常用固定液及其配制
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一、常用固定液及其配制
固定液分单纯固定液和混合固定液。
1.甲醛(formaldehyde)
是无色气体,易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发,且有强烈刺激气味,常用得是37%~40%得甲醛溶液,商品名为福尔马林(formalin)。
用作固定的浓度习惯为10%福尔马林(即1份甲醛溶液加9份水配制而成),实际含甲醛4%。
10%福尔马林渗透力强,固定均匀,对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好,是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织,易产生黑色的沉淀,称福尔马林色素。
2.乙醇
无色液体,易溶于水,它除可作为固定剂外,还可作为脱水剂,对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度,乙醇渗透力校弱,它能溶解脂肪,核蛋白被沉淀后,仍能溶于水,因此核的着色不良。
3.中性甲醛液(混合固定液)
甲醛(浓)120ml,加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠
(NaH2PO4·H2O)4g,磷酸氢二纳(Na2HPO4)13g。
此液固定效果比单纯10%福尔马林要好。
4.AF液(混合固定液)
95%乙醇90ml,甲醛(浓)10ml。
也有配方是95%乙醇
85ml,甲醛(浓)10ml,冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外,兼有脱水作用,因此,固定后可直接入95%乙醇脱水。
以上4种固定液中,以中性甲醛为首选,其次为10%福尔马林,乙醇应尽量不用。
二、组织脱水
脱水用的乙醇浓度一般从70%~75%开始,然后依次80%→95%→100%,即由低浓度逐步到高浓度。
脱水的时间与组织大小、厚薄有很大关系、组织厚大,脱水时间要长些;而小薄的组织脱水时间相对的可以短些。
组织脱水时间在低浓度乙醇中可以长些(如70%~80%),而在高浓度乙醇中要短些,这是因为高浓度的乙醇渗透力不强,延长脱水时间无益,相反高浓度乙易使组织收缩、变脆,致使以后切片和观察困难。
⑴70%乙醇1h。
⑵80%乙醇1h。
⑶95%乙醇Ⅰ1h。
⑷95%乙醇Ⅱ1h。
⑸95%乙醇Ⅲ1h。
⑹100%乙醇Ⅰ1h。
⑺100%乙醇Ⅱ1h。