人趋化因子受体5基因的克隆及原核表达

人趋化因子受体5基因的克隆及原核表达
赵国新;靳静;冯龙;马云云;卫艳萍;赵国强
【期刊名称】《郑州大学学报（医学版）》
【年(卷),期】2008(043)005
【摘要】目的:构建人趋化因子受体5(CCR5)原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达.方法:从健康人外周血单个核细胞提取总RNA,以RT-PCR获得CCR5基因全长1 059 bp的完整编码序列;将其克隆入载体pGEM-T中,经限制性内切酶和菌落PCR分析并测序;再将阳性重组子中的CCR5片段与表达载体pQE80L连接并转化大肠杆菌DH5a,进行诱导表达,对表达产物进行纯化和鉴定.结果:SDS-PAGE和Western Blot分析表明,在30℃以IPTG诱导获得相对分子质量为41 000的CCR5重组蛋白表达带,诱导4 h后此蛋白表达量约为全菌总蛋白的25%.结论:成功获得人CCR5重组蛋白.
【总页数】5页(P911-915)
【作者】赵国新;靳静;冯龙;马云云;卫艳萍;赵国强
【作者单位】河南省医学科学研究所,郑州,450052;河南职工医学院,郑州,451191;郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州,450001;郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州,450001;郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州,450001;郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州,450001【正文语种】中文
【中图分类】R512.91
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