血清学试验
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参与凝集试验的抗原称为凝集原抗体称凝集素第二节凝集试验正离子负离子层凝集反应的原理抗原抗体的特异结合出现可见的颗粒凝集负电荷负电荷抗原负电荷抗原二分类及方法1直接凝集试验玻片法试管法试管法2间接凝集试验间接血凝试验乳胶凝集试验3协同凝集试验第二节凝集试验一直接凝集反应颗粒性的抗原与相应的抗体直接结合并出现凝集现象颗粒性抗原凝集素1玻片法凝集试验方法评价
抗体种类
IgA：二体 IgD： IgE： IgM：五体
IgG结构
IgA结构
Ig Ａ：存在于血清（占血清免疫球蛋白总量的 13% ） 和外分泌液中
IgM 等结构
IgＭ：血液中 IgＥ：血清中，0.002%
IgＤ：血清中，1%
抗体的产生部位
胸腺 一级淋巴器官 骨髓 (鸟)法氏囊 淋巴器官 淋巴结（约500-600个）
血清学试验
血清学试验
血清学鉴定： 用已知抗体鉴定未知的细菌或标本中的抗原 血清学诊断： 用已知抗原检测血清中的特异性抗体
抗原（antigen）
是一类能刺激人或动物机体产生抗体或致敏 淋巴细胞（免疫原性），并能与这些产物在 体内或体外发生特异性反应的物质（反应原 性）。
（一）抗原的性质 抗原的性质
抗原抗体反应类型-----沉淀反应 （precipitation reaction)
可溶性抗原（如细菌的外毒素、内毒素、菌体裂 解液、病毒的可溶性抗原、血清、组织浸出液等） 与相应的抗体结合，在适量电介质存在下，形成 肉眼可见的细微的白色沉淀。
抗原抗体反应类型-----沉淀反应 （precipitation reaction) 可溶性抗原+相应抗体 肉眼可见的沉淀
抗原抗体反应类型-----间接凝集反应
协同凝集试验 葡萄球菌A蛋白是大多数金黄色葡萄球菌的 特异性表面抗原，能与多种哺乳动物血清中的 IgG 协同凝集试验 分子的Fc片段相结合，结合后的IgG仍保持其抗 体活性。当这种覆盖着特异性抗体的葡萄球菌与 相应抗原结合时，可以相互连接引起协同凝集反 应，在玻板上数分钟内即可判定结果(加图图八)。 目前已广泛应用于快速鉴定细菌、霉形体和病毒 等
A1：待检抗原；A2：标准抗原
抗体效价滴定
用梅花型孔，中间放抗原， 周围孔放下不同稀释度的 相应抗体，以出现沉淀线 的最高稀释倍数为该抗体 的效价。
对流免疫电泳
在pH为8.6的琼脂凝胶板上打孔，两孔为一组，孔径3mm，抗原、 抗体孔间距为4～5mm。将抗原加入负极端孔内，抗体加入正极 端孔内，用2～4mA/cm电流电泳1h左右，观察结果，在两孔之 间出现沉淀带的为阳性反应 。
反应的可逆性
抗原与抗体的结合为分子表面的结合，结合的适宜温 度为0～40℃、pH在4.0～9.0范围内。如温度超过 60℃或pH降到3.0以下，或加入解离剂台硫氰化钾、 尿素等，则抗原抗体复合物又可重新解离，解离后的 抗原或抗体性质不改变。
抗原抗体反应一般规律
最适比和带现象 只有抗原与抗体呈适当比例时，才可出现可见的结合 反应。 当抗原过多或抗体过多，则抗原抗体的结合不能形成 大的复合物，因而抑制可见反应的出现，这一现象称 为带现象。 抗体过多出现的抑制现象称前带现象，而抗原过多出 现的抑制现象称后带现象。 为了克服带现象，在进行血清学试验时，需将抗原或 抗体作适当稀释。
细菌抗原
细菌的各种抗原
微生物抗原成分-----病毒抗原成分
颗粒抗原 微生物抗原
组分抗原
可溶性抗原
抗体(antigen)
是由抗原刺激人体或动物体的B细胞,由B细胞转化成 抗体 浆细胞所产生的具有特异性的免疫球蛋白 (immunoglobulin,缩写为Ig)．
抗体的结构和种类
Ig Ｇ：存在于血清（占血清免疫球蛋白总量 的80%）和组织液中。
间接血凝抑制试验
抗体与游离抗原结合后就不能凝集抗原致敏的红 细胞，从而使红细胞凝集现象受到抑制，这一试 验被称为间接血凝抑制试验 。
间接血凝抑制试验
抗原抗体反应类型-----间接凝集反应
乳胶凝集试验 以乳胶颗粒作为载体的间接凝集试验，称为 乳胶凝集试验 乳胶凝集试验。该试验既可检测相应的抗体也可 鉴定未知的抗原，而且方法简便、快速，在临床 诊断中广泛应用于伪狂犬病、流行性乙型脑炎、 钩端螺旋体病、猪细小病毒病、猪传染性萎缩性 鼻炎、禽衣原体病、山羊传染凝集试验
抗原抗体反应类型-----间接凝集反应
将可溶性抗原（或抗体）吸附于与免疫无关的小 间接凝集反应 颗粒（载体）表面，加入相应的抗体（或抗原）， 在适宜条件下，发生凝集反应。 载体：动物的红血球；聚苯乙烯乳胶；矽酸铝； 活性炭等。
抗原抗体反应类型-----间接凝集反应
间接血凝试验
对流免疫电泳结果判定
1为阳性 2为弱阳性
3/4为强阳性
对流电泳方法评价
简便、快速、敏感度较双向琼脂扩散试验高 8~10倍，但分辨力低于双向琼脂扩散试验。
火箭免疫电泳(rocket
immunoelectrophoresis, RIE)
火箭免疫电泳
火箭免疫电泳是单向单扩散和电泳技术相结合的一种血清 学试验。是让抗原在电场的作用下，在含有抗体的琼脂中 定向泳动，二者比例合适时形成类似火箭样的沉淀峰。沉 淀峰的高度与抗原的浓度成正比 。
沉淀反应
单向单扩散
抗血清+琼脂
抗原
单向双扩散
琼脂
抗血清+琼脂
沉淀反应--------琼脂扩散试验：
沉淀反应
沉淀线
抗血清+琼脂
孔径3mm
双向单扩散
抗原 标准阳性抗血清
双向双扩散
抗原
待检血清
单向免疫扩散
双向琼脂扩散
沉淀线形状、位置与抗原抗体扩散率及浓度的关系
A：Ag、Ab浓度及扩散率近似；B ： Ag、Ab浓度近似，扩散率Ag＞ Ab ； C：Ag、Ab浓度近似，扩散率Ag＜ Ab ；D： 扩散率近似，浓度Ag ＞ Ab ；E： 浓度Ag ＞ Ab，扩散率Ag ＞ Ab ；F：浓度Ag ＜ Ab，扩散率Ag ＜ Ab
异种间的物质 1.异物性
同种异体间的物质
自体内隔绝物质： 眼睛水晶体蛋白质、精 细胞及甲状腺球蛋白等
抗原的性质
2.分子量足够大：一般>104道尔顿
3.立体化学结构：一般分子结构和空间构象愈复杂 的物质，免疫原性愈强。 4.抗原决定族antigenic determinant(抗原分子表 面上的具有一定化学组成和结构的特殊化学基团) 决定其特异性
抗原抗体反应一般规律
反应的二阶段性 结合阶段-----反应发生快，几秒钟至几分钟 。 反应阶段-----较慢，需几分钟、几十分钟或更长时 间 。
凝集反应 抗原抗体反应类型 -----凝集反应
颗粒性抗原（如细菌、红血球等）或吸附在乳胶、 白陶土、离子交换树脂和红细胞的抗原与其特异性 抗体结合后，在有电介质存在时，凝聚成肉眼可见 的凝集小块。 凝集原——凝集素 玻片法 直接凝集反应
抗原抗体反应条件
1. 抗原
2. 抗体
3. 环境因素： 抗原抗体反应条件 （1）电介质：0.85%NaCI； （2）温度：37或56 （3）pH值：7.0
（4）振荡：适当的机械振荡
（5）反应时间
抗原抗体反应一般规律
特异性和交叉性 若两种抗原之间含有部分共同抗原时，则发生交叉反 应。亲缘关系越近，交叉反应的程度也越高 。
火箭免疫操作步骤
1. 制备抗体琼脂糖凝胶板 将已融化的1.2%巴比妥缓冲琼脂糖冷 却至55℃左右，加入适量抗血清，混匀后立即浇板，置室温凝固。 2. 打孔 在琼脂凝胶板一侧打孔，孔径3mm，孔距2mm。置琼脂 板于电泳槽内，搭桥后用微量注射器准确加样10μl。 3. 电泳 样品孔放负极侧，电压8~10V/cm或电流3~5mA/cm，电 泳6h。 4. 观察沉淀峰 电泳完毕后，观察琼脂板上沉淀峰，并测量从孔 中心到峰尖的高度。 5. 绘制标准曲线图 以峰高为纵坐标，浓度为横坐标(对数坐标)， 绘制标准曲线，求出待检样品内抗原浓度
对流免疫电泳原理
在pH8.6的琼脂凝胶中，抗体球蛋白因等电点高，只 带有微弱的负电荷，而且分子又较大，因此电泳力小， 小于电渗力，泳向负极；而一般抗原蛋白质常带较强 的负电荷，分子较小，电泳力大，大于电渗力，泳向 正极，电泳时抗原放负极侧，抗体放正极侧，抗原抗 体相对泳动，一定时间后抗原和抗体将在两孔之间相 遇，在比例适当处形成肉眼可见的沉淀线。
抗原抗体反应类型 -----沉淀反应 沉淀反应
环状沉淀反应
主要用于抗原的定性试验，如炭疽 病的诊断（Ascoli氏试验）、链球 菌的血清型鉴定和血迹鉴定等
抗原
沉淀环
抗血清
絮状沉淀反应
常用于毒素、类毒素 和抗毒素的定量测定 抗原抗血清混 合
沉淀反应--------凝胶扩散试验：1%琼脂凝胶的孔径
约85毫微米，可允许各种抗原抗体自由扩散。由近及远形成 浓度梯度。 抗原
双响琼脂扩散
(1) 沉淀线吻合：待检抗原与 标准抗原完全相同。 (2) 沉淀线相切：待检抗原中 含有与标准抗原相同的抗原， 还含有另外的抗原与抗血清相 对应。 (3) 沉淀线相交：待检抗原有 与抗血清对应的抗原，但和标 准抗原不同。 (4) 沉淀线部分吻合：待测抗 原和标准抗原性质相同，但含 量较低。
吸附抗原的红细胞就称为致敏红细胞。致敏红细胞 间接血凝试验 与相应抗体结合后，能出现红细胞凝集现象。 用已知抗原吸附于红细胞上检测未知抗体称为正向 间接血凝试验，用已知抗体吸附于红细胞上鉴定未 知抗原称为反向间接血凝试验。 常用的红细胞有绵羊、家兔、鸡及人的O型红细胞。
抗原抗体反应类型-----间接凝集反应
抗原决定族
抗原的种类
半抗原（只有反应原性而无免疫原性）
完全抗原 天然抗原 人工抗原 合成抗原
抗原种类
异种抗原
蛋白质抗原
核酸抗原 多糖抗原 脂抗原
同种异体抗原
自身抗原
微生物抗原成分-----细菌抗原成分
菌体抗原:革兰氏阴性菌的菌体抗原称O抗原---脂 多糖蛋白质的复合物
微生物抗原
鞭毛抗原称为H抗原 表面抗原:不同细菌的表抗原名称不同.大肠杆菌的 表面抗原称为封套抗原或K抗原,肺炎双球菌的叫荚膜 抗原,伤寒沙门氏菌的表面抗原称为Vi抗原
火箭免疫结果
若抗原与抗体比例合适，则孔前出现顶端完全闭合的 火箭状沉淀峰；抗原大量过剩时或不形成沉淀峰，或 沉淀峰不闭合；抗原中等过剩时沉淀峰呈圆形；当二 者比例不适当时，常不能形成火箭状沉淀峰。
火箭免疫电泳方法评价
火箭电泳是一种操作简便、省时、结果重复性好的 定量检测方法。其敏感度可测0.3mg/L抗原含量， 若低于此水平则难以形成可见的沉淀峰。如加入少 量125I标记的抗原在含抗体的琼脂板上电泳，形成 的不可见火箭峰，经洗涤干燥后，用X线胶片感光， 经显影和定影，可呈现同位素显影，这就是放射自 显影技术，可用于微量抗原含量测定，如测定血清 AFP或IgE含量，可测至μg/L水平。
免疫电泳(immunoelectrophoresis, IEP)
是将区带电泳和双向琼脂扩散相结合的一种免疫化 学分析技术。
免 疫 电 泳 示 意 图
免疫电泳操作步骤
1. 取洁净载玻片，浇注融化的琼脂凝胶，凝固后打孔挖槽。 2. 用微量加样器加待检标本或正常血清对照于孔内。 3. 电泳条件以电压4~6V/cm或电流2~3mA/cm为宜，电泳 1.5~2h。 4. 电泳完毕后，用毛细滴管在槽内加入含相应抗原，孵育， 使抗原抗体双相扩散，形成沉淀线。 5. 观察沉淀线的数目、形状和位置。经漂洗、干燥、染色、 脱色等步骤制作染色标本，可长期保存。例如血浆蛋白免 疫电泳。
抗原抗体反应类型-----间接凝集反应
炭粉凝集试验 以极细的活性炭粉作为载体的间接凝集试验， 碳粉凝集试验 称为炭粉凝集试验。反应在玻板上或塑料反应盘 进行，数分钟后即可判定结果。通常是用抗体致 敏炭粉颗粒制成炭素血清，用以检测抗原，如马 流产沙门氏菌；也可用抗原致敏炭粉，用以检测 抗体，如腺病毒感染、沙门氏菌病、大肠杆菌病、 囊虫病等的诊断。
二级淋巴器官
脾脏
抗体在人体中产生部位
thymus
Lymph node
spleen
Bone marrow
抗体的存在部 位 : 血清、乳汁、 体液
抗 体 作 用
抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用 （ADCC）
抗原抗体反应
抗原抗体反应（antigen-antibodyreaction）是指抗原与相应 抗体之间所发生的特异性结合反应。可发生于体内（invivo）， 也可发生于体外(invitro)。体内反应可介导吞噬、溶菌、杀菌、 中和毒素等作用；体外反应则根据抗原的物理性状、抗体的类 型及参与反应的介质（例如电解质、补体、固相载体等）不同， 可出现凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应及中和反应等各 种不同的反应类型。因抗体主要存在于血清中，在抗原或抗体 的检测中多采用血清作试验，所以体外抗原抗体反应亦称为血 清反应（erologicreaction）。
抗体种类
IgA：二体 IgD： IgE： IgM：五体
IgG结构
IgA结构
Ig Ａ：存在于血清（占血清免疫球蛋白总量的 13% ） 和外分泌液中
IgM 等结构
IgＭ：血液中 IgＥ：血清中，0.002%
IgＤ：血清中，1%
抗体的产生部位
胸腺 一级淋巴器官 骨髓 (鸟)法氏囊 淋巴器官 淋巴结（约500-600个）
血清学试验
血清学试验
血清学鉴定： 用已知抗体鉴定未知的细菌或标本中的抗原 血清学诊断： 用已知抗原检测血清中的特异性抗体
抗原（antigen）
是一类能刺激人或动物机体产生抗体或致敏 淋巴细胞（免疫原性），并能与这些产物在 体内或体外发生特异性反应的物质（反应原 性）。
（一）抗原的性质 抗原的性质
抗原抗体反应类型-----沉淀反应 （precipitation reaction)
可溶性抗原（如细菌的外毒素、内毒素、菌体裂 解液、病毒的可溶性抗原、血清、组织浸出液等） 与相应的抗体结合，在适量电介质存在下，形成 肉眼可见的细微的白色沉淀。
抗原抗体反应类型-----沉淀反应 （precipitation reaction) 可溶性抗原+相应抗体 肉眼可见的沉淀
抗原抗体反应类型-----间接凝集反应
协同凝集试验 葡萄球菌A蛋白是大多数金黄色葡萄球菌的 特异性表面抗原，能与多种哺乳动物血清中的 IgG 协同凝集试验 分子的Fc片段相结合，结合后的IgG仍保持其抗 体活性。当这种覆盖着特异性抗体的葡萄球菌与 相应抗原结合时，可以相互连接引起协同凝集反 应，在玻板上数分钟内即可判定结果(加图图八)。 目前已广泛应用于快速鉴定细菌、霉形体和病毒 等
A1：待检抗原；A2：标准抗原
抗体效价滴定
用梅花型孔，中间放抗原， 周围孔放下不同稀释度的 相应抗体，以出现沉淀线 的最高稀释倍数为该抗体 的效价。
对流免疫电泳
在pH为8.6的琼脂凝胶板上打孔，两孔为一组，孔径3mm，抗原、 抗体孔间距为4～5mm。将抗原加入负极端孔内，抗体加入正极 端孔内，用2～4mA/cm电流电泳1h左右，观察结果，在两孔之 间出现沉淀带的为阳性反应 。
反应的可逆性
抗原与抗体的结合为分子表面的结合，结合的适宜温 度为0～40℃、pH在4.0～9.0范围内。如温度超过 60℃或pH降到3.0以下，或加入解离剂台硫氰化钾、 尿素等，则抗原抗体复合物又可重新解离，解离后的 抗原或抗体性质不改变。
抗原抗体反应一般规律
最适比和带现象 只有抗原与抗体呈适当比例时，才可出现可见的结合 反应。 当抗原过多或抗体过多，则抗原抗体的结合不能形成 大的复合物，因而抑制可见反应的出现，这一现象称 为带现象。 抗体过多出现的抑制现象称前带现象，而抗原过多出 现的抑制现象称后带现象。 为了克服带现象，在进行血清学试验时，需将抗原或 抗体作适当稀释。
细菌抗原
细菌的各种抗原
微生物抗原成分-----病毒抗原成分
颗粒抗原 微生物抗原
组分抗原
可溶性抗原
抗体(antigen)
是由抗原刺激人体或动物体的B细胞,由B细胞转化成 抗体 浆细胞所产生的具有特异性的免疫球蛋白 (immunoglobulin,缩写为Ig)．
抗体的结构和种类
Ig Ｇ：存在于血清（占血清免疫球蛋白总量 的80%）和组织液中。
间接血凝抑制试验
抗体与游离抗原结合后就不能凝集抗原致敏的红 细胞，从而使红细胞凝集现象受到抑制，这一试 验被称为间接血凝抑制试验 。
间接血凝抑制试验
抗原抗体反应类型-----间接凝集反应
乳胶凝集试验 以乳胶颗粒作为载体的间接凝集试验，称为 乳胶凝集试验 乳胶凝集试验。该试验既可检测相应的抗体也可 鉴定未知的抗原，而且方法简便、快速，在临床 诊断中广泛应用于伪狂犬病、流行性乙型脑炎、 钩端螺旋体病、猪细小病毒病、猪传染性萎缩性 鼻炎、禽衣原体病、山羊传染凝集试验
抗原抗体反应类型-----间接凝集反应
将可溶性抗原（或抗体）吸附于与免疫无关的小 间接凝集反应 颗粒（载体）表面，加入相应的抗体（或抗原）， 在适宜条件下，发生凝集反应。 载体：动物的红血球；聚苯乙烯乳胶；矽酸铝； 活性炭等。
抗原抗体反应类型-----间接凝集反应
间接血凝试验
对流免疫电泳结果判定
1为阳性 2为弱阳性
3/4为强阳性
对流电泳方法评价
简便、快速、敏感度较双向琼脂扩散试验高 8~10倍，但分辨力低于双向琼脂扩散试验。
火箭免疫电泳(rocket
immunoelectrophoresis, RIE)
火箭免疫电泳
火箭免疫电泳是单向单扩散和电泳技术相结合的一种血清 学试验。是让抗原在电场的作用下，在含有抗体的琼脂中 定向泳动，二者比例合适时形成类似火箭样的沉淀峰。沉 淀峰的高度与抗原的浓度成正比 。
沉淀反应
单向单扩散
抗血清+琼脂
抗原
单向双扩散
琼脂
抗血清+琼脂
沉淀反应--------琼脂扩散试验：
沉淀反应
沉淀线
抗血清+琼脂
孔径3mm
双向单扩散
抗原 标准阳性抗血清
双向双扩散
抗原
待检血清
单向免疫扩散
双向琼脂扩散
沉淀线形状、位置与抗原抗体扩散率及浓度的关系
A：Ag、Ab浓度及扩散率近似；B ： Ag、Ab浓度近似，扩散率Ag＞ Ab ； C：Ag、Ab浓度近似，扩散率Ag＜ Ab ；D： 扩散率近似，浓度Ag ＞ Ab ；E： 浓度Ag ＞ Ab，扩散率Ag ＞ Ab ；F：浓度Ag ＜ Ab，扩散率Ag ＜ Ab
异种间的物质 1.异物性
同种异体间的物质
自体内隔绝物质： 眼睛水晶体蛋白质、精 细胞及甲状腺球蛋白等
抗原的性质
2.分子量足够大：一般>104道尔顿
3.立体化学结构：一般分子结构和空间构象愈复杂 的物质，免疫原性愈强。 4.抗原决定族antigenic determinant(抗原分子表 面上的具有一定化学组成和结构的特殊化学基团) 决定其特异性
抗原抗体反应一般规律
反应的二阶段性 结合阶段-----反应发生快，几秒钟至几分钟 。 反应阶段-----较慢，需几分钟、几十分钟或更长时 间 。
凝集反应 抗原抗体反应类型 -----凝集反应
颗粒性抗原（如细菌、红血球等）或吸附在乳胶、 白陶土、离子交换树脂和红细胞的抗原与其特异性 抗体结合后，在有电介质存在时，凝聚成肉眼可见 的凝集小块。 凝集原——凝集素 玻片法 直接凝集反应
抗原抗体反应条件
1. 抗原
2. 抗体
3. 环境因素： 抗原抗体反应条件 （1）电介质：0.85%NaCI； （2）温度：37或56 （3）pH值：7.0
（4）振荡：适当的机械振荡
（5）反应时间
抗原抗体反应一般规律
特异性和交叉性 若两种抗原之间含有部分共同抗原时，则发生交叉反 应。亲缘关系越近，交叉反应的程度也越高 。
火箭免疫操作步骤
1. 制备抗体琼脂糖凝胶板 将已融化的1.2%巴比妥缓冲琼脂糖冷 却至55℃左右，加入适量抗血清，混匀后立即浇板，置室温凝固。 2. 打孔 在琼脂凝胶板一侧打孔，孔径3mm，孔距2mm。置琼脂 板于电泳槽内，搭桥后用微量注射器准确加样10μl。 3. 电泳 样品孔放负极侧，电压8~10V/cm或电流3~5mA/cm，电 泳6h。 4. 观察沉淀峰 电泳完毕后，观察琼脂板上沉淀峰，并测量从孔 中心到峰尖的高度。 5. 绘制标准曲线图 以峰高为纵坐标，浓度为横坐标(对数坐标)， 绘制标准曲线，求出待检样品内抗原浓度
对流免疫电泳原理
在pH8.6的琼脂凝胶中，抗体球蛋白因等电点高，只 带有微弱的负电荷，而且分子又较大，因此电泳力小， 小于电渗力，泳向负极；而一般抗原蛋白质常带较强 的负电荷，分子较小，电泳力大，大于电渗力，泳向 正极，电泳时抗原放负极侧，抗体放正极侧，抗原抗 体相对泳动，一定时间后抗原和抗体将在两孔之间相 遇，在比例适当处形成肉眼可见的沉淀线。
抗原抗体反应类型 -----沉淀反应 沉淀反应
环状沉淀反应
主要用于抗原的定性试验，如炭疽 病的诊断（Ascoli氏试验）、链球 菌的血清型鉴定和血迹鉴定等
抗原
沉淀环
抗血清
絮状沉淀反应
常用于毒素、类毒素 和抗毒素的定量测定 抗原抗血清混 合
沉淀反应--------凝胶扩散试验：1%琼脂凝胶的孔径
约85毫微米，可允许各种抗原抗体自由扩散。由近及远形成 浓度梯度。 抗原
双响琼脂扩散
(1) 沉淀线吻合：待检抗原与 标准抗原完全相同。 (2) 沉淀线相切：待检抗原中 含有与标准抗原相同的抗原， 还含有另外的抗原与抗血清相 对应。 (3) 沉淀线相交：待检抗原有 与抗血清对应的抗原，但和标 准抗原不同。 (4) 沉淀线部分吻合：待测抗 原和标准抗原性质相同，但含 量较低。
吸附抗原的红细胞就称为致敏红细胞。致敏红细胞 间接血凝试验 与相应抗体结合后，能出现红细胞凝集现象。 用已知抗原吸附于红细胞上检测未知抗体称为正向 间接血凝试验，用已知抗体吸附于红细胞上鉴定未 知抗原称为反向间接血凝试验。 常用的红细胞有绵羊、家兔、鸡及人的O型红细胞。
抗原抗体反应类型-----间接凝集反应
抗原决定族
抗原的种类
半抗原（只有反应原性而无免疫原性）
完全抗原 天然抗原 人工抗原 合成抗原
抗原种类
异种抗原
蛋白质抗原
核酸抗原 多糖抗原 脂抗原
同种异体抗原
自身抗原
微生物抗原成分-----细菌抗原成分
菌体抗原:革兰氏阴性菌的菌体抗原称O抗原---脂 多糖蛋白质的复合物
微生物抗原
鞭毛抗原称为H抗原 表面抗原:不同细菌的表抗原名称不同.大肠杆菌的 表面抗原称为封套抗原或K抗原,肺炎双球菌的叫荚膜 抗原,伤寒沙门氏菌的表面抗原称为Vi抗原
火箭免疫结果
若抗原与抗体比例合适，则孔前出现顶端完全闭合的 火箭状沉淀峰；抗原大量过剩时或不形成沉淀峰，或 沉淀峰不闭合；抗原中等过剩时沉淀峰呈圆形；当二 者比例不适当时，常不能形成火箭状沉淀峰。
火箭免疫电泳方法评价
火箭电泳是一种操作简便、省时、结果重复性好的 定量检测方法。其敏感度可测0.3mg/L抗原含量， 若低于此水平则难以形成可见的沉淀峰。如加入少 量125I标记的抗原在含抗体的琼脂板上电泳，形成 的不可见火箭峰，经洗涤干燥后，用X线胶片感光， 经显影和定影，可呈现同位素显影，这就是放射自 显影技术，可用于微量抗原含量测定，如测定血清 AFP或IgE含量，可测至μg/L水平。
免疫电泳(immunoelectrophoresis, IEP)
是将区带电泳和双向琼脂扩散相结合的一种免疫化 学分析技术。
免 疫 电 泳 示 意 图
免疫电泳操作步骤
1. 取洁净载玻片，浇注融化的琼脂凝胶，凝固后打孔挖槽。 2. 用微量加样器加待检标本或正常血清对照于孔内。 3. 电泳条件以电压4~6V/cm或电流2~3mA/cm为宜，电泳 1.5~2h。 4. 电泳完毕后，用毛细滴管在槽内加入含相应抗原，孵育， 使抗原抗体双相扩散，形成沉淀线。 5. 观察沉淀线的数目、形状和位置。经漂洗、干燥、染色、 脱色等步骤制作染色标本，可长期保存。例如血浆蛋白免 疫电泳。
抗原抗体反应类型-----间接凝集反应
炭粉凝集试验 以极细的活性炭粉作为载体的间接凝集试验， 碳粉凝集试验 称为炭粉凝集试验。反应在玻板上或塑料反应盘 进行，数分钟后即可判定结果。通常是用抗体致 敏炭粉颗粒制成炭素血清，用以检测抗原，如马 流产沙门氏菌；也可用抗原致敏炭粉，用以检测 抗体，如腺病毒感染、沙门氏菌病、大肠杆菌病、 囊虫病等的诊断。
二级淋巴器官
脾脏
抗体在人体中产生部位
thymus
Lymph node
spleen
Bone marrow
抗体的存在部 位 : 血清、乳汁、 体液
抗 体 作 用
抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用 （ADCC）
抗原抗体反应
抗原抗体反应（antigen-antibodyreaction）是指抗原与相应 抗体之间所发生的特异性结合反应。可发生于体内（invivo）， 也可发生于体外(invitro)。体内反应可介导吞噬、溶菌、杀菌、 中和毒素等作用；体外反应则根据抗原的物理性状、抗体的类 型及参与反应的介质（例如电解质、补体、固相载体等）不同， 可出现凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应及中和反应等各 种不同的反应类型。因抗体主要存在于血清中，在抗原或抗体 的检测中多采用血清作试验，所以体外抗原抗体反应亦称为血 清反应（erologicreaction）。