ELISA洗涤液(10×,pH7.4)
北京雷根生物技术有限公司
ELISA 洗涤液(10×,pH7.4)
简介:
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ,BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致,具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用,可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
Leagene ELISA 洗涤液(10×,pH7.4)主要由磷酸氢二盐、磷酸二氢盐、去污剂、防腐剂等组成,主要用于ELISA 实验中洗涤96孔板以便洗去多余的抗体,使用前用去离子水稀释至1×。
本试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
自备材料:
1、 96孔板
2、 显色底物
3、 水浴锅
4、 ELISA 终止液
操作步骤(仅供参考):
1、 按要求包被96孔板。
2、 使用前用去离子水稀释至1×,用1×ELISA 洗涤液洗涤数次。
3、 孵育完抗体后,用1×ELISA 洗涤液洗涤96孔板。
4、 。
注意事项:
1、 注意密闭保存,避免挥发。
一旦开封,保质期就会大大缩短。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
亦可短期内室温存储。
编号 名称 IT0012 Storage ELISA 洗涤液(10×,pH7.4) 500ml 4℃ 使用说明书 1份。
tbst成分
tbst成分
TBST中含有Tris-Hcl,NaCl,tween20 这三种物质,是做WESTERN BLOT中常用的一种缓冲溶液。
TBST是TBS+Tween的缩写,TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液,为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液
用1N HC1调pH至7.4,Tween为一种非离子型去污剂,有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力。
拓展资料:
PBS和PBST 差别:
PBST中由PBS 加入了Tween 20, Tween 20 是非离子型去污剂。
因为western 中所用的膜可以与蛋白质结合,这样的话孵育过程中,抗体是能够与膜非特异性结合的,为了防止以后曝光造成胶片背景太高,在孵育抗体后,混有Tween 2的PBS 能够将非特异性结合的抗体洗掉,增加特异性。
在抗体的保存中,抗体往往是以极高浓度保存在甘油之中的,使用的时候按照一定的比例去稀释,TBST 跟TBS 都可以用来稀释抗体,以做孵育抗体之用。
TBSTtaetoweentbe
TBSTtaetoweentbe————————————————————————————————作者:————————————————————————————————日期:TBST是什么?TBST中含有Tris-Hcl,NaCl,tween20这三种物质,是做WESTERN BLOT 中常用的一种缓冲溶液T ris-B uffered S aline and T ween 20可作为缓冲液,也可作洗涤液(可用TBST洗NC膜)TBST洗涤缓冲液的全称试什么?TB S T是TB S+Tween的缩写,TB S是Tris-HCl缓冲盐溶液,为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液用1N HCl调pH至7.4,Tween为一种非离子型去污剂,有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力。
用途:Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。
Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。
Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans)核纤层蛋白(lamin)的中间纤维的形成。
Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。
Tris也被用作滴定标准物。
作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用Tris,最好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。
Tris中文别名:三(羟甲基)氨基甲烷;氨丁三醇;缓血酸铵;三羟甲基氨基甲烷;Tris;英文名称: Tris(hydroxymethyl)aminoethane分子式:C4H11NO3Tris-HCl缓冲液(0.05mol/L,25℃)TRIS是一种最常用的生物缓冲液,常配成PH值为6.8,7.4,8.0,8.8。
其PH值随温度变化很大。
温度每升高一度,PH值下降0.03,应注意温度对于Tris的pKa的影响。
1M TRIS-HCl 6.8和1.5M TRIS-HCl 8.8是SDS-PAGE最常用的试剂。
而由TRIS配成的TAE,TBE等是DNA电泳最常用的试剂,TE(PH8.0)主要用于溶解DNA。
tween20 结构式
tween20 结构式Tween20,即聚山梨醇酯20,是一种非离子表面活性剂,常用于生物化学和生命科学领域。
它是由山梨醇与20个分子的环氧乙烷反应而成,具有许多特殊的性质和应用。
一、Tween20的特性Tween20是一种亲水性的表面活性剂,能够在水中形成胶束结构。
它的分子结构中含有一个疏水链和一个亲水的山梨醇基团。
这种结构使得Tween20能够在水和油之间形成稳定的乳状液体,具有较好的乳化和分散性能。
二、Tween20的应用1. 在生物化学实验中,Tween20常用作洗涤剂和溶解剂。
由于其良好的分散性能和低毒性,它常用于蛋白质和核酸的提取、纯化和分析过程中。
在蛋白质电泳中,Tween20可用于增加样品的溶解度,提高电泳效果。
2. 在细胞培养中,Tween20可以用作细胞培养基的组分之一。
它能够增强细胞对营养物质的吸收和代谢,有利于细胞生长和增殖。
3. 在生物医药领域,Tween20常用于制备药物的纳米粒子和纳米乳剂。
它可以改善药物的溶解性和稳定性,提高药物的生物利用度和疗效。
4. 在食品工业中,Tween20可用作乳化剂和稳定剂,常用于制备乳酸饮料、冷冻甜点和乳制品等。
三、Tween20的优点1. 与其他表面活性剂相比,Tween20具有较低的毒性和刺激性,对生物体影响较小。
2. Tween20易于溶解在水中,并能够与其他溶剂和物质充分混合。
3. Tween20具有较好的稳定性,能够在不同温度和pH条件下保持其性能稳定。
4. Tween20对大多数生物分子具有良好的相容性,不易与其发生反应或产生不良影响。
总结:Tween20是一种非离子表面活性剂,具有良好的分散性能和稳定性。
它在生物化学和生命科学领域具有广泛的应用,如蛋白质和核酸的提取、细胞培养、制备纳米药物和食品工业等。
Tween20的优点包括低毒性、易溶性、稳定性和相容性。
通过合理应用Tween20,可以提高实验效果和产品质量,推动科研和工业的发展。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
北京雷根生物技术有限公司
Tween20/TBS 溶液(20×TBST,pH7.4)
简介:
Tris 缓冲盐溶液简称TBS, 属于常规pH 缓冲液,常用于清洗Western Blot 中蛋白印迹膜,或者配制封闭液,是常用分子生物学试剂。
在TBS 的基础上加入一定比例的Tween 20,能够大大增强TBS 的洗涤作用。
Tween20/TBS 溶液(20×TBST,pH7.4)主要成分为Tris-HCl(pH7.4)、氯化钠Tween 20、防腐剂等,主要用于Western Blot 中PVDF 、NC 膜的洗涤,亦可作为封闭液的基础试剂。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 根据实验具体要求操作。
2、 一般稀释至1×,进行下游实验。
3、 清洗膜时,每次5~10min ,重复3次。
注意事项:
1、 如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 PW0026 Storage Tween20/TBS 溶液(20×TBST,pH7.4) 500ml 4℃ 使用说明书 1份。