灵芝多糖的提取纯论文制作PPT

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2、实验内容
紫外分光光度计
1）多糖含量的测定
根据《中国药典》（2010版）一部灵芝项下规定， 制定标准曲线，得出线性回归方程： y=17.751x+0.0326，R2=0.9991，n=6，线性关系 良好，如下图：
1.2
1 0.8 吸光度A 0.6 0.4 0.2 0 0 0.01 0.02 0.03 多糖浓度mg/ml 0.04 0.05 0.06 0.07 y = 17.75x + 0.032 R² = 0.999
灵芝多糖的提取纯化工艺研究
研究背景
灵芝味甘，性平，归心、肺、肝、肾经。 《中国药典》（2010版）记载灵芝为多孔菌科 真菌赤芝或紫芝的干燥子实体，有补气安神， 止咳平喘的功效，用于心神不宁，失眠心悸， 肺虚咳喘，虚劳短气，不思饮食等。药理试验 证明，灵芝多糖具有抗病毒、抗肿瘤、提高免 疫力、抗氧自由基、抗衰老等生物活性。 随着生活节奏的加快、生活压力的不断攀 升，人们的健康越来越受到威胁，心脑血管、 癌症等疾病的病发率逐年上升，使得具有提高 免疫力、抗肿瘤等功效的灵芝多糖深受重视。
整体框架
1、前言 灵芝多糖的来源与分类 灵芝多糖的主要成分 灵芝多糖的结构分析 灵芝多糖的提取方法 灵芝多糖的纯化方法 灵芝多糖的测定方法
2、实验内容
1）多糖含量的测定
单因素试验 2）提取工艺研究
正交试验设计 3）纯化工艺研究：正交试验设计 3、讨论 4、结论
提取时间 提取温度 提取次数
1、前言
我国已发现灵芝的品种有90多种，包括赤芝、黄芝、 紫芝、黑芝等，多分布于云、贵、冀、吉、苏等省。 灵芝的化学成分复杂，现已发现灵芝含有灵芝多糖、 三萜类化合物、核苷、甾醇、生物碱、氨基酸、微量 元素等多种化学成分。
灵芝多糖的主要提取方法：1）热水提取法 2）超声波辅助提取法 3）微波辅助提取法
灵芝多糖的主要纯化方法：1）醇沉法 2）Sevage除蛋白法 3）层析法 4）膜分离法
提取工艺的正交试验
L9(34)正交试验因素水平表
结 果 分 析
方差分析表
从方差分析表可知：以D因素项为误差项进行方差 分析，结果C因素对结果有显著差异，A、B因素对结 果影响甚微。 由直观分析可知，A、B、C三因素对多糖转移率的 影响大小为A＜B＜C，因A1＜A3＜A2、B1＜B2＜ B3、C1＜C2＜C3，故应选A2B3C3为灵芝多糖的最佳 提取工艺条件，即料液比为1:30，提取时间为2h，提 取次数为3次。
பைடு நூலகம்
提取温度 方法：精密称取灵芝粗粉3份，每份5g，置于250ml烧杯中， 加水200ml，分别设定温度为60、80、100℃，加热回流提 取1次，滤过，滤液分别定容至250mL，取适量滤液，测定 多糖含量。
从图中看出，提取温度对提取工艺有着很大的影响， 温度升高多糖得率迅速增加，而且多糖的溶解性较差， 生产上通常需要沸水才能使其提取完全，因此，考虑到 企业机械化生产的需要，提取温度采用100℃。
4、结论
本实验采用水提醇沉法对灵芝子实体中的多糖进行 提取，通过实验和分析，确定了提取时间、提取温 度、料液比这三个因素对提取率的影响规律。结合 正交试验，得出了水提醇沉提取灵芝多糖的最佳工 艺条件为提取时间2h，提取次数2次，料液比1:30， 乙醇浓度90%，醇沉时间24h，醇沉次数2次，浸膏 相对密度为1.1-1.2。同时，在最佳条件下，进行了3 份提取和纯化验证实验，结果表明有良好的重复 性，说明此方法可行有效。本实验作为一种传统、 经济的提取纯化灵芝多糖的方法，可为企业实际生 产提供理论依据。
验证实验结果
从结果可看出：最佳醇沉工艺具有较好的重复性，说明该 工艺是可行稳定的，干膏得率为4.07%，干膏中多糖含量达 12 %以上。
3、讨论
在实验过程中，也发现不少值得探究的问题。灵芝 子实体的粉碎度对灵芝多糖的溶出也有较大的影响， 但由于机械粉碎度有限，本实验未能探讨粉碎度对灵 芝多糖溶出的影响规律及其最佳粉碎度；本实验中提 取得到的灵芝多糖含量比参考文献偏低，其可能原因 是灵芝的产地不同。
标准曲线的待测样品
根据《中国药典》（2010年）一部灵芝项下规定， 制备样品溶液。结果如下：
本次灵芝药材的多糖含量平均为0.5%,符合《中国药 典》（2010年）一部的要求，可以作为本研究的供试 品。
实验简略工艺流程图如下：
2）提取工艺研究
单因素试验
料液比 方法：精密称取灵芝粗粉4份，每份5g，分别置 250ml圆底烧瓶中，按照料液比1:10、1:20、1:30、 1:40加水回流提取1小时，滤过，滤液分别定容至 250mL，取适量滤液，测定多糖含量。
随着料液比的增加，多糖提取得率增加，但当料液 比大于1:30时，多糖得率增加不显著。
提取时间 方法：精密称取灵芝粗粉4份，每份5g，置150ml圆底烧瓶中， 分别加水125mL，回流提取1、1.5、2、2.5小时，滤过，滤液 分别定容至250mL，取适量滤液，测定多糖的含量。
随着提取时间的延长，多糖的提取得率逐渐增加，提 取2小时即可将灵芝子实体中多糖提取较完全。
验证实验结果
从结果可以看出：优选的提取工艺具有较好的重复 性，说明该工艺是可行、稳定。三次验证试验结果表 明，灵芝多糖的含量为0.48%，多糖转移率较高，为 96.48%，说明该工艺基本能把多糖提取完全。
3）纯化工艺研究
纯化工艺的正交试验所得的 9个干膏
纯化工艺的正交试验
L9(34)正交试验因素水平表
方差分析表
由直观分析可知，A、B、C、D四因素对多糖含量的影响 大小为A＞B＞C＞D，并考虑多糖干膏的得率，故应选 A3B2C3D2为灵芝多糖的最佳纯化工艺条件，即乙醇浓度为 90%，醇沉时间为24h，醇沉次数为3次，浸膏相对密度为 1.1-1.2。 从企业生产化和节约成本的角度考虑，为了有效成分的充 分纯化，因此选择工艺条件为A3B2C2D2，即乙醇浓度为 90%，醇沉时间为24h，醇沉次数为2次，浸膏相对密度为 1.1-1.2。
灵芝多糖的含量测定方法：1）蒽酮-硫酸法 2）苯酚-硫酸法
目的与意义
灵芝是一种历史悠久的中药，其成分十分复杂，包括 灵芝多糖、三萜类化合物、甾醇、氨基酸、蛋白质等 活性成分。其中现代研究最多的是灵芝多糖和三萜类 化合物。本研究通过对灵芝多糖的提取纯化工艺进行 研究，为灵芝多糖的开发利用提供实验依据。
致谢
在论文即将完成之际，我首先要感谢母校四年来对我的悉 心栽培、教育和无私照顾，感谢老师们为我提供良好的做毕 业论文实验的环境。 感谢一起愉快的度过四年大学生活的老师们和团结友爱的
同学们。
在此再次谨向所有给予我指导、帮助和关心的老师、同学 们致以衷心的感谢与崇高的敬意。谢谢你们！
THE
END ！