siRNA沉默葡萄糖调节蛋白78可增强乳腺癌细胞对顺铂的敏感性

siRNA沉默葡萄糖调节蛋白78可增强乳腺癌细胞对顺铂的
敏感性
浦龙健;黄莹莹;李阳;徐锦程;蒋琛琛;刘浩;蒋志文
【期刊名称】《南方医科大学学报》
【年(卷),期】2013(033)001
【摘要】Objective To investigate the effect of small interfering RNA-mediated glucose-regulated protein 78 (GRP78) knockdown on the chemosensitivity of breast cancer cells to cisplatin. Methods Human breast cancer cell line MDA-MB-231 was exposed to different doses of cisplatin (0,1, 2, 4, 8, and 16 μmol/L), and the changes in cell viability were detected using MTT assay. PI/Annexin V staining was used to observe the apoptosis of the cells in response to transfection with a small interfering RNA targeting GRP78 (pSHlSi-GRP78). Western blotting was employed to detect GRP78 expression in pSHlSi-GRP78-rransfected cells after exposure to 8
μmol/L cisplatin for 24, 48 and 72 h. Results Exposure of the cells to 8
μmol/L cisplatin for 24, 48 and 72 h resulted in a cell survival rate of
83.13%, 54.22% and 35.79%, respectively, but the cell apoptosis rate was only 10.8% at 24 h. Transfection of MDA-MB-231 cells with pSHlSi-GRP78 caused a cell apoptosis rate of 24.6%, which increased to 48.9% in cells with both pSHlSi-GRP78 transfection and cisplatin exposure. Cisplatin exposure caused an initial up-regulation followed then by a down-regulation of GRP78 expression in MDA-MB-231 cells, while pSHlSi-GRP78
transfection produced an obvious down-regulation of GRP78 expression. Conclusions Inhibition of GRP78 expression increases the apoptosis and enhance cisplatin chemosensitivity of breast cancer cells in vitro, suggesting the value of GRP78 as a potential therapeutic target in the clinical treatment of breast cancer.%目的探讨siRNA沉默葡萄糖调节蛋白
78(GRP78)增强顺铂对乳腺癌细胞凋亡的敏感性,以期为乳腺癌的临床治疗提供新的靶点.方法 MTT法检测不同浓度(0、1、2、4、8、16 μmol/L)顺铂对乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖抑制作用；PI/Annexin V双染检测顺铂(8 μmol/L)对siRNA转染沉默GRP78乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的影响,同时将未转染和转染空质粒乳腺癌细胞MDA-MB-231作为空白和阴性对照；Western blot检测顺铂(8μmol/L)处理乳腺癌细胞MDA-MB-231不同时间(0、6、16、24
h)GRP78的表达以及siRNA转染沉默GRP78乳腺癌细胞MDA-MB-231中GRP78的表达.结果8μmol/L顺铂作用于乳腺癌细胞MDA-MB-231 24,48、72 h细胞存活率分别为83.13％、54.22％,35.79％,但24 h细胞凋亡率仅为10.8％.将GRP78沉默后,细胞的凋亡率为24.6％,沉默GRP78并合用顺铂进行刺激,细胞的凋亡率为48.9％,明显高于单用顺铂组.用顺铂刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231 GRP78表达先上调后有减弱趋势,而siRNA转染沉默GRP78后,GRP78表达明显下降.结论抑制GRP78的表达可以增加乳腺癌细胞的凋亡率,为乳腺癌的临床治疗提供了新的靶点.
【总页数】4页(P44-47)
【作者】浦龙健;黄莹莹;李阳;徐锦程;蒋琛琛;刘浩;蒋志文
【作者单位】蚌埠医学院药学系//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽蚌埠233030;蚌埠医学院药学系//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽蚌埠233030;
蚌埠医学院药学系//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽蚌埠233030;蚌埠医学院药学系//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽蚌埠233030;蚌埠医学院药学系//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽蚌埠233030;蚌埠医学院药学系//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽蚌埠233030;蚌埠医学院药学系//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽蚌埠233030
【正文语种】中文
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