透析袋如何选择

透析袋如何选择
透析的基本原理
透析是一个简单的扩散过程，溶质中小分子物质从高浓度溶液通过半透性膜扩散到低浓度溶液中，直至渗透压达到平衡。

由于多孔膜的选择性，使得溶质中小分子物质可以通过，而较大物质则被截留，从而分离出不同大小分子量的物质，依据分子量大小截留，可高效用于分离工艺，改变或控制透析的条件，可在多种透析应用中得到预期效果，通过截留分子量（MWCO）可使目标分子得到分离。

如图
透析袋透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。

透析袋透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。

透析膜的材质
透析膜可用动物膜和玻璃纸等，但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜，主要有再生纤维素（RC）、纤维素酯（CE）、聚偏二***乙烯（PVDF）。

但随着生物技术发展，对透析袋处理样品更多更严格的要求，根据生产工艺有可以分为标准膜和生物技术级膜。

o生物技术纤维素酯（CE）膜
生物学惰性和超纯的生物技术CE膜，用于带电荷分子的分离及大分子纯化。

生物技术CE膜对条
件及溶剂要求较高。

一般而言，CE膜能够抗弱的或稀的酸碱溶液和轻微乙醇，MWCO只有轻微改变。

＊＊直接与有机溶剂接触会破坏CE膜。

生物技术CE膜能在pH2-9与4-37℃下使用。

即用透析装
置中也可使用CE膜。

性质：亲水、孔径均一
生物技术再生纤维素（RC）膜
生物技术RC膜通过再生过程制得，物理抗性与化学相容性得到改良，具有与生物技术CE膜一样
高纯度与均一的MWCO。

RC膜能够与高浓度的弱酸碱、低浓度的强酸碱、大多数醇类及一些温和的
或低浓度有机溶剂共用，＊＊直接与强极性或有机溶剂接触会破坏RC膜。

生物技术RC膜能在
pH2-12与4-60℃条件下使用。

性质：亲水、孔径均一
生物技术聚偏二***乙烯（PVDF）膜
疏水、惰性及无电抗性，生物技术PVDF膜是实验室透析的革命性进步，能够耐极端高温（130℃）
及溶剂条件。

只有生物技术PVDF膜能够经受与大多数的酸碱（包括******）和大多数的有机溶剂
（包括DMF）直接接触，＊＊PVDF膜还具有独特的高温高压蒸汽灭菌的能力，可热封进行样品分
装。

性质：疏水、孔径均一
2种MWCO：250kD、500kD
4种宽度：8mm、12mm、16mm、24mm
长度和包装：10m/卷、0.1%叠氮化钠湿型
透析膜的选择
1.选择合适的分子截留量（MWCO）：由于透析膜由海绵状横向耦合的聚合物材料构成，截留性
能间接的由孔径等级即截留分子量（MWCO）表示，截留率90%的溶质分子大小可更精确的表示膜的MWCO。

然而，溶质的渗透性亦取决于分子形状、水合度、离子电荷与极性，推荐选择膜的MWCO 为欲截留物质分子量的一半，两倍于透过物质的分子大小。

2.选择合适的形状：根据需要，最大程度的方便操作及样品回收。

3.选择合适的膜：成功进行透析分离的关键是在适当的条件下选用最合适的膜。

选择时可参照
下列：
o根据目的选择等级（生物技术或标准）；
o根据溶液的化学特性选择膜材质（CE、RC或PVDF）；
o根据使用方法选择产品类型（管状、一次性或片状）；
o根据溶质分子量在不同种MWCO中选择；
o根据目的选择膜预处理方式；
透析袋截留分子量选择参照表（各常见物质分子大小）
中文名称英文名称分子量（道尔顿）直径
无机盐离子Inorganic Salts（26+D）
葡萄糖Glucose（180D）
维生素B12VitaminB12（1,356D）
胰岛素Insulin(5805D)
抑肽酶Aprotinin(6512D)
右旋糖酐、葡聚糖Dextrans(10-150KD)
细胞色素C Cytochrome C(12KD)
热源物质Pyrogens(0.003-0.2μm)
肌红蛋白Myoglobin(16.7KD)
病毒Viruses(0.005-0.1+μm)
血红蛋白Hemoglobin(64KD)
牛血清白蛋白BSA(67KD)
炭黑Carbon Black(0.01-0.1+μm)
免疫球蛋白G lgG(150KD)
免疫球蛋白M lgM(900KD)
细菌Bacteria(0.2-30μm)
酵母细胞Yeast Cells(0.3-8μm)
脊髓灰质炎病毒Polio Virus(2.37μm)
红血蛋白Red Blood Cells(6-8μm)
花粉Pollen(10-100μm)
沙子Sand(50+μm)
透析膜厂家介绍
目前国内使用的透析膜多为进口产品，主要有美国联合碳化物公司和Specrtum公司（斯百全上海公司）等，其中只有Spectrum公司提供生物技术等级透析膜，来满足MWCO精确、膜纯度高要求的关键应用。

由于这些膜的制造过程没有重金属污染及硫化物，所以均为超纯的，无须清洁或预处理。

只需用去离子水清洗，使用通用闭合夹，添加样品即可使用，方便、快捷！
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。

通常是将半透膜制成袋状，就叫做透析袋。

自Thomas Graham1861年发明透析方法至今已有一百多年。

透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。

在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。

透析只需要使用专用的半透膜即可完成。

通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。

保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。

透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。

透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。

透析膜可用动物膜和玻璃纸等，但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜，目前常用的是美国Union Carbide（联合碳化物公司）和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管，截留分子量MwCO（即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量，缩
写为MwCO）通常为1万左右。

商品透析袋制成管状，其扁平宽度为23mm～50mm不等。

为防干裂，出厂时都用10％的甘油处理过，并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质，它们对蛋白质和其它生物活性物质有害，用前必须除去。

可先用50％乙醇煮沸1小时，再依次用50％乙醇、0.01mol/L碳酸氢钠和0.001mol/L EDTA溶液洗涤，最后用蒸馏水冲洗即可使用。

实验证明，50％乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。

使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中，若长时间不用，可加少量NaN2，以防长菌。

洗净凉干的透析袋弯折时易裂口，用时必须仔细检查，不漏时方可重复使用。

新透析袋如不作如上的特殊处理，则可用沸水煮五至十分钟，再用蒸馏水洗净，即可使用。

使用时，一端用橡皮筋或线绳扎紧，也可以使用特制的透析袋夹夹紧，由另一端灌满水，用手指稍加压，检查不漏，方可装入待透析液，通常要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大时，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。

含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增加50％是正常的。

为了加快透析速度，除多次更换透析液外，还可使用磁子搅拌。

透析的容器要大一些，可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。

小量体积溶液的透析，可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下。

检查透析效果的方法是：用1％BaCl2检查(NH4)2SO4，用1％AgNO3检查NaCl、KCl等。

为了提高透析效率，还可以使用各种透析装置。

使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置。

美国生物医学公司（Biomed Instruments Inc.）生产的各种型号的Zeineh透析器，由于使用对流透析的原理，使透析速度和效率大大提高。

根据个人使用经验，建议使用透析袋效果比较好，还有具体需要什么规格的要看你的目的蛋白量有多大，才能决定使用多大的截留分子量的透析袋，一般截留量越大价格也就会越高，还有就是透析袋宽度的选择，要看你的实验一次需要透析多少量来决定。

Fisherbrand™再生纤维膜透析袋。