分子诊断学试卷

分子诊断学试卷A

二、填空（每空0.5分，共15分。请将答案填写在答题纸上）

1.从高温嗜热细菌中发现高温DNA polymerase后，使得PCR技术得以广泛应用，在高温下有活性的DNA

polymerase有⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽、⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽、⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽、⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽。其中具有3’-5’外切活性的高温DNA polymerase有⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽和⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽⎽。

2.黏粒(cosmid)是质粒－噬菌体杂合载体，它的复制子来自、cos位点序列来自，最大的克隆片段达到45

kb。

3.感受态细胞(Competent cells)是一种处于_________________________状态的细胞。一般通过__________

来诱导大肠杆菌感受态的形成。

4.PCR反应过程分为三个步骤，即，和。

5. 细菌的移动基因存在着三种类型的转位因子包括、、。

6.Klenow酶在情况下，呈现DNA聚合酶活性，在情况下呈现外切酶活性。

7. 外源基因在原核细胞中表达，常用的启动子有、、、和。

8. 在Lac Z标记基因插入外源基因，经IPTG诱导，在X-gal培养基中显色，为性克隆，未插入基因的克

隆显色，为性克隆。

9. 基因序列经碱基替代，缺失或插入后，可使遗传信息产生三种不同的后果，分别为、、。

10.由一个细胞或者组织的基因组所表达的全部相应的蛋白质，称为。

三、判断题（错的打“×”，对的打“√”，每题1分，共10分。请将答案填在答题纸对应的题号下）

1. Maxam-Gilbert化学降解法测序时，从测序胶上直接读出的序列是用于测序的模板的互补序列。

2. 蛋白酶K可有效地降解内源蛋白，能快速水解细胞裂解物中的DNA酶和RNA酶，以利于

完整DNA和RNA的分离。

3. 电泳时EB加在琼脂糖凝胶中一般会降低DNA在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率。

4. 提取DNA时，若用酚除蛋白质，需要用Tris-HCl对酚进行平衡,pH达7.8。

5. 基因组研究可以归纳成为构建4张相互关联的基因组图谱：遗传图、物理图、序列图和功能图。

6. DNA连接酶是一种能催化二条DNA链之间形成磷酸二酯键的酶，因此该酶既可修复基因序列中的缺口，

也可修复裂口。

7. 质粒提取后，在琼脂糖电泳出现一条带时说明质粒提取纯度高，当为三条带时为纯度不高。

8. COS位点，COS质粒，COS细胞它们均含有用于自身环化的12个碱基的互补粘性末端。

9. 入噬菌体的插入型载体只有一个单一限制酶切点，替换型载体有2个成对的限制性酶切点。

10. 原核细胞和真核细胞转录的mRNA均具有与rRNA结合的SD序列，以利于进行有效的转录。

四、选择题（每题1分，共15分。请将最佳答案填在答题纸对应的题号下）

1. 用于核酸分子杂交的探针不能是放射性标记的( )。

A．DNA B．RNA C．抗体D．寡核苷酸

2. cDNA文库包括该种生物的( )。

A．某些蛋白质的结构基因B．所有蛋白质的结构基因

C．所有结构基因D．内含子和调控区

3. 关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确?( )

A．溶液I的作用是悬浮菌体B．溶液Ⅱ的作用是使DNA变性

C．溶液Ⅲ的作用是使DNA复性

D．质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性

4. 有关DNA 序列自动化测定的不正确叙述是（）。

A．不再需要引物B．激光扫描分析代替人工读序

C．基本原理与手工测序相同D．用荧光代替了同位素标记

5. 在重组DNA 技术中，不常用到的酶是（）。

A．限制性核酸内切酶B．DNA 聚合酶C．DNA 连接酶D．DNA 解链酶

6. 关于cDNA 的最正确的说法是（）。

A．以mRNA 为模板合成的双链DNA B．同mRNA 互补的单链DNA

C．同mRNA 互补的双链DNA D．以上都正确

7. 在分离DNA 过程造成DNA 分子断裂的因素很多，下列说法中哪一项是不正确的（）。

A．核酸酶的降解B．化学降解C．保存液中未加一滴氯仿D．物理剪切

8. 下列哪一项不是Southern blotting 的步骤（）。

A．用限制酶消化DNA B．DNA 与载体的连接

C．凝胶电泳分离DNA 片段D．DNA 片段转移到硝酸纤维膜上

9. 下列哪种克隆载体对外源DNA 的装载量最大（）。

A．粘粒B．酵母人工染色体C．质粒D．λ噬菌体

10. 人工染色体载体必须具有的元件是（）。

A．染色体端粒B．着丝粒C．自主复制序列D．以上三项全部

11. λ噬菌体外包装目的基因片段的大小应为（）。

A.小于λ噬菌体DNA的50%

B. 小于噬菌体DNA的75%

C.大于λ噬菌体DNA的105%

D.为λ噬菌体DNA的75%～105%

12.识别基因序列不同，但酶切后产生的粘性末端相同的一类酶为（）。

A.同工酶

B.同尾酶

C.同裂酶

D.同位酶

13.下列生物体的细胞基因组哪些会有断裂基因？（）

A.大肠杆菌

B.乙肝病毒

C.人

D.噬菌体

14. 真核细胞基因表达的特点为（）。

A.单顺反子

B.多顺反子

C.转录和转译连续进行D .转录和转译在同一时空进行

15. pBR322质粒作为基因克隆载体不具有下列何种调控元件（）。

A.Amp r和Tet r

B.ori复制子

c Z标记

D.多克隆位点

五、问答题（共36分，请将答案填写在答题纸对应的题号下）

1. 真核细胞基因组中的基因常有内含子存在，能否在原核细胞中表达？为什么？（5分）

2. 质粒单酶切点的基因连接如何降低本底和防止自我环化和提高连接效率？（6分）

3. 真核表达调控的顺式作用元件有哪些？其作用特点是什么？（8分）

4. 基因工程疫苗研究开发应遵循的原则是什么？（8分）

5. 有哪几种反义核苷酸基因失活疗法？简述其原理。（9分）

答案-试卷A

一、名词解释（每题3分，共24分。请将答案填写在答题纸上）

1. 分子诊断：是指通过检测基因的结构异常或其表达异常，对人体的健康状况和疾病做出诊断的方法。

2. 实时定量PCR(real-time PCR)：7.实时PCR：通过特定设计的PCR 仪器来实时检测PCR 扩增过程每

一轮循环产物的累积数量，推算模板的起始浓度，这种工作方式就称为实时PCR

3. 重叠基因：不同基因的核苷酸序列有时为相邻两个基因共用，将核苷酸彼此重叠的两个基因称为重叠基

因

4. 锌指结构：由两个半胱氨酸（Cys）残基和两个组氨酸（His）残基通过位于中心的锌离子结合成一个稳

定的指状结构, 并以锌辅基敖合形成的环状结构作为活性单位, 在指状突出区表面暴露的碱基及其极性氨基酸与DNA结合有关

5. 基因置换：是指将致病基因整个地被有功能的正常基因所置换，使致病基因永久地得到更正。

6. 基因敲除：基因敲除是向正常生物个体内引入某个突变的基因位点而选择性地使某特定基因功能失活的

技术。

7.基因芯片：将大量的基因片段有序地、高密度地排列在玻璃片或纤维膜等载体上，称之为基因芯片（又