HPLC法测定动物组织中己烯雌酚的含量

［ ２ ］Ｇ Ｂ ／ Ｉ ＇ ５ ０ ０ ９ ． １ ０ ８— ２ ０ ０ ３ ． 食 品卫 生检 验方法 ・ 理 化部分 （ 二） ［ Ｓ ］ ． ［ 作 者 简介 ］ 姚 浔平 （ １ ９ ７ ７一） ， 女， 大学 本 科 ， 技师 ， 主 要 从 事 理 化 检验 工作 。 （ 收稿 日期 ： ２ ０ ０ ５— ０ ３— ３ １ ）
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中国卫 生检 验 杂志 ２ ０ ０ ５年 ６月 第 ｌ ５卷 第 ６ 期
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｈ ｅ ａ ｌ ｔ ｈ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｊ ｕ ｎ ２ ０ ０ ５ ； Ｖ ｏ ｌ １ ５ Ｎ ｏ ６
１ ． ５ 样 品 检 测
性关系良好 ， 相关系数大于０ ． ９ ９ ９ ， 回收率大于 ８ ５ ％， 灵敏度达
０ ． １ ５ ｍ ／ｋ ｓ ｇ 。 ３ 结 论
本研究建立 了测定动物组织 中己烯雌酚含量的高效液相 色谱法 ， 为动物组织 中己烯雌酚 的监测 以及 此类食品安全 的 保证 创造 了条件 。
了研究 ， 结果 表 明 ， 本法简便准确 ， 适 于 动物 组 织 中己 烯 雌 酚
含量 的测 定 。
１ 材料 与 方 法
１ ． １ 仪 器 与 试 剂
己烯 雌 酚 的标 准色 谱 图见 图 １ 。
柏
３ ０
｛２ 雌酚 的分 离色谱 图
２ ３ ０ ｎ ｍ； 柱温 ： ３ ０ ￣ Ｃ； 进 样量 ： ２ Ｏ 。
１ ． ３ 标 准 贮备 溶 液 的配 制
准 确称 取 １ ０ ０ ｍ ｇ己烯 雌 酚溶 于 甲醇 ， 移入 １ ０ ０ ｍ ｌ 容量 瓶 中， 加 甲醇至 刻度 ， 混匀 即得 １ ． ０ ｍ ／ｍ ｓ ｌ 的 己烯 雌 酚 标 准 贮 备
２ ． ２ 回 收率 试验
高效液相色谱仪 ， Ａ ｇ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ １ １ ０ ０ （ 附紫外检测器 ， 工作 站 ） ； 甲醇（ 色谱淋洗剂 ） ； 二次蒸馏水 （ Ｍ ｉ ｌ ｌ ｉ Ｑ ） ； 己烯雌酚 （ Ｄ Ｅ Ｓ ） 标
准品 （ Ｓ ｉ ｇ ｍａ ）。
在样 品 中各添 加 不 同浓 度 的 己 烯 雌 酚 标 准 溶 液 ， 按 上 述
操作 ， 回收率试验结果见表 １ 。
表 １ 各种 浓度 的回收 率试 验结 果
１ ． ２ 色谱 条件
色谱柱 ： Ｚ ｏ ｒ ｂ ａ ｘ Ｓ Ｂ—Ｃ ｌ ８ （ ２ ５ ０ ｍ ｍ× ４ ． ６ ｍ ｍ× ５ ｌ ｚ ｍ ） （ Ａ ｇ ｉ —
ｌ ｅ ｎ ｔ ） ； 流动 相 ： 甲醇 ： 水（ ７ ０ ： ３ ０ ） ； 流速 １ ． ０ ｍ ｌ ／ ｍ ｉ ｎ ； 检测波长 ：
［ 参 考 文献 ］
［ １ ］叶 树得 ．食 品 中兽药 残 留卫 生 技术 ［ Ｍ］ ．天 津 ： 天津 科 学技 术 出
版社 ， １ ９ ９ ８ ． ４ ３ ８— ４ ４ ２ ．
准 确称 取 适 量样 品 （ ５ ± ０ ． １ ｇ ） 粉碎 样 品 ， 用少 量 的 甲醇浸 润并匀 浆 ， 转移至 ５ Ｏ ｒ Ｉ ｌ ｌ 容量 瓶 中 ， 加 甲醇定 容 至刻 度， 于 ８ ０ ￣ Ｃ 水 浴 中加 热 １ ０ ｍ ｉ ｎ ， 加 甲醇定 容 至刻度 ， 取 出后 加 甲醇定 容 至 刻度 ， 充分 混 匀后 过 滤 ， 取 滤液 ２ ５ ｒ Ｉ ｌ ｌ 至蒸 发皿 中挥 干 ， 用 甲醇溶 解 并定 容 至 ２ ｍ ｌ ， 过滤 膜 （ Ｏ ． ４ ５ ｍ） 后进 样 分析 。
物 组织 中己烯 雌 酚 的含量 。结果 ： 该 法 的线 性 范 围在 Ｏ～ ２ ０ ０￣ ／ｋ ｓ ｓ范 围 内 ， 相 关 系数 ｒ 大于 ０ ． ９ ９ ９ ， 平 均 回收 率 在 ８ ５ ％ 以上 。结 论 ： 该 法具 有 准确 、 灵 敏 等优 点 ， 适 合动 物组 织 中己烯 雌酚 含量 的检 测 。 ［ 关键 词 ］ 己烯雌 酚 （ Ｄ Ｅ Ｓ ） ； 高效液 相 色谱 法（ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ） ； 动 物组 织 ［ 中图分 类 号 ］ ０ ６ ５ ７ ． ７ ２ ［ 文献 标识 码 ］ Ａ ［ 文章 编号 ］ １ ０ ０ ４— ８ ６ ８ ５ （ ２ ０ ０ ５ ） ０ ６ — ０ ７ ２ ２一 Ｏ １
【 测定 方法 】
Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ 法测定动 物组织中己 烯雌 酚的 含量
姚 浔平 ， 金米聪 ， 李 小平
（ 浙 江省 宁波 市疾 病 预 防控制 中心 ， 浙 江 宁波 ３ １ ５ ０ １ ０ ）
［ 摘要］ 目的 ： 建立测定动物组织中己烯雌酚含量的方法 。方法： 采用高效液相色谱仪 （ Ａ ｇ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ ） ， Ｚ ｏ ｒ ｂ ａ ｘ —Ｓ Ｂ—Ｃ ， 色谱 柱（ ２ ５ ０ ｍ ｍ× ４ ． ６ ｍ ｍ× ５ ｌ ｚ ｍ） ， 流动 相 为 甲醇 ： 水（ ７ Ｏ ： ３ ０ ） ， 流速 １ ． ０ ｍ ｌ ／ ｍ ｉ ｎ ， 检测波长为 ２ ３ ０ ｎ ｍ 作 为 分 析条 件 ， 测 定 动
２ 结 果 ２ ． １ 色谱 图
己烯雌 酚 （ Ｄ Ｅ Ｓ ） 是 一种 人造 雌激 素 ， 临床 上用 于 治疗 卵 巢 功 能不 全或 垂 体 功能 异 常引起 的 各种 疾 病 、 闭经、 子宫 发 育 不
全、 功能性子宫出血 、 绝经期综 合征、 老年性阴道炎及退乳等 。 然而 ， 有些单位或个人则用 己烯雌 酚作生长素使用 ， 加在饲料 中， 喂养猪 、 禽等 ， 促进生长。早在 ７ Ｏ年代中期 ， １ ３ 本就发现食 用残留的己烯雌酚对人类健康会造成不 良的影响…。本试验 采用高效液相色谱法对动物组织 中的己烯雌酚含量测定进行
溶液。 １ ． ４ 标 准应 用液 的 配制及 标 准曲 线
２ ． ３ 线性 范 围及 灵敏 度
在上 述 条件 下 ， 己烯 雌酚 浓 度 在 ０～ ２ ０ ０ Ｖ Ｌ ／ｋ ｓ ｇ范 围 内线
吸取 １ Ｏ ｍ ｌ己 烯 雌 酚 标 准 贮 备 溶 液 （ １ ． ０ ｍ ｓ ／ ｍ １ ） 于 １ ０ ０ ｍ ｌ 容量 瓶 中 ， 加 甲醇 至 刻 度 ， 混匀即得 １ ０ ０ ｒ Ｉ ｌ ｌ 的 己烯 雌 酚标 准溶 液 。分别 吸取 该 标 准 溶液 １ … ２ ３ ４ 、 ５ ｍ ｌ 于 １ Ｏ ｒ Ｉ ｌ ｌ 的容量 瓶 中 ， 加 甲醇 至刻 度 ， 即得 系列 浓 度 的标 准 应用 液 。