大蒜素对结肠癌LoVo细胞增殖的影响_刘扬清

大蒜素对结肠癌Lo Vo细胞增殖的影响

223300江苏淮安南京医科大学附属淮安医院肿瘤内科

刘扬清,高勇,万一元,易竹筠,惠红霞,徐丽娟,刘华

=摘要> 目的:观察大蒜素对结肠癌细胞L oV o生长、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法:不同浓度的大蒜素作用于体外培养的L o V o细胞,倒置显微镜下观察LoV o细胞的形态学变化,采用M TT法检测大蒜素对L o V o细胞增殖抑制能力,An-nex in V-F I TC标记流式细胞术检测大蒜素对LoV o细胞的凋亡抑制率,流式细胞术检测大蒜素对L o V o细胞周期影响。结果:大蒜素可抑制人结肠癌LoV o细胞增殖,具有明显量效和时间依赖性,24、48和72h大蒜素抑制L oV o细胞的IC

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分别为32123、10174和6158L g/m;l大蒜素能够诱导LoV o细胞凋亡,作用24h其诱导凋亡率随着药物浓度的递增具有增高趋势,作用48h其诱导凋亡作用峰值浓度为8L g/m,l后再继续增加浓度凋亡率反而下降;大蒜素作用L oVo细胞24h后,大蒜素浓度低

于4L g/m l时,L oV o细胞周期被阻滞于G

2/M;而高于4L g/m l时,细胞周期被阻滞于G

2

/M和G

1

期。结论:大蒜素能够诱导

LoV o细胞凋亡,阻滞细胞周期,抑制细胞增殖。

=关键词> 大蒜素;结肠癌;LoV o细胞株;细胞增殖;凋亡

中图分类号:R73513+5;R730152文献标识码:A文章编号:1009-0460(2009)02-0139-05

Effect of allicin on proliferation of colon cancer LoV o cell line in vitro

LIU Yang-q ing,GAO Yong,WAN Yi-yuan,YI Zhu-jun,HUIH ong-x ia,X U L i-juan,LIU H ua.D epart m ent of Oncology,Aff iliated H uai p an H os p ital of N anjing M edical Universit y,H ua i p an223300,China =Abstract>O bjective:T o investi gate the e ffect o f ce ll gro w th,cell apoptosis and ce ll cyc le of allic i n on hu m an co lon cancer ce ll li ne LoV o i n vitro.M ethod s:T he human co lon carcinoma ce ll LoV o we re cultured and trea ted by a lli c i n i n d ifferent concentrations in vitro.M orpho log i c change was observed by i nve rted m icroscope.M TT assay w as used to test dynam ica ll y t he effect o f the ce ll g row th inh i biti ng.A poptos i s i nducti on(A nnex i n V-F I TC/P I)and m odulati on o fDNA cell cycle w asm easured by fl ow cy t om etry.R esults:A-l li c i n had i nh i b iti ve e ffects on g row t h o f LoV o cells i n a dose and ti m e-dependent m anner,w ith t he IC

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va l ue of32123,10174and 6158L g/m l at24h,48h and72h respec ti ve l y.The apoptosis ra te o f L oV o cells i ncreased prog ressi ve l y treated w it h i ncreasi ng con-centrati on a lli c i n f o r24h,wh ile the apoptosis rate achieved peak va l ue when treated w it h8L g/m l allic i n for48h.T he ce ll cycle w as

arrested a t G

2/M phase treated w ith a llici n at concentration l ow er than4L g/m l and at G

1

+G

2

/M phase treated w ith allic i n at concen-

trati on higher t han4L g/m l f o r24h.Con cl u si on:A lli c i n has a si gn ifican t ant-i pro liferati on effect on hu m an co l on cancer cell line L o V o by i nducti on o f apoptosis and arrest m en t of ce ll cyc l e.

=K eyW ords>A lli c i n;Co l on ca rc i no m a;LoV o ce ll line;P roliferati on;A poptosis

大蒜素(d iallyl trisulfide,A llicin)是大蒜中主要生物活性成分的总称,是从大蒜球茎中分离出的一种化合物,其中主要化学成分为二烯丙基三硫化物(DADS)。以往的研究表明大蒜素有抗真菌、抗细菌和降血酯、降血压、防治动脉粥样硬化等心血管疾病的作用[1],并具有良好的抗癌、防癌作用[2-4],但目前大蒜素确切的抗癌机制仍不清楚。本实验采用M TT比色法、流式细胞仪分析法研究大蒜素在体外对人结肠癌Lo V o细胞生长、凋亡及细胞周期的影响,现将结果报告如下。1材料与方法

111药物及试剂大肠癌细胞系购于中国科学院细胞库;大蒜素(30m g/支)为上海禾丰制药产品,使用时新鲜配制成倍比稀释浓度分别为:2、4、8、16和32L g/m;l F-12K培养基、MTT(四氮唑蓝)、胰蛋白酶为S i g m a公司产品;Annex in V-FI T C凋亡测定试剂盒购自晶美生物公司;DNA PREP试剂盒为BD公司产品;全自动酶标仪(stat F ax2100,USA);流式细