人肝细胞生长因子(hdHGF)基因在毕赤酵母中的分泌表达

人肝细胞生长因子(hdHGF)基因在毕赤酵母中的分泌表达邓兵兵;方宏清;薛冲;赵洪亮;刘志敏
【期刊名称】《中国生物化学与分子生物学报》
【年(卷),期】2001(17)5
【摘要】研究了hdHGF基因在毕赤酵母中的表达 .以人胎盘mRNA为模板 ,经逆转录、重叠PCR获得hdHGF全长和成熟基因片段 .将该基因片段克隆到pPIC9载体上 ,将重组表达质粒转化巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)GS115,筛选mut+ 表型 ,经甲醇诱导可实现rhdHGF的分泌表达 .经摇瓶培养筛选出 4株表达水平较高的酵母工程菌株 ,SDS PAGE分析和Western印迹试验表明 ,产物分子量约为80kD ,5L发酵罐高密度培养已使生物量达 13 5g L(干重 ) ,发酵液上清总蛋白量为8 0g L ,电泳结果表明rhdHGF表达水平为总蛋白的 12 3 % .
【总页数】5页(P590-594)
【关键词】人肝细胞生长因子;巴斯德毕赤酵母;分泌表达;hdHGF基因
【作者】邓兵兵;方宏清;薛冲;赵洪亮;刘志敏
【作者单位】军事医学科学院生物工程研究所
【正文语种】中文
【中图分类】Q78;R394.8
【相关文献】
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