欧蒙免疫印迹法（ANA谱3）模条本底颜色变深对结果影响2例分析
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2 讨论
检测项目 病例 1 病例 2
ANA(S) ＜1:100 1:640
ANA核型 阴性 均质
表 1 2病例实验室检查结果
dsDNA(IU/mL) dsDNA荧光
4.58 633.34
阴性 强阳性
G(g/L) 64.3 37.6
IgG(mg/dL) -
2580
肝纤 4项 ↑ -
通讯作者：李 发 爵
有些研究中!在深色背景下!只要能观察到特 异性抗原位置条带阳性!均可视为明确阳性%若背 景颜色过深而严重影响到结果判读! 则样本不适 用于该检测体系!可考虑采用其他的检测方法(如 '3BD:)进行检测& 但本研究中血清稀释法再加上 BBC 作为补充也不失为一种简便易行的方法& 由于 观察样本例数有限! 在今后的工作中增加观察例 数及与临床的结合! 以对此类问题有一个比较全 面的了解& 参考文献
+530+
实验与检验医学 !"!# 年 $ 月第 %& 卷第 % 期 '()*+,-*./01 0.2 3045+0/5+6 7*2,8,.*9 :;<=!"!#9>51=%&9?5=%
·病例报告·
欧蒙免疫印迹法（ANA谱 3）模条本底颜色变深对 结果影响 2例分析
章晓霞 1，李发爵 2，李湘成 3，陈民 2，苏悦 2，付红 2，彭丽平 2，梁小燕 2
!"&M#N&&$"%D$&"= @MB魏 方=抗 核 抗 体 与 抗 &验 与 检 验 医
学 !""N !C & M&DM!= (收稿日期 2021-02-22Q
欧蒙印迹法中所包被的抗原均为生化特性明 确的纯化抗原"因此具有良好的检测敏感性@&A% 操 作过程中"模条本底颜色变深&扫描不报警的现象 时有发生#但本底颜色很深及扫描报警"显示'不 可用的(情况也偶有发生"表明实验失败"复查也 如此"报告发不出% !"!" 年 &! 月 &$ 日和 !"!& 年 & 月 & 日 ! 名住院患者 :?: 谱 # 模条 )&B 项$颜 色很深及扫描报警"显示'不可用的(#经进一步分 析为球蛋白增多"增加了模条的吸附所至% 血清经 适当稀释"减少球蛋白的含量"从而减少吸附达到 可以扫描"不报警"实验成功的目的#再加做间接 免疫荧光 )CCD*E')F! 细胞$":?: 谱 # 报告就可 以安心发出% 现报告如下% 1 临床资料 &=& 一般资料 ! 病例均来自抚州市第一人民医院 住院病人"其中病例 &"游某"男"B& 岁"临床诊断* 肺部感染&乙型肝炎后肝硬化失代偿期&低蛋白血 症&胸腔积液&脾大% 病例 !"罗某"女"%G 岁"临床 诊断*肾病综合症&狼疮性肾炎&甲减&高血压病等% &=! 检测方法 :?: 谱 # 采用欧蒙免疫印迹法"在 全 自 动 'HIJK15/702/*+ 仪 & 佳 能 L0.5M80. 3,N'&!" 扫描仪及配套试剂上进行 #CCD 采 用 欧 蒙 试剂及 'HIJM/0+ O1;P 荧光显微镜上进行% 结 果见表 &&图 &Q图 $%
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关键词 自疫模条#本底颜色 中图分类号：I#R!=## 文献标识码：: 文章编号：&SG%F&&!RT!"!#U"%F"B#"F"# *&"=#RSRV&SG%F&&!R=!"!#="%="#$
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图 5 第 2条模条为病例 2ANA谱 3模条图形， 本底颜色较深，见模糊质控带
图 6 为病例 2模条经扫描后（黄色区域）图形，提示“不可用的”
P#Q中 国 免 疫 学 会 临 床 免 疫 分 会=自 身 抗 体 检 测 在 自 身 免 疫 病 中 的
532
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图 1 第 2条模条为病例 1ANA谱 3模条图形， 本底颜色很深，未见质控带
图 2 病例 1模条经扫描后（黄色区域）图形，提示“不可用的”
图 3 黄线上模条为病例 1血清经 1:3稀释后的 ANA谱 3模条图形，见较清晰质控带
图 4 病例 1血清经 1:3稀释后的 ANA谱 3模条的扫描图形 （黄线上），未见报警，质控带显示 1个“+”。结果为全阴性
图 7 第 2条为病例 2血清经 1:2稀释后的 ANA谱 3模条图形，见较清晰质控带
图 8 第 2条为病例 2血清经 1:2稀释后的 ANA谱 3模条的 扫描图形，未见报警，质控带显示“++”。结果为抗 SSA、 Ro-52、ds-DNA、ANuA、Histone抗体分别为 1个“+”
病例 &!:?: 谱 # 模条本底颜色很深!未见质 控带!扫描报警!提示"不可用的#!见图 &$图 !%说 明实验失败!复查也如此!经与欧蒙工程师沟通! 告知给病人退费& 笔者通过 &@# 稀释血清!模条显 示较清 晰 质 控 带 !经 扫 描 后 质 控 带 显 示 & 个 "A'! 未 出 现 报 警 (正 常 质 控 带 显 示 黑 色 AAAA 为 合 格 )! 结果为 :?: 谱 # 所有项目阴性!见图 #$图 %& 再 经 BBC 的验证*D&@&""(参考值 *&@&"")$核 型 *阴 性!见表 && 最终报告该病人 :?: 谱 # 所有项目为 阴性&
抗体分别为 & 个+A'!见图 L$图 $& 因血清 &@! 稀 释!所以该病人 :?: 谱 # 上述 E 项抗体分别报告 ! 个+A'是较准确的& BBC 结果 DM&@ F%"$核型为均 质%其它(2IHJ?:('3BD:)F##=#% BNO-3$荧光强阳 性!也可说明这一点!见表 &&
对于某些患者的特殊情况(例如临床用药$肝 功能异常等)导致血清样本中非特异蛋白质$胆红 素或血脂等含量增加! 上述物质可能会被吸附到 膜片上!最终导致非特异性背景颜色的增强P&Q& 病 例 & 乙型肝炎后肝硬化失代偿!肾功能轻度异常! 肝 纤 % 项 升 高 !除 轻 度 黄 疸 (RS,1!&=L ;-51O3)外 $ 血脂偏低!球蛋白升高明显(F%=# <O3)%病例 ! 肾病 综合症$狼疮性肾炎!胆红素$血脂正常!B<T 达到 ! E$" -<O23(参考值*LE&U& EF" -<O23)!RVF#=F<O3$ :3S!F <O3$T3S#L=F <O3!也就是球蛋白升高& 所以 笔者认为模条颜色变深可能主要与病人球蛋白升 高相关!球蛋白越高模条颜色越深!甚至导致扫描 不成功!显示+不可用的'!实验失败& 通过对血清 的适当稀释!减少球蛋白的含量!从而降低模条的 吸附及本底颜色!以达到可以扫描!不报警!实验 成功的目的& 扫描结果稀释倍数即为最终报告结 果%加做 BBC 报告可进一步增加可信度!因为 K')H ! 细胞中包含 &""U&E" 种自身抗原!美国风湿病学 会(:WG)已将间接免疫荧光检测推荐为检测 :?: 的 +金 标 准 'P!Q!中 国 免 疫 学 会 临 床 免 疫 分 会 $欧 洲 自身免疫标准化促进会 (':DB) 将其推荐为 :?: 检测的+参考方法'P#HEQ& 值得注意的是!荧光显微镜 的质量和荧光光源强度及滤光器的配置要好!否则 会影响结果判断的准确性PFQ&
P&Q王炜玮!李 全 焕 !王 坤 等= 欧 蒙 免 疫 印 迹 法 在 实 验 操 作 中 常 见 问 题 处 理 及 结 果 评 价PXQ=山 西 医 药 杂 志 !!"&E !%%(E)*E!&HE!#=
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图 1 第 2条模条为病例 1ANA谱 3模条图形， 本底颜色很深，未见质控带
图 2 病例 1模条经扫描后（黄色区域）图形，提示“不可用的”
图 3 黄线上模条为病例 1血清经 1:3稀释后的 ANA谱 3模条图形，见较清晰质控带
图 4 病例 1血清经 1:3稀释后的 ANA谱 3模条的扫描图形 （黄线上），未见报警，质控带显示 1个“+”。结果为全阴性
图 7 第 2条为病例 2血清经 1:2稀释后的 ANA谱 3模条图形，见较清晰质控带
图 8 第 2条为病例 2血清经 1:2稀释后的 ANA谱 3模条的 扫描图形，未见报警，质控带显示“++”。结果为抗 SSA、 Ro-52、ds-DNA、ANuA、Histone抗体分别为 1个“+”
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